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β-Catenin调控间充质干细胞向HGF的定向迁移

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β-Catenin调控间充质干细胞向HGF的定向迁移

作者：崔恒进苏州大学

学位级别：硕士

恶性胶质瘤是最为常见的原发性脑瘤，因其具有极强的浸润和扩散能力，常用的医疗手段很难将其治愈，近年来研究发现间充质干细胞（marrow mesenchymalstem cells, MSCs）具有自我更新和趋向胶质瘤迁移的能力，成为治疗此类疾病的种子细... 详细信息

恶性胶质瘤是最为常见的原发性脑瘤，因其具有极强的浸润和扩散能力，常用的医疗手段很难将其治愈，近年来研究发现间充质干细胞（marrow mesenchymalstem cells, MSCs）具有自我更新和趋向胶质瘤迁移的能力，成为治疗此类疾病的种子细胞。为了达到理想的治疗效果，必须保证移植的MSCs能够定向迁移到病灶或受损部位，因此研究调控MSCs定向迁移的机制成为热点之一。大量文献报道多种细胞因子（PDGF、IGF、EGF和Ang-1等）和信号通路（PI3K/Akt、MAPK/ERK1/2、JAK/STAT、Rho和TGF-β/Smad等）参与调控MSCs的定向迁移，在hMSCs中Wnt3a能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进细胞的迁移，而在小鼠肝细胞中HGF也能通过c-met上调细胞核内β-catenin的累积促进细胞趋化性迁移，目前关于HGF和Wnt/β-catenin信号通路协同调控MSCs迁移的作用鲜有报道。本文旨在研究β-catenin在HGF诱导MSCs趋化性迁移的过程中的作用。本研究采用Percoll密度梯度离心法从大鼠骨髓中成功分离、培养并扩增得到高纯度的MSCs。提取MSCs的总RNA，RT-PCR克隆得到SD大鼠β-catenin及其激活型ΔN90的cDNA，利用AdEasyTM系统构建重组腺病毒载体Ad-β-catenin和Ad-ΔN90，构建成功的重组腺病毒在QBI-293A细胞中包装并扩增，获得高滴度的病毒子，感染细胞以获得高表达β-catenin的MSCs。同时针对SD大鼠β-catenin基因由Abgent公司设计并合成FAM荧光标记的siRNA（FAM-siRNA），用脂质体转染MSCs降低β-catenin的表达。为进一步检测β-catenin在MSCs定向迁移过程中的作用提供有利的工具。首先研究β-catenin对MSCs迁移的影响，利用Boyden chamber研究发现β-catenin的抑制剂FH535上调β-catenin的磷酸化使其降解，显著性的抑制MSCs的迁移。β-catenin激活剂LiCl通过上调β-catenin促进的MSCs迁移呈浓度依赖效应，当LiCl浓度为10mM时，MSCs达到最大的迁移数量，而50ng/ml的Wnt3a也能促进MSCs的迁移。Duun chamber和划痕实验也证实了这些结果。免疫荧光染色结果显示LiCl和Wnt3a能够促进β-catenin的入核，而FH535能够抑制此种效应。以上说明β-catenin参与调控MSCs的迁移。在探讨β-catenin调控MSCs趋向HGF定向迁移的实验中，Boyden chamber和Dunn chamber装置研究发现FH535和低表达β-catenin（si-β-catenin）抑制MSCs趋向HGF的定向迁移，而LiCl、Wnt3a和过表达β-catenin都能够促进MSCs的迁移并增强HGF对MSCs的趋化效应。Western blot发现HGF能促进β-catenin和ABC蛋白水平的增加并抑制其磷酸化，同时HGF促进了β-catenin的入核，而FH535能抑制这种效应。说明β-catenin参与调控MSCs趋向HGF的定向迁移。综上，β-catenin能被LiCl和Wnt3a上调，从而促进MSCs迁移，而FH535促使β-catenin降解，抑制LiCl和Wnt3a对MSCs迁移的作用。β-catenin的上调也能够促进HGF诱导的MSCs定向迁移，而抑制β-catenin的表达则降低了MSCs向HGF定向迁移的能力。本研究为进一步揭示MSCs的定向迁移机制与临床应用MSCs进行移植提供了理论基础。

关键词：间充质干细胞 HGF 细胞迁移 β-catenin

求解单调变分不等式的非精确邻近点算法与投影算法

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运筹学学报 2024年

作者：崔恒鑫姜帆南京信息工程大学数学与统计学院

本文提出了一类求解单调变分不等式的具有相对误差准则的非精确邻近点算法。在提出的方法中,可以通过两种方式得到下一个迭代点。在一般假设条件下,建立了新算法的全局收敛性。通过选择一种特殊的误差形式,所提出的非精确邻近点算法退... 详细信息

本文提出了一类求解单调变分不等式的具有相对误差准则的非精确邻近点算法。在提出的方法中,可以通过两种方式得到下一个迭代点。在一般假设条件下,建立了新算法的全局收敛性。通过选择一种特殊的误差形式,所提出的非精确邻近点算法退化为一类带有线搜索的投影收缩算法,这揭示了非精确邻近点算法和投影类算法之间的联系。数值实验验证了新方法的有效性。

关键词：变分不等式非精确邻近点算法投影算法全局收敛

马祖常及其文学实践活动对元代中华民族共同体意识形成的推进

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马祖常及其文学实践活动对元代中华民族共同体意识形成的推进

作者：崔恒内蒙古科技大学包头师范学院

学位级别：硕士

元朝,结束了华夏大地自唐末藩镇割据以来的战乱纷争,极大地促进了中华各民族文化的交流与融合。因此,元朝也成为我国古代少数民族文学发展的重要时期。在各民族文化碰撞与交融的社会背景下,在中原文化的影响下,中华民族共同体意识逐渐... 详细信息

元朝,结束了华夏大地自唐末藩镇割据以来的战乱纷争,极大地促进了中华各民族文化的交流与融合。因此,元朝也成为我国古代少数民族文学发展的重要时期。在各民族文化碰撞与交融的社会背景下,在中原文化的影响下,中华民族共同体意识逐渐成为文人表达抱负、书写胸怀的主流思想。在这样的文化背景中,元代西域著名诗人、政治家马祖常,创作了大量富有“大一统”思想、饱含爱国主义情操的文学作品,其诸多文学实践,不仅是其个人卓越才华的缩影,也为研究元代中华民族共同体意识的形成提供了重要参考。作为雍古部人,马祖常在元代文学和政治圈层中拥有独特身份和地位,他对祖国自然风光的书写、对社会问题的思考、与各阶层文人的交流,无不彰显出他在统一多民族国家中所持的立场和态度,也深刻影响着元代的文风和文人的价值取向。本研究通过文献研究法、实证研究法、跨学科研究法,以文学赏析为基础,以历史学的视角看待马祖常生平及其文学实践活动,总结概括了马祖常文学实践活动的核心理念,即守望相助的家国情怀、心系百姓的价值追求、对中华文化的认同与传承、兼容并蓄的文化观念,特别是“华夷一体”的民族思想。本文努力挖掘马祖常及其文学实践活动中蕴含的中华民族共同体意识,提出马祖常及其文学实践活动,对推进中华民族共同体意识的发展起到了极其重要作用的新观点。以期对元代历史、文学史的研究提供新角度,为历史文献学整理和边疆民族交融的研究,提供实证支持,本文为传承和弘扬中华民族共同体意识注入新的活力。

关键词：马祖常文学实践活动中华民族共同体意识

PARP抑制剂在卵巢癌治疗中的耐药机制和抗耐药研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第4期31卷 410-415页

作者：周璐(综述) 崔恒(审阅) 朱秀红(审阅) 青岛市即墨区人民医院妇科山东青岛266200 北京大学人民医院妇科北京100044

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂可以显著提高患者生存期已用于卵巢癌的临床治疗,以PARP抑制剂为代表的卵巢癌维持治疗已成为卵巢癌治疗的热点话题。PARP抑制剂通过其合成致死作用极大延长了卵巢癌患者的无进展生存期和总生存期,但... 详细信息

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂可以显著提高患者生存期已用于卵巢癌的临床治疗,以PARP抑制剂为代表的卵巢癌维持治疗已成为卵巢癌治疗的热点话题。PARP抑制剂通过其合成致死作用极大延长了卵巢癌患者的无进展生存期和总生存期,但在治疗中有相当一部分卵巢癌患者对PARP抑制剂产生耐药,导致治疗效果不佳。目前国内外聚焦于研究PARP抑制剂的耐药及其抗耐药机制,通过与其他药物联合治疗等方法延缓甚至对抗PARP抑制剂的耐药。本文综述了近年来关于PARP抑制剂的临床耐药机制及其应对其耐药的方法,为提高临床医生对PARP抑制剂耐药性的认知和合理用药,增强PARP抑制剂治疗的敏感性,以及提高卵巢癌临床治疗效果提供新的思路和研究方向。

关键词：卵巢癌 PARP抑制剂耐药机制抗药性

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盆腔淋巴囊肿预防和治疗的研究进展

中国妇产科临床杂志 2024年第4期25卷 364-366页

作者：张燕张佳崔恒朱秀红青岛市即墨区人民医院妇科山东青岛266200 北京大学人民医院妇产科北京100044

盆腔淋巴囊肿是盆腔淋巴结切除术后常见的并发症。盆腔淋巴囊肿对患者有诸多危害,有症状的淋巴囊肿多需要治疗,增加了患者的经济和心理负担,严重者延迟患者的后续治疗,影响患者预后。本文对预防和治疗盆腔淋巴囊肿的进展进行综述。

关键词：盆腔淋巴囊肿预防治疗研究进展

SA516Gr.70钢搅拌摩擦焊接头的热循环及组织性能

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吉林大学学报(工学版) 2024年

作者：宫文彪苗梓琪崔恒王秀英刘威长春工业大学先进结构材料教育部重点实验室长春工业大学材料科学与工程学院长春轨道客车股份有限公司广东茂名重力石化机械有限公司

SA516Gr.70钢具有优良的强韧性，被广泛地应用于压力容器的制造，传统的弧焊易导致焊缝产生裂纹、氢脆等缺陷。本文采用钨铼合金搅拌工具对4mm厚SA516Gr.70低碳钢进行搅拌摩擦焊接，研究了接头的热循环对焊接接头组织和力学性能的影响... 详细信息

SA516Gr.70钢具有优良的强韧性，被广泛地应用于压力容器的制造，传统的弧焊易导致焊缝产生裂纹、氢脆等缺陷。本文采用钨铼合金搅拌工具对4mm厚SA516Gr.70低碳钢进行搅拌摩擦焊接，研究了接头的热循环对焊接接头组织和力学性能的影响。结果表明，在旋转速度800 r/min，焊速90 mm/min的焊接参数下，获得了无缺陷的焊接接头。前进侧热循环峰值温度最大值为1018℃，后退侧为998℃. 焊核区组织为细小的马氏体和贝氏体，平均晶粒尺寸为5.4μm，与母材相比，焊核区晶粒细化效果显著。焊接接头显微硬度与距焊缝中心距离呈负相关，焊核区显微硬度达到449.7HV. 拉伸试验断裂均在热影响区，焊缝不同区域呈现出不同的断口形貌。

关键词： SA516 Gr.70钢搅拌摩擦焊焊接热循环微观组织力学性能

β-catenin和突变体ΔN90腺病毒载体的构建及其在MSCs中的表达

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生物技术通报 2013年第11期29卷 153-158页

作者：崔恒进王春燕胡君谢桂琴徐晓静张焕相苏州大学基础医学与生物科学学院江苏省干细胞研究重点实验室苏州215123

旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用,构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体,在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺... 详细信息

旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用,构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体,在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装和扩增。结果显示,酶切和测序证实Ad-β-catenin和Ad-ΔN90质粒构建正确,荧光显微镜可观察到GFP的表达,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,Western blot检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的蛋白表达量,TOPFlash检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的转录活性。说明成功构建Ad-β-catenin和Ad-ΔN90腺病毒载体,并获得高滴度病毒子。

关键词：腺病毒载体 β-catenin ΔN90 骨髓间充质干细胞构建

金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵敏感性与生物被膜形成能力相关性分析

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畜牧兽医学报 2024年

作者：崔恒洁覃金珑朱志豪鲍雪栗绍文孟宪荣华中农业大学动物医学院华中农业大学动物医学院湖北省预防兽医学重点实验室

以35株生猪屠宰场及养殖场来源的金黄色葡萄球菌分离菌株为试验材料，分析金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵敏感性与生物被膜形成能力的相关性。采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵的敏感性，结晶紫染色法检测生物被膜形成能力，... 详细信息

以35株生猪屠宰场及养殖场来源的金黄色葡萄球菌分离菌株为试验材料，分析金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵敏感性与生物被膜形成能力的相关性。采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵的敏感性，结晶紫染色法检测生物被膜形成能力，基于全基因组测序结果分析屠宰环节的26株金黄色葡萄球菌多位点序列分型(multi-locus sequence typing，MLST)情况，以及消毒剂抗性与生物被膜形成相关基因的携带情况。结果表明，35株菌中，苯扎溴铵的最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration，MBC)范围为1 mg·L-1～16 mg·L–1，强成膜能力菌株共16株，占总数的45.71%(16/35)，其中93.75%(15/16)来自于屠宰链的下游。ST7是强成膜能力菌株的优势序列型(93.75%，15/16)。金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力和苯扎溴铵MBC值呈正相关(相关系数为0.690)，而消毒剂抗性与相关基因携带情况无关。综上，金黄色葡萄球菌可通过形成生物被膜提高对消毒剂的耐受性，减弱了苯扎溴铵的消毒效果，增加了养殖和屠宰环节中细菌污染和传播的风险。

关键词：金黄色葡萄球菌生物被膜苯扎溴铵相关性

Dvl1及其突变体腺病毒载体的构建与在MSCs中表达鉴定

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基因组学与应用生物学 2014年第2期33卷 314-321页

作者：王春燕崔恒进胡君谢桂琴张焕相苏州大学基础医学与生物科学学院江苏省干细胞研究重点实验室苏州215123

Dvl1及其结构缺失突变体ΔDIX(dsh and axin)和ΔDEP(dsh,Egl-10 and pleckstrin)腺病毒载体的构建并验证其在MSCs(mesenchymal stem cells)中的表达情况。将目的基因定向克隆至pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装及扩增,实时荧光定量PCR和Western bolt验证Dvl1在MSCs中的表达情况。经PCR、PacⅠ单酶切鉴定及测序分析,成功构建Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,目的基因序列与GenBank报道一致,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,成功构建了Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,并获得高滴度的病毒子,qPCR和Western blot证实Dvl1在MSCs中高表达并增加了β-catenin在细胞中的累积,为进一步研究Dvl1在MSCs迁移过程的作用奠定了基础。

关键词：间充质干细胞腺病毒载体 Dvl1