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受损神经来源的mtDNA通过GRP75增加线粒体内Ca2+水平诱导U87细胞凋亡和小鼠痛觉敏化

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陆军军医大学学报 2024年第18期 2081-2091页

作者：黄鹏辉李丽崔剑陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院疼痛科

目的探讨受损神经来源的线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）对人脑星形胶质母细胞瘤细胞（human glioblastoma cell line U-87MG,U87）内GRP75蛋白表达、线粒体Ca2+水平、细胞凋亡的影响，及其诱导小鼠痛觉敏化的机制。方法采用坐... 详细信息

目的探讨受损神经来源的线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）对人脑星形胶质母细胞瘤细胞（human glioblastoma cell line U-87MG,U87）内GRP75蛋白表达、线粒体Ca2+水平、细胞凋亡的影响，及其诱导小鼠痛觉敏化的机制。方法采用坐骨神经慢性缩窄（chronic constriction injury, CCI）建立小鼠神经病理性疼痛（neuropathic pain, NeP）模型，采用随机数字表法将20只C57BL/6雄性小鼠（6～8周龄，体质量20～30 g）分为4组：假手术组、CCI-7天组、CCI-14天组、CCI-21天组，行为学检测痛觉敏化情况，实时荧光定量PCR法（quantitative Real-time PCR, qPCR）检测小鼠脊髓中mtDNA含量变化。从H2O2处理的人神经母细胞瘤细胞（human neuroblastoma cell line SH-SY5Y,SH-SY5Y）提取mtDNA。采用浓度为0～1 ng/μL的mtDNA处理U87细胞。CCK-8检测细胞活力变化，根据结果选择适宜的实验浓度。将U87细胞分为5组：对照组、mtDNA组、mtDNA+GRP75抑制剂（MKT-077 1μg/mL）组、mtDNA+钙螯合剂（BAPTA-AM 10μmol/L）组和mtDNA+MKT-077+BAPTA-AM组，mtDNA处理前2 h分别予以MKT-077、BAPTA-AM预处理。Western blot检测GRP75蛋白（glucose-regulated protein 75,GRP75）的表达，内质网-线粒体共定位染色观察内质网-线粒体连接；钙离子荧光探针检测线粒体Ca2+水平；活性氧（reactive oxygen species, ROS）及线粒体膜电位检测评估线粒体氧化应激功能；PI荧光标记检测U87细胞凋亡率。结果与假手术组相比，CCI-21天组小鼠脊髓中用于检测mtDNA含量的细胞色素c氧化酶I（cytochrome c oxidase I,CO1）和NADH脱氢酶亚基1（nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase 1,ND1）均升高，CO1:1.01±0.20 vs 2.22±0.26 （P<0.05）,ND1:1.00±0.12 vs 1.79±0.07 （P<0.05）。CCK-8结果显示：mtDNA（1 ng/μL）可抑制U87细胞活力（P<0.01）;0.2 ng/μL mtDNA可上调GRP75蛋白的表达（P<0.05）,促进内质网-线粒体偶联，增加线粒体Ca2+水平（109.4±62.6 vs 540.3±150.3,P<0.05）,并诱使线粒体释放ROS增多（P<0.05）。MKT-077或/和BAPTA-AM处理后，线粒体Ca2+量减少，线粒体膜电位改善，PI检测显示U87细胞凋亡率降低[mtDNA组vs mtDNA+MKT-077组：（18.39±2.09）vs（13.22±1.42）,P<0.05;mtDNA组vs mtDNA+BAPTA-AM组：（18.39±2.09）vs（12.09±1.53）,P<0.05;mtDNA组vs mtDNA+MKT-077+BAPTA-AM组：（18.39±2.09）vs（11.65±2.09）,P<0.05]。结论受损神经来源的mtDNA可上调GRP75蛋白的表达、干扰线粒体Ca2+水平、加剧线粒体氧化应激，以诱导U87细胞凋亡，这可能是一种参与NeP形成的新机制。

关键词：神经病理性疼痛 mtDNA GRP75 钙凋亡

氧化应激通过TDP-43激活mtDNA-cGAS/STING通路诱发神经元损伤和小鼠痛觉敏化

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陆军军医大学学报 2024年第18期 2036-2045页

作者：李丽黄鹏辉崔剑陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院疼痛科

目的探索TAR DNA结合蛋白43（transactive response DNA binding protein 43,TDP-43）在氧化应激诱导的小鼠神经元（neuro-2a, N2a）细胞损伤及小鼠痛觉敏化中的作用及机制。方法（1）为评估最佳诱导浓度，不同浓度的H2O2处理N2a细胞... 详细信息

目的探索TAR DNA结合蛋白43（transactive response DNA binding protein 43,TDP-43）在氧化应激诱导的小鼠神经元（neuro-2a, N2a）细胞损伤及小鼠痛觉敏化中的作用及机制。方法（1）为评估最佳诱导浓度，不同浓度的H2O2处理N2a细胞分为4组：对照组、200μmol/L H2O2组、400μmol/L H2O2组和800μmol/L H2O2组。（2）为评估最佳诱导时间，400μmol/L H2O2处理N2a细胞分为4组：对照组、6 h H2O2组、12 h H2O2组和24 h H2O2组。（3）为验证线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）释放途径，使用环孢素（cyclosporin, CsA）抑制线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore, mPTP）分为3组：对照组、24 h H2O2组和24 h H2O2+CsA组。（4）为验证TDP-43介导的细胞损伤机制，siRNA抑制TDP-43后分为3组：对照组、24 h H2O2组、24 h H2O2+siTDP-43组。（5）采用CCK-8检测细胞活性，EdU检测细胞增殖，Western blot检测TDP-43、神经元标志物（neuronal nuclei, NeuN）、环状GMP-AMP合酶（cylic GMP-AMP synthase, cGAS）和干扰素基因刺激因子（stimulator of interferon, STING）表达，qPCR检测mtDNA,免疫染色观察细胞内TDP-43表达变化，Calcein AM染色评估mPTP开放。（6）为验证TDP-43在神经病理性疼痛（neuropathic pain, NP）中的作用，将24只6～8周健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠（体质量25～30 g）使用随机数字表法分为3组：对照组、慢性压迫性损伤（chronic constriction injury, CCI）组、CCI+siTDP-43组，术前1 d和术后7、14、21 d进行鞘内注射siTDP-43;术前1 d和术后1、3、5、7、14、21 d通过von Frey纤维丝和热辐射法测定小鼠机械痛阈值和热痛阈值，免疫荧光检测术后21 d腰段（L5-L6）脊髓背角中TDP-43与NeuN的变化。结果氧化应激刺激诱导N2a中TDP-43蛋白表达增加，刺激mtDNA通过mPTP释放，上调cGAS、STING的表达，影响N2a的细胞活性（P<0.05）;CsA抑制mPTP通道的开放并减少mtDNA释放（P<0.05）;下调TDP-43的表达后可显著降低mtDNA的释放，抑制cGAS和STING的表达，并恢复N2a细胞的增殖能力（P<0.05）。CCI术后5 d,小鼠机械痛阈值和热痛阈值出现明显下降并持续至21 d（P<0.05）;CCI小鼠术后21 d脊髓背角神经元中TDP-43表达增加（P<0.05）;鞘内注射siRNA抑制TDP-43后，可提高CCI小鼠的机械痛阈值和热痛阈值（P<0.05）。结论氧化应激诱导神经元细胞TDP-43蛋白增加，刺激mtDNA通过mPTP释放到细胞质，激活cGAS/STING通路，导致神经元损伤并加重CCI小鼠痛觉敏化。

关键词：神经病理性疼痛 TDP-43 cGAS/STING通路 mtDNA 氧化应激

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联邦学习深度梯度反演攻防研究进展

电子与信息学报 2024年第2期46卷 428-442页

作者：孙钰严宇崔剑熊高剑刘建华北京航空航天大学网络空间安全学院北京100191 空天网络安全工业和信息化部重点实验室(北京航空航天大学) 北京100191

联邦学习作为一种“保留数据所有权,释放数据使用权”的分布式机器学习方法,打破了阻碍大数据建模的数据孤岛。然而,联邦学习在训练过程中只交换梯度而不交换训练数据的特点并不能保证用户训练数据的机密性。近年来新型的深度梯度反演... 详细信息

联邦学习作为一种“保留数据所有权,释放数据使用权”的分布式机器学习方法,打破了阻碍大数据建模的数据孤岛。然而,联邦学习在训练过程中只交换梯度而不交换训练数据的特点并不能保证用户训练数据的机密性。近年来新型的深度梯度反演攻击表明,敌手可从共享梯度中重建用户的私有训练数据,从而对联邦学习的私密性产生了严重威胁。随着梯度反演技术的演进,敌手从深层网络恢复大批量原始数据的能力不断增强,甚至对加密梯度的隐私保护联邦学习(PPFL)发起了挑战。而有效的针对性防御方法主要基于扰动变换,旨在混淆梯度、输入或特征以隐藏敏感信息。该文首先指出了隐私保护联邦学习的梯度反演漏洞,并给出了梯度反演威胁模型。之后从攻击范式、攻击能力、攻击对象3个角度对深度梯度反演攻击进行详细梳理。随后将基于扰动变换的防御方法依据扰动对象的不同分为梯度扰动、输入扰动、特征扰动3类,并对各类方法中的代表性工作进行分析介绍。最后,对未来研究工作进行展望。

关键词：联邦学习梯度反演数据重建标签恢复扰动变换

宁波大榭遗址的制盐功能认证与制盐流程复原研究

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南方文物 2024年第2期 241-250,240页

作者：周雪琪雷少崔剑锋北京大学考古文博学院浙大城市学院艺术与考古学院南京大学历史学院考古文物系宁波市文化遗产管理研究院北京大学中国考古学研究中心

通过对宁波大榭遗址出土的夹砂陶器、夹贝陶盆、烧土块、支脚、结核物等遗物进行检测,对相关遗物进行成分、物相分析以获得基本的材质信息,对部分遗物中的碳酸钙进行了碳、氧同位素的研究以了解其形成过程,帮助判断遗迹成因与遗物所经... 详细信息

通过对宁波大榭遗址出土的夹砂陶器、夹贝陶盆、烧土块、支脚、结核物等遗物进行检测,对相关遗物进行成分、物相分析以获得基本的材质信息,对部分遗物中的碳酸钙进行了碳、氧同位素的研究以了解其形成过程,帮助判断遗迹成因与遗物所经历的事件,并且辅以锶同位素去判断一些样品的海相或陆相来源。分析结果表明,一些非海相、但与海水关系密切的方解石质结核物的生成温度在38℃左右,或许是在晾晒过程中,土壤中原本的钙质与盐泥或盐水中的钙质混合并析出,最终形成了这种遗迹。此外,陶盆内壁的风化情况以及其中贝壳羼和料的碳、氧同位素也显示其可能用来煮水,同时观察到一些红烧土块外部风化酥粉严重,可能也曾在加热后被投入盐水中辅助升温。综上所述,大榭遗址的遗迹遗物与制盐密切相关,且当地的制盐产业可能采用了晒煮结合的工艺。

关键词：大榭遗址新石器时代盐业考古科技考古

循证管理在事业单位人力资源管理中的应用探讨

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经济师 2024年第7期 264-266页

作者：崔剑南广东省佛山航道事务中心广东佛山528000

在高质量发展背景下,循证管理在人力资源管理中的应用越来越受到关注。循证人力资源管理是将循证管理的理念和方法应用于人力资源管理领域的一种新方法。这种新的管理方式在事业单位中具有显著的应用前景,对于提高人力资源管理的效能和... 详细信息

在高质量发展背景下,循证管理在人力资源管理中的应用越来越受到关注。循证人力资源管理是将循证管理的理念和方法应用于人力资源管理领域的一种新方法。这种新的管理方式在事业单位中具有显著的应用前景,对于提高人力资源管理的效能和事业单位的服务质量具有重要的意义。文章在深入理解循证人力资源管理理论内涵的基础上,分析其在事业单位中应用的优势和挑战,并探讨其在事业单位中的实践案例和前景,从而进一步推动其在我国事业单位中的应用和推广。

关键词：循证管理人力资源管理事业单位证据

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青藏高原多尔索洞错水深反演与水量变化估算

人民长江 2024年第4期55卷 142-149页

作者：崔剑乔宝晋郭恒亮杨洪河南省地质研究院河南郑州450016 郑州大学地球科学与技术学院河南郑州450052 郑州大学国家超级计算郑州中心河南郑州450001 武汉大学遥感信息工程学院湖北武汉430072

利用由实测水深空间插值获得的水下地形数据估算湖泊水量及其变化往往存在较大误差。以Landsat系列影像数据及多尔索洞错12 m以下实测水深数据为基础,建立多波段组合模型进行水深模拟,结合多时相Landsat影像获取的多尔索洞错边界数据获... 详细信息

利用由实测水深空间插值获得的水下地形数据估算湖泊水量及其变化往往存在较大误差。以Landsat系列影像数据及多尔索洞错12 m以下实测水深数据为基础,建立多波段组合模型进行水深模拟,结合多时相Landsat影像获取的多尔索洞错边界数据获取水深变化,估算1996~2016年多尔索洞错水量变化。实验结果表明:多因子反演模型的相关系数(R^(2))均在0.90以上,平均绝对误差低至0.48 m,相比空间插值方法能更精确地模拟多尔索洞错水深在12 m以下区域的水深分布情况;近20 a来多尔索洞错不断扩张,水位升高约0.40 m/a,水量增加约0.18 km^(3)/a。

关键词：水深反演水量变化归一化水体指数法(NDWI) 多波段组合模型多尔索洞错

基于民间游戏的幼儿园劳动课程设计与实施的研究

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当代家庭教育 2024年第10期 111-113页

作者：崔剑红江苏省常州市钟楼区新闸街道中心幼儿园

幼儿园劳动课程是培养幼儿良好劳动习惯和实践能力的重要途径。随着社会的发展和教育观念的更新,越来越多的幼儿园开始关注如何结合民间游戏来设计和实施劳动课程。民间游戏具有丰富的文化内涵和教育意义,可以激发幼儿学习的积极性和主... 详细信息

幼儿园劳动课程是培养幼儿良好劳动习惯和实践能力的重要途径。随着社会的发展和教育观念的更新,越来越多的幼儿园开始关注如何结合民间游戏来设计和实施劳动课程。民间游戏具有丰富的文化内涵和教育意义,可以激发幼儿学习的积极性和主动性。然而,在实际操作中,部分幼儿园对于民间游戏劳动课程的设计与实施还存在认识不足的情况,由于缺乏有效的教学策略和方法,劳动课程的教学效果并不理想。本文旨在探讨基于民间游戏的幼儿园劳动课程设计与实施,以期为幼儿园教师提供有益的参考。

关键词：幼儿园劳动教育民间游戏课程设计

新疆乌鲁木齐市阿拉沟墓地出土战国至西汉铅钡玻璃及釉砂珠的科学分析及相关问题

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考古 2024年第4期 102-120,I0002页

作者：姜晓晨阳刘念崔剑锋王炳华北京大学考古文博学院北京市100871 中国社会科学院考古研究所北京市100101 新疆维吾尔自治区文物考古研究所乌鲁木齐市830011

前言铅钡系硅酸盐器物最早出现于战国早期,战国至两汉时期在我国广泛流行,它包括铅钡玻璃、铅钡釉砂、铅钡釉陶、硅酸铜类釉砂以及“中国蓝”、“中国紫”颜料等具有我国本土特征的硅酸盐制品,其中尤以铅钡玻璃为代表,是先秦时期最重要... 详细信息

前言铅钡系硅酸盐器物最早出现于战国早期,战国至两汉时期在我国广泛流行,它包括铅钡玻璃、铅钡釉砂、铅钡釉陶、硅酸铜类釉砂以及“中国蓝”、“中国紫”颜料等具有我国本土特征的硅酸盐制品,其中尤以铅钡玻璃为代表,是先秦时期最重要的发明之一,也是中国最具代表性的手工业产品之一,更是世界玻璃史上的一朵奇葩。

关键词：阿拉沟墓地铅钡系硅酸盐器物成分分析铅同位素分析斤产源

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VANET中隐私保护的格基异构签密方案

小型微型计算机系统 2024年第9期45卷 2269-2277页

作者：崔剑阳蔡英张宇范艳芳北京信息科技大学计算机学院北京100101

针对车载自组织网络(Vehicular Ad hoc Network,VANET)中车辆跨密码系统通信过程中的隐私泄露问题,提出了一种格基异构签密方案.首先,方案实现了无证书密码系统(Certificateless Cryptosystem,CLC)的车辆与基于身份密码系统(Identity-Ba... 详细信息

针对车载自组织网络(Vehicular Ad hoc Network,VANET)中车辆跨密码系统通信过程中的隐私泄露问题,提出了一种格基异构签密方案.首先,方案实现了无证书密码系统(Certificateless Cryptosystem,CLC)的车辆与基于身份密码系统(Identity-Based Cryptosystem,IBC)的车辆相互通信;其次利用签密的机密性和可认证性防止车辆用户在跨密码系统通信过程中发生隐私泄露,并实现了接收方对消息完整性以及发送方身份合法性的认证;最后在随机预言机模型下证明了方案在适应性选择密文攻击下具有不可区分性(Indistinguishability against adaptive Chosen Cipher Text Attack,IND-CCA2),在适应性选择消息攻击下具有存在性不可伪造性(Existential Unforgeability against adaptive Chosen Messages Attack,EUF-CMA).性能分析表明,与其他方案相比,本文方案在计算开销、通信开销和安全性方面具有一定优势,适用于车辆跨密码系统通信的场景.

关键词：车载自组织网络隐私保护可认证性格异构签密