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我国沿海主要经济贝类中典型人类肠道病毒的污染分布

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微生物学报 2014年第1期54卷 69-79页

作者：明红霞樊景凤吴利军岳龙涛高雪琴梁玉波国家海洋环境监测中心辽宁大连116023 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071 山东省医药生物技术研究中心、卫生部生物技术药物重点实验室山东济南250062

【目的】了解我国沿海主要经济贝类中肠道病毒的污染分布对保障贝类食用安全具有重要作用。【方法】通过建立5种典型人类肠道病毒的特异、灵敏、高通量的基因芯片检测技术,开展全国范围内沿海主要海水增养殖区经济贝类体内肠道病毒的污... 详细信息

【目的】了解我国沿海主要经济贝类中肠道病毒的污染分布对保障贝类食用安全具有重要作用。【方法】通过建立5种典型人类肠道病毒的特异、灵敏、高通量的基因芯片检测技术,开展全国范围内沿海主要海水增养殖区经济贝类体内肠道病毒的污染调查。【结果】采集的162份经济贝类中肠道病毒的阳性检出率分别为:甲肝病毒4.3%;诺如病毒14.8%;轮状病毒6.2%;星状病毒5.6%;腺病毒9.9%,其中诺如病毒污染居于首位,该检测结果与PCR结果高度一致。我国沿海省市主要养殖区内贝类均受到了肠道病毒不同程度的污染,且不同省市之间差异不显著。在选取的6类经济贝类中,牡蛎中肠道病毒阳性检出率最高,其次是毛蚶和泥蚶。【结论】本研究表明,在我国,沿海主要经济贝类受到肠道病毒污染是一种较普遍的现象,给人类健康带来了潜在的危害,本研究为贝类食品的安全监控提供了基础数据资料。

关键词：基因芯片人类肠道病毒沿海经济贝类

CD38在类风湿关节炎外周血与滑膜组织中的表达

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现代免疫学 2014年第2期34卷 89-93页

作者：岳龙涛刘文波王瑶王月俭常晓天山东省千佛山医院医学研究中心济南250014 山东省医学科学院医药生物技术研究中心济南250062 济南威达生物技术有限公司济南250012

CD38是单链Ⅱ型跨膜蛋白,为B淋巴细胞活化的标记物。类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是自身免疫性疾病,病变滑膜内存在大量B淋巴细胞增生。本研究通过对RA患者外周血及滑膜中的CD38进行表达分析从而探寻RA发病的免疫机制。应用... 详细信息

CD38是单链Ⅱ型跨膜蛋白,为B淋巴细胞活化的标记物。类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是自身免疫性疾病,病变滑膜内存在大量B淋巴细胞增生。本研究通过对RA患者外周血及滑膜中的CD38进行表达分析从而探寻RA发病的免疫机制。应用流式细胞术检测RA患者(N=103)及正常人(N=120)外周血中CD38的表达;采用免疫组织化学法分别对5例RA患者、骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者及强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者滑膜组织中CD38的表达进行检测;将靶向CD38的SiRNA转入RA患者滑膜成纤维细胞(RASF)(N=5)后,ELISA法检测培养基中TNF-α、IL-1α和IL-β的表达。流式结果显示RA患者外周血中CD38+(P=1.92E-09)、CD3+CD38+(P=0.019)和CD56+CD38+(P=0.007)亚群细胞表达率明显升高,且CD38+细胞的表达率与RA患者类风湿因子(RF)水平显著相关(P=0.026);免疫组织化学结果表明CD38在RA患者滑膜中特异性高表达;ELISA实验证实:对CD38基因进行SiRNA干扰后,RASF培养基中的IL-1α和IL-1β表达水平显著降低。该项研究表明:CD38基因的表达增加可能参与RA患者的免疫激活。

关键词：风湿性关节炎滑膜组织外周血 CD38

HSP60、HSP70、HSP90α在结直肠癌组织中的表达及其与病理组织学分级的关系

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癌症 2009年第6期28卷 612-618页

作者：张文利高雪芹韩金祥王国强岳龙涛山东省医药生物技术研究中心卫生部生物技术药物重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室山东省医学科学院山东济南250062 山东省济宁卫生学校山东济宁272031

背景与目的:结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,其发病的分子机制有待进一步阐明。目前,HSPs家族成员在某些恶性肿瘤的发生发展中的作用已有一些报道,但是这一家族成员HSP60、HSP70、HSP90α在结直肠癌组织中的表达还未见报道。本课题旨在... 详细信息

背景与目的:结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,其发病的分子机制有待进一步阐明。目前,HSPs家族成员在某些恶性肿瘤的发生发展中的作用已有一些报道,但是这一家族成员HSP60、HSP70、HSP90α在结直肠癌组织中的表达还未见报道。本课题旨在研究结直肠癌组织中HSP60、HSP70、HSP90α的mRNA及其蛋白的表达,并分析其与病理分级的关系。方法:采用RT-PCR、免疫组化及Westernblot方法测定49例结直肠癌及其癌旁组织中HSP60、HSP70、HSP90α的表达;分析其与结直肠癌的病理组织学类型及分化程度的关系。结果:结直肠癌组织中HSP60、HSP70、HSP90αmRNA及蛋白的表达均显著高于相应的癌旁组织。癌组织较其癌旁组织HSP60、HSP70和HSP90α表达率及过表达率均有明显升高。在蛋白水平证明三种HSPs在癌组织中的表达明显高于癌旁组织。但是,HSP60、HSP70及HSP90α在结直肠癌高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌的表达率和过表达率差异均无统计学意义。Western-blot表明HSP60、HSP70、HSP90α在结直肠癌组织较癌旁组织中的表达也明显增高。结论:结直肠癌组织HSP60、HSP70、HSP90α三种基因的mRNA及蛋白表达均明显高于癌旁组织,但是其与病理分级无相关关系。

关键词：热休克蛋白结直肠肿瘤 RT—PCR Western blot 免疫组化病理学

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表达芯片筛选类风湿关节炎特异表达基因

中国生物化学与分子生物学报 2014年第9期30卷 899-904页

作者：岳龙涛张伟郑亚冰刘文波常晓天山东大学山东省千佛山医院医学研究中心济南250014 济南市第二人民医院济南250001

为了寻找类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)新的特异性表达标记物,应用基因芯片对RA、骨关节炎(osteoarthritis,OA)和强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者关节滑膜组织的基因表达谱进行比较,并采用实时定量PCR方法对芯片... 详细信息

为了寻找类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)新的特异性表达标记物,应用基因芯片对RA、骨关节炎(osteoarthritis,OA)和强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者关节滑膜组织的基因表达谱进行比较,并采用实时定量PCR方法对芯片结果进行验证.全基因组表达芯片的结果显示,与OA滑膜组织及AS滑膜组织相比,在RA患者的滑膜组织中,CD38,ANKRD38,E2F2,CFDP1,CD7,ISG20和IL2RG基因表达异常;实时定量PCR结果证实,RA患者滑膜组织中,CD38、E2F2和IL2RG基因表达明显增高.

关键词：类风湿关节炎基因表达谱芯片 CD38 IL2RG E2F2

小细胞肺癌患者外周血辅助性T细胞的表达情况及临床意义

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临床医学研究与实践 2021年第10期6卷 14-17页

作者：岳龙涛郑盈盈孙青山东第一医科大学第一附属医院/山东省千佛山医院病理科山东济南250014 山东第一医科大学第一附属医院/山东省千佛山医院医学研究中心山东济南250014

目的研究小细胞肺癌(SCLC)患者外周血中辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17及调节性T淋巴细胞(Treg)的表达情况,探讨其在SCLC进展中的作用。方法选择2016年1月至2018年4月本院收治的44例住院的SCLC患者(SCLC组)及24名健康者(对照组)作为研究... 详细信息

目的研究小细胞肺癌(SCLC)患者外周血中辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17及调节性T淋巴细胞(Treg)的表达情况,探讨其在SCLC进展中的作用。方法选择2016年1月至2018年4月本院收治的44例住院的SCLC患者(SCLC组)及24名健康者(对照组)作为研究对象。采用流式细胞法检测两组研究对象外周血中Th1、Th2、Th17及Treg细胞的表达情况,应用微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测血清中的细胞因子IFN-γ、IL-17及IL-10的表达情况。结果SCLC组患者的外周血中Th1细胞、Th1/Th2、IFN-γ表达水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。SCLC组患者的外周血中Th2、Treg、Th17、Treg/Th17、IL-17、IL-10表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论SCLC患者外周血中Th1/Th2的降低、Treg/Th17的升高可能与SCLC的致病机理及预后密切相关,该结论将为SCLC的治疗提供新的思路。

关键词：小细胞肺癌外周血 Th1 Th2 Th17 Treg

侧脑室注射腺病毒介导的GDNF基因对帕金森病的保护作用

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山东大学学报（医学版） 2016年第4期54卷 32-36页

作者：王思李秀华杜鹃岳龙涛王瑶刘菲郭配潍坊医学院山东潍坊261000 山东大学附属千佛山医院神经内科山东济南250014 山东大学附属千佛山医院医学研究中心山东济南250014

目的探讨腺病毒介导的神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因脑内转移对帕金森病(PD)的保护作用。方法采用C57Bl/6小鼠1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-henyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine,M PTP)法建立PD模型,随机分为重组GDNF腺病毒(Ad-GDNF)实验组和对照组。Ad-GDNF实验组将Ad-GDNF定向注射至侧脑室,对照组将无GDNF基因的腺病毒定向注射至侧脑室,并测量体质量,进行行为学实验评分,行中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色,高压液相色谱-电化学仪(HPLC-ECD)检测纹状体多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量,采用ELISA、RT-PCR法检测Ad-GDNF在中脑的表达。结果侧脑室注射病毒后2周,Ad-GDNF实验组体质量、行为学实验得分、黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞、纹状体DA含量均显著高于对照组(P<0.05);Ad-GDNF实验组在中脑内有过表达,中脑GDNF含量约是对照组2倍。结论侧脑室注射腺病毒介导的GDNF基因可减轻1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-henyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine,M PTP)诱发的小鼠DA能神经元进行性变性,保护DA能神经元,提示这一手段在PD保护性治疗方面具有一定的应用价值。

关键词：神经胶质细胞源性神经营养因子腺病毒帕金森病基因治疗 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶

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血脂康对实验性自身免疫性神经炎的治疗潜能

山东大学学报（医学版） 2015年第2期53卷 1-5,18页

作者：张蓬岳龙涛李亨张民王聪聪段瑞生窦迎春山东大学附属千佛山医院神经内科山东济南250014 山东大学附属千佛山医院中心实验室山东济南250014 山东中医药大学基础医学院山东济南250355

目的：探讨传统中药血脂康对实验性自身免疫性神经炎（EAN）大鼠的治疗潜能及免疫调节机制。方法应用周围髓鞘蛋白（P0）抗原180～199肽段免疫雌性 Lewis 大鼠建立 EAN 模型，将15只 EAN 大鼠随机、平均分为大剂量治疗组[1000 mg ／（kg... 详细信息

目的：探讨传统中药血脂康对实验性自身免疫性神经炎（EAN）大鼠的治疗潜能及免疫调节机制。方法应用周围髓鞘蛋白（P0）抗原180～199肽段免疫雌性 Lewis 大鼠建立 EAN 模型，将15只 EAN 大鼠随机、平均分为大剂量治疗组[1000 mg ／（kg·d）]、小剂量治疗组[200 mg ／（kg·d）]和对照组（每组 n ＝5），采用双盲法每日观察大鼠临床症状并评分；流式细胞技术检测淋巴结单个核细胞悬液细胞因子 TNF-α、IFN-γ、IL-10和 IL-17的分泌情况以及调节性 T 细胞在淋巴结单个核细胞及 CD4＋T 细胞中所占百分比。结果与对照组相比，血脂康大、小剂量治疗组的临床评分均降低，TNF-α的分泌均减少（P 均＜0．01）；IL-10的分泌量均明显受到抑制（P ＜0．001和 P ＜0．01）；大剂量治疗组IL-17的分泌较对照组减少（P ＜0．01）。与对照组相比，小剂量治疗组 CD4＋CD25＋ T 细胞占淋巴结单个核细胞的百分比、大剂量治疗组 CD4＋CD25＋ T 细胞和 CD4＋Foxp3＋ T 细胞占淋巴结单个核细胞及 CD4＋T 细胞的比例均明显降低（P 均＜0．05）。与对照组比较，大剂量治疗组 CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg 占淋巴结单个核细胞及 CD4＋T 细胞的比例降低（P 值分别为0．075和0．066）。结论血脂康通过抑制TNF-α、IL-10和 IL-17细胞因子产生，缓解了 EAN 大鼠病情，但同时抑制了 CD4＋T 细胞向 Treg 的分化。

关键词：血脂康格林巴利综合征实验性自身免疫性神经炎调节性 T 细胞细胞因子

AG490对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的治疗作用

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山东大学学报（医学版） 2016年第4期54卷 11-16,41页

作者：陈慧李亨岳龙涛张民王聪聪王杉张蓬段瑞生山东大学附属千佛山医院神经内科山东济南250014 山东大学附属千佛山医院中心实验室山东济南250014

目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠的治疗作用。方法用人工合成的大鼠乙酰胆碱受体α亚基的97-116肽段免疫Lewis大鼠,建立EAMG模型,将12只大鼠随机、平均分为AG490治疗组及对照组,双盲法隔日评... 详细信息

目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠的治疗作用。方法用人工合成的大鼠乙酰胆碱受体α亚基的97-116肽段免疫Lewis大鼠,建立EAMG模型,将12只大鼠随机、平均分为AG490治疗组及对照组,双盲法隔日评估大鼠临床症状并评分。流式细胞术检测淋巴结单个核细胞中细胞因子IL-6及IL-21的分泌;CCK-8及羟基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)检测淋巴结单个核细胞的增殖;ELISA检测大鼠血清中抗R97-116抗体水平。结果自免疫后第13天开始,AG490治疗组临床症状较对照组明显缓解,并且第27、29、31、33、37、39、41天时,两组肌力评分的差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,AG490治疗组中的细胞因子IL-6、IL-21的分泌减少(P<0.01);AG490治疗组中抗R97-116抗体Ig G、Ig G2b的分泌减少(P<0.01);与对照组相比,AG490治疗组的淋巴细胞的增殖受到抑制。结论 AG490通过抑制细胞因子IL-6及IL-21的分泌,降低大鼠血清中抗R97-116抗体Ig G、Ig G2b水平,缓解EAM G大鼠病情。

关键词： AG490 实验性自身免疫性重症肌无力 IL-6 IL-21 抗R97-116抗体

髓源树突细胞源性外泌体对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠NK及NK T细胞的影响

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2018年第5期25卷 350-354,362页

作者：杜通杨春林李亨张民刘儒涛岳龙涛李晓丽山东大学附属千佛山医院神经内科 250014 山东大学附属千佛山医院病理科 250014

目的探讨他汀类药物诱导髓源树突细胞(BMDCs)源性外泌体(exosomes)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠自然杀伤细胞(NK)及NK T细胞的影响。方法阿托伐他汀和DMSO分别与BMDCs共培养,采用流式细胞术分析其表型。应用梯度离心法提取... 详细信息

目的探讨他汀类药物诱导髓源树突细胞(BMDCs)源性外泌体(exosomes)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠自然杀伤细胞(NK)及NK T细胞的影响。方法阿托伐他汀和DMSO分别与BMDCs共培养,采用流式细胞术分析其表型。应用梯度离心法提取不同组BMDCs分泌的外泌体(分别记为他汀Dex和对照Dex),将不同组外泌体注射于EAMG大鼠体内,采用双盲法观察EAMG临床症状;通过流式细胞术检测各组大鼠淋巴结NK、NK T和干扰素γ(IFN-γ)阳性细胞、白细胞介素-10(IL-10)阳性细胞的表达水平;采用ELISA方法检测各组血清抗R97-116IgG抗体及其亚型水平。结果他汀类药物能够明显抑制BMDCs表面CD80和CD86的表达水平(CD80:1.10%比22.80%,P<0.01;CD86:30.78%比43.93%,P<0.01),这些BMDCs可进一步分泌他汀Dex。与对照Dex治疗组比较,他汀Dex治疗组EAMG大鼠淋巴结NK细胞比例增加(2.30%比1.63%,P<0.05),淋巴结单个核细胞(MNC)中IFN-γ+细胞比例(1.05%比2.24%,P<0.05)、血清抗R97-116IgG抗体及其亚型IgG2a和IgG2b水平均明显降低(IgG:0.44比0.64,IgG2a:0.26比0.35,IgG2b:1.47比1.94;均P<0.05)。结论他汀Dex可缓解EAMG大鼠的临床症状,这种作用与上调淋巴结MNC中的NK细胞有关。

关键词：他汀类药物外泌体重症肌无力,自身免疫性,实验性杀伤细胞,天然自然杀伤T细胞