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Peroxiredoxin Ⅱ在肝癌组织中的表达及功能分析

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Peroxiredoxin Ⅱ在肝癌组织中的表达及功能分析

作者：岳海英广西医科大学

学位级别：硕士

目的动态观察黄曲霉毒素B(Aflatoxin B,AFB)诱发树鼩肝癌发生过程中硫氧还原蛋白过氧化物酶Ⅱ(PeroxiredoxinⅡ,PrxⅡ)蛋白的表达情况,同时在人肝癌、癌旁组织及正常肝组织中进行验证,并进一步探讨PrxⅡ的生物学功能及其在肝癌发生发展... 详细信息

目的动态观察黄曲霉毒素B(Aflatoxin B,AFB)诱发树鼩肝癌发生过程中硫氧还原蛋白过氧化物酶Ⅱ(PeroxiredoxinⅡ,PrxⅡ)蛋白的表达情况,同时在人肝癌、癌旁组织及正常肝组织中进行验证,并进一步探讨PrxⅡ的生物学功能及其在肝癌发生发展中的作用机制。方法应用RT-PCR和Western blot方法,检测6例AFB诱发的树鼩肝癌、癌旁组织和这些动物肝癌发生前的活检肝组织,同时检测6例对照组动物相应时期的肝活检组织中PrxⅡ在mRNA水平和蛋白水平的表达改变,并在18例人肝癌及其相应癌旁组织和17例正常人肝组织进行验证,以及在三种人肝癌细胞系Hep3B、SMMC7721、MHCC97L和正常肝细胞系LO2中验证。然后化学合成针对PrxⅡ的小干扰RNA(siRNA)即PrxⅡ-1和PrxⅡ-2,分别用脂质体Lipofectamine2000介导转染到人肝癌细胞系Hep3B细胞,应用荧光定量PCR和Western blot测定干扰效果,再通过MTT实验、细胞周期实验、细胞克隆形成实验、细胞凋亡检测等,观察PrxⅡ表达被干扰后对Hep3B细胞生物学功能的影响;最后通过二氛荧光素双乙酸(Dichlorodihydrofluoresceindiacetate,DCFH-DA)法和硫代巴比妥酸(Thibabituric acid,TBA)法检测细胞内过氧化代谢产物活性氧类(Reactive oxygen species,ROS)和脂质过氧化产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的水平来探讨PrxⅡ的作用机制。结果***Ⅱ在树鼩肝癌组织中的mRNA和蛋白水平表达均明显高于相应的癌旁和癌前组织,也高于对照组同期活检肝组织(均为P＜0.05);人肝癌组织中PrxⅡ的mRNA和蛋白表达改变和树鼩相符,即肝癌中的表达高于癌旁组织和正常肝组织(均为P＜0.05);人肝癌细胞系Hep3B、SMMC7721、MHCC97L中的mRNA和蛋白表达水平也高于正常肝细胞系LO2(均为P＜0.01)。***Ⅱ-siRNA瞬时转入Hep3B细胞后,细胞中PrxⅡ的mRNA和蛋白表达均受到抑制,转染48h后PrxⅡmRNA水平抑制率达80%以上。3.以空白对照组(未经转染的Hep3B细胞)、阴性对照组(转染非特异性dsRNA)和分别转染两对siRNA的实验组,即PrxⅡ-1组和PrxⅡ-2组进行一系列实验,结果为实验组Hep3B细胞的生长受到不同程度的抑制,抑制率在转染96h后可达40%以上(P＜0.05),并且细胞生长状态较差,阴性对照组和空白对照组细胞生长无明显变化。PrxⅡ-1和PrxⅡ-2组、阴性对照组及空白对照组的细胞周期各时相的比例变化不大;RNA干扰PrxⅡ表达后,Hep3B细胞凋亡比例明显增加:2个实验组及阴性对照组、空白对照组的细胞凋亡比例在转染终浓度为50nmol/L时分别为8.40%、7.59%、5.14%和4.91%,在转染终浓度为100nmol/L时分别为19.40%、33.25%、5.96%和4.91%;以上4组PrxⅡ表达降低后细胞克隆形成数明显下降,各组分别为42.0±2.83、40.5±0.71、121.5±2.12和130.0±1.41(两个实验组与阴性对照组、空白对照组相比,均为P＜0.05),并且两个实验组形成的克隆直径也小于空白组和阴性对照组。***-DA法和TBA法检测结果显示细胞内ROS和MDA的水平在两个实验组明显高于两个对照组(均为P＜0.05)。结论PrxⅡ在树鼩和人癌组织中的表达均高于相应的癌旁、癌前和正常肝组织,在肝癌细胞系中的表达高于正常肝细胞系;PrxⅡ的生物学功能涉及细胞生长与凋亡、细胞克隆形成能力及细胞内过氧化产物代谢的影响。这些结果提示PrxⅡ在肝癌的发生发展过程中可能起重要作用,其机制可能与提高细胞内过氧化代谢产物ROS和MDA的水平形成有利于肿瘤细胞生长的微环境有关。因此,PrxⅡ有可能成为预防或治疗肝癌的分子靶标。

关键词：硫氧还原蛋白过氧化物酶Ⅱ 肝细胞性肝癌黄曲霉毒素B1 树鼩 RNA干扰

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滴灌条件下土壤水分运移规律试验研究

滴灌条件下土壤水分运移规律试验研究

作者：岳海英西北农林科技大学

学位级别：硕士

滴灌条件下土壤水分运移规律的试验研究,是正确设计滴灌系统和对田间作物水分进行精准管理的前提和基础。为了探索滴灌条件下土壤水分的运动规律及分布状况,进行了单点源和双点源条件下的室内滴灌试验。本文主要研究了点源入渗条件下,... 详细信息

滴灌条件下土壤水分运移规律的试验研究,是正确设计滴灌系统和对田间作物水分进行精准管理的前提和基础。为了探索滴灌条件下土壤水分的运动规律及分布状况,进行了单点源和双点源条件下的室内滴灌试验。本文主要研究了点源入渗条件下,滴头流量和灌水量等因素对湿润体内各点土壤含水量、湿润体形状和湿润范围的影响;双点源入渗条件下,滴头流量和交汇作用对土壤水分分布规律的影响。主要研究成果如下: 1)通过室内滴灌单点源入渗试验,结果发现湿润体形状符合抛物线模型,并且水平湿润锋和垂直湿润锋之间存在显著的抛物线关系,湿润体内水平和垂直湿润距离均随着入渗时间的推移而逐渐增大;不同滴头流量入渗试验时发现,滴灌湿润体水平和垂直入渗距离与入渗时间之间存在显著的幂函数关系,并且滴头流量越大湿润锋运移速率越大。水平和垂直两个方向上的湿润锋运移速率具有相同的规律:入渗开始时湿润锋运移速率较大,随着入渗时间的推移,运移速率逐渐减小。 2)滴灌自由入渗条件下,当滴头流量为4.6L/h时,粘壤土垂直湿润锋运移速度大于水平湿润锋运移速度所用的时间最短。 3)滴灌自由入渗条件下,利用得到的湿润体形状的抛物线特征,推求土壤湿润体特征值的经验解模型,通过试验数据进行验证,实测值与计算值之间相对误差绝大部分在5%以内,模型精度较高。湿润体内含水率在水平或竖直方向,滴头附近含水率最大,随入渗距离的增加而逐渐减小;在湿润体内某一平面上,含水率值大致相等;在离滴头距离从近到远的位置上,含水率差别从大到小变化,等值线由疏到密分布。 4)本文利用抛物线旋转体模型获得了湿润体体积与灌水量之间的关系,通过分析获得单点源入渗湿润体内平均含水率变化的转折点,对应的滴头流量为0.65L/h;双点源交汇入渗湿润体内平均含水率变化的转折点,对应的滴头流量为0.53L/h。 5)双点源交汇入渗条件下,滴头下方的水平入渗距离和垂直入渗距离均随着入渗时间的延长而增大,并且与入渗时间存在显著的幂函数关系,而交汇界面处的水平和垂直入渗距离与入渗时间之间存在显著的线性关系。湿润锋交汇界面处的土壤含水率大于相同土壤深度处的含水率。 6)双点源交汇入渗条件下,在相同灌水量和相同滴头间距情况下,滴头流量越大,湿润体发生交汇用时越短;相同滴头流量条件下,土壤交汇界面湿润体内含水率大于单点源入渗条件下相同位置处的含水率。湿润体发生交汇前后,水平和垂直两个方向上含水率分布规律:两者都随着入渗距离的增加,湿润体内含水率逐渐减小。

关键词：滴灌含水率增量湿润体体积交汇入渗水分运移

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放射性肺损伤机制研究进展

中华放射肿瘤学杂志 2014年第3期23卷 230-233页

作者：岳海英王仁生广西医科大学第一附属医院放疗科南宁530021

放疗是肺癌、乳腺癌等胸部肿瘤患者综合治疗的重要组成部分，治疗中可使肿瘤附近肺组织因受到放射剂量超过其生物效应的阈值而产生不同程度损伤。因此，RILI已成为胸部肿瘤患者放疗常见并发症，影响患者生活质量，甚至可因相关性疾病而... 详细信息

放疗是肺癌、乳腺癌等胸部肿瘤患者综合治疗的重要组成部分，治疗中可使肿瘤附近肺组织因受到放射剂量超过其生物效应的阈值而产生不同程度损伤。因此，RILI已成为胸部肿瘤患者放疗常见并发症，影响患者生活质量，甚至可因相关性疾病而死亡。随着放疗技术发展，RILI发生率虽有所下降，

关键词：损伤机制肺癌放射性肿瘤患者放疗技术综合治疗常见并发症相关性疾病

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铁基水氧化催化剂的产氧机理研究

铁基水氧化催化剂的产氧机理研究

作者：岳海英辽宁师范大学

学位级别：硕士

在光催化驱动水分解技术中,水的产氧步骤一直是整个反应的关键,为提高水分解效率,开发廉价、高效、环境友好型的水氧化催化剂至关重要。在本文中,我们选取Fe（TPA）Cl2和TPA中一个吡啶被喹啉取代的分子为对象,运用DFT的B3LYP-D3泛函,对F... 详细信息

在光催化驱动水分解技术中,水的产氧步骤一直是整个反应的关键,为提高水分解效率,开发廉价、高效、环境友好型的水氧化催化剂至关重要。在本文中,我们选取Fe（TPA）Cl2和TPA中一个吡啶被喹啉取代的分子为对象,运用DFT的B3LYP-D3泛函,对Fe（TPA）Cl2和Fe（L）Cl2催化水产氧进行了研究。计算了反应中不同价态Fe配合物的几何结构、所涉及的氧化反应和质子耦合电子转移反应的参考电位,以及不同反应的吉布斯自由能变化。首先通过直接氧化和配体交换反应的研究,确定了[Fe（TPA）Cl-H2O]+（1TPA）以及[Fe（L）Cl-H2O]+（1）为后续催化循环过程的水氧化催化剂,且基态为五重态。然后催化循环经历了 PCET、离子交换等过程,金属Fe的高自旋反应最容易发生。关键氧-氧键的生成过程中,[Fe（X）（OH）=O...H2O]+（X=TPA、L）经历了一个含有两个分子内氢键的五元环过渡态,而这一过程并不需要质子耦和电子转移反应的参与,使氧-氧键形成更为简单。Fe（L）Cl2体系因为O-O键形成的能垒比Fe（TPA）Cl2高了13.3kcal/mol,所以实验中能观测到反应前体高氧化态的Fe（Ⅳ）配合物中间体,但是Fe（L）Cl2的催化性能变弱。我们的理论计算结果解释了实验上Fe（L）Cl2体系能够观测到高价Fe（Ⅳ）中间体这一现象,但对Fe（TPA）Cl2和Fe（L）Cl2二者水氧化催化剂的活性仍然要深入研究。

关键词：光催化反应水氧化催化剂 Fe-配合物密度泛函理论

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非充分供水条件下滴灌入渗特征研究

人民黄河 2010年第5期32卷 62-63,65页

作者：岳海英李援农西北农林科技大学水利与建筑工程学院陕西杨凌712100

为了推求点源入渗条件下垂直湿润锋的运移规律,根据非饱和土壤水分运动的达西定律及其相应的假定,研究了点源入渗情况下,垂直湿润锋运移距离与入渗率和累计入渗量的关系,以及湿润锋随入渗时间的变化规律。结果表明:入渗率与湿润锋倒数... 详细信息

为了推求点源入渗条件下垂直湿润锋的运移规律,根据非饱和土壤水分运动的达西定律及其相应的假定,研究了点源入渗情况下,垂直湿润锋运移距离与入渗率和累计入渗量的关系,以及湿润锋随入渗时间的变化规律。结果表明:入渗率与湿润锋倒数间存在明显的线性关系;累计入渗量与湿润锋呈线性关系;湿润锋与时间存在明显的多项式关系。

关键词：滴灌点源入渗湿润锋累计入渗量

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不同负载量对酿酒葡萄果实品质的影响

北方园艺 2013年第15期 44-46页

作者：岳海英马海军宁夏农林科学院种质资源研究所宁夏银川750001 宁夏大学宁夏银川750021

以"赤霞珠"、"梅鹿辄"和"蛇龙珠"3个酿酒葡萄品种为试材,研究了不同负载量处理对酿酒葡萄果实品质的影响。结果表明:随着果实负载的减小,果实的果粒直径和果粒重量在增加,果实的可溶性固形物含量也在增加,但可滴定酸含量的变化不是很明... 详细信息

以"赤霞珠"、"梅鹿辄"和"蛇龙珠"3个酿酒葡萄品种为试材,研究了不同负载量处理对酿酒葡萄果实品质的影响。结果表明:随着果实负载的减小,果实的果粒直径和果粒重量在增加,果实的可溶性固形物含量也在增加,但可滴定酸含量的变化不是很明显,表明60%留果量处理最好。

关键词：负载量酿酒葡萄品质

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滴灌土壤湿润体含水率分布规律的试验研究

灌溉排水学报 2010年第2期29卷 137-139页

作者：岳海英李援农西北农林科技大学水利与建筑工程学院陕西杨凌712100

通过室内滴灌试验,研究了不同滴头流量对土壤湿润体变化过程的影响。试验所用的土壤为杨凌塿土,滴头流量分别为0.08、0.16、0.24、0.40、0.60、1.20、2.003、.60 L/h。结果表明,从0.08～0.6 L/h的滴头流量,其湿润体体积和灌水量之间存... 详细信息

通过室内滴灌试验,研究了不同滴头流量对土壤湿润体变化过程的影响。试验所用的土壤为杨凌塿土,滴头流量分别为0.08、0.16、0.24、0.40、0.60、1.20、2.003、.60 L/h。结果表明,从0.08～0.6 L/h的滴头流量,其湿润体体积和灌水量之间存在显著的线性关系,说明平均含水率是一定值;从1.2～3.6 L/h的滴头流量,其湿润体体积和灌水量之间存在显著的幂函数关系,说明平均含水率是逐渐增大的。

关键词：滴灌滴头流量湿润体体积含水率增量

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红提葡萄果穗拉长及果粒膨大技术

北方园艺 2009年第3期 162-163页

作者：梁玉文贾永华岳海英宁夏农林科学院种质资源研究所宁夏银川750001

为提高红提葡萄的商品性,获得较高的经济效益,在红提葡萄花序分离期、幼果期、果实膨大期分别用葡萄特效膨大灵、奇宝、赤霉素、保美灵、益果灵浸蘸果穗,不同药剂处理对红提葡萄果穗延伸生长和果粒膨大均有明显的影响,对于红提葡萄果穗... 详细信息

为提高红提葡萄的商品性,获得较高的经济效益,在红提葡萄花序分离期、幼果期、果实膨大期分别用葡萄特效膨大灵、奇宝、赤霉素、保美灵、益果灵浸蘸果穗,不同药剂处理对红提葡萄果穗延伸生长和果粒膨大均有明显的影响,对于红提葡萄果穗的拉长效应最好、最适宜的处理药剂为奇宝与保美灵混合液。

关键词：红提葡萄果穗果粒膨大

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油桃设施促早栽培品种比较试验

北方园艺 2009年第4期 141-142页

作者：梁玉文岳海英贾永华宁夏农林科学院种质资源研究所宁夏银川750001

引进早油2号、中油桃4号、中油桃5号、早油蟠桃、红山灯、丽春、超红珠、曙光、大早红9个品种进行日光温室促早栽培。结果表明:采用常规环境调控措施,在宁夏银川地区提前75d成熟。各品种以大早红和早油蟠桃成熟较早,红山灯产量最高,口... 详细信息

引进早油2号、中油桃4号、中油桃5号、早油蟠桃、红山灯、丽春、超红珠、曙光、大早红9个品种进行日光温室促早栽培。结果表明:采用常规环境调控措施,在宁夏银川地区提前75d成熟。各品种以大早红和早油蟠桃成熟较早,红山灯产量最高,口味也较好且色泽艳丽,着色度较高,香味浓郁,其次为中油4号、中油桃5号、丽春。

关键词：油桃设施促早栽培