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逍遥散对LPS诱导抑郁样小鼠细胞凋亡作用

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：杨婧雯王英巩子汉梁文青岳广欣梁媛宁夏回族自治区中医医院暨中医研究院中国中医科学院中医基础理论研究所河南中医药大学中医学院

目的：探索逍遥散对脂多糖(LPS)诱导抑郁样小鼠海马细胞凋亡的作用机制。方法：适应性喂养后，将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、米诺环素组(腹腔注射，50 mg·kg-1)、氟西汀组(灌胃，2.6 mg·kg-1)、逍遥散低、中、高剂量组(灌胃... 详细信息

目的：探索逍遥散对脂多糖(LPS)诱导抑郁样小鼠海马细胞凋亡的作用机制。方法：适应性喂养后，将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、米诺环素组(腹腔注射，50 mg·kg-1)、氟西汀组(灌胃，2.6 mg·kg-1)、逍遥散低、中、高剂量组(灌胃，6.012 5、12.025、24.050 g·kg-1)，给药14 d后，模型组和各给药组腹腔注射2 mg·kg-1LPS，正常组腹腔注射等体积生理盐水。通过糖水偏好和悬尾实验评估小鼠抑郁样行为；高效液相色谱法(HPLC)检测小鼠海马5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)含量。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量；免疫组化检测离子钙接头蛋白-1(Iba-1)蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马TNF-α、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关的X蛋白基因(Bax)、Bcl-2、B淋巴细胞瘤-XL(Bcl-xl)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达水平；全自动蛋白表达分析系统(Wes)检测小鼠海马Bax、Bcl-2蛋白表达水平；Tunel法观察小鼠海马神经元凋亡。结果：与正常组比较，模型组小鼠糖水消耗率显著降低(P<0.01)；血清TNF-α含量及海马TNF-α mRNA表达显著升高(P<0.01)；海马5-HT、DA含量明显下降(P<0.05，P<0.01)；Iba-1表达明显增多(P<0.05)；Bax mRNA及蛋白表达显著上升、Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较，氟西汀、米诺环素及逍遥散中剂量组小鼠糖水消耗率明显升高、悬尾不动时间明显下降(P<0.05，P<0.01)；米诺环素、逍遥散组小鼠海马5-HT、DA含量明显升高(P<0.05，P<0.01)。各给药组小鼠血清TNF-α含量及TNF-α mRNA表达明显降低、Iba-1表达明显减少、Bax mRNA及蛋白表达水平明显降低、神经元凋亡明显减少(P<0.05，P<0.01)。结论：逍遥散可改善LPS诱导的C57小鼠的抑郁样行为，其机制可能与抑制海马神经炎症减少神经元凋亡有关。

关键词：脂多糖逍遥散凋亡海马小鼠

逍遥散对脂多糖诱导抑郁样小鼠细胞凋亡的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期 36-43页

作者：杨婧雯王英巩子汉梁文青岳广欣梁媛中国中医科学院中医基础理论研究所宁夏回族自治区中医医院暨中医研究院河南中医药大学中医学院

目的：探索逍遥散对脂多糖（LPS）诱导抑郁样小鼠海马细胞凋亡的作用机制。方法：适应性喂养后，将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、米诺环素组(腹腔注射，50 mg·kg-1)、氟西汀组（灌胃，2.6 mg·kg-1）、逍遥散低、中、高剂量组... 详细信息

目的：探索逍遥散对脂多糖（LPS）诱导抑郁样小鼠海马细胞凋亡的作用机制。方法：适应性喂养后，将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、米诺环素组(腹腔注射，50 mg·kg-1)、氟西汀组（灌胃，2.6 mg·kg-1）、逍遥散低、中、高剂量组(灌胃，6.012 5、12.025、24.050 g·kg-1)，给药14 d后，模型组和各给药组腹腔注射2 mg·kg-1LPS，正常组腹腔注射等体积生理盐水。通过糖水偏好和悬尾实验评估小鼠抑郁样行为；高效液相色谱法（HPLC）检测小鼠海马5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）含量。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；免疫组化检测离子钙接头蛋白-1（Iba-1）蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠海马TNF-α、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关的X蛋白（Bax）、Bcl-2、B细胞淋巴瘤-xl（Bcl-xl）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）m RNA表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠海马Bax、Bcl-2蛋白表达水平；原位末端标记法（TUNEL）法观察小鼠海马神经元凋亡。结果：与正常组比较，模型组小鼠糖水消耗率显著降低（P<0.01）；血清TNF-α含量及海马TNF-α m RNA表达显著升高（P<0.01）；海马5-HT、DA含量明显下降（P<0.05,P<0.01）;Iba-1表达明显增多（P<0.05）;Bax m RNA及蛋白表达显著上升、Bcl-2 m RNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较，氟西汀、米诺环素及逍遥散中剂量组小鼠糖水消耗率明显升高、悬尾不动时间明显下降（P<0.05,P<0.01）；米诺环素、逍遥散组小鼠海马5-HT、DA含量明显升高（P<0.05,P<0.01）。各给药组小鼠血清TNF-α含量及TNF-α m RNA表达明显降低、Iba-1表达明显减少、Bax m RNA及蛋白表达水平明显降低、神经元凋亡明显减少（P<0.05,P<0.01）。结论：逍遥散可改善LPS诱导的C57小鼠的抑郁样行为，其机制可能与抑制海马神经炎症减少神经元凋亡有关。

关键词：脂多糖逍遥散凋亡海马小鼠

基于文献探讨柴胡疏肝散治疗肝癌共病抑郁的作用机制

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中国中医基础医学杂志 2024年

作者：宁子昕李皓月高坤曹洋岳广欣申力中国中医科学院中国中医科学院中医基础理论研究所陕西中医药大学

目的基于GEO数据库基因芯片挖掘与网络药理学，探讨柴胡疏肝散拆分的行气组、解郁组及柴胡疏肝散全方组治疗肝癌共病抑郁的作用机制。方法通过TCMSP平台获得柴胡疏肝散的潜在活性成分和候选靶点，从GEO数据库下载肝癌和抑郁症的相关... 详细信息

目的基于GEO数据库基因芯片挖掘与网络药理学，探讨柴胡疏肝散拆分的行气组、解郁组及柴胡疏肝散全方组治疗肝癌共病抑郁的作用机制。方法通过TCMSP平台获得柴胡疏肝散的潜在活性成分和候选靶点，从GEO数据库下载肝癌和抑郁症的相关基因数据集，药物靶点和疾病靶点取交集，利用STRING数据库对交集靶点进行蛋白互作网络（protein-proteininteraction，PPI）分析，筛选核心网络节点，利用Reactome数据库对核心靶点进行通路信息挖掘。结果共获得行气组交集靶点24个，解郁组交集靶点有52个，柴胡疏肝散全方交集靶点57个。筛选出行气组核心靶点9个，解郁组核心靶点20个，柴胡疏肝散全方组核心靶点21个。行气组核心靶点涉及的通路主要为细胞周期、肿瘤蛋白p53（tumorproteinp53，TP53)表达的调控、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)在癌症中的组成信号传导等。解郁组核心靶点主要通路包括白细胞介素（interleukin，IL）-10的信号传导、细胞周期、TP53调节细胞周期基因的转录、癌基因诱导的细胞衰老、细胞对压力反应、氧化应激诱导的细胞衰老等。柴胡疏肝散全方组涉及的通路与解郁组一致。结论行气组药物可能通过调控细胞周期、细胞增殖、凋亡、自噬、侵袭和迁移来治疗肝癌。解郁组与柴胡疏肝散全方可能通过调节机体“神经-内分泌-免疫”系统，发挥抑制免疫反应、抑制小胶质细胞激活、抑制下丘脑-垂体-肾上腺（Hypothalamic-Pituitary-Adrenal，HPA）轴激活、抗氧化等作用，从而治疗肝癌合并抑郁。解郁组药物可能是柴胡疏肝散治疗肝癌合并抑郁的核心药物。

关键词：柴胡疏肝散肝癌抑郁症 GEO数据库网络药理学作用机理

基于NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路探讨温阳解郁方调节小鼠海马突触可塑性的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 39-47页

作者：孟丹华佘楷杰孟晓莹巩子汉梁文青王英梁媛岳广欣中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 河南中医药大学基础医学院郑州450000

目的:探讨温阳解郁方改善“母婴分离+束缚应激(MS+RS)”抑郁小鼠神经炎症,保护突触可塑性的作用机制。方法:仔鼠出生第0天(PD0)随机分为空白组和造模组。造模采用母婴分离联合束缚应激21 d建立抑郁模型,PD21离乳后剔除雌鼠,随机分为模... 详细信息

目的:探讨温阳解郁方改善“母婴分离+束缚应激(MS+RS)”抑郁小鼠神经炎症,保护突触可塑性的作用机制。方法:仔鼠出生第0天(PD0)随机分为空白组和造模组。造模采用母婴分离联合束缚应激21 d建立抑郁模型,PD21离乳后剔除雌鼠,随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组,每组15只,PD21~PD111各给药组药混饲料给药,给药剂量分别为5.85、12.03、16.71 g·kg^(-1),2.6 mg·kg^(-1)。糖水偏好、开放旷场、O迷宫及新物体识别行为学实验评估小鼠焦虑抑郁和学习记忆能力;免疫组化法(IHC)观察海马小胶质细胞离子钙接头蛋白-1(Iba-1);高效液相色谱法(HPLC)检测海马去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测海马白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β、突触素(Syn)、突触后致密物95(PSD95)蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠糖水偏好率、5 min中央运动时间、运动总距离、开臂停留时间和认知指数明显降低(P<0.05,P<0.01),IHC结果显示,小胶质细胞呈“阿米巴”激活态,Iba1明显增加,海马NE、E含量显著减少(P<0.01),IL-1β和IL-18含量显著增加(P<0.01),PSD95、Syn蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01),NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,温阳解郁组和氟西汀组小鼠糖水偏好率、认知指数增加,5 min中央运动时间、开臂停留时间、认知指数明显增加(P<0.05,P<0.01),小胶质细胞形态恢复正常,Iba1明显降低,海马NE、E含量明显增加(P<0.05,P<0.01)、IL-1β和IL-18含量显著降低(P<0.01),PSD95、Syn蛋白表达显著增加(P<0.01)、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),各中药组以温阳解郁方效果最佳。结论:温阳解郁方可能通过调节NLRP3炎症通路,缓解小胶质细胞诱导的神经炎症,增加海马神经递质含量,并改善突触可塑性,减轻MS+RS小鼠抑郁样行为,其综合效果优于温阳方和解郁方。

关键词：温阳解郁方 NOD样受体蛋白3(NLRP3) 小胶质细胞神经炎症突触可塑性

基于BDNF/Akt/mTOR信号通路探讨温阳解郁方调控海马神经元凋亡和突触可塑性的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 48-57页

作者：孟丹华佘楷杰孟晓莹巩子汉梁文青王英梁媛岳广欣中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 河南中医药大学基础医学院郑州450000

目的:探讨温阳解郁方调节“母婴分离+束缚应激(MS+RS)”抑郁小鼠海马神经元凋亡改善突触可塑性的机制。方法:仔鼠出生第0天(PD0)随机分为空白组10只和造模组50只。造模采用MS+RS建立抑郁模型,PD21离乳后随机分为模型组、温阳组、解郁组... 详细信息

目的:探讨温阳解郁方调节“母婴分离+束缚应激(MS+RS)”抑郁小鼠海马神经元凋亡改善突触可塑性的机制。方法:仔鼠出生第0天(PD0)随机分为空白组10只和造模组50只。造模采用MS+RS建立抑郁模型,PD21离乳后随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组,每组10只,PD21~PD111分组给药。糖水偏好、开放旷场、O迷宫及新物体识别行为实验评估小鼠焦虑抑郁和学习记忆能力;免疫组化法(IHC)检测小鼠海马突触后致密物95(PSD95)表达情况;原位末端标记法(TUNEL)染色检测小鼠海马神经元凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化酪氨酸蛋白激酶/酪氨酸蛋白激酶(p-TrkB/TrkB)、磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B(p-Akt/Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR/mTOR)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、突触后致密蛋白95(PSD95)、突触素(Syn)蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠糖水偏好程度、中央区停留时间、运动总距离、开臂停留时间和认知指数显著减少(P<0.01),IHC结果显示海马PSD95表达明显减少,海马神经元凋亡数量增加(P<0.01),BDNF、p-TrkB/TrkB、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、PSD95、Syn蛋白表达显著减少(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白含量明显增加(P<0.05);与模型组比较,温阳解郁组和氟西汀组糖水偏好程度、5 min中央运动时间、5 min开臂停留时间和认知指数明显增加(P<0.05,P<0.01),海马PSD95表达明显增加、海马凋亡指数显著增加(P<0.01),BDNF、p-TrkB/TrkB、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、Bcl-2、PSD95、Syn蛋白含量显著增加(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白含量显著减少(P<0.01)。结论:温阳解郁方可以通过BDNF/Akt/mTOR信号通路,改善模型组小鼠神经元凋亡情况,保护海马突触结构和功能,缓解模型组小鼠抑郁样行为,其综合疗效及分子机制效果优于温阳方和解郁方。

关键词：温阳解郁方脑源性神经营养因子(BDNF)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 海马神经元凋亡突触可塑性

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二次打击致抑郁小鼠的证候属性及其机制

中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 29-38页

作者：巩子汉王英杨婧雯梁文青孟丹华佘楷杰梁媛岳广欣宁夏回族自治区中医医院暨中医研究院银川750021 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 河南中医药大学郑州450000

目的:探讨母婴分离(MS)联合慢性束缚应激(RS)致抑郁小鼠的证候属性及其机制研究。方法:仔鼠出生第0天(PD0)随机分为空白组和造模组。PD21后剔除雌鼠,随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组,采用MS+RS建立二次打击模型,... 详细信息

目的:探讨母婴分离(MS)联合慢性束缚应激(RS)致抑郁小鼠的证候属性及其机制研究。方法:仔鼠出生第0天(PD0)随机分为空白组和造模组。PD21后剔除雌鼠,随机分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组、氟西汀组,采用MS+RS建立二次打击模型,每组15只。采用糖水、悬尾及旷场实验评估小鼠焦虑抑郁样行为;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及皮质酮(CORT)含量;高效液相-电化学法(HPLC-ECD)检测各组小鼠海马单胺类神经递质含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠海马5-羟色胺(5-HT)系统、下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴及脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路基因表达水平;免疫组化法(IHC)检测各组小鼠海马5-HT系统及HPA轴蛋白表达水平;全自动蛋白表达分析系统(Simple Wes)检测各组小鼠海马BDNF等蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠出现抑郁样行为,温阳解郁方及氟西汀可显著缓解。与空白组比较,模型组血浆CORT及ACTH含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠血浆CORT及ACTH含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,单胺类神经递质表达方面,模型组海马神经递质表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠海马神经递质表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠5-HT能神经受到抑制、HPA轴异常激活,温阳解郁方及氟西汀可调控5-HT能神经及HPA轴的异常状态。与空白组比较,海马组织BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,温阳、解郁、温阳解郁方及氟西汀组小鼠海马BDNF、TrkB mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:二次打击致抑郁小鼠的证候属性可能是阳虚肝郁型,温阳解郁方可能通过调节5-HT神经系统及HPA轴介导的BDNF信号通路,增加海马神经递质含量,进而缓解模型小鼠抑郁样行为。

关键词：二次打击抑郁样行为 5-羟色胺(5-HT)神经系统下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路阳虚肝郁

基于“滞-郁-虚”动态演变探讨慢性应激诱导抑郁的病机特点

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中华中医药杂志 2024年第3期39卷 1563-1566页

作者：佘楷杰孟丹华孟晓莹潘明敏梁文青岳广欣中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 暨南大学中医学院广州510632 河南中医药大学基础医学院郑州450046

文章回溯了滞、郁、虚的概念发展源流及演变,从字形、字义角度解释滞、郁、虚的内涵,对精神疾病中定义模糊的滞、郁病机进行深层涵义的挖掘和对比研究。滞代指气机不畅、病理产物蓄积、脏腑功能失调的病机特征;郁在囊括滞的基础上强调... 详细信息

文章回溯了滞、郁、虚的概念发展源流及演变,从字形、字义角度解释滞、郁、虚的内涵,对精神疾病中定义模糊的滞、郁病机进行深层涵义的挖掘和对比研究。滞代指气机不畅、病理产物蓄积、脏腑功能失调的病机特征;郁在囊括滞的基础上强调疾病层面的忧郁病症表现,滞为郁的内在病理基础,郁为滞的外在行为表象。虚为不足,为抑郁中后阶段的主要特征。在此基础上阐述慢性应激诱导抑郁的“滞-郁-虚”病机演变特点:滞是病理基础;郁是发病机转,是抑郁行为发生的标志;虚是结局指标,是疾病加重、病程延长的病机枢纽。针对“滞-郁-虚”不同阶段,治疗当采取行气、解郁、补虚等治则,并根据具体病机、病机兼杂、病机程度而随证加减治疗。

关键词：滞-郁-虚慢性应激抑郁病机动态演变

机器学习驱动中医诊断智能化的发展现状、问题及解决路径

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中国中医基础医学杂志 2024年第3期30卷 398-406页

作者：佘楷杰袁艿君马庆宇岳广欣陈家旭暨南大学中医学院方证研究中心广州510632 广州市中医方证重点实验室广州510632 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 北京中医药大学中医学院北京100029

本文对人工智能(artificial intelligence,AI)技术的机器学习算法,特别是传统机器学习和深度学习分析中医四诊信息以实现诊断智能化的应用和局限进行概述,并结合多源多模态信息处理、智能辨病辨证等探讨了智能诊断的发展现状,为智能决... 详细信息

本文对人工智能(artificial intelligence,AI)技术的机器学习算法,特别是传统机器学习和深度学习分析中医四诊信息以实现诊断智能化的应用和局限进行概述,并结合多源多模态信息处理、智能辨病辨证等探讨了智能诊断的发展现状,为智能决策的辅助诊疗提供基础。基于AI应用于中医诊断的适用性,分析目前中医诊断智能化赋能的技术难题,如缺乏四诊采集标准和大型带标注的先验数据集,缺乏多算法共建智能诊断模型的研究,以及对智能诊疗模型的疗效评价研究等,并详细分析解决路径,以期为中医诊断智能化应用提供发展方向。

关键词：人工智能机器学习深度学习中医诊断智能决策

基于“方证相应”思路辨析克雷伯杆菌肺炎的病机演变

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中国中医基础医学杂志 2024年第4期30卷 589-591页

作者：李露岳广欣李东影任星张继丹刘爽王毅中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700

克雷伯杆菌肺炎是一种常见的医院内感染,根据其发展过程可分为初期、进展期和恢复期,所用基本方分别为银翘散、清金化痰汤、麦门冬汤。从“方证相应”分析其病机演变规律,发现克雷伯杆菌肺炎初期属于外感风热袭肺证,以风邪为主;若失治... 详细信息

克雷伯杆菌肺炎是一种常见的医院内感染,根据其发展过程可分为初期、进展期和恢复期,所用基本方分别为银翘散、清金化痰汤、麦门冬汤。从“方证相应”分析其病机演变规律,发现克雷伯杆菌肺炎初期属于外感风热袭肺证,以风邪为主;若失治或误治,则转为内陷痰热壅肺证,以热邪为主;后期则以正气亏虚为主,出现气阴两虚等虚证。因此邪实正虚是贯穿整个病理过程的基本特点,其主要涉及的中医因素有风、热、痰、毒、瘀、虚等。临床治疗方面,要根据方证的变化而选用相应的方剂,适时调整,综合施治。“方证相应”是指根据患者的症状而选用与之相符的方剂,不受病名或病因的限制,重视抓住主证,是中医药治疗耐药克雷伯杆菌肺炎的有效方法和理论依据。

关键词：方证相应克雷伯杆菌肺炎病机演变临床特点