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HtrA1促进髓核细胞基质金属蛋白酶的表达及其机制

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HtrA1促进髓核细胞基质金属蛋白酶的表达及其机制

作者：岳佳伟江苏大学

学位级别：硕士

目的:椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是导致颈肩腰腿痛的一个重要原因。IDD的发病原因及其机制十分复杂,其影响因素之间又相互联系,目前尚未完全阐明。高温必需因子A1(High temperature requirement A1,Htr A1)属于... 详细信息

目的:椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是导致颈肩腰腿痛的一个重要原因。IDD的发病原因及其机制十分复杂,其影响因素之间又相互联系,目前尚未完全阐明。高温必需因子A1(High temperature requirement A1,Htr A1)属于丝氨酸蛋白酶(Htr A)家族,已经有越来越多的证据,暗示Htr A1作为一个分泌型蛋白酶在骨、关节、和肌肉等疾病中发挥作用。基质金属蛋白酶(MMPs)是细胞外基质降解过程中所不可或缺的蛋白水解酶之一,其的生物学作用是参与ECM的代谢,目前已经发现的MMPs有28多种,而在IVD过程中发挥作用的研究较多的主要有MMP1、MMP3、MMP7、MMP9、MMP13。而对于在IDD中Htr A1以及MMPs的内在机制尚不清楚,故本研究旨在检测椎间盘髓核组织中Htr A1及MMPs的表达,分析Htr A1与MMPs在髓核中的表达有无相关性。并进一步地于人椎间盘髓核细胞探讨Htr A1MMPs的可能存在的内在机制。方法:(1)临床病例分析:男14例,女18例,年龄58～73岁,平均年龄67.7岁;对照组18例,均为脊柱外伤患者,男12例、女6例,年龄45～62岁,平均年龄56.3岁。分离髓核组织,RT-q PCR方法检测髓核组织中Htr A1、MMP-1、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-13的m RNA表达水平;Western-blot法检测髓核组织中的Htr A1、MMP-1、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-13的蛋白含量;直线回归法分析Htr A1的m RNA表达水平与MMP-1、MMP-3、MMP-7、MMP-13之间的相关性。(2)r Htr A1刺激HNPCs及抑制剂的干预实验:1)r Htr A1刺激HNPCs后Htr A1及MMPs的表达:用r Htr A1刺激HNPCs,RT-q PCR方法检测HNPCs中Htr A1、MMP-1、MMP-3、MMMP-13的m RNA表达水平;Western-blot法检测HNPCs中的Htr A1、MMP-1、MMP-3、MMP-13的蛋白含量,ELISA检测HNPCs上清中MMP-1、MMP-3、MMP-13的含量。2)抑制剂的干预:用r Htr A1刺激HNPCs并以ERK1/2和ROCK的抑制剂进行干预,RT-q PCR方法检测HNPCs中Htr A1、MMP-1、MMP-3、MMP-13的m RNA表达水平;Western-blot法检测HNPCs中的Htr A1、MMP-1、MMP-3、MMP-13的蛋白含量,ELISA检测HNPCs上清中MMP-1、MMP-3、MMP-13的含量。结果:(1)椎间盘退变患者髓核组织中Htr A1的表达相对于对照者明显升高,且MMP-1、MMP-3、MMP-13的表达也随之升高;同时,相关性分析结果显示,Htr A1与MMP-1、MMP-3、MMP-13呈正相关。(2)r Htr A1刺激HNPCs后,MMP-1、MMP-3、MMP-13的m RNA以及蛋白的表达均上调,并且r Htr A1可引起ERK1/2和ROCK的磷酸化。(3)ERK1/2和ROCK的抑制剂干预之后,MMP-1、MMP-3、MMP-13的m RNA以及蛋白的表达均下调,同时,细胞上清中的MMP-1、MMP-3、MMP-13亦下调。

关键词：椎间盘退变(IDD) 高温必需因子A1(Htr A1) 基质金属蛋白酶(MMPs) ERK1/2 ROCK

椎间盘退变患者髓核组织中HtrA1的表达及其与MMPs的关系

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山东医药 2017年第22期57卷 83-85页

作者：岳佳伟李大鹏吴燕黄永辉江苏大学附属医院江苏镇江212001 江苏大学医学院

目的观察椎间盘退变患者髓核组织中高温必需因子A1(HtrA1)的表达及其与基质金属蛋白酶(MMPs)的关系。方法 78例接受椎间盘髓核切除患者,其中年轻脊柱骨折患者(改良Thompson分级Ⅰ级)10例,椎间盘退变患者68例(改良Thompson分级Ⅱ级22例... 详细信息

目的观察椎间盘退变患者髓核组织中高温必需因子A1(HtrA1)的表达及其与基质金属蛋白酶(MMPs)的关系。方法 78例接受椎间盘髓核切除患者,其中年轻脊柱骨折患者(改良Thompson分级Ⅰ级)10例,椎间盘退变患者68例(改良Thompson分级Ⅱ级22例、Ⅲ级24例、Ⅳ级22例)。采用real-time PCR和Western blotting法分别检测椎间盘髓核组织中的Htr A1及MMP-1、3、7、9、13 mRNA和蛋白,并采用Pearson法分析Htr A1和MMP-1、3、7、9、13的相关性。结果改良Thompson分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者椎间盘髓核组织中HtrA1 mRNA分别为0.56±0.49、0.70±0.45、1.47±0.86、4.10±1.17,蛋白分别为0.16±0.09、0.52±0.07、1.21±0.26、3.10±0.17,两两相比P均<0.05。不同改良Thompson分级患者椎间盘髓核组织中MMP-1、3、13的mRNA、蛋白表达两两相比P均<0.05。HtrA1 mRNA与MMP-1、3、13 mRNA表达呈正相关(r^2分别为0.144 8、0.240 6、0.869 5,P均<0.01)。结论椎间盘髓核组织中HtrA1的表达随椎间盘退变程度的升高而升高,且与MMP-1、3、13的表达有关。

关键词：椎间盘退变高温必需因子A1 基质金属蛋白酶

引入Baarda粗差探测的InSAR大气校正方法与应用

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西南交通大学学报 2024年

作者：黄其欢何子琪岳佳伟张瀚文河海大学地球科学与工程学院

湍流大气延迟严重影响时序InSAR高精度精细化变形提取的精度。本文考虑湍流大气延迟在时空域上的随机特性和对形变相位的剧烈影响，提出一种引入Baarda粗差探测的InSAR大气校正方法。该方法将湍流大气延迟视为时间序列上的粗差，采用Baa... 详细信息

湍流大气延迟严重影响时序InSAR高精度精细化变形提取的精度。本文考虑湍流大气延迟在时空域上的随机特性和对形变相位的剧烈影响，提出一种引入Baarda粗差探测的InSAR大气校正方法。该方法将湍流大气延迟视为时间序列上的粗差，采用Baarda粗差探测方法予以识别和去除，进而通过时空滤波法获取高精度形变信息。模拟和Sentinel-1 SAR实测数据证实了该方法的有效性，相对于仅用时空滤波法，本文方法获取的模拟数据形变速率残差标准差在稳定区域和形变区域分别降低了约25.8%和16.0%；Sentinel-1 SAR数据获取的半变异函数相较于同空间尺度下原始相位结果降低约74%，优于仅时空滤波法的65%。该方法成功应用于巴基斯坦拉合尔市橙线轨道交通的精细化监测，结果显示，橙线全线约17.6%处于地面沉降强发育区。

关键词：时序InSAR 大气校正 Baarda粗差探测变形监测

基于发展化学学科核心素养的教学设计案例分析

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家庭生活指南 2018年第12期 235-235页

作者：岳佳伟山西大同大学化学与环境工程学院

当前,化学学科的教学已经不仅仅是注重知识的传递,更多的教育者将目标放在了学科核心素养的培育上。本文对发展化学学科核心素养的相关要点进行了分析,并结合相应的教学设计案例进行说明,总结了发展化学学科核心素养的途径。

关键词：化学学科核心素养教学设计案

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矿山电气中PLC控制技术的应用研究

机械管理开发 2018年第3期33卷 129-130页

作者：岳佳伟大同煤矿集团四老沟矿山西大同037028

为使PLC控制技术在矿山电气中得到更好的推广与应用,以矿山电气中PLC控制技术为研究对象,介绍了PLC技术的基本组成及工作原理,并研究了PLC控制技术在矿山电气中的具体应用,希望对矿山企业的发展给予一定的技术支持。

关键词： PLC控制技术组成工作原理矿山电气应用

髓核组织高温相关丝氨酸蛋白酶A1表达水平与椎间盘退变程度的相关性

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中国医学科学院学报 2017年第6期39卷 737-742页

作者：李大鹏吴燕岳佳伟孙继芾王家伦黄永辉江苏大学附属医院骨外科江苏镇江212001 江苏大学医学院生理学教研室江苏镇江212013

目的分析髓核组织高温相关丝氨酸蛋白酶A1(HtrA1)的表达水平与椎间盘退变程度(Pfirrmann分级)的相关性。方法 36例需手术摘除髓核组织的患者,术前行磁共振成像检查,据矢状位T2加权相磁共振对拟手术节段予Pfirrmann分级;采用逆转录PCR及W... 详细信息

目的分析髓核组织高温相关丝氨酸蛋白酶A1(HtrA1)的表达水平与椎间盘退变程度(Pfirrmann分级)的相关性。方法 36例需手术摘除髓核组织的患者,术前行磁共振成像检查,据矢状位T2加权相磁共振对拟手术节段予Pfirrmann分级;采用逆转录PCR及Western blot方法检测髓核组织中HtrA1的mRNA及蛋白表达水平,对髓核组织HtrA1的表达水平与Pfirrmann等级进行相关性分析。结果 36例椎间盘经磁共振成像检查,PfirrmannⅠ级3例、Ⅱ级10例、Ⅲ级11例、Ⅳ级7例、Ⅴ级5例;髓核组织HtrA1 mRNA及蛋白表达水平随Pfirrmann等级增高而增加,经Bonferroni检验,除Ⅳ、Ⅴ级间外(P>0.05),余各级间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05),经Spearman秩相关分析:HtrA1 mRNA及蛋白表达水平与Pfirrmann分级间存在秩相关关系(P<0.000 1)。结论髓核组织HtrA1 mRNA及蛋白表达水平随Pfirrmann等级增高而升高,提示HtrA1与椎间盘退变程度存在相关性。

关键词：椎间盘退变髓核磁共振成像 Pfirrmann分级

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无人机测绘在重大突发事件中的应用和影响

资源导刊 2020年第24期 34-36页

作者：李国桥岳佳伟河南省地质矿产勘查开发局测绘地理信息院河南郑州450006 华北水利水电大学测绘与地理信息学院河南郑州450046

通过阐述无人机在新冠肺炎疫情报道、抗疫宣传、运输物资、测量等方面的表现与积极作用,分析无人机在重大突发事件中的应用和影响。无人机能够在类似事件中实施快速有效的救援,大大提高了工作效率,实现了无接触式管理与支援。

关键词：无人机报道宣传物资测量

胰岛素样生长因子1通过PI3K/Akt信号通路促进髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达

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中国组织工程研究 2017年第8期21卷 1202-1208页

作者：李大鹏吴燕岳佳伟王家伦胡浪黄永辉江苏大学附属医院江苏省镇江市212001 江苏大学医学院江苏省镇江市212013

背景:采用生长因子等生物学方法修复退变椎间盘是目前椎间盘退变治疗的研究热点,胰岛素样生长因子1能促进髓核细胞增殖、促进功能性细胞外基质的合成,但其机制仍未阐明。目的:观察胰岛素样生长因子1对髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表... 详细信息

背景:采用生长因子等生物学方法修复退变椎间盘是目前椎间盘退变治疗的研究热点,胰岛素样生长因子1能促进髓核细胞增殖、促进功能性细胞外基质的合成,但其机制仍未阐明。目的:观察胰岛素样生长因子1对髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达的促进作用,并探讨其信号转导机制。方法:分离培养人髓核细胞,取第3代细胞给予不同质量浓度的胰岛素样生长因子1(0,20,50,100,200μg/L)进行刺激,采用RT-PCR、Western-blot检测聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达。100μg/L的胰岛素样生长因子1作用于髓核细胞,采用Western-blot检测胰岛素样生长因子1对PI3K/Akt信号通路的激活作用,并通过LY294002的应用检测PI3K/Akt通路的抑制对聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达的影响。结果与结论:(1)随胰岛素样生长因子1质量浓度增高,聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达水平逐渐升高,该作用呈剂量依赖性。胰岛素样生长因子1(100μg/L)能显著促进p-PI3K和p-Akt的表达(P<0.01),而LY294002能抑制胰岛素样生长因子1的促进作用(P<0.01);(2)胰岛素样生长因子1(100μg/L)能促进髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达(P<0.01),而LY294002能抑制胰岛素样生长因子1对聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达的促进作用(P<0.01);(3)因此认为胰岛素样生长因子1可通过PI3K/Akt通路促进髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达。

关键词：胰岛素样生长因子Ⅰ 椎间盘退化蛋白聚糖类胶原Ⅱ型细胞外基质组织工程组织构建胰岛素样生长因子1 髓核细胞椎间盘退变聚集蛋白聚糖 Ⅱ型胶原生长因子下腰痛国家自然科学基金

正常与退变髓核细胞对骨髓间充质干细胞诱导分化的对比研究

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医学研究生学报 2017年第11期30卷 1179-1185页

作者：李大鹏柯荣军吴燕岳佳伟蒋璐黄永辉江苏大学附属医院脊柱外科镇江医学博士212001 江苏大学医学院生理教研室镇江212013

目的正常髓核细胞(nNPCs)对骨髓间充质干细胞(MSCs)有诱导分化作用,而退变髓核细胞(dNPCs)对MSCs的诱导作用是否存在差异尚未阐明,文中对比nNPCs与dNPCs对MSCs向髓核细胞分化诱导作用的差异。方法细胞株/退变患者来源的人NPCs与细胞株... 详细信息

目的正常髓核细胞(nNPCs)对骨髓间充质干细胞(MSCs)有诱导分化作用,而退变髓核细胞(dNPCs)对MSCs的诱导作用是否存在差异尚未阐明,文中对比nNPCs与dNPCs对MSCs向髓核细胞分化诱导作用的差异。方法细胞株/退变患者来源的人NPCs与细胞株来源人MSCs行体外三维共培养,分为5组:nNPCs对照组、dNPCs对照组、MSCs对照组、nNPCs-MSCs组(nNPCs诱导的MSCs)、dNPCs-MSCs组(dNPCs诱导的MSCs),共培养7 d后,行RT-PCR及Western blot检测各组细胞聚集蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型胶原(COL-2)、SOX-9、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-3的表达水平。结果 RTPCR结果显示,与nNPCs对照组相比:dNPCs对照组ACAN、COL-2、SOX-9的表达较低(P<0.05),MMP-1、MMP-3的表达相对较高(P<0.01);nNPCs-MSCs组ACAN的表达相对较低(P<0.05);dNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达相对较低(P<0.05)。与dNPCs对照组相比:nNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达相对较高(P<0.05),MMP-1、MMP-3的表达较低(P<0.01);dNPCs-MSCs组MMP-1、MMP-3的表达较低(P<0.01)。与MSCs对照组相比:nNPCs-MSCs组及dNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达均相对较高(P<0.01)。与nNPCs-MSCs组相比:dNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达相对较低(P<0.05)。Western blot结果显示:与nNPCs对照组相比:dNPCs对照组ACAN、COL-2、SOX-9的表达较低(P<0.05),而MMP-1、MMP-3的表达较高(P<0.05);nNPCs-MSCs组MMP-1、MMP-3的表达相对较低(P<0.01);dNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9、MMP-1、MMP-3的表达较低(P<0.05)。与dNPCs对照组相比:nNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达较高(P<0.05),MMP-1、MMP-3的表达较低(P<0.01);dNPCs-MSCs组MMP-1、MMP-3的表达较低(P<0.01)。与MSCs对照组相比:nNPCs-MSCs组及dNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达均相对较高(P<0.01)。与nNPCs-MSCs组相比:dNPCs-MSCs组ACAN、COL-2、SOX-9的表达均相对较低(P<0.05)。结论 nNPCs及dNPCs均能诱导MSCs向髓核样细胞分化,与nNPCs共培养后,MSCs的ACAN、COL-2、SOX-9的表达水平与nNPCs相当,优于同样培养条件下dNPCs对MSCs的诱导。

关键词：髓核细胞骨髓间充质干细胞椎间盘退变聚集蛋白聚糖 Ⅱ型胶原