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高粱TCP转录因子基因SbTCP14的克隆和表达分析

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植物生理学报 2021年第7期57卷 1573-1581页

作者：屈志广杜巧丽方远鹏蒋君梅谢鑫贵州大学农学院农业微生物特色重点实验室贵阳550025

为探究高粱(Sorghum bicolor)TCP转录因子SbTCP14的表达特征,以高粱‘BTx623’为材料,对其进行基因克隆、生物信息学分析、响应胁迫表达及蛋白原核表达研究。结果显示,高粱SbTCP14基因CDS全长为1185 bp,其蛋白分子量大小为40.09 kDa,编... 详细信息

为探究高粱(Sorghum bicolor)TCP转录因子SbTCP14的表达特征,以高粱‘BTx623’为材料,对其进行基因克隆、生物信息学分析、响应胁迫表达及蛋白原核表达研究。结果显示,高粱SbTCP14基因CDS全长为1185 bp,其蛋白分子量大小为40.09 kDa,编码394个氨基酸,亚细胞定位于细胞核,无跨膜区和信号肽。系统进化分析表明高粱SbTCP14与玉米ZmTCP14的亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明,在250 mmol·L^(-1)NaCl和20%PEG6000处理下,SbTCP14基因表达量呈先升高后降低模式。在300 mmol·L^(-1)甘露醇处理下,SbTCP14基因表达量在24 h内无显著变化。经0.01 mmol·L^(-1)IAA和1 mmol·L^(-1) SA处理后,SbTCP14基因表达量呈先升后降趋势。原核表达结果显示,SbTCP14蛋白最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3)菌株,最佳诱导温度为25℃,最佳IPTG浓度为0.8 mmol·L^(-1)。Western blot结果验证原核表达的蛋白为SbTCP14。

关键词：高梁 SbTCP14 基因克隆生物信息学分析表达分析

高粱GRF基因家族鉴定及SbGRF4原核表达分析

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植物保护学报 2020年第4期47卷 929-938页

作者：陈俊屈志广方远鹏蒋君梅李向阳谢鑫贵州大学农学院贵阳550025 贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室贵阳550025

为研究高粱生长调控因子(growth-regulating factor,GRF)在高粱生长过程中的功能,采用生物信息学分析方法对高粱GRF基因家族进行鉴定,并以高粱BTx623品种为材料,利用PCR技术扩增获得SbGRF4基因cDNA全长序列,构建pET-28a-SbGRF4重组质粒... 详细信息

为研究高粱生长调控因子(growth-regulating factor,GRF)在高粱生长过程中的功能,采用生物信息学分析方法对高粱GRF基因家族进行鉴定,并以高粱BTx623品种为材料,利用PCR技术扩增获得SbGRF4基因cDNA全长序列,构建pET-28a-SbGRF4重组质粒,采用原核表达技术分别对表达菌株、诱导温度以及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导浓度进行优化,最后用Western blot技术对原核表达的SbGRF4蛋白进行验证。结果表明,在高粱中共鉴定到10个GRF基因SbGRF1~SbGRF10;亚细胞定位预测结果显示均定位于细胞核中;分布于高粱的6条染色体上,所有家族成员均含有QLQ和WRC保守结构域;系统进化结果显示,高粱GRF蛋白分为Class 2、Class 3、Class 4a、Class 4b四个亚家族;相同亚家族各个成员间外显子和内含子的数量差异较小;同一亚家族的高粱GRF蛋白保守基序具有相似性;克隆到的SbGRF4基因c DNA序列全长为1 221 bp,并成功构建pET-28a-SbGRF4融合表达载体;SbGRF4蛋白的最佳表达菌株为大肠杆菌Escherichia coli JM109(DE3)菌株,最佳诱导温度为25℃,最佳IPTG诱导浓度为0.6mmol/L;Western blot验证结果显示原核表达的蛋白为SbGRF4。表明SbGRF4蛋白可在大肠杆菌原核表达系统中表达。

关键词：高粱基因克隆 GRF基因家族 SbGRF4 原核表达

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高粱抗病基因SbSGT1的克隆及原核表达

核农学报 2020年第9期34卷 1933-1942页

作者：陈美晴陈俊蒋君梅王营锴屈志广方远鹏任明见谢鑫贵州大学农学院贵州贵阳550025 国家小麦改良中心贵州分中心贵州贵阳550025

为探究高粱抗病基因SbSGT1的功能,以高粱BTx623为材料,利用RNA反转录得cDNA,以cDNA为模板扩增出全长SbSGT1基因,并对其进行生物信息学分析。进一步构建pET-28a-SbSGT1重组质粒进行原核表达,并分别对表达菌株、诱导温度以及异丙基-β-D-... 详细信息

为探究高粱抗病基因SbSGT1的功能,以高粱BTx623为材料,利用RNA反转录得cDNA,以cDNA为模板扩增出全长SbSGT1基因,并对其进行生物信息学分析。进一步构建pET-28a-SbSGT1重组质粒进行原核表达,并分别对表达菌株、诱导温度以及异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导浓度进行了优化。结果表明,SbSGT1全长1095 bp,编码364个氨基酸,蛋白理论分子大小约为40.45 kDa,蛋白质等电点为5.0。进化树分析表明,SbSGT1与玉米和水稻的亲缘性较高;蛋白质序列分析表明,SbSGT1蛋白为亲水性蛋白,定位在细胞质中;二级结构预测发现其α螺旋和无规则卷曲占比最高,分别达到43.41%和45.88%。原核表达结果表明,SbSGT1最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3),最佳诱导温度和IPTG浓度分别为25℃和0.8 mmol·L-1。本研究为进一步探究SbSGT1基因在高粱抗病机理中所发挥的生物学功能奠定了基础。

关键词：高粱 SGT1 基因克隆原核表达

高粱转录因子SbGRF4基因克隆及原核表达分析

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高粱转录因子SbGRF4基因克隆及原核表达分析

高粱转录因子基因SbSBP15的克隆及表达分析

中国植物保护学会2019年学术年会

作者：陈俊屈志广陈美晴蒋君梅李向阳谢鑫贵州大学农学院贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室

GRF （growth regulating factor）是一类植物特有的转录因子,其参与调节植物生长、发育以及抗逆等过程。本研究以高粱BTx623为材料,以cDNA为模板扩增全长SbGRF4基因,并对其进行生物信息学及原核表达分析。结果表明,SbGRF4全长1 221bp,... 详细信息

GRF （growth regulating factor）是一类植物特有的转录因子,其参与调节植物生长、发育以及抗逆等过程。本研究以高粱BTx623为材料,以cDNA为模板扩增全长SbGRF4基因,并对其进行生物信息学及原核表达分析。结果表明,SbGRF4全长1 221bp,编码406个氨基酸,蛋白理论分子大小约为44kDa,蛋白质等电点为7.05。进化树分析表明,SbGRF4与玉米GRF4的亲缘性较高;蛋白质序列分析表明,SbGRF4蛋白为亲水性蛋白,定位在细胞核中;二级结构预测发现其α螺旋和无规则卷曲占比最高,分别达到25.37%和64.04%。为获得SbGRF4可溶性蛋白,构建了pET-28a-SbGRF4重组质粒进行原核表达,分别对表达菌株、诱导温度以及IPTG诱导浓度进行优化。结果显示,SbGRF4最佳表达菌株为JM109 （DE3）菌株,最佳诱导温度为25℃,最佳IPTG诱导浓度为0.6mmol/L,最后用Western blot对表达的SbGRF4蛋白进行验证。本研究为进一步研究高粱SbGRF4蛋白的结构和功能奠定基础,通过对该基因的表达研究,可为后续研究高粱GRF转录因子提供一定的科学基础。

关键词：高粱基因克隆转录因子 SbGRF4 原核表达

来源： cnki会议评论

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农业生物技术学报 2020年第9期28卷 1554-1566页

作者：方远鹏蒋君梅杜巧丽陈美晴裴会敏屈志广任明见谢鑫贵州大学农学院/国家小麦改良中心贵州分中心黔南民族师范学院生物科学与农学院

SQUA启动子结合蛋白-box (SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN box, SBP-box)基因家族编码一类植物特有的SBP转录因子,在植物界分布广泛,参与植物生长、发育、繁衍等多方面调控,包括胚胎发生、次生产物合成、胁迫应答等,在作物改良方面... 详细信息

SQUA启动子结合蛋白-box (SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN box, SBP-box)基因家族编码一类植物特有的SBP转录因子,在植物界分布广泛,参与植物生长、发育、繁衍等多方面调控,包括胚胎发生、次生产物合成、胁迫应答等,在作物改良方面具有价值。本研究主要通过生物信息学以及实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)方法,对高粱(Sorghum bicolor) SbSBP15基因进行克隆和表达分析。研究结果显示,该基因CDS全长1 227 bp (GenBank No. MT634207),编码408个氨基酸。SbSBP15蛋白含有1个典型SBP结构域,相对分子质量为42.19 kD,等电点为8.87;与玉米(Zea mays)相应的同源基因亲缘关系最近;亚细胞定位主要在细胞核;具较强的亲水性;蛋白互作网络分析表明,SbSBP15可与蛋白激酶相互作用。qRT-PCR分析表明,SbSBP15在高粱茎中表达量最高,受干旱和盐胁迫诱导表达;植物激素吲哚乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)处理后其表达上调,而水杨酸(salicylic acid,SA)则抑制其表达。SbSBP15蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli) Rosetta (DE3)菌株的原核表达结果显示,0.8 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside, IPTG)于25℃诱导的表达量最高。本研究可为高粱分子遗传研究提供候选基因,为植物SBP15基因的生物学功能研究提供基础资料。

关键词：高粱 SbSBP15 基因克隆生物信息学分析表达分析

拖拉机剪式座椅悬架系统特征参数分析与最优组合研究

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机械设计 2024年第9期 92-100页

作者：安存胜屈广超魏伟振刘奎河南省果园管理特种机器人工程技术研究中心河南林业职业学院汽车与机电工程系河南科技大学车辆与交通工程学院国家农机装备创新中心

剪式座椅悬架系统特征参数分析与最优组合是研究和提升拖拉机座椅减振性能的关键，文中提出仿真试验设计采样与试验数据方差分析相结合的方法筛选出最优减振性能的特征参数组合。通过力学分析推导座椅悬架运动微分方程，构建驾驶员-座... 详细信息

剪式座椅悬架系统特征参数分析与最优组合是研究和提升拖拉机座椅减振性能的关键，文中提出仿真试验设计采样与试验数据方差分析相结合的方法筛选出最优减振性能的特征参数组合。通过力学分析推导座椅悬架运动微分方程，构建驾驶员-座椅悬架单自由度简化模型，理论计算出座椅弹簧刚度和阻尼器阻尼取值范围，分析拖拉机剪式座椅悬架系统的主要性能参数及特征参数对座椅减振性能的影响。以弹簧刚度和阻尼器阻尼为控制变量，以座椅悬架上平面加速度和位移为优化目标。采用优化拉丁超立方方法进行试验设计抽样，在ADAMS中对抽样样本进行仿真，结合SPSS软件对仿真数据进行方差分析并筛选最优特征参数组合。结果表明：优化后座椅悬架上平面加速度和位移振动性能响应指标分别提升30.43%,2.31%。本研究提升了拖拉机剪式座椅减振性能，为座椅悬架系统优化设计提供了参考。

关键词：剪式座椅悬架系统振动性能特征参数分析与优化

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工业设备异常检测与健康预测研究及应用

工业设备异常检测与健康预测研究及应用

作者：鹿广志安徽理工大学

学位级别：硕士

自适应调整燃料电池混合动力汽车能量管理策略

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控制理论与应用 2024年

作者：付江涛胡喆强志尧苑学广河南科技大学信息工程学院

针对燃料电池混合动力汽车(FCHEV),提出一种基于庞特里亚金最小原理(PMP)优化的自适应调整的分层能量管理策略(EMS).首先,提出的EMS利用马尔可夫链Metropolis-Hastings(MC-MH)采样估计未来功率需求;其次,根据超级电容器(SC)的充电状态(S... 详细信息

针对燃料电池混合动力汽车(FCHEV),提出一种基于庞特里亚金最小原理(PMP)优化的自适应调整的分层能量管理策略(EMS).首先,提出的EMS利用马尔可夫链Metropolis-Hastings(MC-MH)采样估计未来功率需求;其次,根据超级电容器(SC)的充电状态(SOC)估计调整低通滤波器的参数;最后,基于庞特里亚金最小原理的优化实现最佳的燃料经济性.通过仿真和台架实验验证了所提出的EMS的有效性,并将结果与采用动态规划(DP)方法的全局等效燃料消耗量EMS进行比较.结果表明,本文所提出的EMS能够充分发挥SC的功能,在仿真和台架实验中分别提高0.3%和8.8%的燃料经济性.

关键词：燃料消耗燃料电池混合动力汽车能量管理策略 Metropolis-Hastings采样庞特里亚金最小原理优化

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踝骨折:空心螺钉固定还是钢板固定

科学之友 2024年第6期 74-75页

作者：屈广新河北省三河市中医医院

在治疗踝骨折时,空心螺钉固定和钢板固定是两种常见的选择。在实施这两种固定方式时需要考虑哪些因素?它们各自的优势是什么?与术后感染风险的关系如何?对关节功能的影响如何?针对上述问题,本文将进行详细的阐述,希望能对大家有所帮助。

关键词：踝骨折术后感染钢板固定空心螺钉固定关节功能固定方式

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