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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对宫颈鳞癌细胞HPV16 E6/E7、P53、pRb、Twist1影响的体外研究

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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对宫颈鳞癌细胞HPV16 E6/E7、P53、pRb、Twis...

作者：尹向梅河北医科大学

学位级别：硕士

目的:宫颈癌是一种危害妇女健康的恶性肿瘤。持续高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是发生宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌(CC)的最主要病因,尤其是HPV16、18型感染。HPV 16/18致病机制主要通过病毒致癌基因E6和E7分... 详细信息

目的:宫颈癌是一种危害妇女健康的恶性肿瘤。持续高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是发生宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌(CC)的最主要病因,尤其是HPV16、18型感染。HPV 16/18致病机制主要通过病毒致癌基因E6和E7分别与抑癌基因p53和视网膜母细胞瘤蛋白p Rb结合。E6抑制p53的活性,E7抑制p Rb的活性,使这些抑癌蛋白丧失功能,引起细胞的无限增殖和恶性转化,阻止细胞凋亡而致肿瘤发生。而癌的发生是一个多因素、多步骤、多阶段的复杂过程。研究表明,表观遗传学的改变和人类多种肿瘤的发生密切相关,抑癌基因DNA甲基化则是宫颈癌中最重要的表观遗传学修饰形式。表观遗传学改变与肿瘤遗传学改变不同,它具有可逆性,DNA去甲基化药物可以使表观遗传学机制介导的沉默基因恢复表达。因此研究去甲基化药物具有较深远的意义。上皮-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指具有极性的上皮细胞转化成具有运动能力的间质细胞的过程,并获得迁移和侵袭的能力。研究表明,EMT在宫颈癌进展中具有重要作用。Twist是碱性螺旋-环-螺旋(basic Helix-Loop-Helix,b HLH)转录因子家族成员,包括Twist1(即Twist)和Twist2。Twist1被认为是参与EMT过程中的关键调控因子,在肿瘤侵袭和转移中具有重要作用。此外,研究发现Twist1在宫颈癌中也存在DNA甲基化修饰,因此Twist1在EMT和DNA甲基化过程中均发挥作用。以往有较多研究发现去甲基化药物5-Aza-CdR对宫颈癌SiHa、He La细胞的增殖具有抑制作用,且具有浓度及时间依赖性,即随着浓度的升高(0.1-100umol/L)及时间的延长(24h、48h、72h、96h)对宫颈癌细胞增殖抑制作用逐渐加强。但其对HPV E6/E7的研究不一致。有些研究者发现5-Aza-CdR可降低HPV E6/E7的表达,而另一些研究者则认为5-Aza-CdR对其没影响。5-Aza-CdR对P53的研究较少,尚未发现对p Rb、Twist1的研究。本课题以HPV16阳性的SiHa细胞为研究对象,探讨DNA转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对宫颈癌SiHa细胞HPV16E6/E7、P53、p Rb、Twist1表达水平的变化。观察5-Aza-CdR能否通过去甲基化作用上调抑癌基因P53、p Rb的表达,降低癌基因Twist1的表达,为去甲基化药物应用于宫颈鳞癌的临床治疗提供实验依据。方法:1选取宫颈鳞癌SiHa细胞株进行培养。2采用四氮唑蓝(MTT)比色法检测其对SiHa细胞增殖的影响:实验组设5-Aza-CdR的浓度分别为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L,干预72h,对照组为未加药物组。每组设5个复孔。酶标仪检测吸光度,计算细胞活力。考察5-Aza-CdR对SiHa作用的量效关系。选取40μmol/L5-Aza-CdR处理组与对照组,进行后续研究。3采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative RT-PCR))方法检测实验组与对照组HPV16 E6/E7、p53、p Rb、Twist1基因mRNA表达水平,并比较两组间的差异。4应用Western-blot检测实验组与对照组p53、pRb、Twist1蛋白的表达水平,并比较两组间的差异。结果:1经终浓度分别为0μmol(对照组)、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L5-Aza-CdR处理SiHa细胞72h以后,MTT检测对照组与10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L实验组的细胞活力(A490值)分别为:0.551±0.023、0.488±0.011、0.467±0.012、0.437±0.019,各实验组与对照组均存在差异,有统计学意义(F=56.010,P=0.000)。在一定浓度范围内随着5-Aza-CdR浓度的增加,SiHa细胞活力下降,抑制作用逐渐增强,呈量效关系。2经终浓度40μmol/L 5-Aza-CdR处理SiHa细胞72h以后,采用RT-PCR分别检测实验组与对照组HPV16 E6/E7、p53、p Rb、Twist1基因的mRNA含量。结果为:HPV16E6/E7 mRNA相对表达量较对照组降低,P<0.05;p53、p Rb mRNA表达量在实验组中较对照组升高,P<0.05;Twist1mRNA表达水平在实验组中较对照组下降,P<0.05。3经终浓度40μmol/L 5-Aza-CdR处理SiHa细胞72h以后,Western-blot检测结果显示:实验组抑癌基因p53蛋白的表达量(0.54±0.03)较对照组

关键词：宫颈鳞癌 DNA甲基化 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 P53 pRb Twist1

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四角切圆燃烧炉内颗粒湍流扩散数值模拟

热能动力工程 2000年第4期15卷 402-404页

作者：王春刚朱群益吴少华秦裕琨尹向梅哈尔滨工业大学能源科学与工程学院黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨锅炉厂

基于四角切圆燃烧锅炉炉内湍流流动各向同性的假设 ,得出炉内各点的特征频率。同时采用特征频率 -频谱随机轨道模型及随机轨道模型对炉内颗粒的湍流扩散进行了数值模拟。计算结果表明 ,特征频率 -频谱随机轨道模型更能反映出颗粒湍流扩... 详细信息

基于四角切圆燃烧锅炉炉内湍流流动各向同性的假设 ,得出炉内各点的特征频率。同时采用特征频率 -频谱随机轨道模型及随机轨道模型对炉内颗粒的湍流扩散进行了数值模拟。计算结果表明 ,特征频率 -频谱随机轨道模型更能反映出颗粒湍流扩散中受涡结构影响的特征。

关键词：锅炉紊流扩散数值模拟燃烧锅炉炉内颗粒

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垂直浓淡煤粉燃烧方式下炉内拟序结构研究

热能动力工程 2000年第3期15卷 210-212,225页

作者：王春刚朱群益尹向梅李争起秦裕琨哈尔滨工业大学能源科学与工程学院黑龙江哈尔滨150001

采用PDA测量系统 ,对四角切圆锅炉中垂直浓淡煤粉燃烧方式下影响一次风与主流场混合和扩散的炉内拟序结构进行了实验研究和湍流特性分析。结果表明 ,一次风射流由于与上游横向射流的相互作用 ,在背火侧形成尾迹涡 ,在向火侧形成剪切涡 ... 详细信息

采用PDA测量系统 ,对四角切圆锅炉中垂直浓淡煤粉燃烧方式下影响一次风与主流场混合和扩散的炉内拟序结构进行了实验研究和湍流特性分析。结果表明 ,一次风射流由于与上游横向射流的相互作用 ,在背火侧形成尾迹涡 ,在向火侧形成剪切涡 ,其中尾迹涡和剪切涡中有较高的湍动能和剪切应力 ,对颗粒的扩散起着主控作用。并从理论上分析了垂直浓淡煤粉燃烧技术可能不利于煤粉颗粒的燃尽。

关键词：拟序结构垂直浓淡煤粉燃烧方式炉内锅炉

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某电厂660MW超临界锅炉设计

锅炉制造 2009年第3期 7-9,12页

作者：孙洪民尹向梅哈尔滨锅炉厂有限责任公司黑龙江哈尔滨150046

介绍了某电厂660WM超临界锅炉的设计方案,设计特点和结构特点。

关键词：超临界切圆燃烧螺旋管圈设计方案

水平浓淡与上下浓淡煤粉燃烧方式气固混合特性的实验研究

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工程热物理学报 2000年第6期21卷 750-754页

作者：秦裕琨王春刚朱群益李争起孙绍增吴少华尹向梅哈尔滨工业大学热能工程教研室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨锅炉厂有限责任公司黑龙江哈尔滨150001

本文针对四角切向燃烧锅炉燃用劣质煤时的稳燃及水冷壁高温腐蚀等问题，采用ＰＤＡ测量设备，对水平浓淡及上下浓淡两种煤粉燃烧方式下的气固两相混合规律进行了实验研究。实验表明，与上下浓淡煤粉燃烧方式相比，水平浓淡煤粉燃烧方式... 详细信息

本文针对四角切向燃烧锅炉燃用劣质煤时的稳燃及水冷壁高温腐蚀等问题，采用ＰＤＡ测量设备，对水平浓淡及上下浓淡两种煤粉燃烧方式下的气固两相混合规律进行了实验研究。实验表明，与上下浓淡煤粉燃烧方式相比，水平浓淡煤粉燃烧方式的气固两相流动特性使燃烧器在稳燃、低ＮＯｘ排放、防结渣、防高温腐蚀等方面具有优良的性能。

关键词：水平浓淡上下浓淡煤粉燃烧方式燃烧锅炉

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下向焊焊接缺陷产生原因及预防

焊接 2000年第9期 37-39页

作者：郭道厚尹向梅邹雪松大庆石油管理局油田建设公司技术科 163712 哈尔滨锅炉厂 150040

立向下焊作为手工电弧焊的一种施焊技术,在我国长输大口径管道上得到普通应用和推广,该技术在国外应用已有十几年历史.其特点是:焊接技术好,速度快,生产效率高,易学习掌握,便于流水作业.

关键词：下向焊焊接缺陷手工电弧焊管道焊接

人工流产术后即时放置4种宫内节育器的临床效果观察

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中国妇产科临床杂志 2016年第6期17卷 512-515页

作者：石亚利马营营尹向梅赵昕刘淳江静石彬河北医科大学第二医院妇产科 050000

目的探讨人工流产(人流)术后即时放置吉妮致美、活性γ型、TCu宫内节育器(IUD)和左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)的安全性和有效性。方法收集2012年3月至2013年9月本院行人流术、并自愿于术后即时放置IUD的女性215例为研究对象,其中术... 详细信息

目的探讨人工流产(人流)术后即时放置吉妮致美、活性γ型、TCu宫内节育器(IUD)和左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)的安全性和有效性。方法收集2012年3月至2013年9月本院行人流术、并自愿于术后即时放置IUD的女性215例为研究对象,其中术后放置吉妮致美IUD 75例、活性γ型IUD65例、TCu IUD 30例、LNG-IUS 45例,分别于放置后1、3、6个月时随访,观察IUD使用情况、月经变化/阴道出血模式及副反应等,分析人流术后即时放置IUD的临床效果。结果放置后6个月内,4种IUD带器妊娠率、IUD相关脱落率、医疗原因取出率和续用率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);放置后3个月内,4种IUD的月经模式改变(包括出血时间、点滴出血时间及总出血时间)比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中吉妮致美和活性γ组出血时间短于TCu组和LNG-IUS组(P<0.05);4种IUD月经量改变、经期延长(周期缩短)及疼痛率比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中LNG-IUS组痛经改善好于其他各组(P<0.05)。结论4种IUD在人流术后即时放置安全、可行、有效;吉妮致美和活性γ组IUD月经时间短于TCu组,LNGIUS相对于其他3种IUD可以有效缓解痛经症状,有助于提高妇女对放置IUD的接受性和满意度。

关键词：宫内节育器人工流产术后即时放置吉妮致美宫内节育器活性γ型宫内节育器 TCu宫内节育器左炔诺孕酮宫内缓释系统

全负荷脱硝在捷制500 MW机组锅炉上的设计应用

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电站系统工程 2023年第5期39卷 72-74,77页

作者：张绮钟耕垒王珊尹向梅闫金山北京清远顺合环保科技有限公司

为响应国家提出的深度调峰号召,神头二电厂#1机组拟实现25%及以上负荷脱硝装置正常投运,各项环保指标在国家要求烟气排放指标内,将脱硝入口烟温提高到300℃以上。针对亚临界低倍率复合循环锅炉的水循环特点,利用热水再循环技术实现全负... 详细信息

为响应国家提出的深度调峰号召,神头二电厂#1机组拟实现25%及以上负荷脱硝装置正常投运,各项环保指标在国家要求烟气排放指标内,将脱硝入口烟温提高到300℃以上。针对亚临界低倍率复合循环锅炉的水循环特点,利用热水再循环技术实现全负荷时段脱硝设备入口烟气温度满足投运要求,达到排放指标。测试运行结果证明,系统设计1号机组省煤器新增复合热水再循环系统改造工程实施后脱硝入口烟温升效果明显,运行试验机组在25%额定负荷及以上负荷,脱硝入口烟温均可保持在300℃以上,同时省煤器出口水温低于饱和温度并有很大的裕度。

关键词：塔式煤粉锅炉低倍率复合控制循环锅炉循环泵复合热水再循环脱硝烟温

660 MW超超临界侧煤仓与锅炉钢架一体化联合设计探讨

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660 MW超超临界侧煤仓与锅炉钢架一体化联合设计探讨