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核酶切割per基因所致的缓解吗啡成瘾作用研究

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华西医科大学学报 2002年第4期33卷 493-496页

作者：何畅屈艺尹华虎王若菡王正荣四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学华西基础医与法医学院重组DNA研究室

目的　探讨 per基因与阿片类成瘾的相关性 ,进而寻找治疗阿片成瘾的基因戒毒疗法。方法　设计并合成特异性 per锤头状核酶基因和 per核酶靶 m RNA组分基因 ,并分别重组入体外转录质粒 ,而后将经体外转录反应得到 per核酶 RNA和地高辛标... 详细信息

目的　探讨 per基因与阿片类成瘾的相关性 ,进而寻找治疗阿片成瘾的基因戒毒疗法。方法　设计并合成特异性 per锤头状核酶基因和 per核酶靶 m RNA组分基因 ,并分别重组入体外转录质粒 ,而后将经体外转录反应得到 per核酶 RNA和地高辛标记的 per核酶靶 m RNA组分。将转录产物混合 ,在不同条件下进行体外切割反应后 ,采用地高辛化学发光法检测 per核酶的体外切割效率。小鼠脑室注射直接导入脂质体包裹的重组质粒 pc DNA3.1- per RZ DNA,按剂量递增法建立吗啡依赖动物模型 ,用纳洛酮催瘾 ,观察戒断反应的变化。结果per核酶对 per核酶靶 m RNA组分的体外切割效率达到 6 0 %。重组质粒组小鼠的刻板跳跃、“湿狗”样抖动和打洞次数与空质粒组、生理盐水组相比明显减少 ,但并不抑制小鼠的体重下降。结论　 per核酶具有体外定点切割 per基因 m RNA组分的活性。经小鼠吗啡成瘾模型检测 ,该重组质粒能成功转染活体小鼠脑细胞并在脑组织内稳定表达 per核酶 ,发挥阻断 per基因表达的作用 ,有效地减轻吗啡成瘾的戒断症状。

关键词：阿片成瘾核酶体外切割 period基因吗啡

病毒感染心肌细胞的心肌肌凝蛋白重链基因表达和细胞力学(英文)

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航天医学与医学工程 2002年第2期15卷 132-133页

作者：万朝敏王正荣尹华虎俞红吉吴泰相四川大学华西第二医院四川成都610041 Biomedical Engineering Department Sichuan University Chengdu 610041China

目的探讨病毒直接损伤心肌细胞的机制。方法采用柯萨奇B3病毒感染体外培养心肌细胞 ,检测心肌细胞收缩力以及心肌细胞的α MHC和 β MHC的基因表达 ,并与正常心肌细胞相对比。结果柯萨奇B3病毒感染后的心肌细胞收缩力比正常心肌细胞的... 详细信息

目的探讨病毒直接损伤心肌细胞的机制。方法采用柯萨奇B3病毒感染体外培养心肌细胞 ,检测心肌细胞收缩力以及心肌细胞的α MHC和 β MHC的基因表达 ,并与正常心肌细胞相对比。结果柯萨奇B3病毒感染后的心肌细胞收缩力比正常心肌细胞的心肌收缩力明显降低 (P <0 .0 1 ) ,并且感染后2 4h比 1 2h下降更为显著 (P <0 .0 5 ) ;心肌细胞收缩蛋白α MHC和 β MHC的基因表达也发生了改变 ,柯萨奇B3病毒感染后心肌细胞的α MHC基因表达明显降低 ,而β MHC基因表达升高。结论柯萨奇B3病毒感染后的心肌细胞收缩力下降 ,使心肌细胞以α MHC基因表达为主转向以β MHC基因表达为主。

关键词：柯萨奇B3病毒心肌细胞收缩能力基因表达心肌细胞力学 β-MHC αMHC

肾血管性高血压大鼠肾脏A型心房肽受体的表达及意义

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四川大学学报（医学版） 2005年第6期36卷 776-778,811页

作者：刘荣韬肖静郭慧玲邱敦国尹华虎王正荣四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学图像图形研究所

目的研究高血压大鼠肾脏A型心房肽受体(ANPR-A)的蛋白表达并探讨其意义。方法采用狭窄单侧肾动脉的方法建立二肾一夹(2K 1C)肾血管性高血压大鼠模型。用尾套法测血压,免疫组织化学染色法观察缩窄术后不同时期肾脏组织各部位ANPR-A蛋白... 详细信息

目的研究高血压大鼠肾脏A型心房肽受体(ANPR-A)的蛋白表达并探讨其意义。方法采用狭窄单侧肾动脉的方法建立二肾一夹(2K 1C)肾血管性高血压大鼠模型。用尾套法测血压,免疫组织化学染色法观察缩窄术后不同时期肾脏组织各部位ANPR-A蛋白的表达,并用计算机图像分析系统半定量检测ANPR-A蛋白的表达水平。结果肾动脉缩窄术后4周,模型组大鼠肾脏ANPR-A蛋白在肾小球表达增加,在肾小管表达降低,与对照组的差异有统计学意义(P0.05)。缩窄术后8周,模型组大鼠肾脏ANPR-A蛋白在肾小管和髓质集合管的表达均降低,与对照组的差异有统计学意义(P0.05)。结论随着高血压的发展,肾脏组织中的ANPR-A表达显著减少,提示高血压的发展与肾脏ANPR-A的表达下降有关。

关键词：高血压肾脏 A型心房肽受体

沙棘总黄酮对牵张所致心衰心肌细胞的收缩力学和钙离子转运的影响(英文)

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航天医学与医学工程 2000年第1期13卷 6-9页

作者：王正荣王玲尹华虎杨芳炬高云钦张祝君华西医科大学四川成都 610041 四川MEDCO制药公司四川 618400

目的研究沙棘总黄酮在改善心衰状态下心肌细胞收缩功能的作用。方法体外培养大鼠心肌细胞并通过超负荷培养建立心衰心肌细胞模型，给予心衰心肌细胞不同剂量的沙棘总黄酮，然后检测心肌细胞的收缩力学特性和钙离子转运状况。结果沙棘总... 详细信息

目的研究沙棘总黄酮在改善心衰状态下心肌细胞收缩功能的作用。方法体外培养大鼠心肌细胞并通过超负荷培养建立心衰心肌细胞模型，给予心衰心肌细胞不同剂量的沙棘总黄酮，然后检测心肌细胞的收缩力学特性和钙离子转运状况。结果沙棘总黄酮显示出有增加心肌细胞收缩力的作用，并且这种作用具有量———效关系，其心肌细胞收缩力学参数与沙棘总黄酮的相关系数均在１．０～０．９之间（Ｐ＜０．００１），而沙棘总黄酮增强心肌细胞收缩力的作用是与细胞内钙离子转运未显示出量效关系。结论在小剂量范围内，沙棘总黄酮是一种不依赖钙离子内转运而增加心肌细胞收缩力，从而能有效改善心衰的中药。

关键词：沙棘总黄酮心肌细胞收缩力学心力衰竭钙转运

植入微囊化hANP cDNA转染细胞治疗大鼠高血压的观察

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航天医学与医学工程 2005年第3期18卷 173-176页

作者：刘荣韬陈立国幸浩洋尹华虎万朝敏王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室四川成都610041 四川大学华西第二医院四川成都610041

目的研究植入微囊化的人类心房肽(hANP)cDNA转染细胞对高血压大鼠的治疗效果,为临床应用基因工程细胞治疗高血压提供新方法。方法将转染有hANPcDNA的CHO细胞包被在具有免疫隔离作用的聚己内酯(PCL)管内形成微囊化基因转染细胞,其后移植... 详细信息

目的研究植入微囊化的人类心房肽(hANP)cDNA转染细胞对高血压大鼠的治疗效果,为临床应用基因工程细胞治疗高血压提供新方法。方法将转染有hANPcDNA的CHO细胞包被在具有免疫隔离作用的聚己内酯(PCL)管内形成微囊化基因转染细胞,其后移植至二肾一夹(2K1C)高血压大鼠腹腔内,检测微囊植入对高血压大鼠的血压及多项生理生化指标的影响,并用放射免疫分析法(RIA)检测血浆hANP水平,用免疫组化结合图像分析法半定量检测肾脏心房肽A型受体(NPRA)的表达。结果微囊化的hANPcDNA转染细胞移植10d后,血浆hANP水平显著升高;移植30d后高血压大鼠的血压明显降低,而尿量、尿钠排出量(USO)和尿cGMP明显增加;移植45d后肾小球滤过率(GFR)和肾血流量(RBF)明显增加,同时高血压大鼠肾脏NPRA的表达下调被抑制。结论植入的微囊化hANPcDNA转染细胞能产生和向囊外排出hANP,引起明显的利尿利钠和降血压效应;本研究结果为高血压的心房肽基因治疗提供了新途径。

关键词：基因转染细胞心房肽高血压基因治疗

节律基因mPeriod2对Lewis肺癌细胞生长的影响

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航天医学与医学工程 2005年第3期18卷 222-223页

作者：王跃锜华慧朱彬尹华虎刘延友杨春蕾王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室四川成都610041

目的研究节律基因mPeriod2(mPer2)对肿瘤细胞的生长抑制及诱导分化凋亡的作用。方法体外培养Lewis肺癌细胞,使用脂质体包裹法将真核表达质粒pcDNA3.1为基础的mPer2表达质粒(pcDNA3.1mPer2)转导入Lewis肺癌细胞内;以免疫组化及流式细胞... 详细信息

目的研究节律基因mPeriod2(mPer2)对肿瘤细胞的生长抑制及诱导分化凋亡的作用。方法体外培养Lewis肺癌细胞,使用脂质体包裹法将真核表达质粒pcDNA3.1为基础的mPer2表达质粒(pcDNA3.1mPer2)转导入Lewis肺癌细胞内;以免疫组化及流式细胞技术检测mPer2表达;通过流式细胞技术检测稳定转染的mPer2阳性表达的Lewis肺癌细胞的生长及凋亡。结果mPer2表达质粒(pcDNA3.1mPer2)转染的Lewis肺癌细胞表达PERIOD2蛋白;与对照组比较,其增殖指数下降及凋亡率增加。结论节律基因mPer2可以抑制肿瘤细胞的生长,增加肿瘤细胞的凋亡率。

关键词：节律基因基因表达基因转导细胞凋亡 Lewis癌

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参附注射液对动物心律失常的影响

华西药学杂志 2001年第5期16卷 345-347页

作者：杨芳炬尹华虎林代平王跃奇史立丽王正荣四川大学基础医学院四川成都610041

目的 :观察参附注射液对动物心律失常模型的影响。方法 :用结扎冠状动脉法造成犬心肌缺血性心律失常模型 ;用乌头碱造成大鼠心律不齐模型 ;用心得安造成犬心动过缓模型 ,然后分别给予参附注射液观察其对上述心律失常的影响。结果 :参附... 详细信息

目的 :观察参附注射液对动物心律失常模型的影响。方法 :用结扎冠状动脉法造成犬心肌缺血性心律失常模型 ;用乌头碱造成大鼠心律不齐模型 ;用心得安造成犬心动过缓模型 ,然后分别给予参附注射液观察其对上述心律失常的影响。结果 :参附注射液能有效改善心肌缺血性心律失常的血流动力学指标 ,对室性早搏 (VP)的发作率由给药前 5min的 39.3± 5 .2次降为 11.2± 2 .7次 ;室性心动过速 (VT)由给药前 5min的 37.2± 3.9次降至9.1± 2 .5次 ;同时对乌头碱所致VP、VT有显著的对抗作用 ;

关键词：参附注射液心律失常心肌缺血室性早搏室性心动过速心动过缓实验研究

节律基因mPeriod2过表达对体外Lewis肺癌细胞γ射线敏感性的影响

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航天医学与医学工程 2006年第4期19卷 253-256页

作者：朱彬何垠波李颖陈兢钟玥尹华虎李光明王正荣四川大学华西医学中心基础医学与法医学院四川成都610041 四川大学华西医院肿瘤治疗中心放疗科四川成都610041 四川大学华西附属一院γ刀治疗中心四川成都610041 南充市中心医院四川南充637000

目的评价mPeriod2(mPer2)基因转染后过表达对小鼠Lew is肺癌细胞(LLCs)60Coγ-射线放射敏感性的影响。方法采用脂质体介导方法将mPer2基因转染至LLC细胞,以空白组及空载体质粒pcD-NA3.1为对照,采用RT-PCR及流式细胞术检测mPer2基因在LL... 详细信息

目的评价mPeriod2(mPer2)基因转染后过表达对小鼠Lew is肺癌细胞(LLCs)60Coγ-射线放射敏感性的影响。方法采用脂质体介导方法将mPer2基因转染至LLC细胞,以空白组及空载体质粒pcD-NA3.1为对照,采用RT-PCR及流式细胞术检测mPer2基因在LLC细胞中的表达,给予60Coγ-射线4Gy单次照射后,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,采用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化、细胞集落形成实验检测细胞增殖及存活情况。结果60Coγ-射线照射后,与转染空载体质粒组及空白组比较,转染mPer2基因细胞表现为G2/M期阻滞,凋亡率下降(contro l:8.10±0.03;pcDNA3.1-vector:11.20±0.07;pcDNA3.1-mPer2:4.40±0.02;P<0.05),细胞克隆形成增加(contro l:14%;pcDNA3.1-vec-tor:11%;pcDNA3.1-mPer2:32%;P<0.01)及PCNA阳性表达增加(contro l:+,pcDNA3.1-vector:+,pcDNA3.1-mPer2:+++,P<0.05)。结论节律基因mPer2过表达使60Coγ-射线照射的小鼠Lew is肺癌细胞凋亡下降,细胞增殖明显,降低了该细胞对放射损伤的敏感性。

关键词：时间生物学节律基因 mPer2基因转染放射敏感性

牵张刺激诱导心肌细胞NF-κB激活及其机制研究

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中国医学物理学杂志 2001年第3期18卷 173-175页

作者：刘荣韬尹华虎王正荣华西医科大学基础医学院生物医学工程研究室四川成都610041

目的:探讨牵张刺激对心肌细胞NF-κB的激活作用及激活机制。材料与方法:在硅橡胶膜上培养心肌细胞,在无NAC和有NAC的条件下对细胞施加牵张刺激,用免疫组织化学方法观测NF-κB的激活情况。结果:牵张心肌细胞5小时后,NF-κB被显著激活;15m... 详细信息

目的:探讨牵张刺激对心肌细胞NF-κB的激活作用及激活机制。材料与方法:在硅橡胶膜上培养心肌细胞,在无NAC和有NAC的条件下对细胞施加牵张刺激,用免疫组织化学方法观测NF-κB的激活情况。结果:牵张心肌细胞5小时后,NF-κB被显著激活;15mM N-乙酰半胱氨酸（NAC）阻断牵张诱导的NF-κB的激活。结论:牵张刺激能够诱导心肌细胞NF-κB的激活,活性氧介导了这种激活作用。

关键词：牵张 NF-κB 活性氧心肌细胞