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雄激素与烧伤引起的骨骼肌消耗

中华烧伤杂志 2006年第4期22卷 316-318页

作者：尹会男柴家科解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100037

严重烧伤后存在着以骨骼肌蛋白降解明显增强为特点的高代谢状态。这种强烈的促体内蛋白分解、抑制糖和脂类利用的高代谢状态，可使机体在短期内出现显著的骨骼肌萎缩和负氮平衡。因此，降低骨骼肌蛋白的分解代谢，已经成为调节烧伤后高... 详细信息

严重烧伤后存在着以骨骼肌蛋白降解明显增强为特点的高代谢状态。这种强烈的促体内蛋白分解、抑制糖和脂类利用的高代谢状态，可使机体在短期内出现显著的骨骼肌萎缩和负氮平衡。因此，降低骨骼肌蛋白的分解代谢，已经成为调节烧伤后高代谢状态的原则性目标。

关键词：烧伤后骨骼肌消耗骨骼肌蛋白降解雄激素高代谢状态分解代谢骨骼肌萎缩负氮平衡原则性

NF-кB与泛素—蛋白酶体途径在烧伤脓毒症及骨骼肌蛋白降解增强发病机制中的作用研究

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NF-кB与泛素—蛋白酶体途径在烧伤脓毒症及骨骼肌蛋白降解增强发...

作者：尹会男中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

目的：1．研究烧伤脓毒症状态下体内重要脏器NF-κB活性变化规律及其对细胞因子的产生和脏器损害的的影响。分析NF-κB在脓毒症发生发展中的作用，以及干预泛素-蛋白酶体途径对其进行调控作为脓毒症预防和治疗手段的可行性。2．研究烧... 详细信息

目的：1．研究烧伤脓毒症状态下体内重要脏器NF-κB活性变化规律及其对细胞因子的产生和脏器损害的的影响。分析NF-κB在脓毒症发生发展中的作用，以及干预泛素-蛋白酶体途径对其进行调控作为脓毒症预防和治疗手段的可行性。2．研究烧伤脓毒症状态下骨骼肌蛋白降解率的变化规律，通过使用NF-κB抑制剂PDTC与泛素-蛋白酶体途径抑制剂ALLN，观察其对烧伤脓毒症状态下骨骼肌蛋白降解率的影响，从而评价两种抑制剂的效果，以及转录因子NF-κB和泛素-蛋白酶体途径在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白代谢中的作用。方法：采用30％TBSAⅢ度烫伤加内毒素(4mg／kg)攻击大鼠为模型。雄性Wistar大鼠210只，随机分为4组：(1)正常对照组(n=15)麻醉后活杀动物;(2)烧伤脓毒症组(n=75)复制烧伤脓毒症模型后，分别于伤后1、2、6、12、24h麻醉后活杀动物，每个时间点15只动物;(3)PDTC组(n=60)伤前1h腹腔内注射PDTC200mg／kg，伤后1、2、6、12h麻醉后活杀动物，每个时间点15只动物;(4)ALLN组(n=60)伤前1h腹腔内注射ALLN30mg／kg，伤后1、2、6、12h麻醉后活杀动物，每个时间点15只动物。经腹主动脉采血，离心分离血浆标本-20℃冻存。无菌留取动物肝、肺、肾、小肠组织液氮冻存。分离双侧伸趾长肌，进行离体有氧孵育或立即置液氮内冻存。采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)分析体内NF-κB活性，采用免疫印迹法(Western blot)检测材二耍‘军医进修学院硕十论文肝脏IKB一a含量，采用酶联免疫吸附试验(E LISA)检测体内TNF一a的变化;肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性采用酶学分光度法测定;血浆ALT、AST、 BUN、Cr使用7 170自动生化分析仪测定;骨骼肌酪氨酸和三甲基组氨酸采用高效液相色谱分析法测定。结果:1.烧伤脓毒症大鼠组织NF一KB的活化规律以及NF一KB抑制剂PDTC与泛素一蛋白酶体途径抑制剂ALLN对其影响:在正常对照组大鼠肝、肺、肾、小肠组织中NF一、B活性极低，而于伤后lh 在各脏器中NF一KB活性均明显增强达到高峰(P<0.01)，之后各脏器NF一KB活性变化情况各不相同，但总的趋势为逐渐下降。 ALLN和PDTC两种抑制剂对各个脏器中NF一KB的活性都有一定程度地抑制作用。2.烧伤脓毒症大鼠肝脏IKB一(x含量的变化规律以及ALLN对其影响:IKB一a在正常大鼠肝脏组织的胞浆中含量较高，而于伤后lh明显减少，之后呈现逐渐恢复趋势，于伤后24h恢复至正常水平。ALLN可明显抑制肝脏中I沼一a含量在伤后lh的减少。3.烧伤脓毒症大鼠体内TNF一a含量的变化规律以及 PDTC与ALLN对其影响:伤后lh和2 h TNF一a在各重要脏器和血浆中的含量较正常对照显著增加(P<0.01)，各脏器和血浆TNF一a 的含量在不同时间点达最高。两种抑制剂均可不同程度地抑制各脏器和血浆中TNF一a的含量。4.烧伤脓毒症大鼠肺组织 MPO活性变化以及PDTC与ALLN对其影响:MPO活性于伤后Zh和6h明显增高(P<0 .01)，而两种抑制剂均可显著降低其活性(P<0.01)。5.烧伤脓毒症大鼠脏器功能指标的改变以及PDTC 与ALLN对其影响:ALT、AST、Bun、Cr于伤后Zh和6h均较正常组显著增高。两种抑制剂均可明显降低伤后Zh和6h ALT、AST的值。ALLN可降低伤后Zh和6h血浆中BUN的值，而对于Cr无显著作用。PDTC对于BUN和Cr的值均无明显作卿妥了军医进修学院硕十论文用。6.烧伤脓毒症大鼠骨骼肌总蛋白和肌纤维蛋白降解率的变化规律以及PDTC与ALLN对其影响:在伤后12h内骨骼肌总蛋白和肌纤维蛋白降解率逐渐增加。两种抑制剂均可明显降低骨骼肌蛋白降解率。7.烧伤脓毒症大鼠骨骼肌NF一KB的活化规律以及PDTC 与ALLN对其影响:大鼠伸趾长肌NF一KB的活性于正常肌肉组织中较低，于伤后Zh较正常对照明显增强达高峰，之后逐渐下降。PDTC可明显降低骨骼肌中NF一沼在伤后2、6、12h的活性，而ALLN可明显降低伤后Zh骨骼肌中NF一沼的活性。结论:1.烧伤脓毒症状态下机体多个重要脏器NF一忍均被活化，抑制NF一虑活性可降低体内细胞因子的产生，减轻烧伤脓毒症状态下的脏器损害，NF一KB在烧伤脓毒症的发生中起到了非常关键的作用，通过泛素- 蛋白酶体途径对其进行调节可降低体内炎症反应，在一定程度上保护脏器的功能。2.烧伤脓毒症状态下骨骼肌蛋白降解率显著增加，蛋白酶体抑制剂ALLN和NF一KB抑制剂PDTC均可明显降低骨骼肌蛋白降解率。结果说明ALLN可通过抑制骨骼

关键词：烧伤脓毒症核因子-кB 泛素蛋白酶体信号转导途径肿瘤坏死因子-α 骨骼肌蛋白降解凝胶电泳迁移率改变分析法免疫印迹法离体孵育高效液相色谱分析大鼠

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治疗烧伤重症监护病房烟曲霉菌感染十例

中华烧伤杂志 2017年第3期33卷 176-177页

作者：李欣李峰刘伟胡泉尹会男解放军总医院第一附属医院烧伤整形科北京100048

大面积严重烧伤患者免疫功能下降、皮肤屏障受损，加之广谱强效抗生素的长时间应用，易导致机会致病性真菌感染，其中以念珠菌感染最为多见，而少见曲霉菌属感染。笔者单位以往的细菌学检查曾检出过念珠菌、毛霉菌，极少检出曲霉菌，但... 详细信息

大面积严重烧伤患者免疫功能下降、皮肤屏障受损，加之广谱强效抗生素的长时间应用，易导致机会致病性真菌感染，其中以念珠菌感染最为多见，而少见曲霉菌属感染。笔者单位以往的细菌学检查曾检出过念珠菌、毛霉菌，极少检出曲霉菌，但自2014年以来，接连检出10例，现将治疗情况介绍如下。

关键词：严重烧伤患者曲霉菌感染重症监护病房治疗念珠菌感染细菌学检查免疫功能皮肤屏障

选择性去细胞异种(猪)皮与自体微粒皮复合移植对创面愈合的影响

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中国临床康复 2004年第11期8卷 2027-2029页

作者：刘强柴家科杨红明尹会男解放军第三○四医院全军烧伤研究所烧伤整形科北京市100037

目的:观察选择性去细胞异种(猪)皮与自体微粒皮复合移植对创面愈合的影响。方法:将异种(猪)皮经甲醛、胰蛋白酶、去污剂TritonX-100处理得到一种选择性去细胞异种(猪)皮。以SD大鼠为动物模型,在背部作全层皮肤缺损,使用微粒皮与选择性... 详细信息

目的:观察选择性去细胞异种(猪)皮与自体微粒皮复合移植对创面愈合的影响。方法:将异种(猪)皮经甲醛、胰蛋白酶、去污剂TritonX-100处理得到一种选择性去细胞异种(猪)皮。以SD大鼠为动物模型,在背部作全层皮肤缺损,使用微粒皮与选择性去细胞异种(猪)皮、异体皮、戊二醛皮及油纱覆盖皮肤缺损,观察创面愈合情况。结果:经组织学,免疫组化染色及电镜观察,选择性去细胞异种(猪)皮表皮层连续、完整,真皮中三大纤维排列有序且无细胞成分,基底膜结构完整。以选择性去细胞异种(猪)皮为覆盖物的创面愈合效果略差于异体皮覆盖创面的效果,但明显优于戊二醛皮及油纱覆盖创面的效果。结论:选择性去细胞异种(猪)皮易于制备,来源广泛,价格低廉,具有无细胞真皮支架和失活表皮,有望取代异体皮成为覆盖烧伤创面的新型敷料。

关键词：选择性去细胞异种猪皮移植自体微粒皮移植复合移植创面愈合物理特性组织学特点烧伤

脂质体包裹Clodronate对单核/巨噬细胞选择性清除作用的研究

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解放军医学杂志 2003年第10期28卷 890-893页

作者：高建川柴家科尹会男刘强盛志勇解放军第304医院北京100037

为探讨脂质体色裹clodronate清除单核 /巨噬细胞的作用 ,将clodronate用脂质体包裹 ,导入具有吞噬作用的单核 /巨噬细胞内 ,使其在单核/巨噬细胞内浓集 ,并形成具有毒性作用的ATP类似物。结果显示 ,所制备的脂质体直径 2 0 0nm ,表面呈... 详细信息

为探讨脂质体色裹clodronate清除单核 /巨噬细胞的作用 ,将clodronate用脂质体包裹 ,导入具有吞噬作用的单核 /巨噬细胞内 ,使其在单核/巨噬细胞内浓集 ,并形成具有毒性作用的ATP类似物。结果显示 ,所制备的脂质体直径 2 0 0nm ,表面呈负电荷 (-40mV) ,clodronate包裹率高 (17 6 %～ 19 0 %) ,透射电镜及激光扫描共聚焦显微镜检查均见其大小均匀 ;体外实验证实clodronate溶液、未包裹clodronate脂质体对培养巨噬细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞增殖无明显影响 (P >0 0 5 ) ,clodronate脂质体包裹后对内皮细胞、平滑肌细胞增殖仍无影响 ,但明显抑制巨噬细胞增殖 (P <0 0 1) ,激光扫描共聚焦显微镜观察发现 ,罗丹明标记的脂质体与单核细胞及上述细胞孵育 4h后 ,平滑肌细胞内无脂质体 ,而脂质体可快速进入单核细胞 /巨噬细胞内 ,且包裹clodronate的脂质体对巨噬细胞有明显损伤作用。上述结果表明 ,clodronate经脂质体包裹后可选择性清除单核 /巨噬细胞 ,而对非吞噬细胞无明显影响。

关键词：脂质体 clodronate 单核细胞巨噬细胞

核因子-κB在烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢中的作用研究

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解放军医学杂志 2003年第11期28卷 960-962页

作者：尹会男柴家科申传安吴焱秋刘强盛志勇解放军第304医院全军烧伤研究所

目的　观察核因子 κB(NF κB)对烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响 ,并探讨其可能机制。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,10 5只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症... 详细信息

目的　观察核因子 κB(NF κB)对烧伤脓毒症大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的影响 ,并探讨其可能机制。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,10 5只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)分析骨骼肌NF κB活性的变化 ,高效液相色谱分析法测定酪氨酸和 3 甲基组氨酸。结果　可见烧伤脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白、肌纤维蛋白降解率在伤后 2h即较对照组即显著升高 ,之后逐渐上升 ,以 12h升高最显著 (P <0 0 1) ;而骨骼肌NF κB的活性于伤后 2h显著升高 ,之后呈现下降趋势 ,伤后 12h其活性仍显著高于正常对照组 (P <0 0 5 )。结论　研究表明NF κB于烧伤脓毒症大鼠的骨骼肌中明显活化 ,而应用NF κB抑制剂PDTC能够明显降低脓毒症时骨骼肌代谢率 ,说明NF κB可能参与调控烧伤脓毒症时骨骼肌的异常代谢。

关键词：烧伤脓毒症 NF-κB 蛋白降解骨骼肌

异种(猪)无细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植修复深度烧伤创面的实验研究

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中国危重病急救医学 2004年第2期16卷 77-80页

作者：刘强柴家科杨红明尹会男解放军第三○四医院烧伤整形科

目的　观察异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮加同种异体皮复合移植修复全层皮肤缺损的效果。方法　 4 8只 SD大鼠背部全层皮肤缺损创面 ,分别行异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮移植(复合皮组 )和单纯微粒皮移植 (对照组 ) ,... 详细信息

目的　观察异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮加同种异体皮复合移植修复全层皮肤缺损的效果。方法　 4 8只 SD大鼠背部全层皮肤缺损创面 ,分别行异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮移植(复合皮组 )和单纯微粒皮移植 (对照组 ) ,术后定期观察创面愈合情况并行创面愈合率和收缩率的计算 ,同时取创面组织进行组织学观察。结果　复合皮组的创面愈合情况良好 ,未见明显挛缩 ,皮肤弹性较好 ,两组异体皮成活情况及创面愈合情况相近 ,但是复合皮组创面收缩率显著低于对照组。组织学观察复合皮组上皮化良好 ,胶原纤维排列有序 ,基底膜结构完整。结论　异种 (猪 )无细胞真皮支架与自体微粒皮复合移植能修复全层皮肤缺损 ,改善创面愈合质量。

关键词：烧伤异种(猪)无细胞真皮自体微粒皮复合移植

脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的变化规律

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解放军医学杂志 2005年第10期30卷 870-872页

作者：杜晓辉姚咏明李荣申传安尹会男解放军总医院普通外科北京100853 解放军总医院304临床部全军烧伤研究所

目的探讨脓毒症大鼠肝脏组织内毒素复合受体--Toll样受体4 (TLR4)/髓样分化蛋白-2(MD-2)mRNA的表达变化,研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的关系.方法腹腔注射内毒素(LPS)5mg/kg制作大鼠脓毒症模型.动物分为正常对照组... 详细信息

目的探讨脓毒症大鼠肝脏组织内毒素复合受体--Toll样受体4 (TLR4)/髓样分化蛋白-2(MD-2)mRNA的表达变化,研究其与肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的关系.方法腹腔注射内毒素(LPS)5mg/kg制作大鼠脓毒症模型.动物分为正常对照组(20只)及内毒素注射后1h、2h、6h组(各20只),检测肝脏组织TLR4/MD-2以及TNF-α mRNA的表达.结果 LPS注射后1h,TLR4/MD-2及TNF-α mRNA表达开始升高并达高峰,伤后2～6h逐渐下降,各时间点的表达量均显著高于对照组(P<0.01),TLR4与MD-2 mRNA的表达呈明显正相关(P<0.05),且分别与TNF-α mRNA的表达呈显著正相关(P<0.05).结论 LPS可迅速上调肝脏组织TLR4/MD-2的基因表达并诱导早期炎症细胞因子TNF-α的基因表达.脓毒症时TLR4识别LPS是可能以TLR4/MD-2复合体的形式完成的,且在识别过程中MD-2是TLR4必需的作用分子.

关键词： Toll样受体4 髓样分化蛋白-2 胀毒症肿瘤坏死因子

内毒素对心肌组织核因子-κB活化的影响及其意义

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解放军医学杂志 2007年第5期32卷 423-424页

作者：杜晓辉姚咏明李荣申传安尹会男解放军总医院普通外科北京100853 解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所

目的通过观察内毒素(LPS)攻击大鼠心肌组织核因子-κB(NF-κB)的活化情况,探讨心肌损伤的可能信号机制。方法大鼠腹腔注射5mg/kgLPS制作脓毒症模型,采用凝胶阻滞迁移分析法(EMSA)检测心肌组织NF-κB活化情况,RT-PCR法检测TNF-α基因表... 详细信息

目的通过观察内毒素(LPS)攻击大鼠心肌组织核因子-κB(NF-κB)的活化情况,探讨心肌损伤的可能信号机制。方法大鼠腹腔注射5mg/kgLPS制作脓毒症模型,采用凝胶阻滞迁移分析法(EMSA)检测心肌组织NF-κB活化情况,RT-PCR法检测TNF-α基因表达情况。结果LPS攻击后1h,NF-κB活化及TNF-α基因表达开始升高,2h达高峰,6h后逐渐下降。相关分析表明,心肌组织NF-κB活化与TNF-α基因表达呈显著正相关(r=0.9922,P<0.05)。结论LPS可增强心肌组织NF-κB的活化并诱导TNF-α基因表达。NF-κB活化导致的TNF-α合成增加在LPS介导心肌损害的分子机制中可能具有重要作用。

关键词： NF-κB 肿瘤坏死因子内毒素类心肌