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复方高滋斑片对抑郁大鼠海马NLRP3炎症小体的影响

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中国医院药学杂志 2024年第18期44卷 2115-2121页

作者：肖敏韩正茹游秋云昝俊峰石雷尤朋涛湖北中医药大学药学院中药资源与中药化学省级重点实验湖北武汉430065

目的:研究复方高滋斑片(Compound Gaoziban Tablets,CGZBT)对抑郁大鼠的缓解作用和海马NLRP3炎症小体的潜在影响。方法:适应性喂养1周后根据0 weeks糖水偏好率将大鼠随机分为Control组、CUMS组、CGZBT-L组(0.4g·kg^(–1))、CGZBT-M组(0.8 g·kg^(–1))、CGZBT-H组(1.6 g·kg^(–1))、Fluoxetine组,每组12只。SD大鼠造模6周建立慢性不可预知轻度应激(CUMS)抑郁模型,从第5周开始在CUMS造模同时给予相应药物干预2周。最后1天对大鼠进行糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验。麻醉后对大鼠海马体、血清进行取材,苏木精-伊红染色法观察海马体CA1区神经元细胞的变化。用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)表达水平。Western blot法检测海马体中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β前体(pro-IL-1β)、IL-1β、白介素-18(IL-18)的表达水平。结果:与CUMS组相比,CGZBT各剂量组旷场移动总距离显著增加(P<0.01),强迫游泳不动时间减少(P<0.01或P<0.05);CGZBT-M组和CGZBT-H组大鼠的糖水偏好率显著增加(P<0.01)。CGZBT可缓解CUMS大鼠海马体CA1区神经元细胞的损伤和降低血清中TNF-α、IL-1β的含量(P<0.01或P<0.05)。与CUMS组相比,CGZBT各剂量组大鼠海马中ASC、Caspase-1、IL-1β、的蛋白表达显著下调(P<0.01或P<0.05);CGZBT-M组和CGZBT-H组大鼠NLRP3、IL-18蛋白表达显著下调(P<0.01或P<0.05)。结论:CGZBT可缓解抑郁大鼠的抑郁症状并抑制海马体中NLRP3炎性小体的表达。

关键词：复方高滋斑片抑郁症炎症小体海马

高良姜素诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的研究

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中药新药与临床药理 2017年第2期28卷 151-154页

作者：罗焱尤朋涛杨敏刘焱文刘丹湖北中医药大学药学院中药资源与中药化学湖北省重点实验室湖北武汉430061 湖北中医药大学药学院湖北武汉430065

目的研究高良姜素促进人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡作用。方法采用CCK-8法检测高良姜素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;以流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测Bax、Bcl-2、cleavedcaspase-3和cleaved-PARP等相关蛋白的表达水平。结果... 详细信息

目的研究高良姜素促进人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡作用。方法采用CCK-8法检测高良姜素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;以流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测Bax、Bcl-2、cleavedcaspase-3和cleaved-PARP等相关蛋白的表达水平。结果高良姜素对MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,24 h和48 h的IC50分别为43.71μmol·L^(-1)和20.68μmol·L^(-1);高良姜素能够诱导MCF-7细胞凋亡,呈浓度依赖关系;高良姜素能上调Bax、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。结论高良姜素对MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,通过线粒体途径调节凋亡相关蛋白的表达水平诱导MCF-7细胞凋亡。

关键词：高良姜素细胞凋亡人乳腺癌细胞株MCF-7 Bax蛋白 Bcl-2蛋白 cleaved-caspase-3蛋白 cleaved-PARP蛋白

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高良姜素含氮衍生物的合成及其抗肿瘤活性

天然产物研究与开发 2017年第4期29卷 575-578页

作者：罗焱尤朋涛杨敏刘焱文刘丹湖北中医药大学中药资源与中药化学湖北省重点实验室湖北中医药大学药学院武汉430065

高良姜素是一种天然来源的黄酮醇类化合物,药理作用广泛,但尚未有关于其结构修饰的研究报道。本文以高良姜素为原料,设计、合成了5个高良姜素含氮衍生物,并对其结构进行1H NMR、13C NMR及MS表征;然后采用MTT法测试结构修饰产物的抗肿瘤... 详细信息

高良姜素是一种天然来源的黄酮醇类化合物,药理作用广泛,但尚未有关于其结构修饰的研究报道。本文以高良姜素为原料,设计、合成了5个高良姜素含氮衍生物,并对其结构进行1H NMR、13C NMR及MS表征;然后采用MTT法测试结构修饰产物的抗肿瘤活性,结果表明化合物2-苯基-3,5,7-三羟基-8-(吗啉甲基)-4H-色烯-4-酮(2c)和2-苯基-3,5,7-三羟基-8-(哌嗪-1-甲基)-4H-色烯-4-酮(2d)对人前列腺癌PC-3细胞株的增殖抑制活性(IC_(50):11.37和13.57μmol/L)显著优于高良姜素(IC50:41.66μmol/L),分别提高了3.66倍和3.07倍;化合物2-苯基-3,5,7-三羟基-8-(哌嗪-1-甲基)-4H-色烯-4-酮(2d)对人结肠癌LOVO细胞株的增殖抑制活性较高良姜素提高了5.22倍。该系列衍生物的抗肿瘤活性的增强可能与8-位上含氮杂环的引入有关。

关键词：高良姜素结构修饰含氮杂环化合物抗肿瘤活性

TOPC通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路,抑制miR-210,Atg7诱导H1975细胞凋亡

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2023年第11期32卷 881-892页

作者：郑吴殷晓李海平罗来春胡春玲尤朋涛湖北中医药大学药学院中药资源与中药化学省级重点实验室湖北武汉430065

TOPC [2-(2,5,5,8a-四甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢萘-1-基)乙基哌嗪-1-碳二硫酸酯]是我们团队合成的一种结肠酸-二硫氨基甲酸酯衍生物。该化合物对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549和H1975的体外增殖抑制作用优于结肠酸。本研究的主要... 详细信息

TOPC [2-(2,5,5,8a-四甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢萘-1-基)乙基哌嗪-1-碳二硫酸酯]是我们团队合成的一种结肠酸-二硫氨基甲酸酯衍生物。该化合物对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549和H1975的体外增殖抑制作用优于结肠酸。本研究的主要目的是探讨TOPC对H1975细胞可能的分子机制。MTT法检测细胞增殖, Hoechst 33342染色和Western blotting方法检测TOPC诱导的细胞凋亡,Westernblotting检测自噬蛋白表达及相关PI3K/AKT/mTOR信号通路,qRT-PCR检测miR-210mimic、inhibitor、inhibitorNC的转染率以及miR-210和Atg7的表达。结果表明,TOPC显著抑制A549和H1975细胞增殖。Hoechst33342染色和Westernblotting分析显示TOPC诱导H1975细胞凋亡。Westernblotting检测显示,TOPC诱导H1975细胞发生自噬,同时自噬相关蛋白Beclin-1、Atg5、Atg7、Atg12和LC3-II表达上调。此外, qRT-PCR结果显示TOPC显著下调了H1975细胞中miR-210的表达。进一步研究表明,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路和抑制miR-210功能在Atg7介导的topc诱导的自噬中起作用。结果表明TOPC能显著抑制A549和H1975细胞的生长,是一种很有前途的非小细胞肺癌治疗药物,值得进一步开发。

关键词： TOPC 细胞凋亡自噬 PI3K/AKT/mTOR miR-210

鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶基因的克隆及表达载体的构建

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基因组学与应用生物学 2018年第9期37卷 3919-3925页

作者：马朝芝黄晓余坤尤朋涛刘焱文但汉雄湖北中医药大学药学院

为提高鞘蕊苏有效成分的含量,开展Coleus Ent-kaurenoic acid oxidase（KAO）基因的克隆以及表达载体构建方面的研究。提取鞘蕊苏叶片的总RNA,利用套式PCR技术克隆获得KAO基因全长,将该基因连接到克隆载体p MD-18T,经测序鉴定正确后,再... 详细信息

为提高鞘蕊苏有效成分的含量,开展Coleus Ent-kaurenoic acid oxidase（KAO）基因的克隆以及表达载体构建方面的研究。提取鞘蕊苏叶片的总RNA,利用套式PCR技术克隆获得KAO基因全长,将该基因连接到克隆载体p MD-18T,经测序鉴定正确后,再将该基因连接到p ET-28a表达载体中。结果显示,成功克隆出的鞘蕊苏KAO基因大小为1 500 bp,对克隆基因进行测序及酶切鉴定,均得到正确大小的DNA片段,说明表达载体构建成功。本研究成功克隆得到鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶基因并构建其表达载体,为提高鞘蕊苏有效成分含量提供了基础。

关键词：鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶 PCR 表达载体

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中华中医药杂志 2021年第7期36卷 3838-3842页

作者：马小青杨敏涂仪军尤朋涛刘丹中药资源与中药化学湖北省重点实验室湖北中医药大学武汉430065

目的:筛选高良姜抗幽门螺杆菌(H. pylori)相关性胃炎的有效部位并探讨其作用机制。方法:MTT法评价高良姜各溶剂萃取部位对GES-1细胞毒活性;H. pylori感染GES-1复制胃炎细胞模型,ELISA法检测白细胞介素(IL)-8浓度。采用H. pylori诱导小... 详细信息

目的:筛选高良姜抗幽门螺杆菌(H. pylori)相关性胃炎的有效部位并探讨其作用机制。方法:MTT法评价高良姜各溶剂萃取部位对GES-1细胞毒活性;H. pylori感染GES-1复制胃炎细胞模型,ELISA法检测白细胞介素(IL)-8浓度。采用H. pylori诱导小鼠胃炎模型,Western Blot法检测NF-κB信号通路相关蛋白IKKα、IKKβ、p65、IκBα及其磷酸化蛋白的表达。结果:在20~160μg/mL浓度范围内,高良姜乙酸乙酯萃取部位显著促进GES-1细胞增殖(P<0.01);给药浓度4μg/mL作用24h,可显著降低H. pylori感染诱导的GES-1胃炎细胞IL-8浓度(P<0.05)。此外,乙酸乙酯萃取部位可显著下调H. pylori胃炎小鼠胃组织IKKβ、p-IKKα/β、p-p65和p-IκBα蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:乙酸乙酯萃取部位能够抑制NF-κB信号通路相关蛋白表达,是高良姜抗***相关性胃炎活性部位。

关键词：幽门螺杆菌相关性胃炎高良姜核因子-κB 有效部位

鳖甲提取物对抑制TGF-β诱导的大鼠肝星状细胞活化的影响

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中国实验方剂学杂志 2017年第19期23卷 155-159页

作者：熊莎高建蓉胡祖良刘焱文尤朋涛湖北中医药大学中药资源与化学重点实验室武汉430065 浙江衢化医院浙江衢化324004

目的:研究鳖甲提取物相对分子质量<6 k Da肽段(P6)对转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)诱导的大鼠肝星状细胞HSC-T6的活化增殖与肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)相关基因表达的影响,初步探究其抗肝纤维化的作用机... 详细信息

目的:研究鳖甲提取物相对分子质量<6 k Da肽段(P6)对转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)诱导的大鼠肝星状细胞HSC-T6的活化增殖与肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)相关基因表达的影响,初步探究其抗肝纤维化的作用机制。方法:应用透析法得到P6;细胞增殖与活性检测(CCK8)法检测P6对HSC-T6细胞增殖的影响;实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR)检测HSC-T6细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),I型胶原(collagen type I,Col I),基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析HSC-T6细胞内α-SMA与Col I蛋白的表达。结果:与空白组比较,P6对HSC-T6细胞存活率无明显影响,但却能显著抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的增殖(P<0.05)。与TGF-β组比较,P6各浓度均能显著降低HSC-T6细胞中α-SMA,Col I,TIMP-1 mRNA的表达,增加MMP-2 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),明显降低α-SMA与Col I蛋白的表达。结论:P6能抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的活化增殖,减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)生成,促进其降解,发挥抗肝纤维化作用。

关键词：鳖甲 HSC-T6 肝纤维化活化机制

毛喉鞘蕊花提取物对大鼠哮喘模型炎症介质的影响及机制研究

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天然产物研究与开发 2019年第9期31卷 1515-1519页

作者：彭小芝马朝芝夏雨涂仪军尤朋涛刘焱文湖北中医药大学药学院湖北中医药大学中药资源与中药化学湖北省重点实验室武汉430065

为探讨毛喉鞘蕊花提取物(Coleus Forskohlii extract,CFE)对哮喘的治疗作用及机制,采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)结合佐剂氢氧化铝建立大鼠哮喘模型,SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为5组,即空白组、模型组、地塞米松组、CFE高剂量组(12.8g/... 详细信息

为探讨毛喉鞘蕊花提取物(Coleus Forskohlii extract,CFE)对哮喘的治疗作用及机制,采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)结合佐剂氢氧化铝建立大鼠哮喘模型,SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为5组,即空白组、模型组、地塞米松组、CFE高剂量组(12.8g/kg)和CFE低剂量组(6.4g/kg),分别用生理盐水、地塞米松及CFE每天灌胃1次,连续14天,灌胃容积为1mL/100g。通过HE染色观察肺组织病理学形态学变化;ELISA法测定大鼠血清(serum)及肺泡灌洗液(BALF)中IFN-γ、IL-4和IL-17A含量变化;Western blot检测MAPK通路相关蛋白的表达变化。HE结果显示,与模型组相比,CFE高、低剂量组能显著减轻OVA刺激后大鼠肺组织病理性损伤,气道轮廓清晰,上皮细胞脱落明显减少;ELISA结果显示,与模型组相比,CFE高、低剂量组大鼠血清及BALF中IL-4、IL-17A的含量明显下降,IFN-γ的含量明显上升(P<0.05或P<0.01);WB结果显示,CFE高剂量组可显著降低大鼠肺组织p-ERK、p-JNK及p-p38蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。综上,毛喉鞘蕊花提取物可有效缓解OVA诱导的大鼠哮喘气道炎症反应,其机制与调节MAPK信号传导通路有关。

关键词：毛喉鞘蕊花哮喘炎症 MAPK信号通路

加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位的血清药物化学研究

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中国中药杂志 2018年第8期43卷 1692-1700页

作者：陈雪剑杨梦玲刘蔚尤朋涛周爱军刘焱文陈新湖北中医药大学中药资源与中药化学湖北省级重点实验室湖北武汉430065 东莞市中医院广东东莞523000

该文应用色谱-质谱技术对加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位进行血清药物化学研究。通过小鼠无水乙醇致胃溃疡模型考察了全方和有效部位组方抗胃溃疡的药效作用,两者均能明显降低无水乙醇致小鼠溃疡;通过气相-质谱法,检测挥发性部位的... 详细信息

该文应用色谱-质谱技术对加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位进行血清药物化学研究。通过小鼠无水乙醇致胃溃疡模型考察了全方和有效部位组方抗胃溃疡的药效作用,两者均能明显降低无水乙醇致小鼠溃疡;通过气相-质谱法,检测挥发性部位的化学成分和灌胃给药无水乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型后的入血成分,共分析鉴定了63个化合物,约占挥发油总量的93%以上。其中α-姜黄烯23.51%,姜烯11.96%,莪术呋喃烯9.56%,β-倍半水芹烯6.54%,莰烯4.77%,为加味小柴胡汤挥发性物质部位的主要成分,在抗胃溃疡的含药血清中检测到6个原形成分;通过液相-质谱法,正负离子模式同时检测生物碱物质部位提取物化学成分和灌胃给药无水乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型后的入血成分,共分析鉴定出17个化合物,在抗胃溃疡的含药血清中检测到6个原形成分,及3,5-O-feruloylquinic acid,巴马汀2个代谢成分。该研究明确了加味小柴胡汤抗胃溃疡的主要有效化学成分,阐明了其药效物质基础,为该经典方剂治疗胃溃疡的创新性临床应用提供科学实验依据,并为进一步的中药新药研制提供基础。

关键词：加味小柴胡汤胃溃疡有效物质部位血清药物化学