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硅对盐胁迫下枣树组织培养苗细胞壁形成和相关酶活性的影响

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植物生理学报 2011年第11期47卷 1096-1102页

作者：徐呈祥徐锡增马艳萍尚旭岚肇庆学院生命科学学院广东肇庆526061 南京林业大学森林资源与环境学院南京210037

盐胁迫(75mmol·L-1NaCl)下,枣树微茎段外植体成活率、生根率及枣苗的侧根条数和长度、苗高、单株重量均较对照显著减小;盐胁迫下加硅(Si)(0.75mmol·L-1KSiO3),枣苗的前述指标与对照无显著性差异。盐胁迫下,枣组织培养生根苗细胞壁提... 详细信息

盐胁迫(75mmol·L-1NaCl)下,枣树微茎段外植体成活率、生根率及枣苗的侧根条数和长度、苗高、单株重量均较对照显著减小;盐胁迫下加硅(Si)(0.75mmol·L-1KSiO3),枣苗的前述指标与对照无显著性差异。盐胁迫下,枣组织培养生根苗细胞壁提取率显著下降,细胞壁中蛋白和低分子量果胶含量显著降低,EDTA可溶性果胶和碱溶性果胶含量显著提高,半纤维素和纤维素含量降低;盐胁迫下加Si,枣苗细胞壁提取率显著提高,细胞壁主要成分的含量水平与对照相近。与盐胁迫下相比,盐胁迫下加Si,虽然枣苗果胶甲酯酶(PME)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性升高未达显著性差异水平,但纤维素酶(Cx)活性显著降低,3种水解酶活性的比值均显著增大,细胞壁共价结合态H+-ATP酶活性显著升高。结果说明,提高培养基可溶性Si水平,可显著改善受盐胁迫枣苗细胞壁水解酶的活性平衡、组分含量的均衡及细胞壁内外溶质的适应性分配,从而为枣苗较好生长奠定了基础。

关键词：枣生根培养盐胁迫硅细胞壁形成

枣品种耐盐性与叶片生物膜结合态多胺水平和H^+-ATP酶活性的关系

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植物生理学报 2011年第8期47卷 811-816页

作者：徐呈祥徐锡增马艳萍尚旭岚肇庆学院生命科学学院广东肇庆526061 南京林业大学森林资源与环境学院南京210037

120mmol·L-1NaCl胁迫30d,耐盐性强的‘金丝小枣’叶片细胞质膜、液泡膜共价结合态腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)含量及多胺(PAs)总水平与对照无显著性差异,但耐盐性弱的‘冬枣’叶片质膜共价结合态Put、Spd、Spm含量和PAs总水平... 详细信息

120mmol·L-1NaCl胁迫30d,耐盐性强的‘金丝小枣’叶片细胞质膜、液泡膜共价结合态腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)含量及多胺(PAs)总水平与对照无显著性差异,但耐盐性弱的‘冬枣’叶片质膜共价结合态Put、Spd、Spm含量和PAs总水平及液泡膜Spd含量均显著降低;‘金丝小枣’叶片类囊体膜共价结合态Put含量、PAs总水平较对照显著降低,‘冬枣’则是Put、Spd、Spm含量及PAs总水平均显著降低。盐胁迫下,‘金丝小枣’叶片细胞质膜、液泡膜、类囊体膜非共价结合态Put、Spd、Spm含量及PAs总水平下降,但其中仅类囊体膜Spd含量显著低于对照,而‘冬枣’的3种膜上非共价结合态的这些多胺及其总水平均显著低于对照。与对照相比,盐胁迫下耐盐性不同的2个枣品种,叶片细胞质膜、液泡膜和类囊体膜H+-ATP酶活性均降低,但降低幅度因枣品种和生物膜种类不同而异,且H+-ATP酶活性与相应膜结合态多胺水平存在极紧密的正相关关系。结果表明,膜结合态多胺参与枣品种耐盐性的表达,调节盐胁迫下枣叶细胞中溶质的跨膜运输。

关键词：枣品种耐盐性生物膜结合态多胺 H+-ATP酶

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药用植物生产体系构建——生物技术的应用

中药材 2018年第1期41卷 239-243页

作者：张洋洑香香尚旭岚南京林业大学林学院江苏南京210037 南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

长久以来,我国依赖药用植物防治疾病。但随着人口激增、生境破坏,致使药用植物野生资源锐减、质量下降,缓解药用植物供需压力是目前亟需解决的民生问题。生物技术在药用植物方面应用广泛,该文介绍了药用植物离体再生研究现状、次生代谢... 详细信息

长久以来,我国依赖药用植物防治疾病。但随着人口激增、生境破坏,致使药用植物野生资源锐减、质量下降,缓解药用植物供需压力是目前亟需解决的民生问题。生物技术在药用植物方面应用广泛,该文介绍了药用植物离体再生研究现状、次生代谢产物生产技术、组培材料稳定性鉴定方法;分析了木本药用植物离体再生体系建立的困难所在;比较了现有代谢产物生产技术的优缺点;强调了组培材料稳定性鉴定的重要性;揭示了转基因技术在药用植物体系构建的广阔前景。

关键词：药用植物体系构建稳定性鉴定基因工程

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青钱柳药用优良单株评价与选择

南京林业大学学报（自然科学版） 2021年第1期45卷 21-28页

作者：田力徐骋炜尚旭岚洑香香南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】以青钱柳表型性状作为优良单株第1轮选择依据,结合叶生物活性物质含量进行第2轮选择,再基于年度间稳定性评价进行决选,为青钱柳生物活性物质原料生产提供优良种植材料。【方法】2017年3月,根据植株叶片(叶色、叶形、叶面积)、... 详细信息

【目的】以青钱柳表型性状作为优良单株第1轮选择依据,结合叶生物活性物质含量进行第2轮选择,再基于年度间稳定性评价进行决选,为青钱柳生物活性物质原料生产提供优良种植材料。【方法】2017年3月,根据植株叶片(叶色、叶形、叶面积)、分枝角、冠型(扁平和饱满)等表型性状,结合优良种源进行第1轮优良单株选择;并于当年9月底采收入选单株叶片测定总黄酮、总三萜和多糖含量,评价入选单株的改良潜力并进行第2轮选择。2018年9月对第2轮选择出的优株进行生物活性物质含量年度稳定性评价并进行优良单株决选。【结果】第1轮选择出的36份材料叶片的3种生物活性物质含量均存在显著差异,总黄酮、总三萜和水溶性多糖的改良潜力分别为34.3%、43.43%和36.41%;据此,单指标结合多指标第2轮选择出10株优良单株。比较第2轮选择优株连续两年叶内的活性物质含量,决选出含量稳定的3株优株LC1、LC4和CP3。分析表明,嫩叶红色的表型性状与叶内总黄酮、总三萜含量呈极显著相关;总三萜含量与植株具较大分枝角和饱满冠型分别呈极显著和显著相关关系;但水溶性多糖含量与观测的表型性状无显著相关。【结论】基于青钱柳红色嫩叶、大分枝角和饱满冠型与植株叶内总黄酮、总三萜含量呈显著相关性,可将3种表型特征作为药用优株的选择依据。终选优株LC1、LC4和CP3叶内生物活性物质不仅含量高,而且年度间表达稳定。为了保证高产稳产,需对选择优株进行多点试验并研究其遗传与环境互作效应,以确定其适宜生境和相应的栽培策略。

关键词：表型性状生物活性物质性状相关稳定性评价优树选择

金丝小枣等4个枣品种耐盐性与细胞质膜、液泡膜质子泵活性的关系

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果树学报 2011年第2期28卷 221-228页

作者：徐呈祥徐锡增马艳萍尚旭岚南京林业大学森林资源与环境学院南京210037 肇庆学院生命科学学院广东肇庆526061

以金丝小枣、梨枣、大瓜枣和冬枣为试材,设加0、0.10%、0.30%、0.50%和0.70%NaCl共5种土壤含盐量水平,研究了盐胁迫下这4个主栽枣品种耐盐性与质膜H+-ATPase和液泡膜H+-ATPase、H+-PPase活性的关系。对叶片相对含水量、丙二醛含量、相... 详细信息

以金丝小枣、梨枣、大瓜枣和冬枣为试材,设加0、0.10%、0.30%、0.50%和0.70%NaCl共5种土壤含盐量水平,研究了盐胁迫下这4个主栽枣品种耐盐性与质膜H+-ATPase和液泡膜H+-ATPase、H+-PPase活性的关系。对叶片相对含水量、丙二醛含量、相对电解质渗漏率、Fv/Fo、Fv/Fm、净光合速率等生理指标测试结果表明,4个枣品种的耐盐性存在较大差异。尽管4品种根尖和叶片细胞PM-H+-ATPase、TP-H+-ATPase和TP-H+-PPase活性随土壤含盐量升高的变化趋势相似,但同一枣品种的不同H+-ATPase、同一H+-ATPase在不同枣品种中的活性差异明显。盐胁迫下,耐盐性强的金丝小枣根尖细胞中3种H+-酶的活性降低幅度明显小于耐盐性弱的冬枣,且金丝小枣PM-H+-ATPase活性与TP-H+-ATPase活性相当,而盐胁迫下耐盐性弱的冬枣根尖细胞中PM-H+-ATPase活性明显低于TP-H+-ATPase活性,TP-H+-PPase活性随土壤含盐量递增更呈直线性下降,对土壤盐分非常敏感。盐胁迫下,枣品种耐盐性不同,枣叶细胞中3种H+-酶活性的差异也很显著。总体上,耐盐性强的枣品种,质膜和液泡膜质子泵的活性均强,根尖细胞向质外体"排盐"的功能与向共质体的液泡中"固定盐分"的功能均突出,叶片细胞向质外体"排盐"的功能基本保持而向液泡中"固定盐分"的功能显著增强,但耐盐性弱的枣品种盐胁迫下叶片细胞质膜、液泡膜质子泵活性下降或略有增强。

关键词：枣盐胁迫耐盐性质膜液泡膜质子泵活性

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青钱柳种子休眠机制

林业科学 2011年第3期47卷 68-74页

作者：尚旭岚徐锡增方升佐南京林业大学森林资源与环境学院南京210037

青钱柳种子具有深休眠特性。对青钱柳离体胚及不同处理种子的萌发试验、种壳透水性和透气性测定以及种子各部分内源抑制物质的提取、生物测定和鉴定等的研究表明:1)青钱柳种胚基本不存在休眠,果皮和种皮存在一定的机械束缚和透水、透气... 详细信息

青钱柳种子具有深休眠特性。对青钱柳离体胚及不同处理种子的萌发试验、种壳透水性和透气性测定以及种子各部分内源抑制物质的提取、生物测定和鉴定等的研究表明:1)青钱柳种胚基本不存在休眠,果皮和种皮存在一定的机械束缚和透水、透气性障碍,果皮中存在活性较强的内源抑制物质是引起青钱柳种子休眠的主要原因。2)种子各部分甲醇浸提液的生物测定结果说明,青钱柳种子各部分均含有内源抑制物质,抑制活性为果皮>种皮>完整种子>种胚。3)对抑制活性最强的果皮甲醇提取液采用系统溶剂法进行初步分离,生物测定结果表明各分离相中乙醚相的抑制活性最强,GC-MS鉴定结果显示乙醚相中相对含量为35.09%的组分是具有较强抑制作用的香草酸。研究结果首次较系统地阐明青钱柳种子的休眠机制。

关键词：青钱柳种子休眠离体胚培养种壳透性抑制物质

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青钱柳二倍体和四倍体叶特征比较研究

南京林业大学学报（自然科学版） 2024年第4期48卷 76-84页

作者：刘夏岚宋子琪胡凤荣尚旭岚南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林草学院江苏南京210037 南京林业大学风景园林学院江苏南京210037

【目的】比较青钱柳(Cyclocarya paliurus)二倍体和四倍体叶表型特征、解剖结构和气孔特征等方面的差异,旨在获得不同倍性青钱柳叶片特征的基础数据。【方法】以青钱柳二倍体和四倍体苗木为材料,对32项叶片特征指标进行测定,并进行独立... 详细信息

【目的】比较青钱柳(Cyclocarya paliurus)二倍体和四倍体叶表型特征、解剖结构和气孔特征等方面的差异,旨在获得不同倍性青钱柳叶片特征的基础数据。【方法】以青钱柳二倍体和四倍体苗木为材料,对32项叶片特征指标进行测定,并进行独立样本t检验、相关性分析和主成分分析。【结果】除中部小叶的最大叶宽位置和锯齿宽度在倍性间无显著差异外,其余30项叶特征在倍性间均达到显著或极显著差异。其中,四倍体小叶数量极显著少于二倍体,而复叶面积和比叶质量极显著大于二倍体;四倍体顶端小叶和中部小叶的叶长、叶宽和叶面积极显著大于二倍体,而叶形指数极显著小于二倍体;四倍体锯齿密度极显著小于二倍体;四倍体叶片厚度、上表皮厚度、下表皮厚度、栅栏组织厚度和海绵组织厚度均极显著大于二倍体,而栅海比和紧密度极显著小于二倍体;四倍体气孔长度和气孔宽度极显著大于二倍体,而气孔密度极显著小于二倍体。相关性分析结果表明,青钱柳表型特征与解剖结构和气孔特征各指标间存在广泛而显著的相关关系。主成分分析提取了反映两种倍性青钱柳叶特征差异的指标,分别为小叶叶宽、小叶面积、叶形指数、海绵组织厚度、气孔长度、栅栏组织厚度和紧密度。【结论】青钱柳二倍体和四倍体的叶特征存在显著差异,小叶叶宽、小叶面积和叶形指数等叶表型特征可用于青钱柳二倍体和四倍体初筛。

关键词：青钱柳多倍体表型特征解剖结构气孔特征

利用流式细胞仪鉴定青钱柳倍性方法的建立及应用

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南京林业大学学报(自然科学版) 2023年

作者：宋子琪卞国良林峰胡凤荣尚旭岚南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院中国科学院南京土壤研究所南京林业大学现代分析测试中心南京林业大学风景园林学院

【目的】利用流式细胞仪检测青钱柳的染色体倍性，为青钱柳种质鉴定及遗传育种研究提供技术支持和基础数据。【方法】以青钱柳叶片为材料，比较了裂解液种类、离心处理和叶片保存方式对倍性检测效果的影响，并利用建立的方法对1395份青... 详细信息

【目的】利用流式细胞仪检测青钱柳的染色体倍性，为青钱柳种质鉴定及遗传育种研究提供技术支持和基础数据。【方法】以青钱柳叶片为材料，比较了裂解液种类、离心处理和叶片保存方式对倍性检测效果的影响，并利用建立的方法对1395份青钱柳种质资源的倍性进行检测。【结果】mGb裂解液的裂解效果最好，峰图质量最优。细胞核悬浮液过滤后可直接染色后进行测定，无需离心。4℃冷藏叶片的测定效果最佳，保存时间以7 d为宜。硅胶干燥样本测定效果优于冷冻，硅胶干燥保存时间以150 d为宜。100份试验样本的CV值为2.13%～5.04%，倍性估算值为1.80～2.40的样本判断为二倍体，倍性估算值为3.60～4.20的样本判断为四倍体。倍性估算值为3.00±0.40时，需采用与初判倍性相同的参照样本进行第二次标定。对1395份青钱柳种质资源进行倍性鉴定，共检测出二倍体104份，四倍体1291份。【结论】本研究建立的青钱柳流式细胞分析倍性的方法为：取参照样本和待测样本叶片各0.50～1.00 cm2，加入1 mL的mGb裂解液中混合切碎，过滤后加入20 μL PI染色1 min即可上机检测。对于倍性估算值异常的样本，采用二次标定法可快速确定其倍性，该方法操作简单、高效准确，为青钱柳种质倍性鉴定提供了有效方法。

关键词：青钱柳倍性鉴定流式细胞术细胞核裂解液内标法

香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中生理生化指标的影响及各指标的相关性分析

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植物资源与环境学报 2012年第4期21卷 76-81页

作者：尚旭岚徐锡增方升佐南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

采用离体胚培养法,研究了在培养基中添加81.33 mg.L-1(半抑制浓度,IC50)香草酸的条件下,青钱柳〔Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.〕离体胚萌发过程中部分生理生化指标的变化,并对各指标间的相关性进行了分析。结果表明:随培养时间... 详细信息

采用离体胚培养法,研究了在培养基中添加81.33 mg.L-1(半抑制浓度,IC50)香草酸的条件下,青钱柳〔Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.〕离体胚萌发过程中部分生理生化指标的变化,并对各指标间的相关性进行了分析。结果表明:随培养时间的延长,处理组(培养基中添加81.33 mg.L-1香草酸)及对照组离体胚的粗脂肪和蛋白质含量均呈逐渐降低的趋势,淀粉和可溶性糖含量均呈先降低后升高的趋势,异柠檬酸裂合酶(ICL)、酸性磷酸酶(AP)、碱性磷酸酶(ALP)和过氧化物酶(POD)活性以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)联合活性均高于培养初期,且ICL、POD、AP和ALP活性不断提高;但处理组的粗脂肪和蛋白质含量均高于对照组且变化幅度相对较小,淀粉含量在培养前期高于对照、在培养后期低于对照,可溶性糖含量总体上高于对照,ICL、AP和ALP活性及G-6-PDH和6-PGDH联合活性的提高幅度整体上小于对照,培养后期POD活性显著高于对照。相关性分析结果表明:青钱柳离体胚萌发过程中粗脂肪和蛋白质含量与各种酶活性间均呈显著或极显著的负相关。研究结果显示:香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中各种酶的活化产生抑制作用,导致主要贮藏物质的转化受阻,从而影响胚的萌发。

关键词：香草酸青钱柳离体胚半抑制浓度(IC50) 生理生化指标相关性分析