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用原位缺口翻译法比较两种细胞死亡的DNA状态

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解剖学报 1994年第4期25卷 398-402,T012,13页

作者：牛建昭小路武彦中根一穗北京中医药大学组织学胚胎学教研室日本长崎大学医学部第3解剖

用原位缺口翻译法（ＩＮＴ）比较了细胞凋亡和坏死所伴随的ＤＮＡ断裂（ＤＳＢ）类型。ＩＮＴ实验条件为：取大鼠小肠制备冰冻切片，乙醇／醋酸固定，加２０μｍｏｌ／Ｌｂｉｏｔｉｎ－１１－ｄＵＴＰ、０．２ＩＵ／ＬＤＮＡ聚合酶Ⅰ，... 详细信息

用原位缺口翻译法（ＩＮＴ）比较了细胞凋亡和坏死所伴随的ＤＮＡ断裂（ＤＳＢ）类型。ＩＮＴ实验条件为：取大鼠小肠制备冰冻切片，乙醇／醋酸固定，加２０μｍｏｌ／Ｌｂｉｏｔｉｎ－１１－ｄＵＴＰ、０．２ＩＵ／ＬＤＮＡ聚合酶Ⅰ，于３７℃中孵育３ｈ。正常大鼠小肠绒毛顶端上皮细胞可迅速被染色；而位于肠绒毛基底部的Ｓ期上皮细胞则不着色，仅在用蛋白酶Ｋ处理后才着色。细胞凋亡标本取自皮下注射氢化可的松（１０ｍｇ／１００ｇ体重）的大鼠胸腺；细胞坏死用ＣＣｌ４（１００μｌ／１００ｇ体重）处理的大鼠肝脏。结果表明，经激素处理的胸腺皮质细胞核只有在蛋白酶Ｋ处理后才被染色，而ＣＣｌ４处理后的肝细胞核不必用蛋白酶Ｋ消化就能直接显色。说明细胞凋亡的ＤＳＢ显色特性不同于细胞坏死。

关键词：细胞凋亡原位缺口翻译 DNA

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小鼠雄性生殖细胞生后发育中的程序性死亡

解剖学报 1998年第4期29卷 418-421,I012,I013页

作者：王瑞安小路武彦郑平菊张远强中根一穗第四军医大学组织学胚胎学教研室日本长崎大学医学部第三解剖

为了观察小鼠睾丸生后发育过程中生殖细胞自发死亡的方式与规律。用生后０、１、４、７、１０、１３、１８和５０ｄＡ／Ｊ系小鼠，一侧睾丸用２．５％戊二醛，另一侧睾丸用４％多聚甲醛固定１８ｈ后，分别用树脂或石蜡包埋，制备超薄和... 详细信息

为了观察小鼠睾丸生后发育过程中生殖细胞自发死亡的方式与规律。用生后０、１、４、７、１０、１３、１８和５０ｄＡ／Ｊ系小鼠，一侧睾丸用２．５％戊二醛，另一侧睾丸用４％多聚甲醛固定１８ｈ后，分别用树脂或石蜡包埋，制备超薄和连续石蜡切片，进行电镜观察和ＴＵＮＥＬ染色光镜观察。电镜观察显示，在出生当日，可见个别呈坏死特征的变性生殖细胞，核质溶解，但无染色质聚集。核周间隙扩大，线粒体和内质网等细胞器肿胀，有空泡形成。细胞膜有突起、出泡现象。生后１ｄ，死亡细胞罕见。生后４ｄ开始见到典型凋亡特征的生殖细胞，并于生后１０～１３ｄ达到高峰。ＴＵＮＥＬ染色见阳性细胞在生后４ｄ开始出现，１０～１３ｄ达高峰，而后逐渐减少，与电镜观察结果一致。结果表明：小鼠睾丸在发育过程中生殖细胞的自发死亡主要以凋亡的形式发生，在一定时期，则以坏死的方式出现。

关键词：生殖细胞细胞凋亡睾丸小鼠生后发育

黄曲霉素B1诱导铁过载鼠肝细胞DNA损伤的研究

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海峡预防医学杂志 2010年第4期16卷 1-3,F0003页

作者：谢剑锋小路武彦菱川善隆宋宁林万松福建省疾病预防控制中心福州350001 日本国立长崎大学医学部福建医科大学基础医学院

[目的]研究黄曲霉素B1(AFB1)对正常鼠与铁过载鼠肝细胞DNA损伤情况。[方法]采用8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)和AFB1单克隆抗体,通过免疫组化方法分析不同AFB1剂量组下两组鼠肝细胞DNA的损伤情况。[结果]AFB1诱导的DNA损伤主要发生在肝... 详细信息

[目的]研究黄曲霉素B1(AFB1)对正常鼠与铁过载鼠肝细胞DNA损伤情况。[方法]采用8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)和AFB1单克隆抗体,通过免疫组化方法分析不同AFB1剂量组下两组鼠肝细胞DNA的损伤情况。[结果]AFB1诱导的DNA损伤主要发生在肝门静脉区和胆管区,随剂量的加大损伤加重,且铁过载组DNA损伤大于正常组。[结论]铁过载可加重AFB1对鼠肝细胞的DNA损伤。

关键词：黄曲霉素B1 铁过载 8-羟基-2′-脱氧鸟苷免疫组化 DNA损伤

用原位缺日翻译法比较两种细胞死亡的DNA状态

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解剖学报 1994年第2期 207-207页

作者：牛建昭小路武彦中根一穗北京中医药大学组织学胚胎学教研室

用原位缺日翻译法比较两种细胞死亡的ＤＮＡ状态（北京中医药大学组织学胚胎学教研室．北京１０００２９牛建昭，小路武彦，中根一穗）ＤＮＡ断裂存在于不同细胞周期中（增殖、分化、死亡）。为研究不同组织细胞核内ＤＮＡ链切断（ＤＳ... 详细信息

用原位缺日翻译法比较两种细胞死亡的ＤＮＡ状态（北京中医药大学组织学胚胎学教研室．北京１０００２９牛建昭，小路武彦，中根一穗）ＤＮＡ断裂存在于不同细胞周期中（增殖、分化、死亡）。为研究不同组织细胞核内ＤＮＡ链切断（ＤＳＢ），我们采用了缺口翻译法（ＩＮＴ...

关键词： Fibronectin Laminin Neural tube defect Retinoic acid Immunohistochemistry Hamster

乙烯雌酚通过雌激素受体表达对男性生殖细胞影响的分析

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海峡预防医学杂志 2006年第4期12卷 47-47页

作者：安树才刘杰菱川善隆吴志仁小路武彦长崎大学医学院

[目的]精子形成过程中雌激素的细胞生物学作用目前为止已得到验证,本文通过乙烯雌酚的投药对男性生殖细胞产生的细胞凋亡和雌激素受体α和β之间的关系进行了研究。[方法]用DNA末端转移酶标记法检测细胞凋亡,用免疫组织化学和非放射性... 详细信息

[目的]精子形成过程中雌激素的细胞生物学作用目前为止已得到验证,本文通过乙烯雌酚的投药对男性生殖细胞产生的细胞凋亡和雌激素受体α和β之间的关系进行了研究。[方法]用DNA末端转移酶标记法检测细胞凋亡,用免疫组织化学和非放射性原位杂交的方法检测蛋白表达和受体α和βmRNA。[结果]己烯雌酚浓度在100 ng和20 mg时,引起最大的促进细胞凋亡的产生,且雌激素受体α蛋白表达无变化,但雌激素受体β蛋白表达和mRNA基因表达下降明显。[结论]己烯雌酚诱发了男性生殖细胞的凋亡,且和浓度不相关,雌激素受体β的不同表达和细胞凋亡相关。

关键词：乙烯雌酚细胞凋亡雌激素受体α 雌激素受体β