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作者：封亮旗南方医科大学

学位级别：硕士

1.研究目的及意义角膜组织没有血管的透明组织。维持其透明性的一个很重要的原因是它没有血管。在感染、外伤、免疫反应、排斥反应、佩戴角膜接触镜、碱烧伤、基质溃疡、角膜缘干细胞病变等病理情况下,从角膜缘血管网形成的新生血管逐... 详细信息

1.研究目的及意义角膜组织没有血管的透明组织。维持其透明性的一个很重要的原因是它没有血管。在感染、外伤、免疫反应、排斥反应、佩戴角膜接触镜、碱烧伤、基质溃疡、角膜缘干细胞病变等病理情况下,从角膜缘血管网形成的新生血管逐渐侵入角膜,从而形成角膜新生血管(corneal neovascularization, CNV)。诚然,CNV在感染清除、伤口愈合等方面具有一定的积极作用。但是,CNV导致角膜的透明性降低,从而严重的影响视力,另外,CNV可破坏角膜正常微环境,使眼前节生理性的免疫豁免消失,因而成为角膜移植排斥反应的高危因素。因此,针对角膜新生血管的治疗业已成为眼科的研究热点。近年来的研究证实,血管抑素(angiostatin, AS)存在着明确的抗角膜新生血管形成的作用,角膜上皮细胞被证明可以分泌血管抑素,但在角膜受到损伤后分泌减少。另外,血管抑素被证实通过病毒载体或者局部运用可以抑制角膜新生血管形成。但相关作用机制研究的不足,影响着其最终运用于临床的进程。因此,阐明血管抑素抗角膜新生血管形成的机制,势必为其临床运用奠定坚实的基础,并产生巨大的社会和经济效益。 2.研究方法众所周知,蛋白质是一类重要的生物大分子,是生命活动的主要承担者。在蛋白质组(proteome)概念提出以后,蛋白质组学的研究取得了可喜的发展。相比较传统的只针对单一蛋白质的研究,蛋白质组学更加注重的是参与特定生理或病理状态的所有蛋白质种类及其与周围环境(分子)的关系。随着相关实验技术的发展,目前已有可能对细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同,相关蛋白质的分类和鉴定,尤其是蛋白质之间相互作用和蛋白质的功能进行探讨。因此,本课题拟以碱烧伤制备的角膜新生血管为基础,局部施加血管抑素,将角膜组织进行二维电泳,分离蛋白质并进行染色,凝胶图像分析系统对蛋白质点进行定量分析,从而明确局部施加血管抑素在抗角膜新生血管形成过程中的差异表达蛋白,进一步地,对其进行质谱分析,从而得到相关蛋白质的定性数据。 3.研究内容和过程 (1)实验动物及分组：本实验采用的是32只新西兰大白兔(购自南方医科大学动物中心),实验动物分为三组,A组为空白对照组：8只新西兰兔不做任何处理;B组为烧伤组：12只新西兰兔采用碱烧伤的方法建立角膜新生血管模型,术后第1天开始局部生理盐水点眼,每日3次,直至取角膜标本;C组为治疗组：12只新西兰兔采用同样方法建立角膜新生血管模型后,术后第1天开始局部用30μg/ml血管抑素(AS)点眼,每日3次,直至取角膜标本。 (2)角膜新生血管模型制作：碱烧伤法制备角膜新生血管模型：氯胺酮25mg/kg及氯丙嗪25mg/kg肌注新西兰兔全身麻醉,0.5%丁卡因表面麻醉,置开睑器充分暴露眼表,将浸有1.5mol/LNaOH液的10mm圆形滤纸片置于眼表中央,1.5min后取下,用50m1生理盐水冲洗眼表,滴妥布霉素眼液后涂妥布霉素眼膏。 (3)角膜新生血管的观察：术后观察角膜的新生血管,第16日使用裂隙灯(苏州66生产YZ5T型号)照相。角膜新生血管的检测：测量血管长度,以连续弯曲度小、新生血管朝向角膜混浊中心生长的最长血管为准,并计算角膜新生血管生长面积(A),按公式A=C/12×3.1416[r2-(r-1)2]。C为Nv累及角膜的圆周钟点数,1为新生血管从角膜缘深入角膜的长度,r为兔角膜半径,设为定值7mm。 (4)标本取材及全蛋白提取：术后3w取材。标本离体后迅速置入5ml冻存管,于液氮速冻后置入-80℃超低温冰箱保存备用。取-80℃保存的组织块,迅速研磨至细粉末状,加入裂解液匀浆、离心。采用Bradford定量法,计算样品蛋白质浓度。 (6)双向凝胶电泳(2-DE)：第一向(IPG-IEF)根据蛋白质等电点的不同进行等电聚焦,第二向(SDSPAGE)根据蛋白质相对分子质量大小分离样品,双向电泳后才用EMBL银染。 (7)图像分析和差异蛋白选取：将银染后的2-DE胶图扫描入电脑。应用ImageMaster2D软件分析每一张凝胶图像,计算图谱中所有蛋白质点的蛋白质相对含量,找出三块胶中均出现,并且有差异的蛋白。 (8)质谱分析：切取有差异的蛋白质点,行脱色、酶解、萃取样品,利用美国ABI4700MALDI-TOF-TOF质谱仪进行质谱分析。UV波长为355nm,重复速率为200HZ,加速电压为20000V,最优质量分辨率为1500Da。扫描质量范围为700-3200Da,收集信号。胰酶自切峰为内标校正质谱仪。所有实验样品的质谱图均以用默认模式获得。 (9)数据库检索：利用软件Mascot distiller过滤基线峰、识别信号峰。利用Matrixscience公司的Mascot软件搜索哺乳动物数据库,寻找匹配的相关蛋白质,同时查询其功能,来明确鉴定的蛋白质

关键词：血管抑素蛋白组学新生血管角膜

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脑栓通胶囊治疗非动脉炎性前部缺血性视神经病变的效果

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广东医学 2016年第11期37卷 1707-1709页

作者：黄创新封亮旗于强杨晖赵秀娟高杨东莞光明眼科医院广东东莞523000 中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室广州510000

目的研究脑栓通胶囊治疗非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)的效果。方法选取中山眼科中心或东莞光明眼科医院就诊的NAION患者,于发病急性期经常规治疗后,服用脑栓通胶囊≥6个月者为脑栓通组;选取同时期年龄、性别相匹配,但急性期... 详细信息

目的研究脑栓通胶囊治疗非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)的效果。方法选取中山眼科中心或东莞光明眼科医院就诊的NAION患者,于发病急性期经常规治疗后,服用脑栓通胶囊≥6个月者为脑栓通组;选取同时期年龄、性别相匹配,但急性期常规治疗结束后除对症治疗外无服用其他药物的患者作为对照组。比较两组患者治疗前后视力、视野MD值的改变情况。结果脑栓通组及对照组治疗后末次观察时视力、视野较发病时均有显著性提高(P0.05)。结论急性期常规治疗可显著改善NAION患者的中心视力及视野,加用脑栓通胶囊治疗6个月可更显著地改善视野。

关键词：前部缺血性视神经病变脑栓通胶囊最佳矫正视力视野

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光学相干断层扫描血管成像在康柏西普玻璃体腔内注射治疗特发性脉络膜新生血管中的应用

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吉林医学 2022年第2期43卷 497-500页

作者：封亮旗东莞光明眼科医院广东东莞523000

目的:对特发性脉络膜新生血管(ICNV)患者给予玻璃体腔内注射康柏西普治疗,并使用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)观察其临床疗效,评估OCTA在ICNV的诊断与随访中的应用价值。方法:纳入经OCTA、光学相干断层扫描(OCT)以及荧光素眼底血管造... 详细信息

目的:对特发性脉络膜新生血管(ICNV)患者给予玻璃体腔内注射康柏西普治疗,并使用光学相干断层扫描血管成像(OCTA)观察其临床疗效,评估OCTA在ICNV的诊断与随访中的应用价值。方法:纳入经OCTA、光学相干断层扫描(OCT)以及荧光素眼底血管造影(FFA)确诊为ICNV患者22例(22眼),给予玻璃体腔内注射10mg/ml康柏西普0.05 ml,并连续随访6个月。每次随访均进行OCTA和OCT复查,若出现ICNV病灶扩大则及时给予再次玻璃体腔内注射康柏西普。将患者首次诊断ICNV时的FFA与OCTA检查结果进行对比,分析这两种检查的一致性。将患者治疗前与随访结束时的最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中心厚度(CMT)以及OCTA所见的视网膜外层CNV面积和OCT所见的病灶厚度进行对比,分析治疗效果。最后,分析OCTA相对于传统检查方式的优势及其应用价值。结果:首次诊断ICNV时,OCTA检查结果中视网膜外层出现新生血管的位置和大小与FFA检查中的病灶形成对应,两者检查结果的一致性良好。患眼治疗前后的BCVA明显提升[logMAR:(0.49±0.39)vs(0.36±0.28),t=2.921,P=0.012],CMT明显降低[(285.7±50.7)μm vs(249.4±43.0)μm,t=2.608,P=0.035]。随访6个月时,OCTA的检查结果显示,17只患眼CNV面积减小,5只无明显变化。结论:OCTA可快速、清晰地显示视网膜及脉络膜各层血管,并且安全无创、结果可靠,相比传统FFA检查具有优势,对ICNV的诊断及随访观察具有重要的临床意义。

关键词：特发性脉络膜新生血管光学相干断层扫描血管成像康柏西普

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免散瞳眼底相机在糖尿病视网膜病变筛查的研究

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山西医药杂志 2018年第24期47卷 2945-2947页

作者：封亮旗王化峰刘园珍广东省东莞光明眼科医院门诊 523000

糖尿病发病率近年来不断上升,预计到2030年,糖尿病患者数将达到3.66亿[1]。糖尿病性视网膜病变是糖尿病的严重并发症之一,其致盲率高,约4.4%的糖尿病患者最终失明[2],2012年中国糖尿病性视网膜病变患病率Meta分析估计中国大陆地区糖尿... 详细信息

糖尿病发病率近年来不断上升,预计到2030年,糖尿病患者数将达到3.66亿[1]。糖尿病性视网膜病变是糖尿病的严重并发症之一,其致盲率高,约4.4%的糖尿病患者最终失明[2],2012年中国糖尿病性视网膜病变患病率Meta分析估计中国大陆地区糖尿病患者群中糖尿病性视网膜病变患病率为23%[3],并且糖尿病性视网膜病变一旦进入晚期,其治疗费用高,效果差,这将严重影响糖尿病患者的生活质量。通过早期诊断和早期治疗,绝大多数糖尿病患者可以避免失明。因此,糖尿病性视网膜病变的早期筛查有着显著的社会效益及经济效益。

关键词：糖尿病视网膜病变早期筛查糖尿病性视网膜病变相机眼底散瞳 Meta分析严重并发症

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血管抑素在眼科方面的应用

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临床眼科杂志 2012年第2期20卷 189-191页

作者：封亮旗刘海俊南方医科大学广州51051 解放军第421医院眼科

血管抑素(As)因为其特异性抑制血管内皮细胞增生的作用,自发现便受到了巨大的关注,其在肿瘤的抗血管治疗中已取得很大进展。近来血管抑素在眼部新生血管疾病的作用受到人们重视,本文对这方面的研究进展作以综述。

关键词：血管抑素新生血管眼

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不同浓度血管抑素抑制大鼠角膜血管的新生

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中国组织工程研究 2012年第24期16卷 4427-4431页

作者：刘子彬刘海俊封亮旗魏二霞许丹丹南方医科大学广东省广州市510515 解放军第421医院广东省广州市510318

背景:血管抑素在角膜中是否抑制组织中的新生血管生长尚不清楚。目的:观察血管抑素溶液对大鼠角膜新生血管生长的作用。方法:24只大鼠制备左眼碱烧伤角膜新生血管模型,随机抽签法分为4组,对照组给予生理盐水,25,50,75mg/LAS组分别给与25... 详细信息

背景:血管抑素在角膜中是否抑制组织中的新生血管生长尚不清楚。目的:观察血管抑素溶液对大鼠角膜新生血管生长的作用。方法:24只大鼠制备左眼碱烧伤角膜新生血管模型,随机抽签法分为4组,对照组给予生理盐水,25,50,75mg/LAS组分别给与25,50,75mg/LAS血管抑素溶液滴眼,4次/d至实验结束。结果与结论:造模后第3天各组角膜均可见少量血管新生,但对照组角膜新生血管生长较其他3组明显。3～7d,各组角膜新生血管生长速度加快,对照组角膜新生血管粗大。烧伤后14d,对照组角膜新生血管仍然粗大未见明显消退,各浓度组较前消退明显。碱烧伤后不同时间点各浓度组角膜新生血管面积较对照组少(P<0.05),75mg/LAS组碱烧伤14d各时间新生血管面积较其他3组减少(P<0.05)。Real-TimePCR结果显示:各浓度组间CD31mRNA表达差异均有显著性意义(P<0.01)。Westernblot结果显示血管抑素作用大鼠后,各浓度组角膜组织的CD31表达均较对照组降低,且随着血管抑素溶液浓度的增加而减少。提示血管抑素能够阻止角膜新生血管的生长。

关键词：角膜新生血管血管抑素 CD31 组织构建

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季节对老年性白内障患者术前结膜囊带菌的影响

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深圳中西医结合杂志 2017年第16期27卷 12-13页

作者：封亮旗吴启超东莞光明眼科医院广东东莞523000

目的:了解季节对东莞地区老年性白内障患者术前结膜囊带菌情况的影响。方法:选取2015年5月至2016年4月东莞光明眼科医院收治的2815例老年性白内障患者,术前对其做结膜囊细菌培养,并分成春夏组(5月~10月)及秋冬组(11月至次年4月)。结果:... 详细信息

目的:了解季节对东莞地区老年性白内障患者术前结膜囊带菌情况的影响。方法:选取2015年5月至2016年4月东莞光明眼科医院收治的2815例老年性白内障患者,术前对其做结膜囊细菌培养,并分成春夏组(5月~10月)及秋冬组(11月至次年4月)。结果:术前结膜囊细菌培养阳性率为27.21%,主要为革兰阳性球菌,春夏组细菌培养阳性率为24.38%,秋冬组阳性率为33.33%,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:老年性白内障患者术前结膜囊带菌率较高,并且季节因素对其带菌率有一定影响。

关键词：结膜囊细菌培养白内障老年人

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吲哚美辛在全视网膜光凝中超前镇痛的疗效观察

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中国现代药物应用 2019年第16期13卷 84-86页

作者：封亮旗陈奕辉邓国涛东莞光明眼科医院

目的分析吲哚美辛在全视网膜光凝(PRP)中超前镇痛的疗效。方法52例行PRP的糖尿病视网膜病变(DR,糖网)患者根据用药情况分为第1组与第2组,每组26例。PRP分2次完成,采取交叉设计。第1组患者第1次PRP前口服吲哚美辛,第2次PRP前口服安慰剂;... 详细信息

目的分析吲哚美辛在全视网膜光凝(PRP)中超前镇痛的疗效。方法52例行PRP的糖尿病视网膜病变(DR,糖网)患者根据用药情况分为第1组与第2组,每组26例。PRP分2次完成,采取交叉设计。第1组患者第1次PRP前口服吲哚美辛,第2次PRP前口服安慰剂;第2组患者第1次PRP前口服安慰剂,第2次PRP前口服吲哚美辛。将口服吲哚美辛的患者作为吲哚美辛组(第1组第1次PRP患者和第2组第2次PRP患者),将口服安慰剂的患者作为安慰剂组(第1组第2次PRP患者和第2组第1次PRP患者),比较安慰剂组和吲哚美辛组患者的治疗时长、激光数量、激光能量及术后疼痛程度、疼痛持续时间。结果安慰剂组和吲哚美辛组患者的治疗时长、激光数量、激光能量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。吲哚美辛组患者的术后疼痛程度分级情况优于安慰剂组,视觉模拟评分法(VAS)评分(4.31±1.35)分低于安慰剂组的(5.99±1.96)分,差异均具有统计学意义(P<0.05)。吲哚美辛组患者的术后疼痛持续时间短于安慰剂组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论吲哚美辛对PRP的超前镇痛有显著效果,值得临床推广。

关键词：吲哚美辛全视网膜光凝超前镇痛疼痛

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思维导图在眼底荧光血管造影患者健康教育中的应用

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医学理论与实践 2022年第15期35卷 2678-2680页

作者：李淑玲刘春霞苏珮施封亮旗吴江浩东莞光明眼科医院广东省东莞市523000

目的:探讨思维导图在眼底荧光血管造影患者健康教育中的应用。方法:选取在我院接受眼底荧光血管造影的200例患者作为观察对象,按随机数字表法分对照组和观察组,每组100例。对照组在检查前给予口头健康教育,观察组运用思维导图实施健康... 详细信息

目的:探讨思维导图在眼底荧光血管造影患者健康教育中的应用。方法:选取在我院接受眼底荧光血管造影的200例患者作为观察对象,按随机数字表法分对照组和观察组,每组100例。对照组在检查前给予口头健康教育,观察组运用思维导图实施健康教育。比较两组患者护理指导效果、患者配合度及眼部图像质量。结果:观察组患者护理指导效果显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);观察组患者的配合度评分为(2.89±0.31)分,高于对照组的(2.47±0.54)分,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组患者的眼部图像质量评分为(3.52±0.50),高于对照组的(3.00±0.40)分,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:思维导图运用于眼底荧光血管造影患者健康教育中可促进患者掌握造影相关内容,提升护理指导效果,提高患者主动配合的能动性,顺利完成检查,保证眼部图像质量,值得临床推广应用。

关键词：思维导图眼底荧光血管造影健康教育

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微脉冲激光治疗不同程度黄斑水肿的效果分析

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中国社区医师 2023年第13期39卷 23-25页

作者：封亮旗曹敏钟伟友邓国涛戴玲东莞光明眼科医院广东东莞523000

目的:分析微脉冲激光治疗不同程度黄斑水肿的效果。方法:选取2019年5月—2021年8月在东莞光明眼科医院就诊的因糖尿病视网膜病变和视网膜静脉阻塞引起黄斑水肿的50例(68眼)患者作为研究对象,根据黄斑中心凹厚度(CMT)分为轻度组、中度组... 详细信息

目的:分析微脉冲激光治疗不同程度黄斑水肿的效果。方法:选取2019年5月—2021年8月在东莞光明眼科医院就诊的因糖尿病视网膜病变和视网膜静脉阻塞引起黄斑水肿的50例(68眼)患者作为研究对象,根据黄斑中心凹厚度(CMT)分为轻度组、中度组、重度组。三组患者均行微脉冲激光光凝治疗,比较三组手术前后最佳矫正视力(BCVA)、CMT、6 mm视网膜容积(6 mm RV)。结果:治疗前后,三组BCVA,重度组CMT,中度组及重度组6 mm RV比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,轻度组和中度组CMT,轻度组6 mm RV均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:随着黄斑水肿的增加,微脉冲激光的治疗效果逐渐减弱。

关键词：微脉冲激光黄斑水肿黄斑中心凹厚度视网膜容积

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