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解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr小鼠CD4^+T细胞DNA甲基化的影响及与GRα表达的相关性研究

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浙江中医药大学学报 2015年第3期39卷 167-171页

作者：陈红波赵丹妮史佳丽张利棕寿旗扬马红珍范永升浙江中医药大学附属第一医院杭州310006 浙江中医药大学动物实验研究中心浙江中医药大学风湿病研究所

[目的]探讨解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平的影响及与糖皮质激素受体α(GRα)之间的关系。[方法]将24只6周龄SPF级MRL/lpr狼疮小鼠随机平均分为对照组和中药组。免疫磁珠技术分离出脾脏CD4+T细胞,采用Methyfl... 详细信息

[目的]探讨解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平的影响及与糖皮质激素受体α(GRα)之间的关系。[方法]将24只6周龄SPF级MRL/lpr狼疮小鼠随机平均分为对照组和中药组。免疫磁珠技术分离出脾脏CD4+T细胞,采用MethyflashTM总体DNA甲基化试剂盒检测CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平,实时定量PCR技术检测GRα、DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、生长停滞与DNA损伤诱导蛋白α(Gadd45α)m RNA表达水平。[结果]同对照组比较,中药组MRL/Lpr小鼠CD4+T细胞基因组DNA整体甲基化水平明显升高(P<0.05),DNMT1基因m RNA表达明显上升(P<0.05),Gadd45α基因m RNA表达明显下降(P<0.05),GRα基因m RNA表达明显升高(P<0.05)。[结论]解毒祛瘀滋阴方可以升高MRL/lpr狼疮小鼠CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平,同时可以上调GRαm RNA表达,但二者之间没有直接联系。解毒祛瘀滋阴方可能是通过其他效应基因实现DNA甲基化调控作用,而不是通过GRα基因。

关键词：系统性红斑狼疮 DNA甲基化糖皮质激素受体解毒祛瘀滋阴方

中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉小鼠免疫功能调节作用的比较

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中国比较医学杂志 2012年第9期22卷 16-20页

作者：傅惠英张利棕寿旗扬周卫民屠珏陈民利浙江中医药大学第二临床医学院杭州310053 浙江中医药大学动物实验研究中心杭州310053

目的观察中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对小鼠免疫功能的影响。方法分别给予中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉后,测定观察对小鼠碳粒廓清功能、迟发性变态反应、溶血素抗体、淋巴细胞增殖和NK细胞活性等的影响。结果 3.0 g/kg中国被毛孢和蝙蝠蛾拟... 详细信息

目的观察中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉对小鼠免疫功能的影响。方法分别给予中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉后,测定观察对小鼠碳粒廓清功能、迟发性变态反应、溶血素抗体、淋巴细胞增殖和NK细胞活性等的影响。结果 3.0 g/kg中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉可显著提高小鼠吞噬指数和半数溶血值(P<0.01)、显著提高T、B淋巴细胞增殖能力(P<0.01,P<0.05)、显著提高NK细胞活性(P<0.05),0.5～1.5 g/kg中国被毛孢都能显著抑制小鼠耳廓肿胀(P<0.01,P<0.05),同时还能抑制脾脏和胸腺增大(P<0.01,P<0.05)。结论中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉均具有免疫调节作用,而中国被毛孢免疫抑制及增强天然免疫系统作用要优于蝙蝠蛾拟青霉,而对适应性免疫系统增强作用蝙蝠蛾拟青霉优于中国被毛孢。

关键词：中国被毛孢蝙蝠蛾拟青霉小鼠免疫功能调节

解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr狼疮鼠CD4^+ T细胞DNA甲基化敏感基因表达的影响

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上海中医药大学学报 2017年第1期31卷 57-62页

作者：陈红波张利棕寿旗扬马红珍高祥福范永升浙江中医药大学附属第一医院肾病科浙江杭州310006 浙江中医药大学动物实验中心浙江杭州310053 浙江中医药大学风湿病研究所浙江杭州310053

目的:观察解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr狼疮鼠CD4^+T细胞DNA甲基化敏感基因白介素10(IL-10)、蛋白磷酸酶2Ac(protein phosphatase 2Ac,PP2Ac)、CD70表达水平的影响。方法:40只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为对照组和解毒祛瘀滋阴方中药组,分别予... 详细信息

目的:观察解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr狼疮鼠CD4^+T细胞DNA甲基化敏感基因白介素10(IL-10)、蛋白磷酸酶2Ac(protein phosphatase 2Ac,PP2Ac)、CD70表达水平的影响。方法:40只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为对照组和解毒祛瘀滋阴方中药组,分别予解毒祛瘀滋阴方中药和生理盐水灌胃8周。干预结束后,观察小鼠皮损及血清抗ds DNA抗体、C3浓度、尿蛋白水平变化;HE染色及荧光染色后观察肾脏病理改变;荧光定量PCR检测小鼠脾脏CD4^+T细胞甲基化敏感基因CD70、PP2Ac、IL-10 mRNA表达水平。结果:与对照组比较,中药组小鼠血清抗ds DNA抗体、C3浓度和肾脏病理损伤明显改善,CD70、PP2Ac和IL-10的mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:解毒祛瘀滋阴方具有对MRL/lpr狼疮鼠的治疗作用,其作用机制可能与其抑制下游甲基化敏感基因CD70、PP2Ac、IL-10的过度表达有关。

关键词：系统性红斑狼疮 CD4+T细胞甲基化敏感基因解毒祛瘀滋阴方小鼠

肾上腺切除肾阳虚大鼠佐剂性关节炎模型的建立

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甘肃中医学院学报 2010年第4期27卷 7-9页

作者：寿旗扬丁科周卫民朱科燕方明笋陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心浙江杭州310053 浙江省中医院浙江杭州310006

目的观察肾上腺切除导致下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能缺陷对大鼠佐剂性关节炎的影响。方法大鼠单、双侧肾上腺切除后,用完全弗氏佐剂诱导大鼠产生佐剂性关节炎,观察大鼠足趾肿胀度和血清中皮质醇水平的变化。结果大鼠双侧肾上腺切除后... 详细信息

目的观察肾上腺切除导致下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能缺陷对大鼠佐剂性关节炎的影响。方法大鼠单、双侧肾上腺切除后,用完全弗氏佐剂诱导大鼠产生佐剂性关节炎,观察大鼠足趾肿胀度和血清中皮质醇水平的变化。结果大鼠双侧肾上腺切除后,血清中皮质醇水平明显降低(P﹤0.01),且双侧切除组大鼠足趾肿胀度比假手术和单侧切除组大鼠明显升高(P﹤0.01)。结论双侧肾上腺切除的肾阳虚大鼠模型与佐剂性关节炎病证结合后,能促进佐剂性关节炎的发病程度。

关键词：佐剂性关节炎肾阳虚肾上腺切除皮质醇

高热量高蛋白饮食诱导GK大鼠糖尿病肾病模型的建立

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中国比较医学杂志 2012年第4期22卷 53-57,I0006页

作者：徐孝平寿旗扬陈方明周卫民蔡月琴陈民利浙江大学动物科学学院杭州310029 浙江中医药大学动物实验研究中心杭州310053

目的运用高热量高蛋白饮食诱导GK大鼠2型糖尿病肾病模型的建立,并探讨其可能的作用机制。方法 28周龄GK大鼠24只,随机分成对照组、模型组,每组各12只,模型组给予高热量高蛋白饮食,对照组给予正常饮食,共8周。于第0、4、8周观察24 h尿微... 详细信息

目的运用高热量高蛋白饮食诱导GK大鼠2型糖尿病肾病模型的建立,并探讨其可能的作用机制。方法 28周龄GK大鼠24只,随机分成对照组、模型组,每组各12只,模型组给予高热量高蛋白饮食,对照组给予正常饮食,共8周。于第0、4、8周观察24 h尿微量白蛋白、24 h尿蛋白、尿肌酐、尿微量白蛋白/尿肌酐比值水平;于第0、8周观察空腹血糖和血清肌酐、尿素氮、总胆固醇、甘油三脂、一氧化氮水平;实验结束时取双肾称重并计算肾肥大指数,取肾组织观察病理形态学变化,检测肾组织钠钾ATP酶活性。结果与对照组比,模型组大鼠24 h尿微量白蛋白、24 h尿蛋白、尿微量白蛋白/尿肌酐比值、空腹血糖、总胆固醇、甘油三脂、一氧化氮、肾肥大指数水平和肾组织钠钾ATP酶活性显著提高,模型组肾小球体积增大,系膜基质增生,基底膜增厚明显。结论运用高热量高蛋白饮食诱导GK大鼠可成功建立2型糖尿病肾病模型。血糖血脂的上升是糖尿病肾病形成的重要因素,同时钠钾ATP酶活性增强进一步损伤肾小管功能,一氧化氮升高促使肾小球高灌注、高滤过,也是加速GK大鼠肾病形成的原因。

关键词： 2型糖尿病肾病 GK大鼠高热量高蛋白饮食

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糖尿病血糖波动模型致大鼠海马体的炎性损伤

中国比较医学杂志 2013年第4期23卷 37-43页

作者：王辉蔡月琴李守业徐志伟刘琼寿旗扬李昌煜浙江中医药大学杭州310053 浙江医学高等专科学校杭州310053

目的探讨血糖波动对糖尿病大鼠海马体造成的炎性损伤。方法用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)和葡萄糖制备SD大鼠糖尿病模型(M组)和持续高血糖模型(MS组),并错时腹腔注射给予葡萄糖、胰岛素制备糖尿病血糖波动大鼠模型(MF组)。血糖波动... 详细信息

目的探讨血糖波动对糖尿病大鼠海马体造成的炎性损伤。方法用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)和葡萄糖制备SD大鼠糖尿病模型(M组)和持续高血糖模型(MS组),并错时腹腔注射给予葡萄糖、胰岛素制备糖尿病血糖波动大鼠模型(MF组)。血糖波动造模第6周时,测定大鼠一般生理学指标,血糖(glucose,Glu)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL-C)和高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-C)等血液生化指标;同时采用荧光定量PCR法检测大鼠海马体中IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α等炎性因子mRNA的表达,Morris水迷宫试验检测血糖波动对糖尿病大鼠学习和空间记忆功能的影响。结果 (1)血糖波动造模第6周时,M组、MS组及MF组大鼠体质量显著低于N组(P0.01)。(2)尾静脉注射STZ 1周后,M组、MS组、MF组的Glu、TG、LDL-C都有显著性的提高(P0.05)。其中,血糖波动模型MF组IL-1β和TNF-α水平的变化最大,达到极显著水平(P0.05)。结论相较急性高血糖和慢性持续性高血糖而言,波动性高血糖对大脑海马体造成的炎性损伤以及功能影响更为严重。

关键词：血糖波动糖尿病海马体炎性损伤大鼠

土茯苓对肾性高血压大鼠血液流变学和氧化应激的影响

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浙江中医药大学学报 2012年第7期36卷 803-804,808页

作者：张利棕寿旗扬王德军方明笋周卫民蒋剑平朱科燕陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心杭州310053 浙江省中医院制剂室

[目的]探讨土茯苓对肾性高血压大鼠(Renal hypertensive rats,RHR)血液流变学和氧化应激的影响。[方法]用两肾两夹法制备大鼠高血压模型,将造模成功的大鼠按收缩压分组,随机分成模型(生理盐水10ml·kg^(-1))组、高(土茯苓6.0g·kg^(-1)... 详细信息

[目的]探讨土茯苓对肾性高血压大鼠(Renal hypertensive rats,RHR)血液流变学和氧化应激的影响。[方法]用两肾两夹法制备大鼠高血压模型,将造模成功的大鼠按收缩压分组,随机分成模型(生理盐水10ml·kg^(-1))组、高(土茯苓6.0g·kg^(-1))、中(土茯苓3.0g·kg^(-1))、低(土茯苓1.5g·kg^(-1))剂量组和阳性(卡托普利5.0mg·kg^(-1))组,另取同批次经手术处理但未狭窄肾动脉的10只大鼠为假手术组(生理盐水10mL·kg^(-1));试验期间各组经口灌胃给予相应药物,1次/d,连续4周。末次给药后,禁食不禁水12h,取血测定试验大鼠血液流变学和氧化应激的指标。[结果]各给药组全血黏度(高、中、低切)、红细胞聚集指数、血沉方程K值、红细胞计数、红细胞电泳时间均不同程度地降低,其中高剂量组有明显降低(P<0.05);高、中剂量组SOD、GSH含量明显增加(P<0.01,P<0.05)。[结论]土茯苓对RHR具有降低血液黏度和抗氧化应激的作用。

关键词：土茯苓 RHR 血液流变学氧化应激

抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和自由基代谢的影响

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浙江中医药大学学报 2009年第6期33卷 751-753页

作者：陶涛潘永明冷晓霞寿旗扬朱科燕谢日青杨玉伟陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心(比较医学研究中心) 杭州310053

[目的]观察抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和脑自由基代谢的影响。[方法]取健康Wistar大鼠72只随机分为空白对照组、模型对照组、抗衰老片高、中、低剂量组、六味地黄丸组和首乌延寿片组。采用皮下注射D-半乳糖100mg/kg,连续造模49天,建立... 详细信息

[目的]观察抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和脑自由基代谢的影响。[方法]取健康Wistar大鼠72只随机分为空白对照组、模型对照组、抗衰老片高、中、低剂量组、六味地黄丸组和首乌延寿片组。采用皮下注射D-半乳糖100mg/kg,连续造模49天,建立大鼠衰老模型,各给药组在造模同时给予相应的药物,观察大鼠一般情况和体重变化,用水迷宫测试空间行为记忆能力,并测定脑组织自由基代谢SOD、MDA、GSH-Px、Na^+-K^+-ATPase、Ca^(++)-Mg^(++)-ATPase、NO和TChE的变化。[结果]与空白对照组比,模型对照组体重增长率下降(P<0.01),脑组织中SOD、Na^+-K^+-ATPase、Ca^(++)-Mg^(++)-ATPase和GSH-Px活力下降,MDA、NO和TChE均明显升高,水迷宫实验中探索路径和搜台潜伏期显著增加。给予不同剂量的抗衰老片、六味地黄丸和首乌延寿片后,能显著提高衰老大鼠体重的增长率,提高脑组织中SOD、Na^+-K^+-ATPase、Ca^(++)-Mg^(++)-ATPase和GSH-Px活力,显著降低MDA、NO含量和TChE活性,缩短衰老大鼠在水迷宫实验的探索路径和搜台潜伏期。[结论]抗衰老片可改善衰老大鼠的学习记忆能力,增强记忆的功能,延缓自由基造成脑组织的脂质过氧化,抗衰老的作用机制可能与抑制体内脂质过氧化过程有关。

关键词：抗衰老片学习记忆自由基代谢乙酰胆碱酯酶

老年SD大鼠的血液流变学与相关生化指标的研究

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实验动物科学与管理 2005年第2期22卷 1-3页

作者：吕建敏王德军寿旗扬林琳周卫民陈民利浙江中医学院动物实验研究中心杭州310053

目的　了解老年大鼠的血液学特性,测定老年与成年SD大鼠的血液流变学各项参数和血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、葡萄糖(GLU)等五项生化指标,并比较二者差异。方法　选用2 0只老年SD大鼠(SPF级,1 5... 详细信息

目的　了解老年大鼠的血液学特性,测定老年与成年SD大鼠的血液流变学各项参数和血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、葡萄糖(GLU)等五项生化指标,并比较二者差异。方法　选用2 0只老年SD大鼠(SPF级,1 5月龄)和2 0只成年SD大鼠(SPF级,3月龄) ,用LBY -N6B型全自动模块式血液流变仪进行血液流变学的分析,用半自动生化仪测定各项生化指标。结果　老年SD大鼠的全血液粘度、全血还原粘度、红细胞聚集指数、红细胞电泳指数、总胆固醇(TC)和丙二醛(MDA)等指标显著高于成年大鼠(P <0 . 0 5 ,P <0 . 0 1 )。结论　老年SD大鼠的血液流变学变化规律和一些与衰老相关的生化指标与人类存在一定的相似性。

关键词：老年SD大鼠血液流变学生化指标