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支原体感染与肿瘤

癌症 2004年第5期23卷 602-604页

作者：宁金鹰寿成超北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所生化与分子生物学实验室北京100034

支原体是广泛存在于自然界的条件致病微生物,可能是唯一可以与真核生物共生,并可与哺乳动物细胞长期相互作用的原核生物。多种不同的肿瘤组织中可检测到支原体的存在,某些支原体的持续感染可导致哺乳动物细胞的转化、上调癌基因的表达... 详细信息

支原体是广泛存在于自然界的条件致病微生物,可能是唯一可以与真核生物共生,并可与哺乳动物细胞长期相互作用的原核生物。多种不同的肿瘤组织中可检测到支原体的存在,某些支原体的持续感染可导致哺乳动物细胞的转化、上调癌基因的表达并引起肿瘤细胞生物学行为的改变,提示支原体感染与肿瘤的发生有潜在的相关性。

关键词：支原体感染肿瘤原核生物持续感染癌基因基因表达

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酪氨酸磷酸酶PRL-3与肿瘤转移

中华肿瘤杂志 2007年第1期29卷 1-3页

作者：彭丽容寿成超北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所生化科 100036

肿瘤转移是恶性肿瘤最具破坏性的特征，也是癌症患者的主要死因之一。经过研究者们多年的努力，对肿瘤转移的过程有了较为清晰的了解，开始以一些关键分子，如血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等作为治疗... 详细信息

肿瘤转移是恶性肿瘤最具破坏性的特征，也是癌症患者的主要死因之一。经过研究者们多年的努力，对肿瘤转移的过程有了较为清晰的了解，开始以一些关键分子，如血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等作为治疗的靶点，但是，目前对肿瘤转移及肿瘤复杂本质的认识还不足于取得治疗上的突破。因而，更为深入地研究肿瘤转移的分子机理并鉴定转移特异标志物一直是肿瘤研究中的热点和重点。

关键词：酪氨酸磷酸酶PRL-3 肿瘤转移蛋白质酪氨酸磷酸酶

P37腺病毒表达载体的构建及对乳癌细胞的促迁移作用

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生物化学与生物物理进展 2007年第11期34卷 1147-1151页

作者：龚曼曼孟麟寿成超北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所生化与分子生物学实验室北京100036

胃癌组织中存在着较高的猪鼻支原体感染率,而P37是猪鼻支原体的主要免疫原.以往研究表明,P37能抑制肿瘤细胞的黏附,促进肿瘤细胞浸润和转移.为了更好地研究P37在肿瘤发生和转移中的功能,通过基因克隆的方法,利用Ad-easy体系,在细菌BJ518... 详细信息

胃癌组织中存在着较高的猪鼻支原体感染率,而P37是猪鼻支原体的主要免疫原.以往研究表明,P37能抑制肿瘤细胞的黏附,促进肿瘤细胞浸润和转移.为了更好地研究P37在肿瘤发生和转移中的功能,通过基因克隆的方法,利用Ad-easy体系,在细菌BJ5183中同源重组后,转染293细胞,成功包装出重组P37腺病毒.它能有效感染乳腺癌细胞BICR.通过RT-PCR和蛋白质印迹检测表明,感染重组P37腺病毒后的BICR细胞能大量表达并分泌P37蛋白.运用该腺病毒体系进行细胞迁移实验表明,P37能显著增强BICR细胞的体外迁移能力.

关键词：腺病毒支原体 P37 肿瘤迁移

抑制和激活蛋白1(Rap1)单克隆抗体的制备和鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第3期31卷 397-401页

作者：孟麟寿成超廉沈沂北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学实验室恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室

目的制备并鉴定人端粒相关蛋白抑制和激活蛋白1(Rap1)的单克隆抗体。方法用重组原核人Rap1蛋白免疫BALB/c小鼠;细胞融合后,间接ELISA筛选阳性杂交瘤,建立分泌抗人Rap1蛋白单克隆抗体(m Ab)的杂交瘤细胞株,并进行效价测定和特异性鉴定。... 详细信息

目的制备并鉴定人端粒相关蛋白抑制和激活蛋白1(Rap1)的单克隆抗体。方法用重组原核人Rap1蛋白免疫BALB/c小鼠;细胞融合后,间接ELISA筛选阳性杂交瘤,建立分泌抗人Rap1蛋白单克隆抗体(m Ab)的杂交瘤细胞株,并进行效价测定和特异性鉴定。结果制备并获得1株稳定分泌抗人Rap1蛋白m Ab的杂交瘤细胞株。ELISA测定腹水效价高达1∶10 000以上。Western blot法、免疫沉淀和免疫荧光染色证实该m Ab能特异性识别人Rap1蛋白并可用于上述不同检测。结论成功制备获得了亲和力高、特异性好的抗人端粒相关蛋白Rap1的m Ab。

关键词：抑制和激活蛋白1(Rap1) 单克隆抗体鉴定

抗p185^(erbB2)单抗的制备及其生物学活性

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北京大学学报（医学版） 2003年第2期35卷 154-158页

作者：韩梅姜北海吴健寿成超北京大学临床肿瘤学院(北京市肿瘤防治研究所)生物化学与分子生物学实验室

目的 :制备抗 p185 erbB2 单克隆抗体 ,并研究其对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的结合及生长抑制作用。为后续工作奠定基础。方法 :用NIH3T3 erbB2细胞免疫BALB/c小鼠 ,制备抗p185 erbB2 单克隆抗体。经ELISA、免疫沉淀、Westernblot及免... 详细信息

目的 :制备抗 p185 erbB2 单克隆抗体 ,并研究其对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的结合及生长抑制作用。为后续工作奠定基础。方法 :用NIH3T3 erbB2细胞免疫BALB/c小鼠 ,制备抗p185 erbB2 单克隆抗体。经ELISA、免疫沉淀、Westernblot及免疫组化检测单抗的结合特异性。并用MTT比色法检测所获抗体对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的生长抑制作用。结果 :经筛选获得 1株对表达 p185 erbB2 细胞反应阳性 ,不表达 p185 erbB2 细胞反应阴性的单克隆抗体1H3 ;免疫沉淀、Westernblot均表明 1H3可与p185 erbB2 分子特异性结合 ;免疫组化结果显示 1H3对c erbB2阳性的乳癌组织呈特异性着染 ;MTT比色法检测表明 1H3对不同的 p185 erbB2 阳性肿瘤细胞均有不同程度的生长抑制作用。结论 :单克隆抗体 1H3能与p185 erbB2 特异结合 ,并可不同程度地抑制NIH3T3 erbB2或SKBR3细胞的生长 ,除可应用于临床对 p185 erbB2 的检测外 ,尚具有肿瘤生物治疗的潜在应用开发价值。

关键词： p185^erbB2 抗体单克隆/生物合成抗体肿瘤/生物合成肿瘤细胞培养的/药物作用

小鼠PRL-3表达载体的构建及对乳腺癌D2F2细胞小鼠移植瘤的治疗作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第3期20卷 266-271页

作者：曹燕飞吕娟黄昊寿成超北京大学肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学研究室恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室长治医学院生物化学教研室北京100142 首都医科大学附属北京朝阳医院检验科山西长治046000

目的:探讨靶向小鼠肝细胞再生磷酸酶-3(mouse phosphatase of regenerating liver-3,mPRL-3)的DNA疫苗对小鼠乳腺癌D2F2细胞体内生长的抑制作用。方法:构建靶向mPRL-3的真核表达载体pVAX1-mPRL-3,并转染至鹌鹑肌成纤维细胞QM7内,Western blotting检测mPRL-3蛋白在QM7细胞中的表达;通过重组慢病毒Lv-mPRL-3或对照载体Lv-Ctrl感染小鼠乳癌D2F2细胞,分别建立高表达mPRL-3的mPRL-3-D2F2细胞或对照NC-D2F2细胞,Western blotting检测小鼠乳腺癌D2F2细胞中mPRL-3蛋白的表达。BALB/c小鼠左侧乳腺脂肪垫下分别接种mPRL-3-D2F2和NC-D2F2细胞后,通过基因枪接种pVAX1-mPRL-3疫苗(mPRL-3-D2F2/pVAX1-mPRL-3),同时设立疫苗对照组(mPRL-3-D2F2/pVAX1-Ctrl)和细胞对照组(NC-D2F2/pVAX1-mPRL-3),检测小鼠的肿瘤体积及生存期。结果:pVAX1-mPRL-3质粒经酶切鉴定及测序验证均正确,并能在QM7细胞中表达。Western blotting检测结果显示,慢病毒感染的mPRL-3-D2F2细胞中mPRL-3蛋白过表达,而NC-D2F2细胞中不表达mPRL-3蛋白。荷瘤小鼠经pVAX1-mPRL-3 DNA疫苗免疫,其肿瘤体积明显低于对照组[(835.3±509.8)vs(1 543.0±578.4)mm3,P<0.01],且pVAX1-mPRL-3疫苗能显著延长荷瘤小鼠的生存期(中位生存期55.5 vs 38 d,P<0.05)。结论:基因枪接种的靶向mPRL-3的DNA疫苗能抑制高表达mPRL-3的小鼠乳腺癌D2F2细胞移植瘤的生长,并延长荷瘤小鼠生存期,提示其对mPRL-3阳性肿瘤有潜在的治疗作用。

关键词：小鼠肝细胞再生磷酸酶-3 小鼠乳腺癌 D2F2细胞 DNA疫苗基因枪

乙酰转移酶基因NAA10的生物学功能及其在肿瘤中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2013年第10期29卷 902-909页

作者：闵力曾妍寿成超北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学研究室恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142

N端乙酰转移酶A(N-acetyltransferase A,NatA)复合体是真核生物最主要的N端氨基酸α位乙酰转移酶,N端α位乙酰转移酶10基因(N-α-acetyltransferase 10,NAA10)编码的N端α位乙酰转移酶10蛋白(N-α-acetyltransferase 10 protein,Naa10p)是NatA的催化亚基.Naa10p具备新生蛋白质N端氨基酸α位乙酰化活性、成熟蛋白质Lys残基ε位乙酰化活性以及对部分转录因子的协同调节作用.Naa10p能够通过调节细胞周期促进细胞增殖,通过调节雷帕霉素靶蛋白(mechanistic target of rapamycin,mTOR)通路促进细胞自噬,并通过多种不同的分子信号通路抑制细胞运动能力.根据乙酰化底物的不同,Naa10p还在细胞凋亡的调控中起双重作用.Naa10p参与的生物学过程还涉及血管生成和神经发育等.Naa10p在多种癌症组织中呈过表达,但其预后意义随肿瘤不同而有较大差别.对Naa10p的生理生化研究必将使我们对细胞的生理病理学过程及其机制的了解更加深入全面.本文将从蛋白质结构、机制功能及临床意义等不同角度系统地阐述NAA10的研究现状与进展.

关键词： N端α位乙酰转移酶10基因(NAA10) 乙酰转移酶蛋白质修饰肿瘤

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HER-2/neu肿瘤疫苗的研究进展

中国肿瘤生物治疗杂志 2010年第2期17卷 221-226页

作者：赵丽丽姜北海寿成超北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所生化与分子生物学实验室恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142

原癌基因HER-2/neu在多种恶性肿瘤中有扩增及过表达,近30%的原发性乳腺癌患者有HER-2/neu过表达。针对HER-2靶点的特异性人源化抗体曲妥株单抗(trastuzumab;又名赫赛汀,Herceptin)在上世纪90年代已用于临床治疗。目前针对HER-2的肽疫苗... 详细信息

原癌基因HER-2/neu在多种恶性肿瘤中有扩增及过表达,近30%的原发性乳腺癌患者有HER-2/neu过表达。针对HER-2靶点的特异性人源化抗体曲妥株单抗(trastuzumab;又名赫赛汀,Herceptin)在上世纪90年代已用于临床治疗。目前针对HER-2的肽疫苗、蛋白疫苗、细胞疫苗、DC相关疫苗、以及DNA疫苗等的研究,均已取得一定进展,如小肽E75(p369-399)与GM-CSF联合应用,在HLA-A2(+)/A3(+)乳腺癌患者的Ⅱ期临床试验中显示出一定疗效;针对编码HER-2的DNA疫苗已经进入临床试验阶段,这些疫苗均有可能成为乳腺癌治疗的又一个重要手段。但这些疫苗距临床实际使用尚有一定的距离,有许多问题有待解决和需要进一步的临床验证。

关键词：肿瘤 HER-2/neu 疫苗曲妥株单抗

分子佐剂TBhsp和MT在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体制备中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第6期30卷 614-617,626页

作者：曹燕飞吕娟孟麟曲立科寿成超北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学研究室恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室长治医学院生物化学教研室北京100142 首都医科大学附属北京朝阳医院检验科山西长治046000

目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp-PRL-3和pET28a-TBhsp-PRL-3-MT,并纯化其表达蛋白,分别免疫BALB/c小鼠,ELISA检测并比较各组的抗血清效价,选取效价最高的小鼠,采用杂交瘤技术制备PRL-3 mAb,并进行类和亚类鉴定。结果成功构建了上述4种PRL-3相关的重组表达质粒,并表达纯化出相应的融合蛋白,其中PRL-3-MT融合蛋白免疫组抗体效价高于其他组;用该组小鼠进行细胞融合并筛选获得均为IgG类的10株分泌PRL-3 mAb的细胞株。结论 MT在PRL-3 mAb制备中可以发挥较为明显的免疫佐剂作用。

关键词：肝细胞再生磷酸酶-3 结核分枝杆菌热休克蛋白结核分枝杆菌T细胞刺激表位