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熊胆粉对H_2O_2所致的PC12细胞凋亡的保护作用及机制

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中华中医药杂志 2014年第1期29卷 55-59页

作者：富苏范吉平中国中医科学院眼科医院北京100040 中国中医科学院北京100700

目的:探讨熊胆粉对H2O2所致的PC12细胞凋亡的保护作用及机制。方法:PC12细胞常规培养后,首先通过MTT检测细胞存活率的方法进行H2O2损伤模型的摸索和熊胆粉药物浓度的筛选;确定造PC12细胞损伤的H2O2浓度和熊胆粉的安全作用浓度后,将处于... 详细信息

目的:探讨熊胆粉对H2O2所致的PC12细胞凋亡的保护作用及机制。方法:PC12细胞常规培养后,首先通过MTT检测细胞存活率的方法进行H2O2损伤模型的摸索和熊胆粉药物浓度的筛选;确定造PC12细胞损伤的H2O2浓度和熊胆粉的安全作用浓度后,将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组、模型组和不同剂量熊胆粉组。用200μmol/L H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞存活率、Hoechst33342荧光核染色观察细胞凋亡形态学改变、流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率、Western blot方法检测与细胞凋亡线粒体途径密切相关的蛋白CytC和Caspase-3表达的变化。结果:200μmol/L H2O2诱导PC12细胞损伤明显,浓度小于等于100μmol/L的熊胆粉浓度对正常PC12细胞的存活率没有抑制作用。与模型组比较,熊胆粉组PC12细胞存活率显著提高(P<0.01),凋亡率显著下降(P<0.01),Cytc和Caspase-3的表达显著减少(P<0.01),其作用与剂量有关。结论:熊胆粉可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制细胞凋亡线粒体途径中凋亡相关蛋白CytC和Caspase-3的表达有关。

关键词： H2O2 PC12细胞细胞凋亡线粒体熊胆粉 CytC Caspase-3

通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡及缺血半暗带CytC、caspase-9和caspase-3表达的影响

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中华中医药杂志 2013年第5期28卷 1194-1198页

作者：富苏范吉平北京中医药大学东直门医院北京100700 中国中医科学院北京100700

目的:探讨通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡的影响和可能机制。方法:98只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(14只),假手术组(14只),造模组(70只),其中造模组通过永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)制备脑缺血损伤模型,待大鼠清醒后,根据l... 详细信息

目的:探讨通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡的影响和可能机制。方法:98只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(14只),假手术组(14只),造模组(70只),其中造模组通过永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)制备脑缺血损伤模型,待大鼠清醒后,根据longa评分(≥2分)随机分层分为模型组、阳性药尼莫地平组、通络化痰高、中、低剂量组(16.2、32.4、64.8mg/mL),共5组,每组14只,分别进行灌胃治疗。并于术后第1、2、3、5、7天行Narrow-Alley corner Test检测脑缺血损伤大鼠神经功能的改变,术后第8天予4%多聚甲醛(pH 7.0)灌注固定后断头取脑,利用TUNEL法测定缺血半暗带神经元细胞凋亡水平的变化,利用免疫组化技术测定通络化痰胶囊对缺血半暗带CytC、caspase-9和caspase-3表达的影响。结果:与正常对照组和假手术组比较,模型组大鼠Narrow-Alley corner Test得分显著增加(P<0.01),尼莫地平组和通络化痰胶囊中剂量组得分显著降低(P<0.01,P<0.05);模型组大鼠缺血半暗带神经元细胞凋亡增多、CytC、caspase-9和caspase-3表达增加(P<0.01),尼莫地平组及通络化痰胶囊组较模型组缺血半暗带神经元细胞凋亡减轻,CytC、caspase-9和caspase-3表达减少(P<0.01)。结论:通络化痰胶囊可促进脑缺血损伤大鼠损伤后神经功能障碍的恢复,其机制可能与通络化痰胶囊减少细胞凋亡线粒体途径相关的CytC、caspase-3和caspase-9表达从而减少缺血半暗带神经元细胞凋亡水平有关。

关键词：脑缺血损伤细胞凋亡通络化痰胶囊细胞色素C 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3

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中医药治疗甲状腺相关眼病的研究进展

中国中医眼科杂志 2022年第10期32卷 837-840页

作者：富苏孙睦许菲中国中医科学院眼科医院北京100040

甲状腺相关眼病(TAO)是临床常见的与自身免疫相关的眼眶疾病,西医对本病的发病机制尚不完全明确,治疗手段有限,且有一定的副作用。中医将本病归属于“鹘眼凝睛”的范畴,在中医辨证论治和整体观的指导下,中医各家对本病的治疗积累了丰富... 详细信息

甲状腺相关眼病(TAO)是临床常见的与自身免疫相关的眼眶疾病,西医对本病的发病机制尚不完全明确,治疗手段有限,且有一定的副作用。中医将本病归属于“鹘眼凝睛”的范畴,在中医辨证论治和整体观的指导下,中医各家对本病的治疗积累了丰富而独特的经验。近年来,临床研究为探讨本病的中医病因病机提供了思路和方法,也证实了中医药辨证内治、中医药外治法和中西医结合疗法对本病有良好的治疗效果。本文将对中医药治疗TAO的经验及临床研究进展进行总结归纳。

关键词：甲状腺相关眼病病因病机辨证论治

中药脑复聪对糖尿病大鼠学习记忆能力及海马CA1区胰岛素样生长因子Ⅰ含量的影响

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中国医科大学学报 2009年第9期38卷 677-680页

作者：富苏张孟仁北京中医药大学第一临床医学院中西医结合临床教研室北京100029 中国医学科学院北京协和医院中医科北京100730

目的探讨糖尿病认知功能障碍的发病机制及寻找有效的治疗用药。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、中药脑复聪高、中、低剂量治疗组。通过水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力,并于8周后取脑组织... 详细信息

目的探讨糖尿病认知功能障碍的发病机制及寻找有效的治疗用药。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、中药脑复聪高、中、低剂量治疗组。通过水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力,并于8周后取脑组织行胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)免疫组织化学染色。结果模型组水迷宫的潜伏期较正常组延长(P<0.01),海马CA1区内IGF-Ⅰ阳性细胞数目减少(P<0.01);脑复聪治疗组大鼠的水迷宫潜伏期均短于模型组(P<0.01),且与脑复聪剂量呈负相关(P<0.01),治疗组大鼠海马CA1区内IGF-Ⅰ阳性细胞数目均增多(P<0.01),且与脑复聪剂量呈正相关(P<0.01)。结论糖尿病大鼠存在学习记忆能力的下降及海马CA1区IGF-Ⅰ含量的减少,而海马CA1区IGF-Ⅰ含量的减少可能是糖尿病大鼠学习记忆能力的下降的机制之一;脑复聪可改善糖尿病大鼠学习记忆能力,其机制可能与增加海马CA1区IGF-Ⅰ的含量有关。

关键词：脑复聪糖尿病认知功能障碍胰岛素样生长因子Ⅰ

通络化痰胶囊对H2O2所致的PC12细胞凋亡的保护作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2013年第12期19卷 188-193页

作者：富苏范吉平王新志北京中医药大学东直门医院北京100700 中国中医科学院北京100700 河南中医学院第一附属医院:郑州450000

目的:探讨通络化痰胶囊对过氧化氢(H2O2)所致的大鼠嗜铬瘤细胞(PC12)细胞凋亡的保护作用及机制。方法:PC12细胞常规培养后,首先通过MTT检测细胞存活率的方法进行H2O2损伤模型的摸索和通络化痰胶囊药物浓度的筛选;确定造成PC12细胞损伤的... 详细信息

目的:探讨通络化痰胶囊对过氧化氢(H2O2)所致的大鼠嗜铬瘤细胞(PC12)细胞凋亡的保护作用及机制。方法:PC12细胞常规培养后,首先通过MTT检测细胞存活率的方法进行H2O2损伤模型的摸索和通络化痰胶囊药物浓度的筛选;确定造成PC12细胞损伤的H2O2浓度和通络化痰胶囊的安全作用浓度后,将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组、模型组和通络化痰胶囊6.25,12.5,25,50,100mg.L-15个治疗组。用200μmol.L-1H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞存活率、Hoechst33342荧光核染色观察细胞凋亡形态学改变、流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率、Western blot方法检测与细胞凋亡线粒体途径密切相关的蛋白细胞色素C(CytC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的变化。结果:200μmol.L-1H2O2诱导PC12细胞损伤明显,浓度小于等于100 mg.L-1的通络化痰胶囊浓度对正常PC12细胞的存活率没有抑制作用。与模型组比较,各通络化痰治疗组PC12细胞存活率提高(P<0.01),凋亡率下降(P<0.01),Cytc和Caspase-3的表达减少(P<0.01),其作用与剂量有关。结论:通络化痰胶囊可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制细胞凋亡线粒体途径中凋亡相关CytC和caspase-3的表达有关。

关键词： H2O2 PC12 细胞凋亡线粒体通络化痰胶囊细胞色素C 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3

熊胆粉减少脑缺血损伤大鼠缺血半暗带皮层神经细胞凋亡的机制

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中国中医基础医学杂志 2013年第7期19卷 819-821,826页

作者：富苏韩经丹周杰范吉平北京中医药大学东直门医院北京100700 中国中医科学院北京100700 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:探讨熊胆粉减少脑缺血损伤大鼠缺血半暗带皮层神经细胞凋亡的机制。方法:70只SD大鼠行永久性大脑中动脉闭塞术(pMCAO),根据longa评分(大于等于2分)随机分层分为5组给予不同灌胃治疗。治疗后利用免疫组化技术测定缺血半暗带皮层Bcl-... 详细信息

目的:探讨熊胆粉减少脑缺血损伤大鼠缺血半暗带皮层神经细胞凋亡的机制。方法:70只SD大鼠行永久性大脑中动脉闭塞术(pMCAO),根据longa评分(大于等于2分)随机分层分为5组给予不同灌胃治疗。治疗后利用免疫组化技术测定缺血半暗带皮层Bcl-2、Bax、CytC、caspase-9和caspase-3表达的变化。结果:尼莫地平组较模型组缺血半暗带皮层Bax、CytC、Caspase-9和Caspase-3表达减少,Bcl-2表达增加。结论:熊胆粉可参与调节脑缺血损伤缺血半暗带皮层神经细胞凋亡的线粒体途径(内途径)。

关键词：熊胆粉脑缺血损伤细胞凋亡CytC Caspase-9 Caspase-3 Bcl-2 Bax

熊胆粉对脑缺血损伤大鼠神经行为学障碍及神经细胞凋亡的影响

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中国中医基础医学杂志 2013年第3期19卷 268-270页

作者：富苏韩经丹周杰范吉平北京中医药大学东直门医院北京100700 中国中医科学院北京100700 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:探讨熊胆粉对脑缺血损伤大鼠神经行为学、缺血侧脑组织病理学及缺血半暗带皮层神经细胞凋亡的影响。方法:70只SD大鼠行pMCAO术,根据longa评分随机分层分为5组予不同灌胃治疗。行Narrow-Alley corner Test检测大鼠神经行为改变,HE... 详细信息

目的:探讨熊胆粉对脑缺血损伤大鼠神经行为学、缺血侧脑组织病理学及缺血半暗带皮层神经细胞凋亡的影响。方法:70只SD大鼠行pMCAO术,根据longa评分随机分层分为5组予不同灌胃治疗。行Narrow-Alley corner Test检测大鼠神经行为改变,HE染色观察缺血侧脑组织病理学改变,TUNEL法检测缺血半暗带皮层神经细胞凋亡水平。结果:熊胆粉组大鼠NarrowAlley Corner Test得分较模型组降低,缺血侧脑组织病理损伤减轻,缺血半暗带神经细胞凋亡较少。结论:熊胆粉可促进脑缺血损伤大鼠神经功能障碍的恢复,减轻脑组织病理损害,减少神经细胞凋亡。

关键词：熊胆粉脑缺血损伤细胞凋亡

“毒损脑络”与脑缺血-再灌注损伤病机关系探讨

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中国中医基础医学杂志 2012年第8期18卷 823-823,829页

作者：韩经丹王珏富苏范吉平北京中医药大学东直门医院北京100700 中国中医科学院北京100700

目的:研究证实中医药对脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:采用中药及针刺治疗及动物实验研究,探讨脑缺血-再灌注损伤复杂的病理生理过程与"毒损脑络"学说的内在相关性。结论:脑缺血-再灌注损伤的基本病机为毒邪内生,损伤脑络,脑神失养... 详细信息

目的:研究证实中医药对脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:采用中药及针刺治疗及动物实验研究,探讨脑缺血-再灌注损伤复杂的病理生理过程与"毒损脑络"学说的内在相关性。结论:脑缺血-再灌注损伤的基本病机为毒邪内生,损伤脑络,脑神失养,神机失守。

关键词：脑缺血-再灌注损伤毒损脑络中医病机

通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2,Bax的影响

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中国实验方剂学杂志 2013年第8期19卷 242-246页

作者：富苏韩经丹周杰范吉平北京中医药大学东直门医院北京100700 中国中医科学院北京100700 中国中医科学院望京医院北京100102

目的:探讨通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡的影响和机制。方法:98只SD大鼠通过永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)制备脑缺血损伤模型,待大鼠清醒后,根据Longa评分(≥2分)随机分为7组,分别为正常对照组、假手术组、模型组、尼莫地... 详细信息

目的:探讨通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡的影响和机制。方法:98只SD大鼠通过永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)制备脑缺血损伤模型,待大鼠清醒后,根据Longa评分(≥2分)随机分为7组,分别为正常对照组、假手术组、模型组、尼莫地平组、通络化痰高、中、低剂量组。于术后第1天开始分别给予蒸馏水(正常对照组、假手术组、模型组)、尼莫地平(32.4 mg·kg-1)和通络化痰胶囊高、中、低剂量组(648,324,162 mg·kg-1)灌胃治疗,并于术后第1,2,3,5,7天行Narrow-Alley Corner Test检测脑缺血损伤大鼠神经功能的改变,术后第8天行4%多聚甲醛(pH 7.0)灌注固定后断头取脑,观察脑组织病理学的改变,利用TUNEL法检测缺血半暗带神经细胞凋亡水平的变化,利用免疫组化技术测定缺血半暗带Bcl-2相关x蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达水平的改变。结果:模型组大鼠Narrow-Alley Corner Test得分较正常对照组和假手术组显著增加(P<0.01),尼莫地平组和通络化痰胶囊组得分较模型组降低(P<0.01,P<0.05)。缺血后大鼠脑组织损伤明显,尼莫地平组和通络化痰胶囊组的损伤减轻。模型组较正常对照组和假手术组神经细胞凋亡增多、缺血半暗带Bax和Bcl-2表达增加(P<0.01)。尼莫地平组和通络化痰胶囊组较模型组神经细胞凋亡减轻、缺血半暗带Bax表达减少,Bcl-2表达增强(P<0.01)。结论:通络化痰胶囊可促进脑缺血损伤大鼠损伤后神经功能障碍的恢复,减轻神经元病理损害,其机制可能与其促进缺血半暗带Bcl-2表达,抑制Bax表达,从而减少细胞凋亡水平有关。

关键词：脑缺血损伤细胞凋亡通络化痰胶囊 Bcl-2相关x蛋白 B细胞淋巴瘤白血病-2