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过表达C2H2型锌指蛋白基因PdbZFP26提高山新杨耐盐性

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林业科学 2023年第1期59卷 110-118页

作者：马姗姗杨静静曲德辉李梦婕张进吴凡林宿红艳王磊鲁东大学农学院烟台264025 鲁东大学生命科学学院烟台264025 鲁东大学生态园林创新研究所烟台264025

【目的】土壤盐渍化是制约农林资源生产力的主要因素之一。为适应环境,植物会通过启动基因表达及生理和形态结构的变化来减缓盐害。越来越多的研究表明,C2H2型锌指蛋白在植物应答盐胁迫调控网络中扮演重要角色。迄今,关于植物C2H2锌指... 详细信息

【目的】土壤盐渍化是制约农林资源生产力的主要因素之一。为适应环境,植物会通过启动基因表达及生理和形态结构的变化来减缓盐害。越来越多的研究表明,C2H2型锌指蛋白在植物应答盐胁迫调控网络中扮演重要角色。迄今,关于植物C2H2锌指蛋白生物学功能的研究集中于植物特有的Q型,而对于非Q型C2H2锌指蛋白的认识非常有限。前人从毛果杨中鉴定到109个C2H2锌指蛋白的编码基因PtrZFPs,其中62个编码的蛋白为非Q型锌指蛋白。鉴定、解析耐盐相关C2H2锌指蛋白基因的功能将为深入理解植物应对非生物胁迫的分子机制提供重要资料。通过分析过表达PdbZFP26转基因山新杨的表型以鉴定其功能,本文以期为山新杨抗盐遗传改良提供优良资源及理论基础。【方法】本研究利用实时定量PCR方法分析PdbZFP26的组织器官表达模式及对非生物胁迫和植物激素的响应模式;利用叶盘转化法获得过表达PdbZFP26转基因山新杨,观察转基因和对照株系在盐胁迫处理前后的长势,测定其抗逆生理指标,比较不同株系对盐胁迫的耐受能力。【结果】基于前期表达谱数据分析,从山新杨茎中筛选到一个受盐胁迫诱导表达的C2H2锌指蛋白基因PdbZFP26,该基因编码区为2 061 bp,共编码686个氨基酸。PdbZFP26仅含有一个C2H2锌指结构域,且该结构域中不具备Q型特征基序“QALGGH”。进化树分析显示,PdbZFP26为C型C2H2型锌指蛋白。表达模式分析结果显示,PdbZFP26在茎中特异表达,主要集中在木质部(包含维管形成层);除盐胁迫之外,ABA和BRs会引起PdbZFP26不同程度的上调,其中ABA胁迫诱导的上调幅度最为显著。转基因山新杨表型分析结果显示,盐胁迫条件下,过表达PdbZFP26转基因山新杨的生长明显优于对照,转基因株系的叶绿素含量显著高于对照,MDA和H2O2含量明显低于对照,而SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性高于对照。【结论】过表达PdbZFP26可通过增加抗氧化物酶活性来降低过氧化物质的积累,从而提高转基因山新杨对盐胁迫的耐受性。

关键词：山新杨 C2H2锌指蛋白盐胁迫

木霉对盐胁迫下枸杞根与叶内离子平衡和光系统Ⅱ的影响

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中国农业科学 2022年第12期55卷 2413-2424页

作者：边兰星梁丽琨颜坤宿红艳李丽霞董小燕梅惠敏烟台大学生命科学学院中国科学院烟台海岸带研究所/中国科学院海岸带环境过程与生态修复重点实验室鲁东大学农学院辽宁大学生命科学院

【目的】研究木霉对枸杞(Lycium chinense)耐盐能力的影响，从离子平衡、氧化胁迫和光系统Ⅱ(PSⅡ)性能等方面揭示耐盐机理。【方法】以枸杞为试验材料，施加木霉菌剂于根周围，浇灌NaCl溶液(300 mmol·L-1)进行盐处理，比较盐胁迫下施... 详细信息

【目的】研究木霉对枸杞(Lycium chinense)耐盐能力的影响，从离子平衡、氧化胁迫和光系统Ⅱ(PSⅡ)性能等方面揭示耐盐机理。【方法】以枸杞为试验材料，施加木霉菌剂于根周围，浇灌NaCl溶液(300 mmol·L-1)进行盐处理，比较盐胁迫下施加和未施加菌剂植株生物量、K~+/Na~+、根系钾钠离子吸收转运、叶片氧化损伤以及PSⅡ性能的差异。【结果】盐胁迫下，施加菌剂的植株生物量降幅较小，说明木霉能够提高枸杞耐盐能力，减少对生长的抑制。木霉缓解盐诱导的光合速率与PSⅡ光化学效率的下降，抑制PSⅡ激发压上升，有利于防御PSⅡ光抑制。盐胁迫下施加菌剂的植株PSⅡ最大光化学效率的降幅和PSⅡ反应中心蛋白损失相对较少，证实了木霉缓解PSⅡ光抑制，保护了PSⅡ反应中心。与光抑制结果一致，盐胁迫下施加菌剂植株叶片膜脂过氧化程度和H2O2含量较低，氧化损伤较轻。盐胁迫下，施加菌剂植株光合电子传递到QA以下电子受体效率的降幅较小，叶绿素快速荧光诱导动力学(OJIP)曲线的J点也未明显上升，表明木霉保护了PSⅡ受体侧电子传递体。木霉对PSⅡ供体侧放氧复合体也起到保护作用，因为施加菌剂抑制了盐胁迫下K点相对可变荧光的显著上升以及避免了OJIP曲线中K点的出现。因此，木霉对PSⅡ各组分都起到了保护作用，缓解了盐胁迫下PSⅡ性能指数的下降，提高了PSⅡ整体稳定性。盐胁迫下，施加菌剂的植株根和叶Na~+含量较低，但K~+含量较高，说明木霉通过减少根和叶中Na~+积累及K~+损失，缓解K~+/Na~+下降，维持离子平衡。木霉增强盐胁迫下根系Na~+外排，保障根系K~+吸收和向地上部转运，是维护枸杞离子平衡的关键机制。【结论】木霉调控盐胁迫下根系钠钾离子吸收转运，维持离子平衡，减轻PSⅡ氧化胁迫，增强枸杞耐盐能力，缓解对其生长的抑制。

关键词：木霉菌剂枸杞耐盐能力光抑制非损伤微测技术

基于莲藕提取物生物合成纳米银及其抑菌活性研究

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食品与发酵工业 2023年第16期49卷 253-260页

作者：吴承宗魏亚楠戴昕彤苗雨颖黄婷赵康辉王磊宿红艳鲁东大学生命科学学院山东烟台264025 鲁东大学农学院山东烟台264025

莲藕作为一种食药同源的食品,极具开发潜力。该研究利用莲藕提取液作为还原剂和稳定剂,采用一步法生物合成出纳米银抑菌剂,为莲藕的开发利用提供了一条新的途径。通过单因素试验探讨了AgNO_(3)浓度、提取液用量、反应温度、反应时间等... 详细信息

莲藕作为一种食药同源的食品,极具开发潜力。该研究利用莲藕提取液作为还原剂和稳定剂,采用一步法生物合成出纳米银抑菌剂,为莲藕的开发利用提供了一条新的途径。通过单因素试验探讨了AgNO_(3)浓度、提取液用量、反应温度、反应时间等对纳米银制备的影响。优化后的合成产物经紫外-可见吸收光谱、透射电镜、X射线衍射分析等进行表征和鉴定,结果表明产物在426 nm附近有1个明显的纳米银等离子体子共振特征吸收峰,纳米银颗粒呈球形,平均粒径为8.2 nm,具有良好的分散性,为面心立方晶型。抑菌实验表明,莲藕生物合成纳米银与化学合成纳米相比具有更高的抑菌活性,对4种临床病原菌和4种水产病原菌均有显著的抑菌效果,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为11.25、22.5μg/mL。稳定性实验表明生物合成的纳米银具有良好的耐热稳定性和长期稳定性。综上所述,利用莲藕提取物可以生物合成较为理想的纳米银抑菌剂,有望在临床、水产等抑菌领域得到广泛应用。

关键词：莲藕纳米银生物合成抑菌剂抑菌活性稳定性

上海交通大学继续教育学院网络教育学生毕业率的研究

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成人教育 2015年第6期35卷 74-80页

作者：宿红艳上海交通大学继续教育学院上海200050

网络教育虽然得到迅速发展,但毕业率低已经是普遍的现象。根据上海交通大学继续教育学院网络教育学生的数据和资料,对影响毕业率的因素和未毕业的原因进行了研究。结果显示对毕业率有影响的因素有学历层次、专业类别、性别和年龄层次四... 详细信息

网络教育虽然得到迅速发展,但毕业率低已经是普遍的现象。根据上海交通大学继续教育学院网络教育学生的数据和资料,对影响毕业率的因素和未毕业的原因进行了研究。结果显示对毕业率有影响的因素有学历层次、专业类别、性别和年龄层次四个维度;未毕业的原因有未参加考试或课程不及格、统考未过、毕业论文未过、退学等。通过研究,希望能够加强网络学院的招生筛选、教学技术的创新及教学支持服务的持续改善来提高学生的毕业率,实现网络教学促进终身学习的目标。

关键词：网络教育毕业率特征未毕业原因

毛果杨中与PtMKK4互作的PtMPKs的筛选及验证

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林业科学 2015年第10期51卷 60-66页

作者：王磊宿红艳顾亮常志远陈娜鲁东大学生命科学学院烟台264025 鲁东大学农学院烟台264025 烟台市农业科学研究院果树研究所烟台265500

【目的】在外界刺激传递到胞内引起细胞响应的信号转导网络中,促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联途径处于中心环节。该途径由MAPKKK,MAPKK和MAPK 3种蛋白激酶组成,各组分之间以逐级磷酸化的方式构成信号放大途径,特异感受上游刺激,将信号... 详细信息

【目的】在外界刺激传递到胞内引起细胞响应的信号转导网络中,促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联途径处于中心环节。该途径由MAPKKK,MAPKK和MAPK 3种蛋白激酶组成,各组分之间以逐级磷酸化的方式构成信号放大途径,特异感受上游刺激,将信号放大并向下传递给靶蛋白。迄今尚未在杨树中确定一条完整的MAPK信号通路。毛果杨MAPKK成员PtMKK4在干旱信号转导中发挥重要作用,筛选、鉴定其进一步激活的靶标MAPKs将为深入理解MAPK级联途径调控植物逆境响应机制提供重要信息。【方法】利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术筛选、鉴定与PtMKK4互作的MAPKs,并采用半定量PCR方法对筛选到的PtMPKs在干旱和高盐胁迫处理下表达水平的变化进行分析。【结果】分别构建pGBKT7-PtMKK4诱饵表达载体和pGADT7-Pt MPKs猎物表达载体,共转化酵母Y2H感受态细胞。仅共转化p GBKT7-Pt MKK4和pGADT7-PtMPK6-1的酵母菌可在营养缺陷型筛选培养基SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His和SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal中生长,且在SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal中生长的菌落显示蓝色。双分子荧光互补试验进一步证实PtMKK4和PtMPK6-1存在蛋白互作。此外,与PtMKK4相似,PtMPK6-1可被20%PEG和200 mmol·L-1NaCl诱导表达。【结论】在毛果杨MAPK级联途径中,PtMPK6-1可能为PtMKK4激活的靶标。

关键词：毛果杨 MAPK级联途径酵母双杂交双分子荧光互补

叶面喷施羧基化碳纳米管对平邑甜茶幼苗生长及抗氧化系统的影响

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山东农业科学 2023年第9期55卷 121-127页

作者：吴康苏安琪田雪娇李传收付志顺杨静静宿红艳鲁东大学农学院山东烟台264025

为研究碳纳米管(carbon nanotubes,CNTs)对植物生长发育的影响,本试验以苹果砧木平邑甜茶(Malus hupehensis)为材料,设置叶面喷施浓度为0、10 mg/L和20 mg/L羧基化单壁碳纳米管(SWCNTs)处理,研究其对幼苗地上部生长和叶片光合作用、抗... 详细信息

为研究碳纳米管(carbon nanotubes,CNTs)对植物生长发育的影响,本试验以苹果砧木平邑甜茶(Malus hupehensis)为材料,设置叶面喷施浓度为0、10 mg/L和20 mg/L羧基化单壁碳纳米管(SWCNTs)处理,研究其对幼苗地上部生长和叶片光合作用、抗氧化系统等生理生化指标的影响。结果表明,叶面喷施10、20 mg/L SWCNTs均能显著促进平邑甜茶幼苗地上部生长和叶片光合作用,有效增强叶片过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性,提高抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量。与对照相比,喷施10、20 mg/L SWCNTs处理叶片脱氢抗坏血酸(DHA)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量显著降低,而过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量没有显著变化。透射电镜结果显示,SWCNTs能穿透并聚集在叶片细胞内部。综上,叶面喷施10、20 mg/L SWCNTs能促进平邑甜茶地上部生长,提高叶片叶绿素含量和光合作用,上调抗氧化酶活性,并加快AsA-GSH循环系统的高效运转,使细胞保持较高的抗氧化能力。

关键词：碳纳米管平邑甜茶叶片抗氧化系统光合作用

风信子HoMADS2基因的克隆及表达分析(英文)

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Acta Genetica Sinica 2005年第11期32卷 1191-1198页

作者：宿红艳李全梓李兴国张宪省山东农业大学生命科学学院山东省作物生物学重点实验室烟台师范学院生命科学学院烟台264025

利用同源克隆策略,从风信子中分离出一个MADSbox基因,命名为HoMADS2。序列比较分析表明,HoMADS2与B类MADSbox蛋白具有较高的同源性。分子进化树分析显示,HoMADS2与PI家族类聚在一起。同时,在HoMADS2的Kbox和C末端区域均具有PI家族的特... 详细信息

利用同源克隆策略,从风信子中分离出一个MADSbox基因,命名为HoMADS2。序列比较分析表明,HoMADS2与B类MADSbox蛋白具有较高的同源性。分子进化树分析显示,HoMADS2与PI家族类聚在一起。同时,在HoMADS2的Kbox和C末端区域均具有PI家族的特征序列。以上序列分析结果表明,HoMADS2可能是PI的一个同源基因。RNA分子杂交结果显示,HoMADS2在四轮花器官中均表达,其表达模式不同于双子叶植物中PI同源基因。利用风信子离体花器官再生系统研究表明,HoMADS2在再生花芽中的表达不同于HoMADS1和HAG1,该基因在再生花芽发育过程中组成型表达,不受外源细胞分裂素和生长素的影响。

关键词： HoMADS2 激素风信子离体花发育

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海鞘与文昌鱼谁更接近脊椎动物的始祖

海洋湖沼通报 2010年第1期 23-30页

作者：王磊宿红艳王昌留鲁东大学生命科学学院山东烟台264025

脊椎动物的起源是进化生物学研究的核心问题之一,目前人们普遍认为脊椎动物与无脊椎动物中的脊索动物起源于同一个原始祖先。头索动物文昌鱼和尾索动物海鞘是现存的无脊椎动物中和脊椎动物亲缘关系最近的类群,是研究胚胎发育机制和脊索... 详细信息

脊椎动物的起源是进化生物学研究的核心问题之一,目前人们普遍认为脊椎动物与无脊椎动物中的脊索动物起源于同一个原始祖先。头索动物文昌鱼和尾索动物海鞘是现存的无脊椎动物中和脊椎动物亲缘关系最近的类群,是研究胚胎发育机制和脊索动物统进化的典型材料。长期以来,文昌鱼一直被认为是脊椎动物的姊妹类群,比尾索动物海鞘更接近于脊椎动物。但最近的研究却有了相反的观点,这导致了脊索动物进化历程之争,引起人们广泛的兴趣和关注。本文介绍这两类原索动物的研究现状,并对它们的进化地位以及作为研究脊椎动物起源的模型进行了探讨。

关键词：海鞘文昌鱼脊索动物脊椎动物进化

草莓APETALA2同源基因的克隆及表达分析

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西北植物学报 2005年第10期25卷 1937-1942页

作者：宿红艳周盛梅王磊张宪省束怀瑞烟台师范学院生命科学学院山东烟台264025 山东农业大学园艺学院山东泰安271018 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018

利用同源克隆方法首次从草莓花芽cDNA中分离出AP ETALA 2同源基因SAP 2。SAP 2全长1 820 bp,编码435个氨基酸。序列分析表明,SAP 2具有AP 2家族典型的结构域。采用RT-PCR方法分析SAP 2在不同组织中的表达情况,结果显示SAP 2在草莓营养... 详细信息

利用同源克隆方法首次从草莓花芽cDNA中分离出AP ETALA 2同源基因SAP 2。SAP 2全长1 820 bp,编码435个氨基酸。序列分析表明,SAP 2具有AP 2家族典型的结构域。采用RT-PCR方法分析SAP 2在不同组织中的表达情况,结果显示SAP 2在草莓营养组织、花芽以及不同花器官中均有表达,与拟南芥AP 2、矮牵牛P hAP 2A的表达模式一致。以上结果说明SAP 2是草莓的AP 2同源基因。

关键词：草莓 APETALA2 基因克降表达分析