检索结果-南通市图书馆

S/D法和低pH孵放法在富含IgM免疫球蛋白中脂包膜病毒的灭活研究

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中国输血杂志 2013年第7期26卷 635-637页

作者：王焰郑朝共容新宗成都蓉生药业有限责任公司四川成都610063

目的以水泡性口炎病毒(VSV)、辛德毕斯病毒(Sindbis)和伪狂犬病毒(PRV)为指示病毒,验证S/D和低pH孵放2种处理方法对富含IgM制剂的脂包膜病毒灭活效果。方法将指示病毒加入富含IgM制剂中,在无保护剂状态下,分别经S/D和低pH孵放处理后,测... 详细信息

目的以水泡性口炎病毒(VSV)、辛德毕斯病毒(Sindbis)和伪狂犬病毒(PRV)为指示病毒,验证S/D和低pH孵放2种处理方法对富含IgM制剂的脂包膜病毒灭活效果。方法将指示病毒加入富含IgM制剂中,在无保护剂状态下,分别经S/D和低pH孵放处理后,测定残余病毒滴度,以病毒滴度下降数代表灭活效果。结果 S/D法使PRV和Sindbis的病毒滴度下降分别为2.94和5.25 Logs;低pH孵放使PRV和VSV的病毒滴度下降分别为6.03和4.94 Logs。结论 S/D法和低pH孵放2种处理方法对脂包膜病毒的模拟病毒VSV、Sindbis和PRV病毒,均能有效灭活。

关键词：富含IgM制剂低pH孵放病毒灭活有机溶剂表面活性剂

猪细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

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中国生物制品学杂志 2013年第12期26卷 1844-1847,1850页

作者：郑朝共许锬容新宗黄琰成都蓉生药业有限责任公司四川成都610041

目的建立猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）荧光定量PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法根据GenBank中登录的PPV NADL-2株序列,针对VP2区设计引物,以提取的PPV核酸为模板,进行荧光定量PCR扩增;优化反应体系及反应条件,并进... 详细信息

目的建立猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）荧光定量PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法根据GenBank中登录的PPV NADL-2株序列,针对VP2区设计引物,以提取的PPV核酸为模板,进行荧光定量PCR扩增;优化反应体系及反应条件,并进行专属性、重复性和敏感性验证。用建立的荧光定量PCR法检测辛酸沉淀及L、P、S公司生产的纳米膜过滤器去除制品中PPV的效果。结果优化后的荧光定量PCR反应体系：Eva Green预混液7.5μl,上下游引物各0.5μl,模板DNA 1μl,补加dH2O至15μl;反应条件：95℃3 min,95℃10 s和60℃10 s,共40个循环;模板浓度的对数值与循环数的相关性较好（R2=0.999）,扩增效率为102.5%。该方法可特异性扩增PPV,而对伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）、牛细小病毒（bovine parvovirus,BPV）、鼠细小病毒（minute virus of mice,MVM）及猪肾细胞PK-15无扩增反应;试验内CV为0.79%～2.81%,试验间CV为1.23%～2.21%,均〈5%,最低检测限为102copies/μl。辛酸沉淀可使样品中PPV浓度下降5 Logs;不同公司生产的20 nm膜滤器过滤量及过滤效果均有明显差异,其中S公司生产的滤器效果最好,可使样品中的PPV滴度下降4 Logs。结论已成功建立了PPV荧光定量PCR检测方法,为快速、准确的检测病毒去除工艺对PPV的去除效果奠定了基础。

关键词：猪细小病毒荧光定量PCR 病毒去除

EvaGreen实时荧光定量PCR检测猪细小病毒方法的建立

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中国输血杂志 2012年第11期25卷 1173-1175页

作者：容新宗杨春郑朝共刘波袁源苗松何太平四川大学公共卫生学院四川成都610041 成都蓉生药业有限责任公司

目的建立以EvaGreen为染料的实时荧光定量PCR检测猪细小病毒(PPV)的方法,为血液制品中病毒去除效果的工艺验证提供高效准确的技术平台。方法根据PPV的VP2基因保守序列,设计并合成引物。对目的片段进行PCR扩增,将扩增的PPV病毒VP2基因片... 详细信息

目的建立以EvaGreen为染料的实时荧光定量PCR检测猪细小病毒(PPV)的方法,为血液制品中病毒去除效果的工艺验证提供高效准确的技术平台。方法根据PPV的VP2基因保守序列,设计并合成引物。对目的片段进行PCR扩增,将扩增的PPV病毒VP2基因片段克隆入PMD19-T载体,重组质粒PMD19-T-VP2经测序鉴定正确后,作为标准品模板,用于标准曲线的绘制和该实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性和重复性检测的材料。结果应用重组质粒PMD19-T-VP2制作的荧光定量PCR扩增曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系;该方法检测灵敏度的下限能达到102copies/μl;与其他DNA病毒和同种属的细小病毒无明显的交叉反应;连续重复检测高、中、低浓度样品,批内批间变异系数小,重复性好。结论以EvaGreen为染料的实时荧光定量PCR检测PPV的方法提高了检测灵敏度,缩短了工艺验证的时间。

关键词： EvaGreen 猪细小病毒血液制品病毒去除实时荧光定量PCR

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病毒灭活技术及产业发展报告

中国医药生物技术 2020年第4期15卷 440-448页

作者：杨春晖容新宗中国医学科学院北京协和医学院输血研究所成都610052

1国际病毒灭活技术及产业发展现状1.1产业规模和产值生物制品的原材料主要来源于血液及哺乳动物细胞培养产物。由于其具有病原体传播的风险,因此在生产过程中需要应用病毒灭活工艺来保障生物安全。不同的制品因工艺的差异也决定了病毒... 详细信息

1国际病毒灭活技术及产业发展现状1.1产业规模和产值生物制品的原材料主要来源于血液及哺乳动物细胞培养产物。由于其具有病原体传播的风险,因此在生产过程中需要应用病毒灭活工艺来保障生物安全。不同的制品因工艺的差异也决定了病毒灭活策略的选择。血液是一种不可替代的重要的治疗资源。

关键词：病毒灭活生物制品病原体传播不可替代产业发展报告策略的选择产业发展现状

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转基因植物疫苗

国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册） 2005年第5期28卷 203-204页

作者：容新宗何太平

生产疫苗抗原的植物表达系统以其经济易操作而极具吸引力。本文就转基因植物疫苗的优点、临床研究和应用前景进行简要综述。

关键词：疫苗转基因植物免疫原性免疫耐受

荧光定量RT-PCR检测脑心肌炎病毒方法的建立及初步应用

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四川大学学报（自然科学版） 2015年第1期52卷 205-209页

作者：袁源许锬郑朝共容新宗黄琰苗松张雪梅四川大学生命科学学院成都610064 成都蓉生药业有限责任公司成都610041

根据GenBank中公布的脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus EMCV)3D基因保守区段设计并合成1对引物,以提取的EMCV核酸为模板,分别进行荧光定量RT-PCR扩增,优化反应体系及条件,建立脑心肌炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法,并初步运用于... 详细信息

根据GenBank中公布的脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus EMCV)3D基因保守区段设计并合成1对引物,以提取的EMCV核酸为模板,分别进行荧光定量RT-PCR扩增,优化反应体系及条件,建立脑心肌炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法,并初步运用于静注人免疫球蛋白(IVIG)纳米膜过滤工艺去除EMCV效果的验证.结果显示该方法实验内和实验间的精密度均小于5%,最低检测限为102copies/μL;纳米膜过滤工艺可使样品中的EMCV滴度下降4Logs.

关键词：荧光定量RT—PCR 脑心肌炎病毒钠米膜病毒去除

人巨细胞病毒中和抗体快速微量检测方法的建立及应用

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中国输血杂志 2012年第2期25卷 150-152页

作者：杨春秦婷婷容新宗高昌茜刘瑞熙刘兰军成都蓉生药业有限责任公司四川成都610061

目的建立具有较好试验重复性的人巨细胞病毒中和抗体快速微量检测方法。方法建立快速微量中和试验方法,用于健康人血浆及IVIG中的CMV中和抗体效价检测。结果用该方法检测336份健康人血浆,其中CMV中和抗体效价≥1∶128的比例为28.1%;检... 详细信息

目的建立具有较好试验重复性的人巨细胞病毒中和抗体快速微量检测方法。方法建立快速微量中和试验方法,用于健康人血浆及IVIG中的CMV中和抗体效价检测。结果用该方法检测336份健康人血浆,其中CMV中和抗体效价≥1∶128的比例为28.1%;检测27批"蓉生静丙"和9批国内其它厂家IVIG的CMV中和抗体效价,其CMV中和抗体效价的GMTs分别为1∶498和1∶485。结论建立了快速、简便、检测通量高、重复性较好的快速微量中和试验方法,为CMV-IVIG的研制提供了可供选择的血浆筛选方法。

关键词：巨细胞病毒中和抗体人免疫球蛋白

QPCR检测人细小病毒B19方法的建立及其在病毒去除工艺验证中的应用

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中国输血杂志 2014年第9期27卷 916-919页

作者：许锬吕家成容新宗黄琰郑朝共成都蓉生药业有限责任公司四川成都610041

目的建立1种检测人细小病毒(B19)的荧光定量PCR方法,并应用于纳米膜过滤去除病毒的工艺验证,评价在血液制品生产过程中纳米膜过滤去除B19的效果。方法用上游引物(P1)5’-GGC ACC TCT CAA AAC ACT-3’和下游引物(P2)5’-C CAC TCC TTG CT... 详细信息

目的建立1种检测人细小病毒(B19)的荧光定量PCR方法,并应用于纳米膜过滤去除病毒的工艺验证,评价在血液制品生产过程中纳米膜过滤去除B19的效果。方法用上游引物(P1)5’-GGC ACC TCT CAA AAC ACT-3’和下游引物(P2)5’-C CAC TCC TTG CTG ATA CTC-3’,在95℃3min、95℃10s52℃10 s72℃10S条件下扩增40个循环,建立检测B19的QPCR方法并验证该方法的专一性、重复性和灵敏性;最后用该方法检测纳米膜过滤去除制品中B19的效果。结果该方法实验内和实验间的精密度均<5%,最低检测限为50 copies/μL;经检测纳米膜过滤可使样品中B19滴度下降3.8Logs。结论成功建立了具有良好专一性、重复性和灵敏性的荧光定量PCR方法。

关键词：荧光定量PCR 特异性扩增病毒去除纳米膜过滤

四川地区供浆员中巨细胞病毒中和抗体效价的分布及体内持续情况

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中国生物制品学杂志 2012年第2期25卷 217-219页

作者：杨春刘兰军高昌茜刘瑞熙秦婷婷容新宗张航成都蓉生药业有限责任公司成都610041

目的分析四川地区供浆员中巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)中和抗体效价分布及体内持续情况。方法建立CMV中和抗体检测方法,检测四川地区8个浆站采集的2 002份健康人血浆中CMV中和抗体水平,并对其中44位供浆员进行1年跟踪检测;对同一... 详细信息

目的分析四川地区供浆员中巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)中和抗体效价分布及体内持续情况。方法建立CMV中和抗体检测方法,检测四川地区8个浆站采集的2 002份健康人血浆中CMV中和抗体水平,并对其中44位供浆员进行1年跟踪检测;对同一供浆员进行4年长期追踪检测。结果四川地区供浆员血浆CMV中和抗体效价主要分布在1∶16～1∶64之间,阳性率(≥1∶8)高达98.35%,其中效价≥1∶192的占8.04%;44名供浆员CMV中和抗体水平在1年内保持稳定;一名供浆员在4年内CMV中和抗体效价保持较高水平。结论四川地区供浆员中CMV自然感染率较高,部分供浆员CMV中和抗体水平较高,且在较长的时间内保持稳定,本研究为CMV特异性人免疫球蛋白的研制提供了依据。

关键词：巨细胞病毒中和抗体血浆