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奶牛乳腺中NR1H3介导乙酸对AGPAT6表达的调节研究

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奶牛乳腺中NR1H3介导乙酸对AGPAT6表达的调节研究

作者：宫晓庆东北农业大学

学位级别：硕士

乳脂含量在一定程度上影响着牛奶的品质。在反刍动物中,日粮经瘤胃微生物发酵产生的乙酸作为乳脂合成前体物质。体内体外实验都已证明乙酸可以调节奶牛乳腺上皮细胞的乳脂合成。酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶6(1-acylglycerol-3-phosphate-... 详细信息

乳脂含量在一定程度上影响着牛奶的品质。在反刍动物中,日粮经瘤胃微生物发酵产生的乙酸作为乳脂合成前体物质。体内体外实验都已证明乙酸可以调节奶牛乳腺上皮细胞的乳脂合成。酰基甘油-3-磷酸酰基转移酶6(1-acylglycerol-3-phosphate-O-acyltransferase 6,AGPAT6)是奶牛乳脂合成过程中的关键酶。本实验室团队前期实验已经明确乙酸可以调节AGPAT6的表达,进而促进乳脂合成,但乙酸调节AGPAT6表达的分子机制尚不明确。核受体亚家族1H成员3(Nuclear receptor subfamily 1 group H member 3,NR1H3)是配体依赖的核激素受体超家族成员,在脂质代谢旺盛的组织中高表达,参与机体胆固醇稳态和脂质合成的调节。水牛和奶山羊中的研究显示NR1H3可以调节乳脂合成相关基因的表达。但在奶牛乳腺中NR1H3的表达模式以及其是否参与乙酸诱导的AGPAT6表达调节还不清楚。为明确NR1H3在奶牛乳腺组织中的表达模式以及其与乳脂合成之间的关系,本研究首先采用荧光定量PCR和Western blot方法检测青春期、泌乳期和干奶期奶牛乳腺组织中的NR1H3的表达变化。结果显示泌乳期乳腺组织中NR1H3 m RNA和蛋白表达水平显著高于青春期和干奶期(P<0.01),提示NR1H3的表达与乳腺泌乳功能相关。在体外培养的奶牛乳腺上皮细胞中,添加NR1H3的激活剂T0901317处理可以显著提高NR1H3的表达和细胞中甘油三酯(Triacylglycerol,TAG)的含量。采用RNAi的方法干扰细胞中NR1H3的表达,得到相反的结果,表明NR1H3可以正向调节奶牛乳腺上皮细胞中乳脂的合成。为研究乙酸是否可以诱导NR1H3的表达,并通过NR1H3调节AGPAT6的表达和乳脂合成,本研究首先采用12 m M乙酸钠处理奶牛乳腺上皮细胞,荧光定量PCR和Western blot结果显示乙酸钠作用下细胞中NR1H3 m RNA和蛋白表达水平显著增加(P<0.01),同时过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)和AGPAT6的表达也显著上调。当采用基因干扰的方法干扰乙酸钠处理的奶牛乳腺上皮细胞中NR1H3的表达,乙酸钠对AGPAT6的表达的诱导作用以及对TAG合成的促进作用被抑制。在干扰NR1H3的同时过表达AGPAT6,NR1H3对TAG合成的抑制作用恢复,表明在乙酸诱导的AGPAT6表达和乳脂合成过程中,NR1H3介导这一过程。本实验室前期已经发现PPARγ参与乙酸对AGPAT6表达的调节。为进一步明确NR1H3是否参与了乙酸-PPARγ-AGPAT6的表达调控,本研究通过免疫共沉淀实验研究NR1H3与PPARγ之间的相互作用。结果显示在奶牛乳腺上皮细胞中,NR1H3与PPARγ存在相互作用。在12 m M乙酸钠的作用下,NR1H3与PPARγ的相互作用增强。双分子荧光互补实验也观察到相同的结果。前期研究显示PPARγ可以结合AGPAT6启动子区(-110bp～+1bp)调节AGPAT6的转录。本研究通过双荧光素酶报告基因系统研究NR1H3对AGPAT6的转录调节,结果显示NR1H3基因干扰后,AGPAT6启动子(-110bp～+1bp)的启动活性显著下降(P<0.05)。添加NR1H3激活剂T0901317处理可以显著提高AGPAT6的启动活性,表明NR1H3和PPARγ可以作用于AGPAT6启动子的同一区域。为进一步研究乙酸钠作用下,PPARγ是否与NR1H3协同调节AGPAT6转录,我们采用PPARγ激活剂Rosiglitazone作用细胞,同时干扰细胞中NR1H3的表达,结果显示Rosiglitazone作用会提高AGPAT6的转录活性,但干扰NR1H3后,Rosiglitazone对AGPAT6转录激活作用被抑制,这一结果进一步明确在乙酸作用下,NR1H3与PPARγ相互作用调节AGPAT6的表达,进而影响乳脂合成。

关键词： NR1H3 PPARγ AGPAT6 乙酸乳脂

AGPAT6在奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成中的功能研究

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东北农业大学学报 2022年第4期53卷 41-48页

作者：林叶刘灿江怡宫晓庆刘川萍杨洋侯晓明东北农业大学动物细胞与遗传工程黑龙江省重点实验室哈尔滨150030

溶血磷脂酸酰基转移酶(Sn-1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase 6,AGPAT6)是脂类物质合成代谢相关酶,但其在奶牛乳脂合成中调节作用尚不明确。研究采用荧光定量PCR、Western blot等方法检测奶牛泌乳循环过程中乳腺组织中AGPAT... 详细信息

溶血磷脂酸酰基转移酶(Sn-1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase 6,AGPAT6)是脂类物质合成代谢相关酶,但其在奶牛乳脂合成中调节作用尚不明确。研究采用荧光定量PCR、Western blot等方法检测奶牛泌乳循环过程中乳腺组织中AGPAT6表达变化、奶牛乳腺上皮细胞中AGPAT6对乳脂合成影响以及相关信号通路分子表达变化。结果表明,AGPAT6 mRNA和蛋白质表达在泌乳期奶牛乳腺组织中极显著高于青春期和干奶期(P<0.01)。在具有乳脂合成能力的奶牛乳腺上皮细胞中,AGPAT6基因过表达极显著提高细胞中TAG含量,AGPAT6基因干扰获得相反结果。AGPAT6过表达可激活PI3K-AKT-mTOR信号通路,添加PI3K抑制剂会抑制AGPAT6诱导PI3K-AKT-mTOR信号通路激活及细胞中TAG合成(P<0.01)。以上结果显示AGPAT6表达与泌乳奶牛乳脂合成呈正相关,AGPAT6通过激活PI3K-AKT-mTOR信号通路促进奶牛乳腺上皮细胞中乳脂合成。

关键词：奶牛乳脂 AGPAT6 PI3K-AKT-mTOR

NCEP／NCAR再分析资料中南北半球大气质量交换的特征研究

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热带气象学报 2008年第1期24卷 74-80页

作者：张燕黄菲宫晓庆中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 中国海洋大学山东青岛266003

用1948～2000年共53年的NCEP/NCAR再分析资料,分析了南北半球大气质量交换的周期变化特征和两半球大气质量交换通道的空间分布。结果表明:两半球的大气质量交换从长时间来看基本上是平衡的。两半球质量交换的季节变化表现为明显的半年周... 详细信息

用1948～2000年共53年的NCEP/NCAR再分析资料,分析了南北半球大气质量交换的周期变化特征和两半球大气质量交换通道的空间分布。结果表明:两半球的大气质量交换从长时间来看基本上是平衡的。两半球质量交换的季节变化表现为明显的半年周期,冬季和夏季的交换比较显著,且以夏季为主;具有显著的十年际变化;年际变化特征总体来看不显著,只在1980年代～1990年代存在较为显著的2～5年的年际振荡。NCEP资料存在较大变更的三个时段(以1968、1979年为分界)的周期变化特征确实存在一定的差异。全球平均异常向南的越赤道质量输送不存在很强的季节依赖性,主要由低空北半球太平洋-大西洋副热带高压南侧东北信风和亚洲季风区对流层高层副热带高压南侧的越赤道东北气流决定,亚洲季风区冬季南下的冷空气也起到很大的作用;而异常向北的越赤道质量净输送则主要发生在夏季,主要由亚洲季风区越赤道西南季风决定,特别是索马里越赤道急流从对流层低层到高层整层的向北输送,同时对流层低层赤道中东太平洋-大西洋信风区的东南信风也有较大的贡献。

关键词：两半球大气质量交换特征

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管花肉苁蓉苯乙醇总苷提纯工艺及其应用研究

管花肉苁蓉苯乙醇总苷提纯工艺及其应用研究

作者：宫晓庆北京石油化工学院

学位级别：硕士

管花肉苁蓉具有广泛的药用价值,目前关于管花肉苁蓉的系统研究仍较少,本文利用超声提取管花肉苁蓉苯乙醇总苷（PhGs）,并利用响应面进行工艺优化,将优化的工艺进行中试规模的放大验证,利用活性炭对PhGs粗提物进行脱色,探究PhGs的脱色工... 详细信息

管花肉苁蓉具有广泛的药用价值,目前关于管花肉苁蓉的系统研究仍较少,本文利用超声提取管花肉苁蓉苯乙醇总苷（PhGs）,并利用响应面进行工艺优化,将优化的工艺进行中试规模的放大验证,利用活性炭对PhGs粗提物进行脱色,探究PhGs的脱色工艺;进一步利用大孔树脂分离纯化,对所得PhGs进行了初步生物活性研究,并将其作为主要成分制成缓释片,论文的研究成果如下:***的提取工艺研究采用超声提取法提取管花肉苁蓉中PhGs,得到单因素提取的最佳工艺条件,利用响应面优化PhGs的提取工艺,得到最佳工艺条件为:乙醇浓度70%,超声功率160 W,超声时间5 min,液料比1:16。***脱色工艺研究将颜色较深的PhGs粗提物利用活性炭进行脱色,并进行了脱色时间、脱色温度以及活性炭含量三个因素的单因素实验,利用响应面优化脱色工艺,得到的PhGs最佳脱色工艺条件为:活性炭含量1.50%,脱色时间53 min,脱色温度64℃,得到的PhGs粗提物颜色显著变浅,脱色率和保留率达到最优。***纯化工艺研究利用大孔树脂对PhGs粗提物进行分离纯化,通过吸附解析实验筛选纯化的大孔树脂,然后对粗提液上样浓度、上柱速率、洗脱液浓度进行考察,最终优选PhGs的分离纯化工艺为上样浓度2.5 mg/mL、上样柱体积10 BV、70%乙醇水溶液为洗脱液,将浓缩液冻干获得固体粉末中PhGs含量为53.15%。***生物活性评价将不同浓度的PhGs对BGC-823细胞和Hacat细胞进行给药处理,观察细胞核形态变化,结果表明PhGs对细胞无毒性;对PhGs粗提取样液还原能力与DPPH清除自由基能力的测定,证明从管花肉苁蓉中提取的PhGs类物质具有一定的还原能力与清除自由基能力。***骨架型缓释片的研制研究PhGs的缓释制剂工艺得到最佳缓释片制作工艺条件设定为:HPMC-10w添加量为23.0%,乳糖添加量11.0%,硬脂酸镁添加量10.0%。本文获得一套系统的管花肉苁蓉开发工艺,包括功效成分PhGs类物质提取、脱色、纯化和生物活性分析,并对PhGs缓释片进行了探索,为PhGs的综合开发研究提供一定的实验基础,具有重要应用价值。

关键词：苯乙醇总苷提取纯化生物活性缓释片

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西中太平洋经向大气环流的年际变化

中国海洋大学学报（自然科学版） 2014年第7期44卷 1-10页

作者：王启宫晓庆中国海洋大学物理海洋教育部重点实验室山东省高校海洋-大气相互作用于气候重点实验室山东青岛266100

讨论了西中太平洋经向大气环流的年际变化特征,其中西太平洋区(WP)和中太平洋区(CP)EOF分解的第一模态分别是WP的负异常Hadley环流和CP的正异常Hadley环流,其时间系数与Nio3.4指数极为一致;第二模态的最显著空间特征是两区都在5°N^15... 详细信息

讨论了西中太平洋经向大气环流的年际变化特征,其中西太平洋区(WP)和中太平洋区(CP)EOF分解的第一模态分别是WP的负异常Hadley环流和CP的正异常Hadley环流,其时间系数与Nio3.4指数极为一致;第二模态的最显著空间特征是两区都在5°N^15°N有异常上升,但其时间系数与Nio3.4指数同期相关很低。西中太平洋有2类海表面温度异常(SSTa),通过其上的深对流潜热加热驱动异常Hadley环流:El Nio型驱动了WP区和CP区赤道区符号相反的第一模态异常环流型;热带辐合带(ITCZ)型驱动了WP区和CP区5°N^15°N区符号一致的第二模态异常环流。

关键词：局域Hadley环流年际变化 SSTa El Nino ITCZ

媒体情绪与企业风险承担——基于机器学习和文本分析的证据

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系统工程理论与实践 2024年第6期44卷 1869-1895页

作者：宫晓莉徐小惠熊熊青岛大学经济学院青岛266071 天津大学复杂管理系统实验室天津300072 天津大学管理与经济学部天津300072

媒体舆论作为企业运营过程中与外界信息交互的重要渠道,能够通过信息加工和反馈潜移默化地影响企业决策.基于优化机器学习方法测量得到的媒体情绪得分,本文发现媒体情绪会抑制企业风险承担,这一结论经过充分稳健性检验后仍然成立.机制... 详细信息

媒体舆论作为企业运营过程中与外界信息交互的重要渠道,能够通过信息加工和反馈潜移默化地影响企业决策.基于优化机器学习方法测量得到的媒体情绪得分,本文发现媒体情绪会抑制企业风险承担,这一结论经过充分稳健性检验后仍然成立.机制分析表明,媒体情绪主要通过影响信息不对称程度、感染投资者情绪和加剧分析师羊群行为实现对企业风险承担的抑制效应.异质性分析表明相比于负面媒体情绪,正面媒体情绪在这一过程中起主导作用.除此之外,这一抑制效应在行业竞争程度更激烈、外部监督程度更严格时显著性降低,且在融资约束更高、金融化程度更高、高管在职消费现象更严重时更加明显.本文的研究不仅有助于厘清媒体情绪对企业风险承担的影响方式和途径,对于如何利用媒体力量助力企业风险决策和价值提升,促进实体经济高质量发展也有一定的政策启示.

关键词：媒体情绪机器学习企业风险承担信息不对称投资者情绪

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北太平洋850和500hPa夏季副热带高压的年际和年代变化

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2014年第1期44卷 1-7页

作者：王启赵娅琴宫晓庆中国海洋大学海洋-大气相互作用与气候实验室山东青岛266100 中国海洋大学海洋环境学院山东青岛266100

利用NCEP\NCAR再分析位势高度场资料和Hadley中心SST资料,将北太平洋500和850hPa夏季副热带高压异常变化结合在一起进行了分析,发现夏季500和850hPa副高的位置和强度的年际和年代变化都有明显差异,并且850hPa副高远比500hPa副高稳定。... 详细信息

利用NCEP\NCAR再分析位势高度场资料和Hadley中心SST资料,将北太平洋500和850hPa夏季副热带高压异常变化结合在一起进行了分析,发现夏季500和850hPa副高的位置和强度的年际和年代变化都有明显差异,并且850hPa副高远比500hPa副高稳定。上下两层除了同时增强和同时减弱外,还存在着500hPa增强850hPa减弱,以及500减弱850hPa增强等不同类型。相关分析表明,夏季500和850hPa副热带高压年际和年代异常变化与同期不同海区海表温度(SST)异常之间存在明显的关系。

关键词：北太平洋夏季副高 500和850 hPa 海表温度

加密货币与全球股市的尾部风险传染研究—基于复杂网络的视角

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中国管理科学 2024年

作者：宫晓莉贾凯文熊熊天津大学管理与经济学部天津大学复杂管理系统实验室青岛大学经济学院

在金融市场一体化和投资者同质化的背景下，加密货币市场与传统金融市场的风险传染效应显著。本文首先利用小波相干方法刻画了加密货币与主要经济体股市的波动随时域和频域变化的联动特征。随后，基于复杂网络视角，本文使用分位数时频... 详细信息

在金融市场一体化和投资者同质化的背景下，加密货币市场与传统金融市场的风险传染效应显著。本文首先利用小波相干方法刻画了加密货币与主要经济体股市的波动随时域和频域变化的联动特征。随后，基于复杂网络视角，本文使用分位数时频波动溢出模型测度了风险溢出指数，捕捉时频域下不同冲击规模的加密货币与全球股市尾部风险溢出效应。研究发现，基于分位数测度的溢出指数能够较好地捕捉不同冲击规模下加密货币与全球股市的尾部风险溢出效应，极端状态下尾部风险溢出效应较正常状态显著增强，且具有明显的非对称性。频域视角下加密货币与全球股市尾部风险溢出表现出显著的周期性特征。此外，加密货币在正常状态下是风险净承受者，但其在市场受到正向冲击时出现了明显的尾部风险净溢出效应。研究结论对于监管部门防范加密货币与全球股市的系统性风险双向传染具有重要的启示作用。

关键词：加密货币尾部风险溢出条件分位数频域

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致阔大而畅精微——谈陶世虎的水彩风景画

美术观察 2024年第4期 142-143页

作者：宫晓东上海应用技术大学艺术与设计学院

20世纪80年代,国内水彩画的创作显现出锐意进取的发展趋势和开放融合的时代风貌。在思想解放的社会氛围下,水彩画界举办了一系列的展览、评奖和对外交流活动,水彩的高等美术教育体系也不断完善。各地的老中青水彩画家群体逐步建立,画家... 详细信息

20世纪80年代,国内水彩画的创作显现出锐意进取的发展趋势和开放融合的时代风貌。在思想解放的社会氛围下,水彩画界举办了一系列的展览、评奖和对外交流活动,水彩的高等美术教育体系也不断完善。各地的老中青水彩画家群体逐步建立,画家们对西方水彩艺术的历史演变和名家经典进行了深入研究,在创作上展示出题材表现的广泛性、主题内涵的深刻性、形式风格的多样性和艺术个性的鲜明性。受此影响,原本以油画为主的陶世虎转而步入水彩领域,开始了自己的创作探索,他耳目一新的艺术风格引起水彩界的广泛关注。

关键词：高等美术教育水彩画家水彩风景画题材表现形式风格时代风貌思想解放主题内涵