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下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

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器官移植 2024年第1期15卷 46-54页

作者：彭宣倪海强顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 详细信息

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老氧化应激沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇超氧化物歧化酶

下调GSK3β通过抑制ITPR1-GRP75-VDAC1复合体功能减轻衰老肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第3期15卷 406-414页

作者：倪海强顾世琦彭宣宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposid... 详细信息

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposide诱导衰老再转染腺病毒阴性对照(AdshNC)后进行H/R处理,Old+Ad-shGSK3β+H/R组即使用Etoposide诱导衰老后再转染靶向沉默GSK3β的短发夹RNA腺病毒(Ad-shGSK3β)后进行H/R处理。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平和线粒体活性氧水平,采用免疫荧光染色法检测各组钙离子水平,采用蛋白质印迹法检测各组GSK3β、线粒体相关的内质网膜(MAM)相关蛋白肌醇1,4,5-三磷酸受体1(ITPR1)、电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)、葡萄糖调节蛋白75(GRP75)表达及磷酸化水平,采用免疫共沉淀分析GSK3β与MAM相关蛋白的相互作用。结果与Young组比较,Old组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old组比较,Old+AdshNC+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old+Ad-shNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Young组比较,Old组ITPR1、GRP75和GSK3β总蛋白表达增多,ITPR1和GRP75磷酸化水平升高,而VDAC1总蛋白和磷酸化水平均下降;与Old组比较,Old+Ad-shNC+H/R组GSK3β蛋白表达不变,ITPR1和GRP75总蛋白和磷酸化水平升高,VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平增高;与Old+AdshNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组GSK3β蛋白表达减少,ITPR1、GRP75和VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平均下降。免疫共沉淀结果显示,GSK3β能够与ITPR1、GRP75和VDAC1蛋白发生相互作用。结论GSK3β在衰老RTEC中表达升高,抑制GSK3β表达能够降低ITPR1-GRP75-VDAC1复合体磷酸化水平,限制线粒体钙离子超负荷,保护线粒体功能,减少再灌注时细胞损伤。

关键词：糖原合成酶激酶3β 肾移植中老年供者缺血-再灌注损伤线粒体损伤衰老线粒体相关的内质网膜钙超载凋亡

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下调XBP1s通过抑制ITPR介导的线粒体功能障碍改善肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第2期15卷 220-228页

作者：倪海强彭宣顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会、器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)对小鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其作用机制。方法将小鼠肾小管上皮细胞分为腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R... 详细信息

目的探讨剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)对小鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其作用机制。方法将小鼠肾小管上皮细胞分为腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组。检测各组细胞凋亡水平、线粒体活性氧活性、线粒体膜电位及线粒体钙离子水平。使用染色质免疫共沉淀测序(ChIP-seq)分析XBP1s调控肌醇1,4,5-三磷酸受体(ITPR)家族的结合位点。检测各组XBP1s和ITPR家族信使RNA(mRNA)和蛋白表达水平。结果与AdshNC组比较,Ad-shNC+H/R组细胞凋亡水平更高,线粒体活性氧水平升高,线粒体膜电位降低,线粒体钙离子水平升高;与Ad-shNC+H/R组比较,Ad-shXBP1s+H/R组细胞凋亡水平较低,线粒体活性氧水平下降,线粒体膜电位升高,线粒体钙离子水平降低(均为P<0.05)。与Ad-shNC组比较,Ad-shXBP1s组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3 mRNA和蛋白相对表达量降低(均为P<0.05)。与Ad-shNC组相比,Ad-shNC+H/R组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3蛋白相对表达量升高;与Ad-shNC+H/R组相比,Ad-shXBP1s+H/R组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3蛋白相对表达量下降(均为P<0.05)。ChIP-seq结果显示,XBP1s能够结合ITPR1的启动子和外显子、ITPR2外显子和ITPR3外显子。结论 XBP1s可能通过直接调控ITPR转录和翻译而影响线粒体相关的内质网膜结构功能,下调XBP1s能够抑制ITPR表达,改善线粒体损伤。

关键词：器官移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 肌醇1,4,5-三磷酸受体线粒体损伤内质网应激线粒体相关的内质网膜钙超载

不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 112-120页

作者：韦迪张维琦莫琼韦少宣覃文慧广西中医药大学药学院南宁530200 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室南宁530001 广西中医药大学第一附属医院南宁530200 桂林市人民医院广西桂林541002

目的:比较不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠骨微观结构、骨代谢的影响,并探析其作用机制。方法:选取88只SPF级雌性SD大鼠,随机分为11组:假手术组,模型组,桑树寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),肉桂寄生低、中、高剂... 详细信息

目的:比较不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠骨微观结构、骨代谢的影响,并探析其作用机制。方法:选取88只SPF级雌性SD大鼠,随机分为11组:假手术组,模型组,桑树寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),肉桂寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),阴香寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1))。药物干预12周后进行取材,使用双能X射线骨密度仪(DXA)和微计算机断层扫描(Micro-CT)检测大鼠股骨近端骨密度及骨微结构情况;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠股骨组织病理学变化;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中雌二醇(E_(2))、骨钙素(BGP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP-5b)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肱骨中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad1、Smad9、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肱骨中BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2蛋白表达量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨微结构明显破坏,骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)显著下降(P<0.01),骨小梁分离度(Tb.Sp)、结构模型指数(SMI)显著上升(P<0.01);血清中BGP、BALP、TRACP-5b和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),E_(2)含量显著降低(P<0.01);大鼠肱骨中BMP-2、Smad1、Smad9、Runx2 mRNA表达显著降低(P<0.01),BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,不同归经寄主桑寄生给药组均能提升骨质疏松大鼠股骨BMD和BV/TV、Tb.N、Tb.Th,降低Tb.Sp、SMI,改善骨微结构,提高骨质疏松大鼠血清E_(2)含量(P<0.05,P<0.01),降低骨质疏松大鼠血清BGP、BALP、TRACP-5b、PINP含量,上调BMP-2、Smad1、Runx2 mRNA表达,上调Smad9 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),上调BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2的蛋白表达(P<0.01);其中多项指标显示肉桂寄生组效果最好。结论:不同归经寄主桑寄生均可改善去卵巢大鼠的骨质疏松症,其中肉桂寄生给药组药效最佳,其治疗骨质疏松症可能是通过调控BMP/Smad信号通路,调节骨转换的平衡。

关键词：桑寄生不同归经寄主骨质疏松骨密度骨形态发生蛋白(BMP)/Smad通路

用于刑侦检测的日盲紫外折衍混合变焦光学系统设计

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光学学报 2024年第4期44卷 273-282页

作者：宋逸辰唐玉凤赖涛袁沛琦丁骁炜毛珊赵建林西北工业大学物理科学与技术学院光场调控与信息感知工业和信息化部重点实验室陕西省光信息技术重点实验室陕西西安710129

基于ARTCAM-407UV-WOM型紫外探测器,结合光学系统成像性能要求和光学元件成像特性,提出一种基于Qcon非球面和衍射表面的日盲紫外折衍混合变焦光学系统设计方法。所设计的系统仅由5块透镜组成,采用氟化钙和熔融石英两种材料,工作波段为0.... 详细信息

基于ARTCAM-407UV-WOM型紫外探测器,结合光学系统成像性能要求和光学元件成像特性,提出一种基于Qcon非球面和衍射表面的日盲紫外折衍混合变焦光学系统设计方法。所设计的系统仅由5块透镜组成,采用氟化钙和熔融石英两种材料,工作波段为0.24~0.27μm,连续变焦范围为40~100 mm。分析结果显示,该系统在整个变焦范围内,奈奎斯特空间频率在11 lp/mm处的调制传递函数值均高于0.7,全视场畸变小于0.06%,表明该设计方法能够满足日盲紫外连续变焦系统结构简单、体积小、像质优良、像面稳定等设计和刑侦检测使用要求,对此类光学系统的设计具有一定借鉴意义。

关键词：光学设计混合光学系统 Q型非球面日盲紫外光变焦光学系统

非制冷长波红外连续变焦光学系统的一种无热化设计

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光学学报 2024年第7期44卷 150-158页

作者：唐玉凤毛珊宋逸辰赖涛袁沛琦丁骁炜赵建林西北工业大学物理科学与技术学院光场调控与信息感知工业和信息化部重点实验室陕西省光信息技术重点实验室陕西西安710129

为了满足长波红外(LWIR)热像仪在宽温度范围下连续变焦的需求,基于LWIR 320 pixel×320 pixel型红外探测器,设计了一款非制冷长波红外连续变焦光学系统。该系统可在宽温度范围下实现无热化,采用常见的硫系玻璃,工作波段为8~12μm,总长为... 详细信息

为了满足长波红外(LWIR)热像仪在宽温度范围下连续变焦的需求,基于LWIR 320 pixel×320 pixel型红外探测器,设计了一款非制冷长波红外连续变焦光学系统。该系统可在宽温度范围下实现无热化,采用常见的硫系玻璃,工作波段为8~12μm,总长为200 mm,仅由7片透镜组成。通过引入偶次非球面,可以使系统色差和轴外像差得到良好的校正,同时选用后固定组的最后一片透镜充当温度补偿组来调节焦距实现无热化。分析结果表明,该系统结构紧凑,可以在-40~60℃温度范围内和60~180 mm焦距范围内连续平滑变焦,并且全程成像质量良好(调制传递函数在20 lp/mm处均大于0.3),变焦和公差也具有良好的可实现性。

关键词：光学设计红外变焦系统长波红外像质评价

中国5~<15岁儿童意外跌落与意外中毒和烧烫伤死亡轨迹模型分析

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中国预防医学杂志 2024年第3期25卷 307-312页

作者：潘晓樱王琦琦李俊琦于石成吴息凤浙江大学公共卫生学院大数据健康科学系浙江杭州310058 中国疾病预防控制中心流行病学办公室浙江大学医学院附属第二医院临床大数据与统计中心浙江省智能预防医学重点实验室

目的分析2005-2021年中国5~<15岁儿童意外跌落、意外中毒和烧烫伤伤害死亡率的轨迹和变化趋势。方法基于2005-2021年中国死因监测数据集,采用Joinpoint模型分析中国5~<15岁儿童意外跌落、意外中毒和烧烫伤的整体死亡率变化趋势,计算... 详细信息

目的分析2005-2021年中国5~<15岁儿童意外跌落、意外中毒和烧烫伤伤害死亡率的轨迹和变化趋势。方法基于2005-2021年中国死因监测数据集,采用Joinpoint模型分析中国5~<15岁儿童意外跌落、意外中毒和烧烫伤的整体死亡率变化趋势,计算平均年度变化百分比(average annual percent change,AAPC);将数据按区域、城乡、性别和年龄分层后,应用SAS 9.4统计软件中的Proc traj程序拟合5~<15岁儿童意外跌落、意外中毒和烧烫伤死亡率轨迹模型。结果 2005-2021年中国5~<15岁儿童意外跌落死亡率总体呈上升趋势(AAPC=0.71%,P=0.235);意外中毒和烧烫伤呈下降趋势(AAPC=-2.96%、-2.50%,P=0.014、0.081)。女性意外跌落死亡率呈上升趋势(AAPC=3.11%);10~<15岁儿童意外跌落呈上升趋势(AAPC=3.94%)。轨迹模型行分析结果显示:意外跌落轨迹模型根据拟合结果分为3组,组1呈现下降趋势,集中在5~<15岁西部男孩;组2呈上升趋势但差异无统计学意义;组3呈上升趋势,包含除5~<10岁东部城市男孩外的东部儿童、中部女孩和10~<15岁西部城市女孩。意外中毒轨迹模型分为两组,组1先升后降(P<0.01),包含东部所有儿童、除10~<15岁中部城市女孩外的中部城市儿童,以及5~<10岁西部城市男孩和5~<10岁中部农村女孩;组2线性下降(P=0.013),包含除5~<10岁西部城市男孩外的西部儿童、除5~<10岁中部农村女孩外的农村中部儿童,以及10~<15岁中部城市女孩。在烧烫伤轨迹模型中,组1上升趋势随年份逐渐升高(P=0.005),包含5~<10岁西部城市男孩和10~<15东中西部城市女孩,组2上升较缓(P=0.587)。结论在意外跌落Joinpoit模型中,女性和10~<15岁儿童死亡率存在上升趋势,是公共卫生防控的重点人群和年龄组。意外跌落轨迹模型中组别3和烧烫伤轨迹模型中组别1的死亡率呈指数上升趋势,应寻找原因,加强防控。

关键词：意外中毒意外跌落烧烫伤死亡率轨迹模型

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荧光微孔板法检测啤酒酵母胞内脯氨酸含量

食品与发酵工业 2024年

作者：于莹莹许睿琦钮成拓王金晶郑飞云刘春凤李崎江南大学生物工程学院酿酒科学与工程研究室江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室

高浓酿造是啤酒生产中一种常用的高效经济技术，而在高浓酿造过程中啤酒酵母会受到各个时期不同的环境压力。脯氨酸被认为是啤酒酵母中的一种应激保护剂，赋予了酵母细胞更高的胁迫耐受性。通过测定酵母胞内脯氨酸含量可以作为筛选环境... 详细信息

高浓酿造是啤酒生产中一种常用的高效经济技术，而在高浓酿造过程中啤酒酵母会受到各个时期不同的环境压力。脯氨酸被认为是啤酒酵母中的一种应激保护剂，赋予了酵母细胞更高的胁迫耐受性。通过测定酵母胞内脯氨酸含量可以作为筛选环境耐受能力强菌株的参考，因此需要建立一种能够快速检测啤酒酵母胞内脯氨酸含量的方法。该研究基于次氯酸钠氧化和邻苯二甲醛/N-乙酰半胱胺酸荧光检测脯氨酸的通用方法，结合细胞破碎的优化，成功建立了一种可以准确测定啤酒酵母胞内脯氨酸含量的荧光微孔板法，其线性范围和回收率分别为5～40 μmol/L（0.58～4.6 mg/L）和73.33%～105.5%。通过比较该检测方法与氨基酸专用高效液相色谱法，两者测定胞内脯氨酸含量绝对值相比无显著性差异，但是荧光微孔板法操作简便快捷。因此，该研究建立的荧光微孔板法为测定酵母胞内脯氨酸提供了一种新思路，同时为适应高浓酿造胁迫的啤酒酵母筛选提供了一种新策略。

关键词：脯氨酸荧光探针啤酒酵母高浓酿造

模式生物果蝇在中医药现代研究中的优势与应用前景

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中国中药杂志 2024年

作者：何丽张永宣李泊潼秦玉洁吴依凡刘永琦修明慧和建政甘肃中医药大学公共卫生学院甘肃中医药大学基础医学院敦煌医学与转化教育部重点实验室

中医药具有多种活性成分，生物活性多样，毒副作用小且不宜耐药，被广泛应用于防治各种疾病。经典模式生物黑腹果蝇以其生命周期短、生理结构简单、培养成本低及操作简便等优势，借助转基因和基因定点敲除等基因调控技术在中医药现代研... 详细信息

中医药具有多种活性成分，生物活性多样，毒副作用小且不宜耐药，被广泛应用于防治各种疾病。经典模式生物黑腹果蝇以其生命周期短、生理结构简单、培养成本低及操作简便等优势，借助转基因和基因定点敲除等基因调控技术在中医药现代研究中得到了广泛应用。该文以炎症性肠病、衰老、肿瘤、神经退行性疾病、睡眠障碍等疾病为例概述果蝇在中医药现代研究中的研究进展，以期为模式生物果蝇在中医药领域的研究应用提供新的方法和技术。

关键词：黑腹果蝇中医药现代研究炎症性肠病衰老肿瘤神经退行性疾病睡眠障碍