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草莓避雨育苗技术要点

落叶果树 2023年第1期55卷 77-79页

作者：武冲姜莉莉王晓芳宗晓娟山东省果树研究所/山东省现代设施果树技术创新中心山东泰安271000

介绍了草莓避雨育苗的育苗地选择、设施结构、肥水设施、母株定植、肥水管理、病虫害防控、子苗固定及起苗等关键环节的技术要点。

关键词：草莓避雨育苗母株引插繁苗系数

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植物中的MAPK及其在信号传导中的作用

植物中的MAPK及其在信号传导中的作用

两种主要甜樱桃病毒RT-PCR检测方法的改进

山东省植物生物学研究进展学术年会

作者：吴涛宗晓娟谷令坤李德全山东农业大学生命科学学院山东农业大学生命科学学院山东农业大学生命科学学院山东农业大学生命科学学院

＜正＞1．植物中MAPKs的结构特点和分类 1．1植物中MAPKs的结构特点 MAPKs最早研究始于哺乳动物和酵母,近年来在拟南芥、苜蓿、烟草、水稻、玉米等高等植物中也取得了很大的进展。植物MAPKs与动物和酵母中的MAPKs非常相似,分子量大多在3...

＜正＞1．植物中MAPKs的结构特点和分类 1．1植物中MAPKs的结构特点 MAPKs最早研究始于哺乳动物和酵母,近年来在拟南芥、苜蓿、烟草、水稻、玉米等高等植物中也取得了很大的进展。植物MAPKs与动物和酵母中的MAPKs非常相似,分子量大多在38～55KD 之间,都含有11个保守的蛋白激酶亚区,在其Ⅶ和Ⅷ亚区之间也存在一个催化区域,其中保守的 TxY基序在此起关键作用。与动物和酵母的不同之处在于,植物TxY中的x常为E或D,而动物和

关键词：

来源： cnki会议评论

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植物保护学报 2011年第3期38卷 285-286页

作者：宗晓娟王文文陈立伟王甲威严雪瑞刘庆忠山东省果树研究所果树生物技术省级重点实验室泰安271000 沈阳农业大学植物保护学院沈阳110866

李属坏死环斑病毒（Prunus necrotic ringspot vi-rus,PNRSV）和李矮缩病毒（Prune dwarf virus,PDV）是较为常见且危害严重的两种植物病毒,1992年被我国列为进境检疫危险性有害生物,主要危害李属和蔷薇属植物。反转录-聚合酶链式反应... 详细信息

李属坏死环斑病毒（Prunus necrotic ringspot vi-rus,PNRSV）和李矮缩病毒（Prune dwarf virus,PDV）是较为常见且危害严重的两种植物病毒,1992年被我国列为进境检疫危险性有害生物,主要危害李属和蔷薇属植物。反转录-聚合酶链式反应检测法（RT-PCR）因操作简便且灵敏度高而备受青睐。

关键词：环斑病毒 PCR检测方法反转录-聚合酶链式反应甜樱桃危险性有害生物 virus 蔷薇属植物植物病毒

甜樱桃矮化砧‘吉塞拉6号’扦插过程中氧化酶活性和碳氮含量变化

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林业科学 2013年第9期49卷 172-177页

作者：魏海蓉陈新宗晓娟王甲威张庆霞张道辉刘庆忠山东省果树研究所山东省果树生物技术育种重点实验室泰安271000 陇东学院农林科技学院庆阳745000

甜樱桃（Prunusavium）矮化砧‘吉塞拉6号’（PrunusceFasus×***）是由酸樱桃（Prunuscerasu,s）与灰毛叶樱桃（Prunuscane$cert$）种间杂交育成的三倍体杂种，用作砧木材料具有矮化、早实、丰产、抗性强、适应范围广等优点（刘庆忠等... 详细信息

甜樱桃（Prunusavium）矮化砧‘吉塞拉6号’（PrunusceFasus×***）是由酸樱桃（Prunuscerasu,s）与灰毛叶樱桃（Prunuscane$cert$）种间杂交育成的三倍体杂种，用作砧木材料具有矮化、早实、丰产、抗性强、适应范围广等优点（刘庆忠等，2006）。

关键词： '吉塞拉6号’ 嫩枝扦插 IBA 不定根发生氧化酶营养物质

3种甜樱桃病毒PNRSV、PDV及LChV-2的多重RT-PCR检测方法的建立与应用

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中国农业科学 2014年第6期47卷 1111-1118页

作者：宗晓娟王文文魏海蓉王甲威陈新徐丽刘庆忠山东省果树研究所/山东省果树生物技术育种重点实验室

【目的】建立可同时检测李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)、李矮缩病毒(Prune dwarf virus,PDV)、樱桃小果病毒2(Little cherry virus-2,LChV-2)的多重RT-PCR检测方法。【方法】以复合感染3种病毒的甜樱桃病株叶片为材料,采用CTAB法提取样本总RNA,选用随机六聚体引物对植物样本总RNA进行反转录,所得cDNA作为多重RT-PCR的扩增模板。根据GenBank中PNRSV、PDV、LChV-2基因组序列共设计6对特异引物,分别通过单一RT-PCR和多重RT-PCR筛选出可用于同时检测3种甜樱桃病毒的引物组合。对多重RT-PCR的退火温度及循环数进行优化,以筛选出各引物组合的最适扩增条件。分别以单一感染PNRSV、PDV、LChV-2、复合感染3种病毒、单一感染樱桃病毒A(Cherry virus A,CVA)及甜樱桃无毒苗为样本,对多重RT-PCR引物的特异性进行分析。选取复合感染3种病毒的甜樱桃总RNA的反转录产物为初始模板,按照梯度稀释法依次将模板稀释为2、22、23、24、25倍,在相同PCR反应体系及反应条件下分别对各引物组合的灵敏度进行分析。多重RT-PCR的扩增条带经凝胶回收试剂盒回收纯化后连接至pMD18-T vector,克隆测序,以验证多重RT-PCR检测的准确性。并应用该方法对山东泰安地区甜樱桃生产园中间隔栽培的中国樱桃进行检测。【结果】筛选到2个可以应用的引物组合,组合1"PNRSV-S1/A1、PDV-S2/A2、LChV2-S1/A1"可分别特异性地扩增733、467、337 bp的片段。组合2"PNRSV-S1/A1、PDV-S3/A3、LChV2-S1/A1"可分别扩增得到733、265、337 bp的片段。扩增产物大小与预期相符。多重RT-PCR反应条件优化结果显示,在退火温度52℃、35个循环条件下,2个引物组合的检测效果均较为理想。特异性分析结果显示,2个引物组合均能特异性检测其各自的靶病毒。灵敏度分析结果显示,2个引物组合在cDNA的23×稀释液中仍能特异性扩增,但扩增条带的强度稍有差异,其对植物总RNA的反转录产物的最低检测浓度为107.9 ng·μL-1。克隆测序及序列分析表明,2个引物组合对各自靶病毒的检测结果可靠。应用该方法对9个中国樱桃样本进行检测,结果显示,测试样品均至少感染了2种病毒,其中5个样品复合感染了3种病毒,2个样品同时感染PDV和LChV-2,2个样品同时感染PNRSV和LChV-2。【结论】应用建立的多重RT-PCR检测方法可稳定、准确、灵敏的同时检测单一或复合侵染的3种甜樱桃病毒。

关键词：李属坏死环斑病毒李矮缩病毒樱桃小果病毒-2 多重RT-PCR 病原检测

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核桃WRKY4基因的克隆与表达分析

核农学报 2014年第7期28卷 1188-1196页

作者：徐丽陈新魏海蓉张力思王甲威宗晓娟刘庆忠山东省果树研究所/山东省果树生物技术重点实验室山东泰安271000

WRKY转录调控因子广泛参与植物的生长发育、生物胁迫和非生物胁迫等生理过程。本研究利用reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)及rapid amplification of cDNA ends(RACE)技术克隆了核桃(Juglans regia L.)WRKY基因cDNA全长序列,命名为WRKY4(GenBank登录号为KC795551.1)。结果表明,克隆到的片段长度为2 174 bp,完整开放阅读框为1 554 bp,编码517个氨基酸。序列分析表明WRKY4基因含有2个WRKY保守结构域和2个C2H2锌指结构域,属于WRKY基因家族第Ⅰ类成员。利用实时荧光定量PCR分析4℃低温和自然低温条件对该基因表达的影响以及组织表达模式。结果表明WRKY4受低温诱导表达,能够在低温胁迫的早期响应这一生理过程。WRKY4在树皮(韧皮部)、雌花、花芽和叶片中均有表达,且在树皮中表达量最高,具有组织特异性。研究结果可为核桃抗寒基因工程育种提供基因资源。

关键词：核桃 WRKY转录因子基因克隆实时荧光定量PCR

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植原体侵染对甜樱桃叶片结构功能的影响

植物生理学报 2017年第7期53卷 1306-1312页

作者：谭钺朱东姿魏海蓉王甲威宗晓娟陈新徐丽刘庆忠山东省果树研究所/山东省果树生物技术育种重点实验室山东泰安271000

植原体侵染甜樱桃后引起叶片黄化、变小等症状,危害叶片功能。本研究旨在通过观察显微结构、测定光合作用相关参数和激素含量,明确植原体侵染对甜樱桃叶片结构和功能的影响。结果表明,甜樱桃被植原体危害后栅栏组织发育受阻,叶片变薄,... 详细信息

植原体侵染甜樱桃后引起叶片黄化、变小等症状,危害叶片功能。本研究旨在通过观察显微结构、测定光合作用相关参数和激素含量,明确植原体侵染对甜樱桃叶片结构和功能的影响。结果表明,甜樱桃被植原体危害后栅栏组织发育受阻,叶片变薄,光合色素减少,气孔导度降低,光合功能严重受损,但淀粉积累增加。病叶中玉米素核苷、脱落酸、水杨酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯等含量均显著变化,激素平衡被打破,可能是引起叶片形态、功能改变的重要原因。

关键词：植原体甜樱桃显微结构光合作用激素

不同色泽甜樱桃果实花色苷积累与其相关酶活性之间的关系

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植物生理学报 2017年第3期53卷 429-436页

作者：魏海蓉谭钺宗晓娟朱东姿陈新徐丽王甲威刘庆忠山东省果树研究所/山东省果树生物技术育种重点实验室山东泰安271000

为探明不同色泽甜樱桃果实发育期间花色苷的积累及其与相关酶活性之间的关系,本研究以红色甜樱桃品种‘美早’和纯黄色品系‘13-33’为试材,对果实发育期间花色苷总量及相关酶活性进行了测定,并且采用超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-... 详细信息

为探明不同色泽甜樱桃果实发育期间花色苷的积累及其与相关酶活性之间的关系,本研究以红色甜樱桃品种‘美早’和纯黄色品系‘13-33’为试材,对果实发育期间花色苷总量及相关酶活性进行了测定,并且采用超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-MS/MS)对各花色苷组份进行了定性和定量分析。结果表明,从‘美早’果实中检测出7种花色苷,各组份含量伴随着果实的发育逐渐升高;从‘13-33’中仅检测出4种花色苷,各组份含量随果实的发育逐渐降低,到果实成熟期其含量已甚微。两个品种的花色苷总量与各组份含量的变化趋势相同;‘美早’中花色苷总量随着果实的发育逐渐升高,特别是在转色期后急剧升高;‘13-33’的花色苷总量随着果实的发育变化不明显,并且一直维持在极低水平。‘美早’的PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性在果实发育后期均显著高于‘13-33’。相关性分析结果表明,‘美早’的花色苷总量与PAL和DFR酶活性之间无显著相关性,而与CHI和UFGT酶活性呈显著正相关。

关键词：甜樱桃果实花色苷超高效液相色谱-串联质谱酶活性

甜樱桃砧木PcMPK3基因启动子的克隆及对病原菌感染的响应

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果树学报 2019年第6期36卷 689-696页

作者：赵烨国静王甲威徐丽谭钺陈新魏海蓉朱东姿刘庆忠宗晓娟山东省果树研究所·山东省果树生物技术育种重点实验室山东泰安271000 山东农业大学林学院山东泰安271018

【目的】探明PcMPK3基因的表达调控规律。【方法】利用染色体步移技术从甜樱桃矮化砧木Gisela 6中克隆PcMPK3基因的启动子序列PcMPK3pro。利用Neural Network Promotor Prediction、softberry、PLACE和PlantCARE网站在线预测PcMPK3基因的基础启动子、转录起始位点和顺式作用元件。将PcMPK3pro定向替换植物表达载体pBI121-SN1的CaMV35S组成型启动子,构建重组表达载体pBI-PcMPK3pro:GUS,瞬时转化烟草叶片。【结果】结果表明,PcMPK3pro含有启动子核心元件TATA-box和CAAT-box等多种响应胁迫的顺式作用元件。受病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000,Pst DC3000)侵染,PcMPK3pro能驱动GUS报告基因表达且GUS酶活性显著提高。【结论】推测PcMPK3基因参与植物响应病原菌感染的胁迫过程。

关键词：甜樱桃砧木 PcMPK3 启动子 GUS基因