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辣根过氧化物酶的新型包埋及活性研究

浙江大学学报（工学版） 2013年第1期47卷 182-187页

作者：韩哲勇厉瑾宋锡瑾王杰浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺对辣根过氧化物酶(HRP)进行化学修饰,在酶分子表面接上不饱和双键,以聚乙二醇400二丙烯酸酯(单体A)、聚乙二醇400二甲基丙烯酸酯(单体B)、聚乙二醇200二丙烯酸酯(单体C)、聚乙二醇200二甲基丙烯酸酯(单体D)4种单... 详细信息

N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺对辣根过氧化物酶(HRP)进行化学修饰,在酶分子表面接上不饱和双键,以聚乙二醇400二丙烯酸酯(单体A)、聚乙二醇400二甲基丙烯酸酯(单体B)、聚乙二醇200二丙烯酸酯(单体C)、聚乙二醇200二甲基丙烯酸酯(单体D)4种单体中的一种和丙烯酰胺为聚合原料,在引发剂作用下进行自由基原位聚合,使酶分子的表面形成多点连接的网状薄壳结构,获得4种新型包埋的辣根过氧化物酶.研究结果表明,聚乙二醇200(400)二丙烯酸酯包埋酶的活性和稳定性较高.在pH为3.0、11.0和温度为70℃的条件下,C-HRP的相对活性达到47.9%、39.7%、76.5%,重复使用5次后,C-HRP保留了62.1%的初始活性.在变性剂SDS和脲中浸泡30d后,4种包埋酶的活性可以保持初始活性的36%以上,说明采用该新型包埋方法可以获得较高的酶活性和稳定性.

关键词：辣根过氧化物酶(HRP) N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺活性包埋

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聚氨酯泡沫塑料固定氨基酰化酶Ⅰ的研究

浙江大学学报（工学版） 2005年第4期39卷 562-564,594页

作者：宋锡瑾王杰浙江大学化学工程与生物工程系浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

以聚醚多元醇和甲苯二异氰酸酯(TDI)为原料,选用氨基酰化酶I作为模型酶,采用一步发泡法,将酶固定在软质聚氨酯泡沫塑料(FPUF)上,并对其进行表征.研究结果表明,在发泡过程中加入一定量的惰性蛋白质,对酶蛋白有一定的屏蔽效果,降低了被TD... 详细信息

以聚醚多元醇和甲苯二异氰酸酯(TDI)为原料,选用氨基酰化酶I作为模型酶,采用一步发泡法,将酶固定在软质聚氨酯泡沫塑料(FPUF)上,并对其进行表征.研究结果表明,在发泡过程中加入一定量的惰性蛋白质,对酶蛋白有一定的屏蔽效果,降低了被TDI损伤的概率,客观上对酶分子起到保护作用,使固定化后的酶活力收率有所提高.测得FPUF对蛋白质的负载率高达100%,固定化酶活力收率为81.03%,该固定化酶的最适pH值为6.8,与最适pH值为7的酶液相比,略向酸性偏移;最适反应温度与游离酶相似,在50～70℃.将固定化酶用于拆分乙酰-DL-甲硫氨酸的试验,体现了较好的连续使用稳定性,其半衰期为404.3 min.

关键词：聚氨酯泡沫塑料氨基酰化酶Ⅰ 固定化乙酰-DL-甲硫氨酸

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脂肪酶构象刻录及稳定性研究

浙江大学学报（工学版） 2006年第5期40卷 841-844页

作者：龚伟宋锡瑾王杰浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

探讨了一种高度稳定的新型固定化酶———刻录酶的制备方法和催化性能.以聚乙二醇200(400)二(甲基)丙烯酸酯4种不同的功能单体和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯为原料,底物月桂酸对脂肪酶进行构象诱导后,经过紫外光聚合和洗脱月桂酸,获得了... 详细信息

探讨了一种高度稳定的新型固定化酶———刻录酶的制备方法和催化性能.以聚乙二醇200(400)二(甲基)丙烯酸酯4种不同的功能单体和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯为原料,底物月桂酸对脂肪酶进行构象诱导后,经过紫外光聚合和洗脱月桂酸,获得了4种锁定脂肪酶活性构象的聚合物,即刻录脂肪酶.研究结果表明,选用聚乙二醇400二丙烯酸酯为功能单体时,刻录脂肪酶的活性较游离脂肪酶提高近1倍,并且所得4种刻录脂肪酶的稳定性大大提高.在强酸、强碱和高温下刻录脂肪酶可以分别保持其初始活性的75%、50%和70%以上,用沉淀变性剂浸泡刻录脂肪酶30 d后,酶活性仍然可以保持其初始活性的50%以上.

关键词：脂肪酶构象稳定性分子印迹

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分子筛固定氨基酰化酶I的研究

高校化学工程学报 2004年第5期18卷 617-620页

作者：宋锡瑾王杰浙江大学化学工程与生物工程学系制药工程研究所浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

以Y型分子筛为载体,分别采用吸附法、吸附-戊二醛交联法、偶联法和偶联-重氮法4种方法对氨基酰化酶I进行固定化。研究发现偶联法获得的分子筛固定化酶的活性最高,达0.258 IUmg-1,并对分子筛固定化酶最适pH值、最适反应温度、重复使用... 详细信息

以Y型分子筛为载体,分别采用吸附法、吸附-戊二醛交联法、偶联法和偶联-重氮法4种方法对氨基酰化酶I进行固定化。研究发现偶联法获得的分子筛固定化酶的活性最高,达0.258 IUmg-1,并对分子筛固定化酶最适pH值、最适反应温度、重复使用性和米氏常数进行了测定;结果表明该载体适合氨基酰化酶I的固定,可以获得较高的酶活力,分子筛固定化酶的最适pH值、最适反应温度都有所拓宽。

关键词：分子筛氨基酰化酶Ⅰ 固定化吸附偶联

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有机相中刻录脂肪酶聚合物对配体的吸附

化工学报 2007年第5期58卷 1244-1247页

作者：宋锡瑾宣锋王杰龚伟浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

Lipase and lauric acid were added into a copolymer system, which contained PEG400-dimethacrylate, trimethylolpropane trimethacrylate, and a surface-active *** polymerization was initiated by ultraviolet irradiation .Then recorded lipase polymers (RLP) of locking lipase conformation were obtained after lauric acid was extracted by a neat organic *** adsorption of RLP in the lauric acid solution was *** adsorption isothermal curves were measured at temperature 30—50℃.The results indicated that RLP’s adsorption capacity was far stronger than blank carrier’s and immobilized lipase polymers (ILP)’s,about 8.7 and 3.9 times *** adsorption process followed the Langmuir and Freundlich isothermal adsorption equations.

关键词：脂肪酶月桂酸构象刻录吸附

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水镁石粉体表面改性及表面能测算

材料科学与工程学报 2011年第5期29卷 729-733,752页

作者：李倩宋锡瑾裴宁王杰浙江大学化学工程与生物工程系浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

水镁石粉体是聚合物的常用填料,但水镁石极性较大,与基材的相容性也较差,因此必须通过表面改性,降低水镁石粉体表面能,增强亲油疏水性,从而增加与聚合物之间的相容性,而阴离子表面活性剂是合适的改性剂之一。水镁石粉体改性后的表面性能... 详细信息

水镁石粉体是聚合物的常用填料,但水镁石极性较大,与基材的相容性也较差,因此必须通过表面改性,降低水镁石粉体表面能,增强亲油疏水性,从而增加与聚合物之间的相容性,而阴离子表面活性剂是合适的改性剂之一。水镁石粉体改性后的表面性能,可以用固体表面能数值的变化来表征,本文选择丙三醇、水、1-溴代萘为探针液体,用直接测定法与Washburn方程间接计算法获得了改性前后水镁石的接触角,通过Lifshitz-van der Waals acid base三参数法计算其表面能。研究结果表明,不同的阴离子基团中,羧酸类、磷酸较之磺酸类硫酸类改性效果有明显优势,表面能的碱分量γ-S和酸分量γ+S降为0;随着改性剂中非极性链烃的碳原子个数增加,表面能非极性分量γLSW下降很多,最终导致总表面能下降,接触角增加,疏水性增强。

关键词：水镁石表面改性表面能

新型制冷剂R134、R134-R134a及R134-R22的热力学性质

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高校化学工程学报 1997年第3期11卷 238-243页

作者：宋锡瑾张未星吴兆立浙江大学化工热力学室

采用马丁－侯８１型方程对制冷剂Ｒ１３４、Ｒ１３４－Ｒ１３４ａ及Ｒ１３４－Ｒ２２的热力学性质进行了系统的计算，并绘制了Ｒ１３４的热力学性质图表，为Ｒ１３４在制冷业及相关领域的应用提供了依据。

关键词：四氟乙烷热力学性质制冷工质制冷剂

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蛋白质分子印迹

化学通报 2005年第7期68卷 504-509页

作者：宋锡瑾龚伟王杰浙江大学制药工程研究所浙江大学化学系杭州310027

分子印迹技术是一种新型的高效分离技术,具有空间选择性识别特性。本文介绍了分子印迹技术在蛋白质大分子上的应用和发展,包括蛋白质分子印迹选用的单体和交联剂、印迹方法、印迹机理、蛋白质分子印迹技术的应用以及存在的一些问题。

关键词：蛋白质分子印迹单体交联剂选择性识别分子印迹聚合物

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纳米氢氧化镁的制备

应用基础与工程科学学报 2006年第4期14卷 523-528页

作者：宋锡瑾宣锋王杰浙江大学化学工程与生物工程系浙江杭州310027 浙江大学化学系浙江杭州310027

采用氯化镁溶液为原料,以氢氧化钠和氨水作为混合沉淀剂,通过反向沉淀和低温乙醇溶液强化成核反应的方法制备纳米级氢氧化镁.实验结果表明,在混合碱与氯化镁的摩尔比为2.2∶1、溶剂的总量为2100mL、水与乙醇的体积比为4∶1、反应时间为3... 详细信息

采用氯化镁溶液为原料,以氢氧化钠和氨水作为混合沉淀剂,通过反向沉淀和低温乙醇溶液强化成核反应的方法制备纳米级氢氧化镁.实验结果表明,在混合碱与氯化镁的摩尔比为2.2∶1、溶剂的总量为2100mL、水与乙醇的体积比为4∶1、反应时间为30m in的实验条件下,可以制得纯度高、平均粒径为短径约8—10nm,长度约40—60nm的纳米氢氧化镁棒状晶体,且形状比较规则,粒度分布均匀,分散性好.

关键词：氢氧化镁纳米粒子混合沉淀剂