检索结果-南通市图书馆

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

J-亚群禽白血病JL-2株的分离鉴定

中国预防兽医学报 2003年第5期25卷 345-349页

作者：宋素泉付朝阳高宏雷王笑梅王英魏萍东北农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

近年来 ,J_亚群禽白血病的暴发流行在国内时有报道 ,在本研究中 ,自吉林某患病鸡群分离出一株病毒 ,采用特异性引物 ,经RT_PCR扩增出长度为 5 4 5bp的J_亚群禽白血病病毒特异性核苷酸片段 ;将病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖 ,获取其前病毒... 详细信息

近年来 ,J_亚群禽白血病的暴发流行在国内时有报道 ,在本研究中 ,自吉林某患病鸡群分离出一株病毒 ,采用特异性引物 ,经RT_PCR扩增出长度为 5 4 5bp的J_亚群禽白血病病毒特异性核苷酸片段 ;将病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖 ,获取其前病毒DNA ,依据原型毒株HPRS_10 3cDNA序列设计并合成一对引物 ,经PCR扩增得到包括gp85、gp37、E_element基因在内的近 1.8kb的DNA片段 ,将其连到pMD18_T载体上 ,转化大肠杆菌JM10 9,培养后提取质粒分别用HindIII,BamHI进行单酶切和双酶切鉴定 ,得到了阳性重组质粒pMD18_T_JL2 /env ,核苷酸序列测定结果表明 ,该片段为J_亚群禽白血病病毒囊膜基因 ,其中亚型特异性片段gp 85和标准对照毒株HPRS_10 3的同源率为 94 % ,所编码氨基酸的同源率为 87%。

关键词： J-亚群禽自血病病毒亚型特异性片段gp85 克隆及序列测定

新型氯霉素化学发光芯片免疫检测方法的建立及应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析化学 2018年第10期46卷 1581-1587页

作者：任帅丁乔棋李丽邵漫雨宋素泉闫丽萍南京农业大学动物医学院南京农业大学教育部动物健康和食品安全国际联合实验室南京农业大学江苏省动物免疫工程实验室

采用氯霉素（CAP）全抗原CAP-HS-BSA免疫新西兰兔,获得抗CAP多克隆抗体,测得效价为2×10;,此抗体与CAP结构类似物的交叉反应率均小于0.01%,特异性良好。在此基础上,分别建立了特异性检测氯霉素残留的间接竞争酶联免疫吸附法（ic-ELISA... 详细信息

采用氯霉素（CAP）全抗原CAP-HS-BSA免疫新西兰兔,获得抗CAP多克隆抗体,测得效价为2×10;,此抗体与CAP结构类似物的交叉反应率均小于0.01%,特异性良好。在此基础上,分别建立了特异性检测氯霉素残留的间接竞争酶联免疫吸附法（ic-ELISA）和基于iPDMS膜的化学发光芯片免疫检测法,并用于实际牛奶样品中CAP的检测。建立的ic-ELISA法的半数抑制浓度(IC;)为12.9 ng/mL,线性检测范围(IC;C;)为0.8;50.0 ng/mL,检出限(IC;)为0.1 ng/mL,回归方程B/B;=-0.2028lg C;+0.7281（R;=0.9926）。牛奶样品中加标回收率为81.8%;7.9%,相对标准偏差（RSD）小于10%。建立的化学发光芯片免疫检测方法的半数抑制浓度为263.0 ng/mL,线性范围(IC;C;)为1;000 ng/mL之间,检出限(IC;)为1 ng/mL,回归方程B/B;=0.1781 lg C;+0.9318（R;=0.9891）,牛奶中CAP的加标回收率为77.0%;00.5%,RSD<15%。

关键词：氯霉素多克隆抗体间接竞争酶联免疫分析化学发光芯片免疫

一株新型鸭呼肠孤病毒的分离及抗体检测的间接ELISA建立

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年第12期55卷 5651-5662页

作者：徐晨晨马旭杰宋素泉闫丽萍南京农业大学动物医学院南京210095

新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)能造成多品种雏鸭肝、脾的出血坏死,并造成免疫抑制,给我国的水禽养殖业造成了严重经济损失,但市场上仍无商品化检测试剂盒。基于此,本研究通过蚀斑纯化从临床病料中成功分离到一株纯净的新... 详细信息

新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)能造成多品种雏鸭肝、脾的出血坏死,并造成免疫抑制,给我国的水禽养殖业造成了严重经济损失,但市场上仍无商品化检测试剂盒。基于此,本研究通过蚀斑纯化从临床病料中成功分离到一株纯净的新型鸭呼肠孤病毒(命名为E232株),并以原核表达的σC蛋白为包被原建立了能够检测NDRV血清抗体的间接ELISA。遗传进化分析结果显示,E232株属于NDRV,且与其他NDRV毒株的核苷酸同源性为96.4%~98.9%。动物回归试验结果表明,E232株发病率达到100%,发病雏鸭的脾出现严重肿胀、出血、坏死,泄殖腔排毒量和咽部排毒量均在感染后第5天达到高峰。建立的间接ELISA具有良好的特异性,与其他鸭病病原阳性血清均无交叉反应;检测NDRV阳性血清最低检出效价为1∶6400,批内重复变异系数为1.53%~7.24%,批间重复变异系数为1.84%~8.30%,检测236份临床血清样品的阳性率为80.93%。综上,本研究E232株的成功分离,丰富了我国NDRV流行病学信息库;间接ELISA的成功建立,为临床NDRV防控提供了良好的技术手段。

关键词：新型鸭呼肠孤病毒分离鉴定 σC蛋白间接ELISA

同方期刊数据库博看期刊

2018—2019年南京某宠物医院2249例宠物猫疾病调查与统计分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧与兽医 2021年第3期53卷 115-120页

作者：牛昊岩张曦予马庆博宋素泉南京农业大学动物医学院江苏南京210095 艾贝尔宠物医院江苏南京210036

本文对2018年和2019年于南京市艾贝尔宠物医院龙江店就诊的2249例宠物猫病例进行调查与统计分析,以评估近年来南京地区宠物猫疾病的发生情况,同时补充国内猫疾病发生情况调查的相关资料。统计结果显示:内科疾病641例,占总病例数的28.50%... 详细信息

本文对2018年和2019年于南京市艾贝尔宠物医院龙江店就诊的2249例宠物猫病例进行调查与统计分析,以评估近年来南京地区宠物猫疾病的发生情况,同时补充国内猫疾病发生情况调查的相关资料。统计结果显示:内科疾病641例,占总病例数的28.50%,其中最常见的为消化系统疾病;外科疾病749例,占总病例数的33.30%,其中最常见的为软组织外科手术;产科疾病64例,占总病例数的2.85%,最常见的为难产;传染病322例,占总病例数的14.32%,最常见的为上呼吸道感染;寄生虫病190例,占总病例数的8.45%,最常见的为体外寄生虫感染;皮肤病283例,占总病例数的12.58%,最常见的为真菌性皮肤病。本次调查结果可在一定程度上提示近年来南京地区宠物猫疾病发生情况,并为宠物医生制定防控临床猫病的方案提供参考资料。

关键词：猫猫病调查

基质固相分散-液相色谱串联质谱法同时检测鸡蛋中15种真菌毒素生物标志物

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析化学 2015年第7期43卷 994-1000页

作者：朱闰月赵志勇杨宪立聂冬霞徐斐武爱波宋素泉上海理工大学医疗器械与食品学院南京农业大学动物医学院上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所

采用基质固相分散(Matrix solid phase dispersion,MSPD)技术,结合高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术(HPLC-ESI-MS/MS)分析,在多反应监测(MRM)模式下建立了鸡蛋中呕吐毒素、黄曲霉素、玉米赤霉烯酮等15种真菌毒素生物标志物的... 详细信息

采用基质固相分散(Matrix solid phase dispersion,MSPD)技术,结合高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术(HPLC-ESI-MS/MS)分析,在多反应监测(MRM)模式下建立了鸡蛋中呕吐毒素、黄曲霉素、玉米赤霉烯酮等15种真菌毒素生物标志物的同时定量分析的方法。样品与吸附剂C18颗粒直接混合装柱,并用20 m L 1 mmol/L甲酸铵的乙腈/甲醇(1∶1,V/V)溶液洗脱、吹干,萃取液经复溶、过滤后即可进行检测,整个分析过程无需复杂的净化、离心等步骤。本方法在0.2100 ng/m L范围内具有良好的线性关系,相关系数R2≥0.9931,检出限在0.052.0μg/kg之间,定量限在0.24.0μg/kg之间,样品的提取回收率为61%90%。

关键词：基质固相分散液相色谱-串联质谱鸡蛋真菌毒素

CIAV VP1 C端基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2004年第6期26卷 432-435页

作者：王英王笑梅高宏雷付朝阳张厚双宋素泉郭艳中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区... 详细信息

将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区和完整的Ⅲ区。把vp1基因克隆到表达载体pGEX＿6p＿1上,用BamHI消化重组表达质粒pGEX＿vp1,回收含C端基因的大片段,自连转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组质粒pGEX＿vp1(C)。重组菌经IPTG诱导,SDS＿PAGE分析,结果VP1C端基因片段在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量约为49kDa。蛋白纯化后作ELISA检测,可与阳性血清反应。本研究为研制应用重组抗原制备ELISA诊断试剂盒奠定了基础。

关键词： VP1 表达基因片段大肠杆菌克隆重组抗原抗原表位 vp1基因病料阳性血清

乳杆菌胞外多糖纳米佐剂对鸡血清4型禽腺病毒亚单位疫苗的免疫增强作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧与兽医 2024年第11期56卷 72-79页

作者：张硕姬贺龙丁晨晨宋素泉闫丽萍南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为了开发安全有效的新型兽用疫苗佐剂,将乳杆菌胞外多糖与季铵化壳聚糖自组装制备出两种纳米颗粒佐剂(NPs 7-4和NPs 8-2),研究其对蛋白抗原的免疫增强效果。纳米颗粒佐剂与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton base)亚单位疫苗颈... 详细信息

为了开发安全有效的新型兽用疫苗佐剂,将乳杆菌胞外多糖与季铵化壳聚糖自组装制备出两种纳米颗粒佐剂(NPs 7-4和NPs 8-2),研究其对蛋白抗原的免疫增强效果。纳米颗粒佐剂与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton base)亚单位疫苗颈部皮下免疫接种7日龄SPF鸡21 d后肌肉注射JS株FAdV-4,测定组织器官病毒载量和泄殖腔排毒量,白油佐剂作为对照。结果显示:两种纳米颗粒佐剂对Penton base亚单位疫苗均具有缓释作用;与白油佐剂组相比,NPs 8-2佐剂组极显著提高了免疫鸡的血清特异性抗体水平(P0.05);攻毒保护试验结果表明,与白油佐剂相比,NPs 8-2佐剂组提高了疫苗的攻毒保护率,组织脏器损伤明显减轻,组织病毒载量和泄殖腔排毒量显著减少(P<0.05),而NPs 7-4佐剂组免疫增强作用不显著。综上,NPs 8-2佐剂能有效增强血清4型禽腺病毒Penton base亚单位疫苗的免疫效果,减少抗原蛋白用量,产生较好的免疫保护效果,其免疫增强效果明显优于传统白油佐剂。

关键词：乳杆菌胞外多糖纳米佐剂血清4型禽腺病毒免疫效果

基于新型量子点荧光微球的氯霉素免疫层析试纸条的制备和应用

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析化学 2017年第11期45卷 1686-1693页

作者：丁乔棋李丽范文韬吕亚楠胡建华闫丽萍宋素泉南京农业大学动物医学院

以羧基化CdTe/ZnSe量子点荧光微球为标记物,通过1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺（EDC/NHS）活化法将氯霉素（CAP）单克隆抗体与量子点荧光微球偶联制备荧光探针。氯霉素全抗原（CAP-HS-BSA）及羊抗鼠二抗分别喷... 详细信息

以羧基化CdTe/ZnSe量子点荧光微球为标记物,通过1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺（EDC/NHS）活化法将氯霉素（CAP）单克隆抗体与量子点荧光微球偶联制备荧光探针。氯霉素全抗原（CAP-HS-BSA）及羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维素膜,形成检测线（T线）和质控线（C线）,组装成新型氯霉素量子点荧光微球免疫层析试纸条,建立了快速、定量检测牛奶中CAP的方法。本研究开发的量子点荧光微球试纸条可在15min内完成牛奶样品中CAP的定量检测,线性范围为0.1;00.0μg/L,检出限为0.1μg/L。牛奶样品CAP的加标回收率为93.3%;7.9%,相对标准偏差在4.9%;.9%之间。

关键词：氯霉素量子点微球免疫层析试纸条

J亚群禽白血病病毒Hrb-1和JL-2株囊膜基因的克隆及遗传分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科技 2003年第11期33卷 3-8页

作者：付朝阳宋素泉高宏雷王笑梅王英张厚双郭燕童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

采用特异性检测J亚群禽白血病病毒的RT PCR方法 ,自哈尔滨市及吉林省患病鸡群中分离鉴定出 2株J亚群禽白血病病毒 ,分别命名为Hrb 1和JL 2。 2株病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖 ,获取其前病毒DNA。采用依据原型毒株HPRS 10 3cDNA序列设计... 详细信息

采用特异性检测J亚群禽白血病病毒的RT PCR方法 ,自哈尔滨市及吉林省患病鸡群中分离鉴定出 2株J亚群禽白血病病毒 ,分别命名为Hrb 1和JL 2。 2株病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖 ,获取其前病毒DNA。采用依据原型毒株HPRS 10 3cDNA序列设计并合成的 1对引物 ,进行PCR扩增 ,得到了JL 2和Hrb 1的囊膜基因。分别构建了重组质粒 pMD18 T JL2 /env和pMD18 T Hrb 1/env。在对 2株病毒囊膜基因进行序列测定的基础上 ,将囊膜基因中 gp85和 gp37的核苷酸序列及其推导氨基酸序列与国际上不同的参照毒株以及国内部分分离株进行了比较分析 ,结果表明 ,JL 2和Hrb 1分别与美国病毒株adol hc 1和UD3有着较大的亲缘关系。

关键词：鸡 J亚群禽白血病 Hrb-1病毒株 JL-2病毒株基因克隆遗传分析 RT-PCR