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国外医学（生理病理科学与临床分册） 1992年第2期12卷 72-75页

作者：宋惠萍

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四种药物对人脑醛糖还原酶的抑制作用

中国药理学与毒理学杂志 1988年第4期2卷 261-266页

作者：宋惠萍卢义钦湖南医科大学生化教研室长沙 410008 湖南医科大学生化教研室

从人脑提纯了醛糖还原酶,应用酶动力学的方法研究了四种药物对此酶的抑制作用。结果表明索比尼尔,阿司他丁和苯巴比妥是人脑醛糖还原酶的完全性非竞争性抑制剂,四甲烯戊二酸是此酶的部分性非竞争性抑制剂。从抑制曲线及四种药物的抑制常... 详细信息

从人脑提纯了醛糖还原酶,应用酶动力学的方法研究了四种药物对此酶的抑制作用。结果表明索比尼尔,阿司他丁和苯巴比妥是人脑醛糖还原酶的完全性非竞争性抑制剂,四甲烯戊二酸是此酶的部分性非竞争性抑制剂。从抑制曲线及四种药物的抑制常数(Ki)可知,索比尼尔是人脑醛糖还原酶最有效的抑制剂,阿司他丁次之。根据苯巴比妥的Ki和它的毒性作用推测,此药似不宜以醛糖作为原酶的抑制剂应用于临床。

关键词：醛糖还原酶索比尼尔阿司他丁四甲烯戊二酸苯巴比妥脑

ACTIVITIES OF ALDOSE REDUCTASE, ATPases, AND NUCLEOTIDE CONCENTRATIONS OF ERYTHROCYTES IN PATIENTS WITH TYPE 2 (NON-INSULIN-DEPENDENT) DIABETES MELLITUS

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中华医学杂志(英文版) 1991年第10期104卷 818-824页

作者：宋惠萍韩秀云何沅康铁邦伍汉文 410078 Changsha Hunan Medical University 10078 Changsha Hunan Medical University

Aldose reductase （EC 1.***.1.21） is implicated in the pathophysiology of diabetic complications. In this paper we determined the activities of aldose reductase and ATPases of the erythrocytes in 17 patients with Type 2 （non-insulin-dependent） diabetes mellitus （NIDDM）. In the aldose reductase assay we used fiuorometric method to avoid the disturbance of hemoglobin. With dihydronicotinamide adenine dinucleotide （NADH）, we verified it was aldose reductase but not aldehyde reductase Ⅱ that was activated in the erythrocytes of the patients with NIDDM. The aldose reductase activity of the erythrocytes in the patients was significantly higher （P<0.01） than that in the controls. The activity of Na/K-ATPase of the patients was significantly lower （P<0.01） than that of the controls. The activities of Ca-ATPase and Mg-ATPase on the erythrocyte membranes of the patients were similar to those of the controls. At the same time we measured the seven nucleotide concentrations in the erythrocytes of the patients. In this experiment we used ultrafiltration method, instead of acid precipitation to make it possible to determine dihydronicotinamide adenine dinucleotide phosphate （NADPH） and NADH. The concentrations of ATP, ADP and AMP were similar to those of the controls. The concentrations of NADPH, NADand NADH in the erythrocytes of the patients were significantly lower （P<0.01, 0.05 and 0.05 respectively） than those of controls. The concentration of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate （NADP） in the patients was significantly higher （P<0.01） than that of controls.

关键词：

高胰岛素水平对血管平滑肌细胞NO生成的影响

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湖南医科大学学报 2001年第5期26卷 415-417页

作者：谢平刘美莲谷亚鹏宋惠萍中南大学湘雅医学院生化教研室长沙410078

培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC) ,检测高胰岛素 (HI)对VSMC膜蛋白激酶C(PKC)活性的影响 ;并采用硝酸还原酶法和免疫印迹法检测HI加或不加PKC抑制剂 -H7对脂多糖 (LPS) +γ -干扰素 (γ -IFN)诱导NO生成和一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响... 详细信息

培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC) ,检测高胰岛素 (HI)对VSMC膜蛋白激酶C(PKC)活性的影响 ;并采用硝酸还原酶法和免疫印迹法检测HI加或不加PKC抑制剂 -H7对脂多糖 (LPS) +γ -干扰素 (γ -IFN)诱导NO生成和一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响。结果 ,HI预处理的VSMC ,膜PKC活性明显高于对照 (P <0 .0 5 ) ;LPS +γ -IFN诱导NO生成显著低于对照 (P <0 .0 1) ,加H7培育 ,NO的生成量较HI处理组明显提高 ,但低于对照 (P <0 .0 1)。免疫印迹示HI处理的VSMC ,iNOS表达下降。提示 :高胰岛素血症可能通过激活VSMC膜PKC ,部分抑制iNOS表达 ,减少NO产生。

关键词：胰岛素分泌过多血管平滑肌细胞一氧化氮蛋白激酶C 大鼠

H_2O_2对平滑肌细胞凋亡及p38MAPK活性的影响

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湖南医科大学学报 2002年第5期27卷 402-404页

作者：陈慧玲廖兰雷闽湘宋惠萍中南大学湘雅医院内分泌科长沙410008 中南大学湘雅医学院生化教研室长沙410078

目的 :了解H2 O2 对兔血管平滑肌细胞 (VSMC)p38蛋白激酶 (p38MAPK)磷酸化的影响及其与细胞凋亡的关系。方法 :取兔主动脉血管平滑肌细胞培养 ,加或不加H2 O2 孵育 ,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应 (MTT)法检测平滑肌细胞活性 ,以Western... 详细信息

目的 :了解H2 O2 对兔血管平滑肌细胞 (VSMC)p38蛋白激酶 (p38MAPK)磷酸化的影响及其与细胞凋亡的关系。方法 :取兔主动脉血管平滑肌细胞培养 ,加或不加H2 O2 孵育 ,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应 (MTT)法检测平滑肌细胞活性 ,以Western杂交检测p38MAPK磷酸化。结果 :①随着H2 O2 浓度增加 ,VSMC活性呈剂量依赖性降低 ;②磷酸化p38MAPK的表达随H2 O2 浓度的增高而增加 ,且磷酸化的p38MAPK在H2 O2 作用后 15min时达到峰值。③加用特异性的p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80后可显著降低p38MAPK的活化 ,并能逆转H2 O2 诱导细胞凋亡的作用。结论 :H2 O2 通过激活p38MAPK而使平滑肌细胞凋亡增加。

关键词： H2O2 细胞凋亡平滑肌细胞 p38蛋白激酶糖尿病心血管疾病

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人胎盘醛还原酶的动力学和热力学性质

湖南医科大学学报 1989年第1期14卷 1-5页

作者：宋惠萍湖南医科大学生物化学教研室

本实验条件下,醛还原酶的最适反应温度为40℃。在25—45℃范围内,K_(iNADPH)随温度上升而增大,K_(mD-)葡萄糖醛酸(K_(mD-Glu))随温度上升而减小,25℃时K_(mNADPH)值最小,反应的活化能为4521±653Cal/mol。温度越高,Alr1的ΔG~≠越大,约... 详细信息

本实验条件下,醛还原酶的最适反应温度为40℃。在25—45℃范围内,K_(iNADPH)随温度上升而增大,K_(mD-)葡萄糖醛酸(K_(mD-Glu))随温度上升而减小,25℃时K_(mNADPH)值最小,反应的活化能为4521±653Cal/mol。温度越高,Alr1的ΔG~≠越大,约3/4的ΔG~≠用以维持过渡态酶一底物复合物的空间构象,以增加分子的有序程度。

关键词：醛氧化还原酶热力学胎盘

骨胳肌蛋白磷酸酶1调节亚基基因3′非翻译区多态性与2型糖尿病相关性研究

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中华内分泌代谢杂志 2002年第5期18卷 369-370页

作者：谷亚鹏谢平刘美莲宋惠萍中南大学湘雅医学院生化教研室长沙410078

蛋白质磷酸酶1(protein phosphatase 1, PPI)在胰岛素作用下可通过脱磷酸作用激活糖原合成酶，促进葡萄糖摄取和糖尿合成。PP1由一个催化亚基(PP1 catalytic subunit, PP1C)和糖原目标亚基（又称调节亚基）(glycogen-associated regulat... 详细信息

蛋白质磷酸酶1(protein phosphatase 1, PPI)在胰岛素作用下可通过脱磷酸作用激活糖原合成酶，促进葡萄糖摄取和糖尿合成。PP1由一个催化亚基(PP1 catalytic subunit, PP1C)和糖原目标亚基（又称调节亚基）(glycogen-associated regulatory subunit of type 1, PPIG）组成，调节亚基正性调节催化亚基的去磷酸化，其编码基因被称作PPP1R3基因。在胰岛素抵抗状态下，胰岛素对PP1的激活作用减弱，从而降低糖原合成酶的活性。

关键词：基因多态性骨胳肌蛋白磷酸酶1 调节亚基 2型糖尿病相关性

胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶对醛糖还原酶的磷酸化作用

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高技术通讯 1997年第3期7卷 8-11页

作者：宋惠萍韩秀云湖南医科大学生化教研室长沙410078 湖南医科大学湘雅医院内科长沙410008

从人胎盘纯化了醛糖还原酶和部分纯化了胰岛素受体。通过磷酸化实验证明：醛糖还原酶是胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶的底物，经分析揭示：胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶可将醛糖还原酶的第40位和第49位的酪氨酸残基磷酸化。在试管内，未磷酸化... 详细信息

从人胎盘纯化了醛糖还原酶和部分纯化了胰岛素受体。通过磷酸化实验证明：醛糖还原酶是胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶的底物，经分析揭示：胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶可将醛糖还原酶的第40位和第49位的酪氨酸残基磷酸化。在试管内，未磷酸化的醛糖还原酶和磷酸化的醛糖还原酶的动力学常数无差异，而细胞内的情况有待于进一步研究。本实验提示：醛糖还原酶除具酶活性外，可能还有在细胞内传递胰岛素信息的功能。

关键词：醛糖还原酶胰岛素受体磷酸化糖尿病

醛糖还原酶基因(AC)_n串联重复序列多态性与糖尿病视网膜并发症的相关性

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中华内分泌代谢杂志 2001年第6期17卷 367-368页

作者：李清解谢平曾卫民宋惠萍中南大学湘雅医学院生化教研室长沙410078

高血糖一直被视作导致糖尿病慢性并发症(DCC)的主要因素,而多元醇(主要是山梨醇)通路在高糖状况下过度激活对DCC的发生、发展起着重要的作用.醛糖还原酶(AR)是多元醇代谢途径的限速酶,与DCC的发生发展密切相关[1].AR活性的改变除与高血... 详细信息

高血糖一直被视作导致糖尿病慢性并发症(DCC)的主要因素,而多元醇(主要是山梨醇)通路在高糖状况下过度激活对DCC的发生、发展起着重要的作用.醛糖还原酶(AR)是多元醇代谢途径的限速酶,与DCC的发生发展密切相关[1].AR活性的改变除与高血糖相关外,遗传因素也是不可忽略的原因.在不同人群中,AR基因转录起始点上游-2.1kb处有(AC)n二核苷酸重复序列标记与DCC之间的关联性存在争议[2].本文研究中国大陆人群中该重复序列标记与2型糖尿病性视网膜病变之间的关系.

关键词：糖尿病视网膜病变醛糖还原酶基因 (AC)n 串联重复序列多态性

胰岛素受体底物-1基因5′-调控序列CAG富含区碱基缺失/插入的研究

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湖南医科大学学报 2001年第2期26卷 103-106页

作者：黄建军宋惠萍中南大学湘雅医学院生化教研室长沙410078

研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因 5′ 调控序列与 2型糖尿病的关系。采用PCR SSCP技术扫描 76例 2型糖尿病患者和 78例正常对照IRS 1基因 5′ 调控区 ,结合应用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法 ,检测IRS 1基因 5′ 调控序列CAG富... 详细信息

研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因 5′ 调控序列与 2型糖尿病的关系。采用PCR SSCP技术扫描 76例 2型糖尿病患者和 78例正常对照IRS 1基因 5′ 调控区 ,结合应用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法 ,检测IRS 1基因 5′ 调控序列CAG富含区的插入 /缺失多态性 ;以检获的正常和变异样品基因组DNA为摸板 ,用高保真pfuDNApolymerase进行扩增 ,采用亚克隆技术 ,将扩增片段分别插入pCATBasic质粒中。通过限制性内切酶酶切并结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染分析后 ,根据迁移率不同筛选含有不同等位基因的重组质粒并进行测序。结果发现人IRS 1基因 5′ 调控区CAG富含区存在以三核苷酸为单位的多种插入 /缺失变异。共检测出 7种基因型和 6种等位基因 (T1～T6 ) ,其中等位基因T5 ,T6仅见于 2型糖尿病组。

关键词：胰岛素受体底物-1 CAG富含区等位基因 Ⅱ型糖尿病基因调控插入/缺失