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土茯苓苗期炭疽病菌的鉴定、生物学特性及防治药剂筛选

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广西科学 2024年

作者：邓力苏远玉徐国梁刘婧张殷蕾宋利沙廖国健冯世鑫张坤梁文静万凌云韦树根广西壮族自治区国有钦廉林场广西壮族自治区药用植物园广西道地药材高品质形成与应用重点实验室

为明确土茯苓(Smilax glabra Roxb.)苗期炭疽病菌的致病菌及病菌的生物学特性，筛选出有效的防治药剂，本研究通过对钦州的土茯苓炭疽病病原菌进行分离纯化、致病性测定、形态与多基因序列(ITS、TUB、ACT、GAPDH和CHS)联合分析来确定病... 详细信息

为明确土茯苓(Smilax glabra Roxb.)苗期炭疽病菌的致病菌及病菌的生物学特性，筛选出有效的防治药剂，本研究通过对钦州的土茯苓炭疽病病原菌进行分离纯化、致病性测定、形态与多基因序列(ITS、TUB、ACT、GAPDH和CHS)联合分析来确定病原菌的分类地位，并对其病原菌生物学特性以及4种化学药剂对病原菌的室内毒力进行测定。结果表明，土茯苓苗期炭疽病病菌为可可炭疽菌(Colletotrichum theobromicola)，其最适生长条件如下：最适培养基为沙氏培养基，以麦芽糖和葡萄糖为碳源，以硝酸钾和蛋白胨为氮源，全光照和28 ℃、pH值为4.0的条件下生长，菌丝致死温度为55 ℃下处理20 min。4种杀菌剂对土茯苓炭疽菌的菌丝生长均表现较强的毒力，其中450 g/L咪鲜胺WG的毒力最强，EC50值为0.0308 mg/L；250 g/L丙环唑EC的毒力最弱，EC50值为0.5617 mg/L，表明这些杀菌剂均对土茯苓炭疽病具有较好的抑制效果，为土茯苓炭疽病的识别和防治提供了科学依据。

关键词：土茯苓炭疽病病原鉴定生物学特性药剂筛选

化橘红挥发油对罗汉果斑枯病菌的抑制作用及机理

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湖北农业科学 2024年第6期63卷 94-98,120页

作者：詹鑫婕陈乾平蒋妮宋利沙丘卓秋黄琦潘丽梅冯世鑫白丹宇蒋水元广西壮族自治区药用植物园广西道地药材高品质形成与应用重点实验室/广西中药材良种繁育技术创新中心南宁530023 广西壮族自治区药用植物园国家中医药传承创新中心南宁530023 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所广西桂林541006

采用平板抑菌法结合盆栽防治试验测定化橘红(Citri grandis Exocarpium)挥发油对罗汉果(Siraitia grosvenorii)斑枯病菌(Stagonosporopsis cucurbitacearum)的抑制活性。通过显微观察病原菌菌丝体的形态及测定挥发油处理病原菌菌丝体后... 详细信息

采用平板抑菌法结合盆栽防治试验测定化橘红(Citri grandis Exocarpium)挥发油对罗汉果(Siraitia grosvenorii)斑枯病菌(Stagonosporopsis cucurbitacearum)的抑制活性。通过显微观察病原菌菌丝体的形态及测定挥发油处理病原菌菌丝体后处理液的电导率及可溶性蛋白质含量变化情况,探究化橘红挥发油的抑菌机理。平板抑菌结果表明,化橘红挥发油稀释≤1 000倍对罗汉果斑枯病病原菌菌丝生长的抑制率均达100.0%,显著高于80%多菌灵可湿性粉剂稀释1 000倍的抑制率(88.7%)。盆栽试验结果表明,化橘红挥发油稀释1 000倍,45%戊唑·咪鲜胺乳油和10%苯醚甲环唑乳油对罗汉果斑枯病病斑扩展的抑制率均在80.0%以上,且均显著高于80%多菌灵可湿性粉剂的抑制率(70.68%)。显微镜下观察发现,经化橘红挥发油处理7 d的病原菌菌丝呈念珠状膨大并有断裂现象。菌丝体与化橘红挥发油共培养结果表明,混合液的电导率及可溶性蛋白质含量均随着化橘红挥发油处理浓度的加大、互作时间的延长而提高;浓度为2.0 g/L的化橘红挥发油与病原菌菌丝共培养48 h,培养液的电导率为279.208μS/cm,为各处理最大值;挥发油终质量分数0.2%、作用60 h后,培养液中的可溶性蛋白质含量达90.6μg/mL,为各处理的最大值。

关键词：罗汉果(Siraitia grosvenorii) 斑枯病菌(Stagonosporopsis cucurbitacearum) 化橘红(Citri grandis Exocarpium) 挥发油抑制作用及机理

亚精胺+赤霉素在低温下对化橘红种子萌发及幼苗生理指标的影响

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热带农业科学 2023年

作者：冯世鑫陈乾平蒋妮宋利沙广西壮族自治区药用植物园

以化橘红种子为材料，在低温下，研究亚精胺(Spd)+赤霉素(GA3)对化橘红种子萌发、幼苗根系的生长、根活力及生理指标的影响，以培育壮苗。设置亚精胺浓度为0(CK)、0.10mmolL-1、0.15mmolL-1、0.20mmolL-1、0.25mmolL-1分别添加80mg/L的... 详细信息

以化橘红种子为材料，在低温下，研究亚精胺(Spd)+赤霉素(GA3)对化橘红种子萌发、幼苗根系的生长、根活力及生理指标的影响，以培育壮苗。设置亚精胺浓度为0(CK)、0.10mmolL-1、0.15mmolL-1、0.20mmolL-1、0.25mmolL-1分别添加80mg/L的GA3溶液浸种、培养，测定种子发芽率、发芽势，幼苗根长、苗长、根重、苗重、根长/苗长、根重/苗重、抗氧化酶活性、渗透调节物质及膜质过氧化物含量的变化。结果在低温的条件下，亚精胺+赤霉素对化橘红种子的萌发有协同促进作用，发芽率、发芽势和发芽指数明显提高；单一使用赤霉素时，幼苗根的生长受到抑制，添加亚精胺后能明显缓解。缓解程度与SPd的浓度呈正相关，以0.20 mmol/L亚精胺+80 mg/L赤霉素处理的根长、根重、根长/苗长、根重/苗重和根活力最高；其幼苗根系的抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性显著增强；提高了渗透调节物质脯氨酸和可溶性蛋白的含量，降低丙二醛(MDA)含量。结论亚精胺+赤霉素复配能促进化橘红种子萌发、根系的生长和根活力的提高；能缓解低温对化橘红幼苗根的损害，提高种苗的抗寒性。

关键词：亚精胺赤霉素化橘红幼苗根生长生理指标

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罗汉果病害研究进展

南方农业学报 2023年第4期54卷 1157-1165页

作者：蒋妮詹鑫婕宋利沙丘卓秋潘丽梅蒋水元广西壮族自治区药用植物园/广西卫生健康委员会重点实验室广西南宁530023 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所广西桂林541006

罗汉果是广西大宗道地药材,具有润肺止咳的功效,其所含低热量的罗汉果甜苷备受人们欢迎。随着罗汉果人工种植面积的不断扩大,其病害问题日益突出,质量和产量均受到严重影响,已成为制约罗汉果产业发展的重要因素之一。目前已报道的罗汉... 详细信息

罗汉果是广西大宗道地药材,具有润肺止咳的功效,其所含低热量的罗汉果甜苷备受人们欢迎。随着罗汉果人工种植面积的不断扩大,其病害问题日益突出,质量和产量均受到严重影响,已成为制约罗汉果产业发展的重要因素之一。目前已报道的罗汉果病害有罗汉果病毒病、根结线虫病、青枯病、斑枯病、芽枯病、炭疽病、白绢病和根腐病等,其中病毒病和根结线虫病是主要病害,发生普遍、危害性大。文章综述了罗汉果病害的发病症状、病原、发生规律及防治方法等研究现状,指出当前罗汉果病害研究主要聚焦于罗汉果病毒病和根结线虫病,但研究深度不够,生产中罗汉果病毒病和根结线虫病问题依然严峻;提出建立快速、简便、特异性强的罗汉果病毒病检测方法,制定和完善罗汉果病毒检测规程;完善罗汉果脱毒苗生产技术体系,做到组培苗不带病毒,育苗基质不带线虫;重视田间综合防治技术协同研究,以减少病毒和线虫传播;加强对罗汉果病毒病和根结线虫病防治的宣传,指导农户科学合理种植;加强罗汉果抗病毒和抗线虫种质资源的收集、筛选与利用。针对今后罗汉果病害重点研究方向,认为应系统开展“寄主、病原物、环境”三角互作关系研究,建立绿色防控技术体系,选育抗病品种,以期为罗汉果病害的综合防治提供参考,推动罗汉果产业的高质量发展。

关键词：罗汉果中药材病害研究进展

桑寄生种子高产木质纤维素降解酶内生真菌的筛选与鉴定

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西南农业学报 2023年第9期36卷 1924-1933页

作者：宋利沙万凌云韦树根潘丽梅霍娟付金娥蒋妮广西壮族自治区药用植物园/广西卫生健康委员会重点实验室南宁530023

【目的】筛选、分离、鉴定桑寄生种子高产木质纤维素降解酶内生真菌,为获取降解能力较强的木质纤维素降解酶及实现桑寄生人工栽培提供技术支撑。【方法】以桑寄生种子为研究对象,采用常规组织分离法分离其内生真菌,以麦麸为木质纤维生... 详细信息

【目的】筛选、分离、鉴定桑寄生种子高产木质纤维素降解酶内生真菌,为获取降解能力较强的木质纤维素降解酶及实现桑寄生人工栽培提供技术支撑。【方法】以桑寄生种子为研究对象,采用常规组织分离法分离其内生真菌,以麦麸为木质纤维生物物质底物,采用ABTS法、藜芦醛法和苯酚红法及纤维素酶(CL)活性检测试剂盒分别测定其漆酶、木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和纤维素降解酶活性,筛选降解木质纤维素能力较强的菌株,并根据形态特征和系统进化树分析确定其分类地位。【结果】从57株桑寄生种子内生真菌中筛选出4株高产木质纤维素降解酶菌株(15H3、2013、106和10y11)。其中,培养11 d时菌株15H3的木质素过氧化物酶活性和菌株2013的锰过氧化物酶活性达高峰,分别为7.14和11.69 U/mL;培养9 d时菌株106的漆酶活性、菌株2013的纤维素酶活性和菌株10y11的锰过氧化物酶活性最高,分别为57.98、0.32和8.56 U/mL。经形态学观察和分子生物学鉴定,15H3和2013分别为拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis arceuthobii)和垫壳孢属(Coniella pseudogranati)菌株,106和10y11为镰孢属(Fusarium incarnatum)菌株。【结论】从桑寄生种子中能筛选鉴定出高产木质纤维素降解酶内生真菌拟盘多毛孢属、垫壳孢属和镰孢属,可为桑寄生侵入寄主细胞壁降解机制研究提供理论依据,为桑寄生的繁育提供数据支持。

关键词：桑寄生种子内生真菌木质纤维素降解酶筛选鉴定

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积雪草组织培养技术分析

分子植物育种 2023年

作者：潘丽梅雷明万凌云谭桂玉覃雅李翠宋利沙张坤付金娥彭凤候小利韦树根张占江广西壮族自治区药用植物园广西道地药材高品质形成与应用重点实验室

为构建积雪草组织培养快速繁殖体系，本研究以积雪草带腋芽茎段和叶片为外植体，通过配制不同浓度培养基，检测和分析不同激素配比组合对芽的诱导、愈伤组织诱导、增殖培养、生根培养的影响，以及不同基质和不同根系类型对组培苗移栽成... 详细信息

为构建积雪草组织培养快速繁殖体系，本研究以积雪草带腋芽茎段和叶片为外植体，通过配制不同浓度培养基，检测和分析不同激素配比组合对芽的诱导、愈伤组织诱导、增殖培养、生根培养的影响，以及不同基质和不同根系类型对组培苗移栽成活的影响。结果表明：积雪草茎段最佳消毒灭菌的方式为：75%酒精30 s，0.1%氯化汞6～7 min；叶片消毒灭菌最佳方式为：75%酒精30 s+0.1%氯化汞6 min；在初代培养中，最适合诱导腋芽的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA；叶片愈伤诱导的最佳培养基为：MS＋1.5 mg/L TDZ＋0.5 mg/L NAA，诱导率达100%；在继代培养时，较适合无菌芽增殖的培养基为：MS+0.3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L TDZ，不定芽分化较明显；诱导愈伤芽分化最佳培养基为：MS+2.5 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA，出芽率较高；最适合组培苗生根的培养基为1/2MS＋0.05 mg/L 6-BA＋0.8 mg/L NAA；用蛭石作为基质移栽培养生根的积雪草组培苗最合适。本研究建立了积雪草组织快繁体系，为积雪草工厂化生产及生物育种提供技术支持。

关键词：积雪草组织培养增殖繁殖系数

广西良凤江国家森林公园植物内生拟盘多毛孢属真菌种类多样性调查

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林业科学 2016年第7期52卷 87-95页

作者：宋利沙韦继光云朝光杨秀好罗基同黄松殿广西大学农学院南宁530005 广西南宁良凤江国家森林公园南宁530031 广西林业有害生物防治检疫站南宁530028

【目的】对广西良凤江国家森林公园苏木科、木兰科和桃金娘科共16种植物的内生拟盘多毛孢属真菌种类多样性进行调查,为进一步了解植物内生拟盘多毛孢的组成及开展内生拟盘多毛孢代谢产物提供物质基础。【方法】采用常规组织块分离法和... 详细信息

【目的】对广西良凤江国家森林公园苏木科、木兰科和桃金娘科共16种植物的内生拟盘多毛孢属真菌种类多样性进行调查,为进一步了解植物内生拟盘多毛孢的组成及开展内生拟盘多毛孢代谢产物提供物质基础。【方法】采用常规组织块分离法和分子技术分析内生拟盘多毛孢与植物种类、分离部位和分离季节的相关性。【结果】从苏木科、木兰科和桃金娘科16种植物中共分离得到89株拟盘多毛孢属真菌,经形态学鉴定为11个种。桃金娘科中的白千层、假多瓣蒲桃,苏木科的银珠、中国无忧花分离得到的拟盘多毛孢种数分别为8,6和8,6种,是拟盘多毛孢定殖种类最多的植物;银珠内生拟盘多毛孢定殖率最高,为2.86%。内生拟盘多毛孢在植物枝条的定殖率高于叶片,秋季高于其他季节。3科植物内生拟盘多毛孢属真菌种类多样性指数以苏木科最高(2.235 3),桃金娘科次之(2.163 5),木兰科最低(1.863 7)。【结论】广西良凤江国家森林公园多种植物内拟盘多毛孢属真菌喜好定殖在银珠、中国无忧花、格木和白千层等植物;对植物器官有明显的选择性,定殖率以枝条较高;与季节有一定的关系,以秋季最高。

关键词：拟盘多毛孢属定殖率多样性苏木科木兰科桃金娘科

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肿节风炭疽病拮抗细菌的筛选与鉴定

植物保护 2018年第6期44卷 61-65,72页

作者：宋利沙蒋妮缪剑华蓝祖栽广西壮族自治区药用植物园南宁530023 广西大学农学院南宁530004

为筛选出对肿节风炭疽病菌Colletotrichum dematium具有拮抗作用的细菌,开发新型生物制剂,本试验分别采用组织分离法和稀释平板法,从广西药用植物园科研基地健康肿节风植株的不同组织和根系土壤分离、纯化获得49株细菌。平板对峙试验结... 详细信息

为筛选出对肿节风炭疽病菌Colletotrichum dematium具有拮抗作用的细菌,开发新型生物制剂,本试验分别采用组织分离法和稀释平板法,从广西药用植物园科研基地健康肿节风植株的不同组织和根系土壤分离、纯化获得49株细菌。平板对峙试验结果表明,来自土壤的zjt-9、zjt-4,来自根系的zgs21及叶片的zyy13对肿节风炭疽病菌具有较强的拮抗作用,其中作用最强的是zjt-9。抗菌谱测定结果表明, zjt-9、zjt-4和zyy13对供试的18种病原真菌均有明显的拮抗效果,拮抗作用最强的是zjt-9,平均抑菌宽度最高达19.10 mm;经显微镜观察,拮抗细菌可造成肿节风炭疽病病原菌菌丝膨大、畸形、断裂。通过形态学特性和16S rDNA鉴定,zjt-9菌株为甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus。

关键词：肿节风炭疽病拮抗细菌筛选鉴定

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草珊瑚炭疽病拮抗细菌的鉴定及其抑菌机理

微生物学通报 2020年第10期47卷 3266-3276页

作者：宋利沙蒋妮张占江蓝祖栽广西壮族自治区药用植物园广西南宁530023

【背景】草珊瑚炭疽病发生严重,目前尚未有植物内生细菌对该病原菌生物防治的研究报道。【目的】筛选对肿节风炭疽病Colletotrichumdematium具有拮抗作用的内生细菌,并对其抑菌机理进行研究。【方法】采用平板稀释法从广西不同地区采集... 详细信息

【背景】草珊瑚炭疽病发生严重,目前尚未有植物内生细菌对该病原菌生物防治的研究报道。【目的】筛选对肿节风炭疽病Colletotrichumdematium具有拮抗作用的内生细菌,并对其抑菌机理进行研究。【方法】采用平板稀释法从广西不同地区采集健康肿节风植株的不同组织分离、纯化获得内生细菌。【结果】平板对峙试验结果表明,来自茎的RJ-4和JJ-5对草珊瑚炭疽病具有较强的拮抗作用,其中拮抗作用最强的菌株是RJ-4,其抑制率达到84.10%。抗菌谱测定结果表明,RJ-4、JJ-5对供试的14种病原真菌均有明显的拮抗效果,拮抗作用最强的是RJ-4,平均抑制率达到95.30%;抑菌机理研究结果表明,该菌株可以分泌蛋白酶和纤维素酶以及几丁质酶,破坏病菌菌丝,抑制病菌生长;含有拮抗细菌的发酵液对病原菌菌丝抑制明显,菌丝扭曲、断裂且分枝缠绕、菌丝颜色加深等。通过形态学特性和16S rRNA基因鉴定,RJ-4菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。【结论】RJ-4菌株具有抑菌抗病功能,并能产生多种抗菌活性物质,这可为新型抗菌物质提供资源。

关键词：草珊瑚炭疽病拮抗细菌抑菌机理鉴定