检索结果-南通市图书馆

miR-409-3p靶向调控MTF2基因在鼻咽癌细胞紫杉醇耐药机制中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤 2021年第5期41卷 341-352页

作者：肖剑陈亦龙谭国林宋业勋中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科湖南长沙410013 宁乡市人民医院耳鼻咽喉头颈外科湖南宁乡410600

目的:探讨微RNA(microRNA,miR)-409-3p及其靶基因MTF2在鼻咽癌细胞对紫杉醇耐药中的作用以及可能的作用机制。方法:采用CCK-8法和集落形成实验检测鼻咽癌亲本细胞CNE-1和5-8F以及耐药细胞CNE-1/Taxol和5-8F/Taxol对紫杉醇的敏感性,实时... 详细信息

目的:探讨微RNA(microRNA,miR)-409-3p及其靶基因MTF2在鼻咽癌细胞对紫杉醇耐药中的作用以及可能的作用机制。方法:采用CCK-8法和集落形成实验检测鼻咽癌亲本细胞CNE-1和5-8F以及耐药细胞CNE-1/Taxol和5-8F/Taxol对紫杉醇的敏感性,实时荧光定量PCR法检测miR-409-3p在亲本细胞和耐药细胞中的表达水平。采用脂质体法将miR-409-3p-抑制子(inhibitor)分别转染CNE-1/Taxol和5-8F/Taxol细胞,采用实时荧光定量PCR法验证转染效率,CCK-8法和集落形成实验检测鼻咽癌细胞对紫杉醇耐药与miR-409-3p之间的相关性。利用Targetscan、miRDB、miRTarBase和miRWalk数据库预测miR-409-3p可能的下游靶基因,并采用荧光素酶报告基因检测miR-409-3p是否直接靶向结合MTF2基因。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测转染miR-409-3p-inhibitor(以转入NC-inhibitor为对照)后对MTF2 mRNA和蛋白表达水平的影响。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测MTF2 mRNA和蛋白在鼻咽癌亲本细胞和紫杉醇耐药细胞中的表达水平。采用脂质体转染法将pcDNA3.1-MTF2(以转入pcDNA3.1-NC为对照)转入CNE-1/Taxol和5-8F/Taxol细胞,CCK-8法和集落形成实验检测过表达MTF2后耐药细胞对紫杉醇药物敏感性的变化,FCM检测MTF2过表达后5-8F/Taxol细胞凋亡率的变化。结果:鼻咽癌亲本细胞对紫杉醇的敏感性明显高于耐药细胞(P<0.05)。鼻咽癌耐药细胞中miR-409-3p的表达水平均高于鼻咽癌亲本细胞(P<0.001)。利用Targetscan、miRDB、miRTarBase和miRWalk数据库进行预测以及荧光素酶报告基因检测证实,miR-409-3p靶向调控MTF2基因。下调鼻咽癌耐药细胞中miR-409-3p的表达水平后,细胞对紫杉醇的耐药性下降(P<0.05),而MTF2的表达水平增加(P<0.01);鼻咽癌亲本细胞中的MTF2表达水平高于鼻咽癌耐药细胞(P<0.01);上调鼻咽癌耐药细胞中MTF2的表达水平后,细胞对紫杉醇的耐药性下降(P<0.05);上调鼻咽癌耐药细胞5-8F/Taxol中MTF2的表达水平后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论:miR-409-3p靶向负调控MTF2的表达,抑制此信号轴可以促进紫杉醇诱导的鼻咽癌细胞的凋亡。MTF2可能作为逆转鼻咽癌化疗耐药的靶分子。

关键词：鼻咽肿瘤微RNAs MTF2基因抗药性肿瘤细胞凋亡

基于生物信息学方法的食管鳞状细胞癌差异基因筛选和相关生物学特征分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华消化杂志 2020年第6期40卷 361-367页

作者：宋业勋肖剑刘少俊张德才中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科长沙410013 中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013

目的应用生物信息学方法对食管鳞状细胞癌(以下简称鳞癌)差异基因表达谱进行分析,筛选与食管鳞癌发生、发展相关的关键基因,并寻找食管鳞癌早期诊断和预后的生物标志物。方法从基因表达综合数据库下载食管鳞癌基因芯片数据集GSE26886、G... 详细信息

目的应用生物信息学方法对食管鳞状细胞癌(以下简称鳞癌)差异基因表达谱进行分析,筛选与食管鳞癌发生、发展相关的关键基因,并寻找食管鳞癌早期诊断和预后的生物标志物。方法从基因表达综合数据库下载食管鳞癌基因芯片数据集GSE26886、GSE77861、GSE100942、GSE20347、GSE23400、GSE38129、GSE17351。首先筛选出各数据集食管鳞癌和正常食管黏膜组织中的差异表达基因,再筛选出7组数据集共同差异表达的关键基因。分别对差异表达关键基因进行基因本体功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。应用Cytoscape软件和分子复合物检测工具构建蛋白质互作网络(PPI)模型,筛选出最关键的主效基因。将主效基因的表达分为高表达组和低表达组,利用Kaplan-Meier数据库分析主效基因与食管鳞癌患者预后的关系。结果在7个数据集中共筛选出626个食管鳞癌差异表达关键基因,包括302个上调基因和324个下调基因。基因本体功能分析表明,差异表达关键基因主要聚集于胶原蛋白结合、细胞周期调控、表皮细胞分化等功能。KEGG信号通路富集分析显示差异表达关键基因主要聚集于细胞外基质-受体交互作用、p53信号通路、花生四烯酸代谢信号通路等。PPI共筛选出5个主效基因,分别为Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)、Ⅹ型胶原α1链(COL10A1)、Ⅵ型胶原α3链(COL6A3)、Ⅴ型胶原α2链(COL5A2)、Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)。COL3A1、COL10A1、COL6A3、COL5A2、COL1A1在食管鳞癌组织中的表达均高于正常食管黏膜组织。高表达组患者预后较低表达组差。结论食管鳞癌组织和正常黏膜组织存在差异表达基因谱,COL3A1、COL10A1、COL6A3、COL5A2、COL1A1为食管鳞癌发生、发展的关键基因并与患者预后相关,可能是食管鳞癌诊疗新的分子标志物。

关键词：食管鳞癌基因芯片生物信息学主效基因

Caspase-1/GSDMD介导的经典细胞焦亡在紫杉醇诱导的鼻咽癌细胞死亡中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤 2021年第7期41卷 475-486页

作者：刘霞静张永全宋业勋刘陶文桂林医学院研究生院广西壮族自治区桂林541004 广西壮族自治区南溪山医院/桂林医学院附属南溪山医院肿瘤科广西壮族自治区桂林541002 中南大学湘雅三医院耳鼻喉头颈外科湖南长沙410013

目的:探讨细胞焦亡在紫杉醇诱导的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞死亡中的作用,及可能的分子作用机制。方法:采用紫杉醇处理NPC细胞HNE-2和5-8F,光学显微镜下观察紫杉醇对细胞形态学的影响,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase... 详细信息

目的:探讨细胞焦亡在紫杉醇诱导的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞死亡中的作用,及可能的分子作用机制。方法:采用紫杉醇处理NPC细胞HNE-2和5-8F,光学显微镜下观察紫杉醇对细胞形态学的影响,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测对HNE-2和5-8F细胞的毒性作用,酶联免疫吸附实验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测对HNE-2和5-8F细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18释放水平的影响,FCM法检测对HNE-2和5-8F细胞中焦亡效应分子Caspase-1活性和细胞膜膜孔形成水平的影响,同时采用蛋白质印迹法检测细胞焦亡关键效应分子Caspase-1、人GasderminD蛋白(GSDMD)-全长(fulllength,FL)和GSDMD-N端片段表达水平的变化,以观察紫杉醇是否可以诱导NPC细胞发生细胞焦亡。随后,予以Caspase-1特异性抑制剂Z-YVAD-FMK和细胞焦亡抑制剂甘氨酸预处理HNE-2和5-8F细胞,再用LDH释放实验、ELISA法、FCM法以及蛋白质印迹法检测对紫杉醇诱导的HNE-2和5-8F细胞发生焦亡的影响。结果:紫杉醇可以诱导HNE-2和5-8F细胞发生细胞焦亡形态学改变,紫杉醇处理HNE-2和5-8F细胞后LDH释放量明显增加(P均<0.01),IL-1β和IL-18的释放量均明显增加(P均<0.05);FLICA660-YVADFMK和SYTOX1Green双阳性细胞所占的比例较对照组明显增加(P均<0.001),提示紫杉醇诱导了细胞焦亡;蛋白质印迹法结果进一步提示,紫杉醇处理的HNE-2和5-8F细胞中,经典焦亡中的关键效应分子的Caspase-1、GSDMD-FL蛋白和GSDMD-N端片段和IL-1β蛋白表达明显上调(P均<0.001)。Caspase-1特异性抑制剂Z-YVAD-FMK和细胞焦亡抑制剂甘氨酸都可以阻断上述紫杉醇诱导的经典细胞焦亡途径(P均<0.05)。结论:紫杉醇可以诱导NPC细胞通过经典途径发生细胞焦亡。

关键词：鼻咽癌紫杉醇细胞焦亡 Caspase-1 GSDMD

甲基莲心碱通过影响微小RNA抑制鼻咽癌细胞侵袭转移的机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

药学学报 2019年第8期54卷 1417-1423页

作者：何香兰李维谭国林宋业勋马艳红中南大学湘雅三医院

本文以鼻咽癌CNE-1和5-8F细胞为研究对象,检测甲基莲心碱(neferine, Nef)抑制鼻咽癌侵袭转移的作用,探讨其抑制侵袭转移的机制。CCK-8法检测鼻咽癌细胞活性;划痕实验、Transwell细胞体外迁移侵袭实验观察Nef对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞侵... 详细信息

本文以鼻咽癌CNE-1和5-8F细胞为研究对象,检测甲基莲心碱(neferine, Nef)抑制鼻咽癌侵袭转移的作用,探讨其抑制侵袭转移的机制。CCK-8法检测鼻咽癌细胞活性;划痕实验、Transwell细胞体外迁移侵袭实验观察Nef对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞侵袭、迁移能力的影响;Western blot法检测上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition, EMT)相关蛋白及其转录因子表达水平;miRNA基因芯片检测Nef处理过的5-8F细胞与对照组miRNA差异基因表达谱,对差异表达基因进行生物信息学分析及筛选,同时研究其表达与鼻咽癌侵袭转移的相关性。实验结果显示:30μmol·L^-1 Nef对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞活性无明显影响, Nef能显著抑制鼻咽癌细胞的侵袭与转移,Western blot结果显示Nef使鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞中神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达下调,上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达上调, Twist、Snail、Slug转录因子无显著表达差异;miRNA基因芯片结果显示Nef作用后的5-8F鼻咽癌细胞与对照组相比共10个miRNA有2倍以上表达差异,其中hsa-let-7c-5p与hsa-miR-423-5p表达差异最显著,分别下调至30.6%、28.6%。生物信息分析显示hsa-let-7c-5p与hsa-miR-423-5p有共同的下游靶基因:小细胞膜蛋白3 (small integral membrane protein 3, SMIM3)、神经生长因子(nerve growth factor, NGF)。鼻咽癌5-8F细胞转染hsa-let-7c-5p mimic与hsa-miR-423-5p mimic后增强其侵袭与转移能力, SMIM3、NGF表达下调。以上研究结果表明, Nef可能通过抑制hsa-let-7c-5p与hsa-miR-423-5p的表达,作用于下游靶基因SMIM3、NGF,抑制EMT相关蛋白的表达,从而抑制鼻咽癌细胞的侵袭转移。研究结果为Nef抑制肿瘤侵袭转移提供实验依据。

关键词：甲基莲心碱鼻咽癌侵袭转移作用机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

头颈肿瘤术后压力感受器衰竭综合征

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2021年第11期35卷 1052-1056页

作者：周政吴牡丽李维艾金刚张晓伟陈玉宋业勋王芳沈阳谭国林中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科长沙410005

压力感受器衰竭综合征(baroreceptor failure syndrome,BFS)是一种临床上报道较少并且容易被忽略的临床综合征[1]。Sugarbaker等[2]于1971年报道在二期颈动脉体瘤切除术后,患者出现了以高血压、心率增快、头痛及焦虑等为特征的临床表现... 详细信息

压力感受器衰竭综合征(baroreceptor failure syndrome,BFS)是一种临床上报道较少并且容易被忽略的临床综合征[1]。Sugarbaker等[2]于1971年报道在二期颈动脉体瘤切除术后,患者出现了以高血压、心率增快、头痛及焦虑等为特征的临床表现,当时对这一并发症的认识还明显不足。

关键词：头颈部肿瘤压力感受器衰竭综合征外科手术

基于无线传感技术的电力电缆护套绝缘在线监测在电力系统中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

科技情报开发与经济 2010年第16期20卷 187-189页

作者：宋业勋董亮冯少辉太原供电分公司山西太原030001

阐述了电力电缆采用环流法进行监测的原理,介绍了无线传感技术的特点及其在现场运行方面的评估,探讨了基于无线传感技术的电力电缆护套绝缘在线监测在电力系统中的应用,指出该技术在运行稳定性、测量准确性等方面有非常好的应用价值。

关键词：电力电缆护套绝缘环流法无线传感技术在线监测

通过生物信息学筛选头颈部鳞状细胞癌差异表达基因及相关生物学特性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国耳鼻咽喉头颈外科 2020年第7期27卷 377-381页

作者：王凯肖剑宋业勋李和清中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科湖南长沙410000

目的利用生物信息学方法,筛选出与头颈鳞状细胞癌发生发展相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),进而寻找出有助于头颈鳞状细胞癌早期诊断和预后的分子生物标志物。方法整合3个GEO数据库,筛选DEGs,进行GO(gene onto... 详细信息

目的利用生物信息学方法,筛选出与头颈鳞状细胞癌发生发展相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),进而寻找出有助于头颈鳞状细胞癌早期诊断和预后的分子生物标志物。方法整合3个GEO数据库,筛选DEGs,进行GO(gene ontology)功能注释及KEGG(the Kyoto Encyclopedia of Gene and Genomes)通路富集分析,构建蛋白质-蛋白质作用网络(protein-protein interaction,PPI),提取关键基因,验证其差异表达水平及与预后的关系。结果从数据集中共筛选出39个上调基因和44个下调基因;GO分析发现上调的DEGs生物学功能主要是细胞外基质结构活性、结构分子活性等,下调的DEGs主要与代谢、结构分子活性等有关。KEGG分析表明上调的DEGs主要在PI3k-Akt信号通路、粘着斑;下调的DEGs主要集中在化学致癌、药物代谢-细胞色素P450途径。通过PPI筛选出4个关键基因MMP1、PLAU、RBP1、SEMA3C与头颈鳞状细胞癌的无病生存期显著相关,且高表达组的预后显著差于低表达组。结论本研究筛选出MMP1、PLAU、RBP1、SEMA3C与头颈鳞状细胞癌的发生发展和预后相关,为临床诊断和治疗提供了新的靶点。

关键词：癌,鳞状细胞预后生物信息学差异表达基因生物标志物

气管袖状切除及端端吻合术治疗颈段重度气管狭窄临床分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国耳鼻咽喉头颈外科 2018年第7期25卷 389-392页

作者：宋业勋谢骏谭国林李和清中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科湖南长沙410013 湖南省儿童医院耳鼻咽喉头颈外科湖南长沙410013

目的分析III^IV级颈段重度气管狭窄的临床、影像特征,探讨气管狭窄段袖状切除及端端吻合术的疗效及并发症的预防。方法回顾性分析2008年7月~2016年7月收治的20例不同病因所致的III^IV级颈段重度气管狭窄患者的临床资料,全部病例均采用... 详细信息

目的分析III^IV级颈段重度气管狭窄的临床、影像特征,探讨气管狭窄段袖状切除及端端吻合术的疗效及并发症的预防。方法回顾性分析2008年7月~2016年7月收治的20例不同病因所致的III^IV级颈段重度气管狭窄患者的临床资料,全部病例均采用气管狭窄段袖状切除及端端吻合术治疗。结果 20例患者均实施气管狭窄段袖状切除及端端吻合术,其中17例(85.0%)术后顺利拔管,3例(15.0%)术后发生吻合口再狭窄。术后并发症包括手术切口皮下感染1例,颈部皮下气肿4例,暂时性单侧声带麻痹3例,无吻合口瘘、喉返神经不可逆损伤等严重并发症发生。无术中、术后死亡病例发生。结论气管袖状切除及端端吻合是针对颈段重度气管狭窄的一种有效的治疗手段。长段气管狭窄不应作为该术式的一个绝对治疗禁忌证。合并糖尿病的气管狭窄患者应该慎重选择该术式作为首选治疗方案。

关键词：气管切除术气管狭窄外科手术端端吻合拔管

CBL联合TBL教学法在消化内科临床教学中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国高等医学教育 2020年第10期 93-94页

作者：张德才刘少俊王晓艳宋业勋中南大学湘雅三医院湖南长沙410013

目的:探讨CBL联合TBL教学法在消化内科临床教学中的应用效果。方法:将120名实习生随机分为实验组和对照组,采用CBL联合TBL教学法和传统教学法进行教学,分析两种教学法的教学效果。结果:实验组出科考核成绩高于对照组;问卷调查显示实验... 详细信息

目的:探讨CBL联合TBL教学法在消化内科临床教学中的应用效果。方法:将120名实习生随机分为实验组和对照组,采用CBL联合TBL教学法和传统教学法进行教学,分析两种教学法的教学效果。结果:实验组出科考核成绩高于对照组;问卷调查显示实验组学生自我受益和对教学方法满意度更高。结论:CBL联合TBL教学法有利于提高消化内科临床教学质量。

关键词： CBL TBL 消化内科临床教学