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用于植物多基因表达载体构建的质粒系统

分子植物育种 2018年第4期16卷 1138-1146页

作者：陈任张虹张芮虎娟周涛安韶雅林哲宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021 宁夏大学生命科学学院银川750021

为克服目前常用于植物基因表达载体构建的质粒由于酶切位点有限,目的基因片段难于插入,缺少植物基因表达所必须的启动子、终止子和筛选标记等功能元件,无法构建多个基因表达载体等缺点,本研究通过对大肠杆菌(Escherichia coli)质粒p UC1... 详细信息

为克服目前常用于植物基因表达载体构建的质粒由于酶切位点有限,目的基因片段难于插入,缺少植物基因表达所必须的启动子、终止子和筛选标记等功能元件,无法构建多个基因表达载体等缺点,本研究通过对大肠杆菌(Escherichia coli)质粒p UC18和双核农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti(tumer inducing)质粒p BI121进行改造,建立了一套适用于植物基因表达载体构建的质粒系统,即重组质粒p KAFCR80和p KAFCR100。p KAFCR80具有植物基因表达最常用的CAMV 35S启动子(cauliflower mosaic virus 35S promoter)和NOS终止子(Nopaline synthase terminator),并在其上游、中间和下游引入了多个克隆酶切位点,利用PCR等方法克隆得到的目的基因片段可以多种方式连接到35S启动子与NOS终止子之间;p KAFCR100具有卡那霉素NPTⅡ(neomycin phosphotransferaseⅡ)耐性基因和s GFP(synthetic green-fluorescent protein with S65T mutation)绿色荧光蛋白报告基因,以及其中间的多克隆酶切位点。p KAFCR80与p KAFCR100两个质粒的配合使用,可以方便地构建植物单个或多个基因表达载体。本研究以PCR扩增的甜叶菊葡萄糖基转移酶三个基因为材料,利用该质粒系统以单独和组合形式成功地构建了植物表达载体,验证了该系统的实用性。

关键词：载体构建质粒系统多基因表达载体新方法甜叶菊葡萄糖基转移酶基因

用于植物基因表达载体构建的质粒改造及其应用

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生命科学研究 2018年第2期22卷 114-121页

作者：安韶雅虎娟张虹孙放马霞王晨陈任宁夏大学宁夏优势特色作物现代分子育种重点实验室中国宁夏银川750021 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室中国宁夏银川750021 宁夏大学生命科学学院中国宁夏银川750021

为克服目前常用于植物基因表达载体构建的质粒所具有的酶切位点有限,目的基因片段难于插入和连接,缺少植物基因表达所必须的启动子、终止子、筛选标记等功能元件的缺点,本研究构建了一个用于植物基因表达载体构建的质粒载体pNULPGE200... 详细信息

为克服目前常用于植物基因表达载体构建的质粒所具有的酶切位点有限,目的基因片段难于插入和连接,缺少植物基因表达所必须的启动子、终止子、筛选标记等功能元件的缺点,本研究构建了一个用于植物基因表达载体构建的质粒载体pNULPGE200。该质粒载体引入了植物基因表达最常用的CaMV 35S启动子(cauliflower mosaic virus 35S promoter)和NOS终止子(nopaline synthase terminator),以及之间的多克隆酶切位点MCS(multiple cloning site)。利用pNULPGE200构建植物基因表达载体,经PCR等方法克隆得到的目的基因可以直接连接到35S启动子与NOS终止子之间,使目的基因能够在植物体内稳定表达;同时该质粒载体还具有独立表达的卡那霉素NPT Ⅱ(neomycin phosphotransferase Ⅱ)耐性基因和sGFP(synthetic green-fluorescent protein with S65T mutation)绿色荧光蛋白报告基因,可用于基因转化时的筛选。本研究以假单胞菌(Pseudomonas putida)携带质粒的二甲苯单加氧酶(xylene monooxygenase)编码基因为材料,分别利用本文质粒载体和常规的质粒载体pBI121构建了植物表达载体,验证了文中质粒载体的实用性。

关键词：质粒改造植物基因表达载体载体构建二甲苯单加氧酶基因

黄土高原植被恢复中土壤有机碳稳定机制研究进展

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应用生态学报 2024年第09期 2413-2422页

作者：安韶山胡洋王宝荣西北农林科技大学水土保持研究所西北农林科技大学资源环境学院新疆农业大学资源与环境学院西北农林科技大学草业与草原学院

黄土高原土层深厚，蕴藏着大量的有机碳，近年来黄土高原开展的一系列生态恢复工程改变了土壤有机碳的稳定性。土壤有机碳稳定性决定了土壤固定和储存有机碳的能力，然而，目前尚未系统综述黄土高原植被恢复过程中土壤有机碳稳定性变化... 详细信息

黄土高原土层深厚，蕴藏着大量的有机碳，近年来黄土高原开展的一系列生态恢复工程改变了土壤有机碳的稳定性。土壤有机碳稳定性决定了土壤固定和储存有机碳的能力，然而，目前尚未系统综述黄土高原植被恢复过程中土壤有机碳稳定性变化特征及其相关机制。鉴于此，本文概括了黄土高原植被恢复过程中土壤有机碳稳定性的变化规律，梳理了土壤有机碳的稳定机制，主要包括矿物保护作用、物理保护作用和生物机制，并对黄土高原植被恢复过程中土壤有机碳稳定性研究未来的发展方向和研究重点进行了展望，以期为黄土高原植被恢复过程中土壤固碳、稳碳理论与技术提供科学支撑，为“双碳”目标的实现提供科学参考。

关键词：黄土高原植被恢复土壤有机碳稳定性矿物团聚体土壤生物

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宁南山区不同恢复年限柠条林土壤养分及有机碳组分变化特征

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应用生态学报 2024年第3期35卷 639-647页

作者：张羽涵李瑶周玥陈圆佳安韶山西北农林科技大学水土保持科学与工程学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学资源与环境学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室陕西杨凌712100

植被恢复能有效改善土壤质量,促进土壤有机碳(SOC)的固存。本研究以宁南山区0~100 cm土层不同恢复年限(16、28、38年)柠条林为研究对象,以农田和天然草地作为对照,分析了土壤养分及有机碳组分沿剖面分布特征及其对恢复年限的响应。结果... 详细信息

植被恢复能有效改善土壤质量,促进土壤有机碳(SOC)的固存。本研究以宁南山区0~100 cm土层不同恢复年限(16、28、38年)柠条林为研究对象,以农田和天然草地作为对照,分析了土壤养分及有机碳组分沿剖面分布特征及其对恢复年限的响应。结果表明:1)SOC、土壤全氮(TN)、全磷(TP)、颗粒态有机碳(POC)和矿物结合态有机碳(MAOC)含量以及颗粒态有机碳占总有机碳的比例(POC/SOC)均随土层深度增加而降低,而矿物结合态有机碳占总有机碳的比例(MAOC/SOC)呈相反趋势;2)随着柠条恢复年限的增加,SOC、TN、TP、C∶P、N∶P、POC和MAOC含量逐渐降低,C∶N无显著变化,POC/SOC先增后减,MAOC/SOC先减后增;3)在3种土地类型中,POC、MAOC与SOC之间均呈极显著正线性相关关系,且SOC的增加主要依赖于MAOC的增加。天然草地和柠条林地土壤SOC、TN、TP、POC和MAOC含量均显著高于农田。综上,柠条林地土壤养分及POC、MAOC含量随着恢复年限增加逐渐降低;与农田相比,天然草地和柠条林地维持和提高土壤养分及碳储存的能力较高。

关键词：植被恢复恢复年限土壤剖面土壤有机碳组分宁南山区

河湟谷地耕地土壤中有机氯农药残留特征及风险评价

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环境科学学报 2024年

作者：谢春娇黄懿梅王攀郭威安韶山西北农林科技大学资源与环境学院农业农村部西北植物营养与农业环境重点实验室西北农林科技大学水土保持研究所

为了明确青藏高原典型农区耕地土壤中持久性有机污染物—有机氯农药（OCPs）的残留特征、健康风险及影响因素，本文采用网格布点法，在青海省河湟谷地的典型农区，分别采集不同种植类型耕地0～20 cm和20～40 cm土层土壤样品125个和14个... 详细信息

为了明确青藏高原典型农区耕地土壤中持久性有机污染物—有机氯农药（OCPs）的残留特征、健康风险及影响因素，本文采用网格布点法，在青海省河湟谷地的典型农区，分别采集不同种植类型耕地0～20 cm和20～40 cm土层土壤样品125个和14个，通过气相色谱和克里金插值法探讨六六六（HCHs）和滴滴涕（DDTs）的含量、空间分布特征和人体健康风险，并结合种植类型、气象条件和土壤理化性质分析农药残留分布的影响因素.结果表明，研究区域60%的土壤样点检出了HCHs,77.6%的土壤样点检出了DDTs.ΣHCHs与ΣDDTs的含量范围（平均值）分别为0.19～20.61 ng·g-1(4.78 ng·g-1)和2.70～38.11 ng·g-1(7.76 ng·g-1)，二者在互助县和乐都区的土壤样点中残留量较高，在同仁县的土壤样点残留量较低；20～40 cm土层中HCHs和DDTs残留较0～20 cm土层分别低53%和16%.种植类型对土壤中ΣHCHs的残留有一定影响，油菜和土豆土壤中的残留量显著高于玉米土壤.土壤中HCHs和DDTs残留量与土壤有机质、全氮、全磷、风速、降水量和日照时数呈正相关，HCHs与含水率和气温呈负相关.HCHs和DDTs残留主要来源于工业HCHs和DDTs的使用.河湟谷地土壤检出的HCHs和DDTs含量均低于我国环境标准规定的限值，其致癌与非致癌风险值均小于阈值，对研究区人群基本不会造成健康风险.

关键词：河湟谷地种植类型六六六(HCHs) 滴滴涕(DDTs) 健康风险评价

宁南山区不同恢复年限柠条林地土壤微生物残体碳沿剖面分布特征

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应用生态学报 2024年第1期35卷 161-168页

作者：张羽涵李瑶周玥刘春晖安韶山西北农林科技大学水土保持科学与工程学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学资源与环境学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室陕西杨凌712100

微生物残体是土壤有机碳(SOC)重要且稳定的来源,已成为评价微生物对SOC转化和积累贡献的重要指标。目前尚不清楚柠条林恢复过程中深层土壤微生物残体的积累及其对SOC的贡献特征。本研究采用生物标志物方法,以宁南山区天然草地为对照,研... 详细信息

微生物残体是土壤有机碳(SOC)重要且稳定的来源,已成为评价微生物对SOC转化和积累贡献的重要指标。目前尚不清楚柠条林恢复过程中深层土壤微生物残体的积累及其对SOC的贡献特征。本研究采用生物标志物方法,以宁南山区天然草地为对照,研究了恢复16年、28年和38年的柠条林地沿0~100 cm剖面土壤细菌、真菌、微生物残体碳含量及其对有机碳的贡献特征。结果表明:1)沿0~100 cm土壤剖面,随着土层深度的增加,天然草地和柠条林地土壤中真菌残体碳(FNC)、细菌残体碳(BNC)和微生物残体碳(MNC)含量均显著降低;除恢复38年的柠条林土壤FNC/SOC、BNC/SOC和MNC/SOC显著降低外,其余样地FNC/SOC、MNC/SOC总体上呈现先增加后降低的趋势,BNC/SOC则逐渐降低。2)随着恢复年限增加,柠条林地土壤中FNC、BNC和MNC含量均显著降低;FNC/SOC和MNC/SOC总体上先增后减,BNC/SOC逐渐降低。3)MNC对SOC的平均贡献表现为恢复28年的柠条(35.0%)>恢复16年的柠条(33.5%)>天然草地(31.0%)>恢复38年的柠条(28.6%)。综上,与天然草地相比,当柠条林恢复年限为16年时,土壤微生物残体碳含量及其对SOC的贡献均较高,有利于SOC的固存。

关键词：植被恢复土壤剖面土壤有机碳微生物残体生物标志物

航运中心与城市经济互动关系分析——上海与新加坡比较

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同济大学学报（自然科学版） 2024年第2期52卷 260-267页

作者：解乔雅张戎同济大学城市交通研究院上海210804 同济大学道路与交通工程教育部重点实验室上海210804

港口与城市经济的协调发展有助于提高港口竞争力和城市影响力。以上海和新加坡为比较对象,采用熵权-灰色关联模型探究港口与城市经济的关联度。通过构建向量自回归模型,从对外贸易、生产总值和产业结构探究港城互动关系。结果表明,城市... 详细信息

港口与城市经济的协调发展有助于提高港口竞争力和城市影响力。以上海和新加坡为比较对象,采用熵权-灰色关联模型探究港口与城市经济的关联度。通过构建向量自回归模型,从对外贸易、生产总值和产业结构探究港城互动关系。结果表明,城市经济与航运中心存在较强关联。新加坡对外贸易与港口间具有稳定的双向促进效应,上海市外向型经济对航运中心的驱动作用较弱。上海市生产总值能为港口发展提供有力的腹地支撑,港口对城市生产总值的辐射带动效应并不明显。上海市第三产业与港口间存在长期的潜在拉动力,但现阶段上海市第二产业对航运中心的发展仍起主导作用。从长期效果看,第三产业扩张政策对航运中心的促进作用强于第二产业。针对上述结论,分析原因并提出增强港口韧性、促进“港产城”融合发展等建议。

关键词：港城关系国际航运中心城市经济向量自回归模型

黄土高原不同人工林型微生物残体碳对土壤有机碳组分的积累贡献及影响因素

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生态学报 2024年第13期44卷 5494-5507页

作者：窦艳星王宝荣廖娇娇薛志婧侯琳安韶山张硕新西北农林科技大学林学院杨凌712100 西北农林科技大学水土保持科学与工程学院(水土保持研究所) 杨凌712100 西北农林科技大学草业与草原学院杨凌712100 西北农林科技大学资源与环境学院杨凌712100 陕西师范大学地理科学与旅游学院西安710119 陕西秦岭森林生态系统国家野外科学观测研究站杨凌712100

为探究不同人工林型微生物残体碳(Microbial necromass carbon,MNC)对土壤有机碳组分的积累贡献及影响因素,在黄土高原选取刺槐林、山杏林、油松林为研究对象,分析了三种人工林0—60 cm土层真菌残体碳(Fungal necromass carbon,FNC)、... 详细信息

为探究不同人工林型微生物残体碳(Microbial necromass carbon,MNC)对土壤有机碳组分的积累贡献及影响因素,在黄土高原选取刺槐林、山杏林、油松林为研究对象,分析了三种人工林0—60 cm土层真菌残体碳(Fungal necromass carbon,FNC)、细菌残体碳(Bacterial necromass carbon,BNC)、MNC对颗粒态有机碳(Particulate organic carbon,POC)和矿物结合态有机碳(Mineral—associated organic carbon,MAOC)的积累贡献及其影响因素。结果表明:(1)三种人工林POC、MAOC中FNC、BNC、MNC含量均随土层深度的增加而降低;(2)刺槐林和山杏林MNC对MAOC的积累贡献(60.9%,52.0%)高于POC(33.5%,49.5%),其中FNC对MAOC的积累贡献分别是BNC的4.4和2.5倍,油松林在0—10 cm土层MNC对POC的积累贡献(73.8%)高于MAOC(48.2%),其中FNC对POC的积累贡献是BNC的3.5倍,而在10—60 cm土层MNC对MAOC的积累贡献(30.9%)高于POC(24.4%),其中FNC对MAOC的积累贡献是BNC的3.4倍;(3)总有机碳和全氮含量与MNC/POC、MNC/MAOC呈显著正相关关系(P<0.05),黏粒含量与MNC/MAOC呈显著正相关关系(P<0.05),pH值、砂粒含量与MNC/MAOC呈显著负相关关系(P<0.05)。说明黄土高原三种人工林0—60 cm土层MNC主要贡献MAOC的积累,油松林0—10cm土层除外,且与细菌残体碳相比,真菌残体碳在土壤有机碳组分积累中的贡献更大,土壤总有机碳、全氮、黏粒、砂粒含量、pH值是影响该区不同人工林型微生物残体碳贡献土壤有机碳组分积累的主要因素。

关键词：微生物残体碳颗粒态有机碳矿物结合态有机碳人工林黄土高原

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黄土丘陵区降水变化下草地土壤微生物残体碳对土壤有机碳组分的贡献及其影响因素

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应用生态学报 2024年第09期 2592-2598页

作者：周玥李娅芸李娜李会军张羽涵安韶山王宝荣西北农林科技大学资源环境学院黄河水资源保护科学研究院西北农林科技大学水土保持科学与工程学院中国科学院水利部水土保持研究所西北农林科技大学黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室西北农林科技大学草业与草原学院

为探究降水变化下草地土壤中微生物残体碳（MNC）对土壤有机碳组分的贡献及其影响因素，在黄土丘陵区白羊草植被恢复地，设置7个降水水平，以自然降水（CK）量作为对照，增加和降低20%、40%、60%的自然降水量(I20、I40、I60、D20、D40、... 详细信息

为探究降水变化下草地土壤中微生物残体碳（MNC）对土壤有机碳组分的贡献及其影响因素，在黄土丘陵区白羊草植被恢复地，设置7个降水水平，以自然降水（CK）量作为对照，增加和降低20%、40%、60%的自然降水量(I20、I40、I60、D20、D40、D60)开展试验，分析了土壤有机碳组分中真菌残体碳（FNC）、细菌残体碳（BNC）和MNC的含量及变化特征。结果表明：1)土壤矿物结合态有机碳（MAOC）中的MNC含量(1.62～2.17 g·kg-1)要高于颗粒态有机碳（POC）中的MNC含量(0.69～1.31 g·kg-1)，前者是后者的1.4～2.8倍。2)在MAOC和POC中，FNC和MNC变化规律相似。MAOC中的BNC是FNC的1～3.1倍；POC中的FNC要高于BNC，只在I40和I60时BNC大于FNC。3)整体上，降水增加和减少均提高了MNC/MAOC和BNC/MAOC，降低了MNC/POC和FNC/POC。I60和D60时的MNC/MAOC比CK高33.2%和18.1%；D60、I40和I60时的BNC/MAOC比CK高28.0%、23.0%和19.1%。除D60外，其他降水条件下FNC/POC、MNC/POC显著低于CK；在POC中，D40、D20、I20、I40和I60的MNC/POC比CK低28.4%、23.3%、28.8%、23.3%和32.2%，D40、D20、I20、I40和I60的FNC/POC比CK低23.3%、16.1%、21.0%、27.0%和31.0%。4)NH4+-N和pH是降水变化下影响不同碳组分中MNC含量的主要因素。综上，降水变化（增加或降低）提高了以BNC为主的MNC对MAOC的贡献，降低了以FNC为主的MNC对POC的贡献，本研究对了解降水变化下微生物残体在不同有机碳组分中的分配规律具有重要意义。

关键词：降水变化微生物残体碳矿物结合态有机碳颗粒态有机碳

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