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大肠杆菌OmpC响应银胁迫初探及生物信息学分析

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中国测试 2024年

作者：沈舒楚吴钰煌蔡丹安皓月伍中宝王君杜幼芹邹黎黎三峡大学基础医学院(肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室) 三峡大学基础医学院(三峡大学感染与炎症损伤研究所) 三峡大学第一临床医学院

通过同源重组技术敲除大肠杆菌(Escherichia coli， E. coli)外膜孔蛋白C(Outer membrane porin channel C，OmpC)编码基因ompC、OmpF编码基因ompF和PhoE编码基因phoE。连续监测ompC缺失株的生长及其对银离子的敏感性；运用生物信息学分... 详细信息

通过同源重组技术敲除大肠杆菌(Escherichia coli， E. coli)外膜孔蛋白C(Outer membrane porin channel C，OmpC)编码基因ompC、OmpF编码基因ompF和PhoE编码基因phoE。连续监测ompC缺失株的生长及其对银离子的敏感性；运用生物信息学分析OmpC的生物学特性。结果显示ompC、ompF和phoE缺失株构建成功，ompC、ompF和phoE缺失并不影响E. coli的生长代谢。相比于其他孔蛋白，OmpC蛋白缺失可显著提高E. coli抵御银离子胁迫的能力，与耐抗生素存在差异。生物信息学分析结果表示，OmpC的分子式为C1795H2676N482O577S4，由367个氨基酸组成，相对分子质量为40368.12，原子总数为5534，等电点为4.58；含有跨膜域，定位于细胞外膜中；糖基化位点含有4个、丝氨酸磷酸化位点含有17个、苏氨酸磷酸化位点含有24个；二级结构中α-螺旋占比18.80%，β-折叠占比29.16%，β-转角占比6.81%，无规则卷曲占比45.23%；与银离子进行分子对接预测显示无对接位点。这为OmpC主要作为银离子入胞通道提供更多证据，为解析E. coli应对银离子胁迫的机制奠定基础；OmpC蛋白的生物信息学分析，为深入了解OmpC在E. coli应答银离子胁迫过程中的作用机制及其防治提供重要科学依据。

关键词：大肠杆菌 λRed同源重组技术银离子 OmpC 生物信息学分析

大肠杆菌CusS的生物信息学分析及对银离子胁迫的响应

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微生物学报 2024年第4期64卷 1187-1202页

作者：安皓月谭超沈舒楚伍中宝吴钰煌邓凯红邹黎黎王君三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002 三峡大学感染与炎症损伤研究所湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002 三峡大学第一临床医学院湖北宜昌443002

【目的】解析大肠杆菌(Escherichia coli)K-12菌株同型二聚体内膜传感器组氨酸激酶(sensor histidine kinase,CusS)蛋白在细菌应答金属银离子胁迫中的调控机制,为该菌的防治提供重要科学依据。【方法】利用ProtParam、ProtScale、Protei... 详细信息

【目的】解析大肠杆菌(Escherichia coli)K-12菌株同型二聚体内膜传感器组氨酸激酶(sensor histidine kinase,CusS)蛋白在细菌应答金属银离子胁迫中的调控机制,为该菌的防治提供重要科学依据。【方法】利用ProtParam、ProtScale、Protein-Sol、TMHMM、SignalP、LocTree3、NetNGlyc-1.0、NetPhosBac-3.0、SOPMA、I-TASSERF、STRING和MEGA分别预测CusS的理化性质、亲水性、可溶性、跨膜域、信号肽、亚细胞定位、糖基化位点、磷酸化位点、二级结构、三级结构、蛋白互作的关系网络和蛋白在革兰阴性杆菌中的同源性。采用Red同源重组技术构建大肠杆菌ΔcusS,在不同培养基中连续监测ΔcusS的生长情况,观察该基因缺失后的细菌生长活性;通过最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)试验评价该缺失株对金属铜、银离子和临床常见抗生素的敏感性变化;运用RT-qPCR检测cusS缺失后其下游基因cusCFBA和cusR转录水平。【结果】CusS蛋白由480个氨基酸组成,相对分子质量为53738.05,原子总数为7624,等电点为6.02,具有稳定性,是一种亲水性、不溶性蛋白;含有跨膜域;不存在信号肽,定位于细胞内膜中;存在2个糖基化位点、24个丝氨酸磷酸化位点、14个苏氨酸磷酸化位点和3个酪氨酸磷酸化位点;二级结构中α-螺旋占比55.42%,β-折叠占比11.67%,β-转角占比3.75%,无规则卷曲占比29.17%;cusS在埃希菌属和志贺菌属中的保守性高;菌落PCR和一代测序验证ΔcusS构建成功;连续检测生长曲线表明cusS缺失并不影响细菌的生长代谢,但CusS蛋白为大肠杆菌抵御金属银胁迫的关键基因。【结论】cusS作为一个关键基因,它的缺失并不影响大肠杆菌的生长活性,但会显著降低细菌抵御银离子胁迫的应答能力。缺失cusS将使下游基因cusCFBA和cusR的mRNA表达水平显著下降。对CusS蛋白进行生物信息学分析及表型初探,为深入了解CusS在大肠杆菌应答银离子胁迫的调控机制奠定了基础。

关键词：大肠杆菌 Red同源重组技术银离子金属外排系统传感器组氨酸激酶(CusS) 生物信息学分析

GC-MS和UPLC-QTOF-MS测定生物药用预充式注射笔中的可提取物

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中国医药工业杂志 2024年第5期55卷 713-718页

作者：鲁征安皓月杜振霞北京化工大学化学学院北京100029

采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)和气相色谱串联四极杆质谱(GC-MS)技术,对3种生物药用预充式注射笔中的可提取物进行了非靶向筛查。基于注射笔的实际使用情况,在70 ℃、4 d的条件下,用4种提取剂对其进行组件整... 详细信息

采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)和气相色谱串联四极杆质谱(GC-MS)技术,对3种生物药用预充式注射笔中的可提取物进行了非靶向筛查。基于注射笔的实际使用情况,在70 ℃、4 d的条件下,用4种提取剂对其进行组件整体提取。通过设置分析评估阈值(AET),并利用药品包装材料可提取物数据库结合人工谱库解析进行定性分析,最终共检出29种有机物,包括抗氧剂、增塑剂、润滑剂等成分。其中,使用普通卤化丁基活塞的注射笔检出27种物质,使用覆膜活塞的注射笔中检出4种可提取物。该研究所得的可提取物清单可以为开展后续的相容性研究提供数据参考。

关键词： UPLC-QTOF-MS GC-MS 药品包装材料注射笔可提取物分析评估阈值风险评估

纸吸管中非挥发性迁移物的非靶向筛查及风险评估

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分析测试学报 2022年第10期41卷 1478-1485页

作者：安皓月马鑫王倩隋海霞杜振霞北京化工大学化学学院北京100029 国家食品安全风险评估中心北京100022

根据欧盟法规推荐的两种食物模拟物对纸吸管样品进行模拟迁移试验,并基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)对样品中的迁移物进行非靶向筛查,得到包括润滑剂、施胶剂、抗氧剂降解产物、消泡剂在内的31种有意添加物和非... 详细信息

根据欧盟法规推荐的两种食物模拟物对纸吸管样品进行模拟迁移试验,并基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)对样品中的迁移物进行非靶向筛查,得到包括润滑剂、施胶剂、抗氧剂降解产物、消泡剂在内的31种有意添加物和非有意添加物。利用该课题组前期建立的风险矩阵,即风险=危害(毒性水平+Cramer分级+4×致突变性)×暴露(4×水溶性+4×渗透性),对纸吸管中31种迁移物进行风险分级。结果表明,未发现Ⅰ级高风险物质,Ⅱ级风险物质中得分较高的来自润滑剂(十六酸酰胺等)、施胶剂(海松酸等)和消泡剂(聚乙二醇等)中的成分,对Ⅱ级风险物质进行半定量分析,通过对比暴露量和TTC阈值,发现酰胺类润滑剂(尤其是芥酸酰胺)存在健康风险,应在纸吸管生产加工过程中引起关注。

关键词：纸吸管食品接触材料超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS) 非靶向筛查风险矩阵

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基于改进BlendMask模型的苹果识别与定位方法

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农业工程学报 2024年第7期40卷 191-201页

作者：白晓平蔡皓月王卓张懿文中国科学院沈阳自动化研究所沈阳110016 中国科学院大学计算机科学与技术学院北京100049 中国科学院机器人与智能制造创新研究院沈阳110169

针对实际自然环境中果实被遮挡、环境光线变化等干扰因素以及传统视觉方法难以准确分割出农作物轮廓等问题,该研究以苹果为试验对象,提出一种基于改进BlendMask模型的实例分割与定位方法。该研究通过引入高分辨率网络HRNet,缓解了特征... 详细信息

针对实际自然环境中果实被遮挡、环境光线变化等干扰因素以及传统视觉方法难以准确分割出农作物轮廓等问题,该研究以苹果为试验对象,提出一种基于改进BlendMask模型的实例分割与定位方法。该研究通过引入高分辨率网络HRNet,缓解了特征图在深层网络中分辨率下降的问题,同时,在融合掩码层中引入卷积注意力机制CBAM(convolutional block attention module),提高了实例掩码的质量,进而提升实例分割质量。该研究设计了一个高效抽取实例表面点云的算法,将实例掩码与深度图匹配以获取苹果目标实例的三维表面点云,并通过均匀下采样与统计滤波算法去除点云中的切向与离群噪声,再运用球体方程线性化形式的最小二乘法估计苹果在三维空间中的中心坐标,实现了苹果的中心定位。试验结果表明改进BlendMask的平均分割精度为96.65%,检测速度34.51帧/s,相较于原始BlendMask模型,准确率、召回率与平均精度分别提升5.48、1.25与6.59个百分点;相较于分割模型SparseInst、FastInst与PatchDCT,该模型在平均精度变化不大的情况下,检测速度分别提升6.11、3.84与20.08帧/s,该研究为苹果采摘机器人的视觉系统提供技术参考。

关键词：图像识别图像分割深度学习苹果 HRNet CBAM BlendMask

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论尹派越剧红楼戏

四川戏剧 2024年第4期 27-32页

作者：翟皓月复旦大学中国语言文学系

尹桂芳曾四度演出越剧红楼戏,不同时期的演出折射出越剧在20世纪40年代至60年代的时代浪潮中浮沉的历史,尹桂芳对贾宝玉这一角色的理解及舞台呈现也经历了一个漫长的演进、沉淀与提高的过程。通过分析“宝玉哭灵”的文本生成、唱腔演变... 详细信息

尹桂芳曾四度演出越剧红楼戏,不同时期的演出折射出越剧在20世纪40年代至60年代的时代浪潮中浮沉的历史,尹桂芳对贾宝玉这一角色的理解及舞台呈现也经历了一个漫长的演进、沉淀与提高的过程。通过分析“宝玉哭灵”的文本生成、唱腔演变、表演打磨,我们可以看到尹派红楼戏平淡天然、含蓄蕴藉的神韵是如何生成的。不同流派对同题剧作的不同诠释,更能使越剧呈现出百花齐放的多元姿态,尹桂芳独特的艺术风格不应被声名更盛的徐王版所遮蔽。

关键词：尹桂芳芳华越剧团红楼梦红楼戏

基于DSGE模型的数字人民币对货币政策传导效应的影响研究

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基于DSGE模型的数字人民币对货币政策传导效应的影响研究

作者：卢皓月云南财经大学

学位级别：硕士

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优秀女子散打运动员技术运用及制胜因素分析

优秀女子散打运动员技术运用及制胜因素分析

作者：陈皓月成都体育学院

学位级别：硕士

金属间化合物MoSi_(2)协同SiC晶须增韧Si_(3)N_(4)陶瓷刀具的制备及切削性能

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材料导报 2024年第2期38卷 168-172页

作者：周后明周金虎刘刚陈皓月湘潭大学机械工程学院湖南湘潭411105

为进一步提高Si_(3)N_(4)陶瓷刀具的强度和韧性,克服单一增韧方式以及金属粘结剂增韧的局限性,本工作利用金属间化合物协同晶须对其增韧补强,将MoSi_(2)颗粒和SiC晶须添加到Si_(3)N_(4)陶瓷基体中,制备出Si_(3)N_(4)/MoSi_(2)/SiC_(w)(S... 详细信息

为进一步提高Si_(3)N_(4)陶瓷刀具的强度和韧性,克服单一增韧方式以及金属粘结剂增韧的局限性,本工作利用金属间化合物协同晶须对其增韧补强,将MoSi_(2)颗粒和SiC晶须添加到Si_(3)N_(4)陶瓷基体中,制备出Si_(3)N_(4)/MoSi_(2)/SiC_(w)(SMC)复合陶瓷刀具材料。结果表明:SiC晶须的加入可以有效提高Si_(3)N_(4)陶瓷的断裂韧性,MoSi_(2)的加入可以显著提升Si_(3)N_(4)陶瓷的抗弯强度。连续干切削45#淬火钢时,相较于商用刀具YBC251,SMC复合陶瓷刀具的寿命及切削稳定性提升显著。其中,添加了SiC晶须的SMC3(MoSi_(2)10%(未作特别说明时均为质量分数),SiC_(w)10%)及SMC2(MoSi_(2)0%,SiC_(w)10%)刀具的寿命均比未添加SiC_(w)的SMC1(MoSi_(2)10%,SiC_(w)0%)更长。随着切削深度的增加,未添加MoSi_(2)的SMC2易出现崩刃现象,切削稳定性不如协同增韧的SMC3。

关键词：陶瓷刀具协同增韧切削力学性能微观结构