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MEKK2及其泛素化修饰对炎症反应的调节作用

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MEKK2及其泛素化修饰对炎症反应的调节作用

CXC趋化因子CRG-2的表达及其在体内对Lewis肺癌生长的影响

浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：安华章第二军医大学转化医学研究院肿瘤研究所

蛋白激酶MEKK2在肿瘤的发生、发展过程中起重要作用,但MEKK2在炎症反应中的作用有待进一步研究。在小鼠腹腔巨噬细胞中,MEKK2基因敲减对LPS诱导的炎症细胞因子产生无显著影响,但能够明显抑制CpG诱导的炎症细胞因子的产生。蛋白激酶Stk3...

蛋白激酶MEKK2在肿瘤的发生、发展过程中起重要作用,但MEKK2在炎症反应中的作用有待进一步研究。在小鼠腹腔巨噬细胞中,MEKK2基因敲减对LPS诱导的炎症细胞因子产生无显著影响,但能够明显抑制CpG诱导的炎症细胞因子的产生。蛋白激酶Stk38与泛素连接酶Smurf1结合形成复合物,促进Smurf1介导的MEKK2泛素化并抑制巨噬细胞中MEKK2表达。Stk8基因敲减或基因缺失显著增强巨噬细胞中CpG诱导的炎症细胞因子的产生。与对照野生型小鼠相比,Stk38基因缺失小鼠对大肠杆菌感染和CLP诱导的脓毒血症更加敏感。在小鼠胚胎成纤维细胞以及人上皮细胞中,MEKK2促进IL-17诱导的炎症因子与趋化因子的产生。泛素连接酶NEDD4L促进MEKK2的泛素化并抑制MEKK2表达。NEDD4L负向调控IL-17诱导的炎症因子与趋化因子的产生。与对照野生型小鼠相比,NEDD4L基因缺失小鼠更易于发生DSS诱导的肠炎。溃疡性结肠炎患者肠上皮细胞中NEDD4L的表达明显低于对照组织。MEKK2及其泛素化修饰在炎症反应的发生与调节中起重要作用。

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中华肿瘤杂志 2001年第2期23卷 137-138页

作者：刘志国杨静华安华章吴汉平王海燕韩者艺樊代明第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所西安710032

IFN-γ对肿瘤有较弱的抑制作用，其作用被认为与血管抑制有关。与IFN-γ类似，IL -12在一些肿瘤类型中也可以促进肿瘤消退，其优点在于作用较强而且较持续。进一步的研究发现，两者对于CRG-2(cytokine responsive gene-2)表达水平的不... 详细信息

IFN-γ对肿瘤有较弱的抑制作用，其作用被认为与血管抑制有关。与IFN-γ类似，IL -12在一些肿瘤类型中也可以促进肿瘤消退，其优点在于作用较强而且较持续。进一步的研究发现，两者对于CRG-2(cytokine responsive gene-2)表达水平的不同影响，可能造成了其在肿瘤治疗效果上的差别［1］。CRG-2属于趋化因子家族中的CXC亚族，其受体CXCR3分布较局限，主要位于激活T细胞。为探讨CRG-2对肿瘤的影响，我们构建了真核表达载体pcDNA3.1/crg-2，转染介导入Lewis肺癌细胞，观察其在体内抑制肿瘤生长的作用。

关键词： Lewis肺癌 CXC趋化因子 CRG-2 肺癌基因表达

CXC趋化因子CRG-2真核表达载体的构建及表达

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第6期17卷 510-511页

作者：刘志国杨静华安华章吴汉平王海燕韩者艺樊代明第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所

CRG-2属于趋化因子家嗾中的CXC亚族,人源类似物称为IP-10,其受体CXCR3主要分布于激活的T细胞[1].趋化因子是一类在炎性因子刺激下表达的小分子分泌蛋白,参与淋巴细胞的定向迁移、渗出与激活,在伤口愈合及炎症中有重要作用[2].最初认为,... 详细信息

CRG-2属于趋化因子家嗾中的CXC亚族,人源类似物称为IP-10,其受体CXCR3主要分布于激活的T细胞[1].趋化因子是一类在炎性因子刺激下表达的小分子分泌蛋白,参与淋巴细胞的定向迁移、渗出与激活,在伤口愈合及炎症中有重要作用[2].最初认为,趋化因子主要对不同的淋巴细胞亚群有作用,随后发现其也参与其它的生理及病理过程,如趋化因子受体可作为HIV感染的辅助受体参与艾滋病的发病,以及血管生成的调节等[3].为探讨趋化因子作为候选分子在肿瘤抑制疗法中的应用,我们选择了对T细胞有特异性趋化作用的鼠CRG-2分子,构建真核表达载体,转染了Lewis肺癌细胞系.

关键词： crg-2 肺癌细胞转染趋化因子 CXC T细胞真核表达载体

Toll样受体在适应性免疫中的作用与相关机制研究进展

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国外医学（免疫学分册） 2005年第1期28卷 16-19页

作者：钱程安华章曹雪涛第二军医大学免疫研究所硕士研究生，上海200433 第二军医大学免疫研究所

TLRs是一类模式识别受体 ,能够被微生物的特异性成分和某些宿主分子所激活 ,在固有免疫系统中起着决定性的作用。同时大部分病原体通过TLRs激活抗原提呈细胞 (主要是树突状细胞 )上调其MHC分子表达 ,启动CD4 + T细胞向Th1型细胞分化。... 详细信息

TLRs是一类模式识别受体 ,能够被微生物的特异性成分和某些宿主分子所激活 ,在固有免疫系统中起着决定性的作用。同时大部分病原体通过TLRs激活抗原提呈细胞 (主要是树突状细胞 )上调其MHC分子表达 ,启动CD4 + T细胞向Th1型细胞分化。而当机体遭遇多细胞寄生虫感染或接触变应原时 ,CD4 + T细胞则向Th2型细胞分化 ,这一类免疫反应可能是通过一系列不同于TLRs的固有识别系统进行调控 ,但究竟是通过目前未知的PRRs还是通过缺失自身标记的机制对病原体进行识别目前还不明了。进一步了解TLRs调节适应性免疫的过程不但能够发展治疗感染性疾病的新途径 ,而且可能为变态反应和某些自身免疫疾病发病机理深入研究以及治疗和防治提供新方法。

关键词： Toll样受体适应性免疫树突状细胞

SHP2磷酸酶差异性调节Trif、Myd88依赖的促炎细胞因子的产生

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SHP2磷酸酶差异性调节Trif、Myd88依赖的促炎细胞因子的产生

胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型ScFv的制备

第六届全国免疫学学术大会

作者：安华章侯晋曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室

【背景】Toll样受体(TLRs)介导宿主抗感染固有免疫反应,是近年免疫学领域的一大研究热点。我们在最近的研究中发现,磷酸酶SHP2可以抑制TBK1蛋白激酶活性并抑制TLR反应中TRIF途径介导的Ⅰ型干扰素和炎症因子的产生。【目的】比较SHP2对T...

【背景】Toll样受体(TLRs)介导宿主抗感染固有免疫反应,是近年免疫学领域的一大研究热点。我们在最近的研究中发现,磷酸酶SHP2可以抑制TBK1蛋白激酶活性并抑制TLR反应中TRIF途径介导的Ⅰ型干扰素和炎症因子的产生。【目的】比较SHP2对Trif、

关键词：

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免疫学杂志 2001年第3期17卷 165-168页

作者：何凤田聂勇战陈宝军徐立韩者艺乔太东安华章樊代明第四军医大学西京医院消化病研究所陕西西安710032

目的制备胃癌单抗 MGd1的单链可变区片段 (single chain variable fragm ent,Sc Fv) ,为胃癌体内诊疗研究提供候选靶向载体分子。方法从 MGd1杂交瘤分离 m RNA,RT- PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因 (VH和 VL DNA) ,二者经 linker DN... 详细信息

目的制备胃癌单抗 MGd1的单链可变区片段 (single chain variable fragm ent,Sc Fv) ,为胃癌体内诊疗研究提供候选靶向载体分子。方法从 MGd1杂交瘤分离 m RNA,RT- PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因 (VH和 VL DNA) ,二者经 linker DNA连接形成 Sc Fv DNA。将 Sc Fv DNA与载体 p CANTAB5 E的连接产物转化于大肠杆菌 TG1,经 M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体抗体 Sc Fv。以高表达 MGd1结合抗原的细胞株 KATO 对重组噬菌体抗体 Sc Fv进行两轮筛选后 ,随机挑取克隆经 EL ISA筛选 MGd1Sc Fv单克隆 ,并对其结合抗原的能力进行鉴定。结果 VH、VL 和 Sc Fv DNA分别约为 340、32 0和 75 0 bp。经两轮亲和筛选后 ,在随机筛检的 30个克隆中得到 12个噬菌体呈现型 MGd1Sc Fv单克隆 ,其中结合抗原能力强的克隆有 5个。结论用噬菌体呈现技术成功地获得了单抗 MGd1的 Sc Fv,为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。

关键词：胃癌单克隆抗体单链可变区片段噬菌体呈现抗MGd1 ScFv

一株胃癌耐药细胞系的建立及其耐药的可能机制

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现代消化病及内镜杂志 1997年第2期2卷 108-110页

作者：安华章樊代明周绍娟第四军医大学消化病研究所西安710032

本文采用大剂量阿霉素诱导出一株对阿霉素耐药的胃癌细胞系 SGC7901/Adr。SGC7901/Adr 对长春新碱、丝裂霉素 C 交叉耐药性,其中对长春新碱耐药性最高,但对5-Fu 依然存在敏感性。应用流式细胞术检测细胞阿霉素荧光强度,发现 SCG7901/Adr... 详细信息

本文采用大剂量阿霉素诱导出一株对阿霉素耐药的胃癌细胞系 SGC7901/Adr。SGC7901/Adr 对长春新碱、丝裂霉素 C 交叉耐药性,其中对长春新碱耐药性最高,但对5-Fu 依然存在敏感性。应用流式细胞术检测细胞阿霉素荧光强度,发现 SCG7901/Adr 细胞内阿霉素浓度明显低于 SGC7901,提示细胞内药物蓄积减少是导致SGC7901/Adr 产生多药耐药性的主要原因。

关键词：胃癌耐药细胞系耐药机制阿霉素流式细胞术药物蓄积

ZDHHC5对结肠癌细胞Ⅰ型干扰素表达和细胞增殖及迁移的调控作用

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中华肿瘤防治杂志 2024年第18期31卷 1108-1115页

作者：邱晋李帅广姬美玲杨心茹叶辉任浩李若男安华章曹莉莉山东第一医科大学第一附属医院(山东省千佛山医院)肿瘤中心山东省临床免疫转化医学高校实验室山东省风湿免疫病转化医学重点实验室山东省肺癌研究所山东济南250014 山东中医药大学第二临床医学院山东济南250014

目的探讨ZDHHC5对Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)表达的调节作用以及对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法利用慢病毒感染和质粒瞬转技术对小鼠结肠癌细胞株MC38ova进行ZDHHC5敲低和过表达,并进行ZDHHC5和Zeste同源物增强子2(EZH2)双重敲低;实... 详细信息

目的探讨ZDHHC5对Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)表达的调节作用以及对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法利用慢病毒感染和质粒瞬转技术对小鼠结肠癌细胞株MC38ova进行ZDHHC5敲低和过表达,并进行ZDHHC5和Zeste同源物增强子2(EZH2)双重敲低;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验检测MC38ova细胞株敲低和过表达ZDHHC5后IFN-Ⅰ表达水平,并检测同时敲低ZDHHC5和EZH2后IFN-Ⅰ表达水平变化;免疫共沉淀实验检测ZDHHC5与EZH2蛋白相互作用;细胞计数试剂盒(CCK 8)增殖实验、克隆形成实验和划痕实验检测MC38ova细胞株敲低ZDHHC5后细胞增殖和迁移能力变化。结果qRT-PCR结果显示,与NC-gfp组IFN-α(1.00±0.05)和IFN-β(1.00±0.06)mRNA水平相比,KD-ZDHHC5#1-gfp组IFN-α(5.72±0.27,t=29.56,P<0.001)和IFN-β(2.59±0.03,t=42.90,P<0.001)mRNA水平升高;与NC组IFN-α(1.00±0.13)和IFN-β(1.00±0.10)mRNA水平相比,KD-ZDHHC5#2组IFN-α(4.74±0.58,t=11.64,P=0.001)和IFN-β(3.85±0.34,t=13.97,P<0.001)mRNA水平升高;与OE-NC组IFN-α(1.00±0.07)和IFN-β(1.00±0.06)mRNA水平相比,OE-ZDHHC5组IFN-α(0.33±0.02,t=16.64,P<0.001)和IFN-β(0.47±0.03,t=14.29,P<0.001)mRNA水平降低;与KD-EZH2组IFN-α(1.00±0.16)mRNA水平相比,KD-EZH2+KD-ZDHHC5组IFN-α(1.82±0.06,t=8.15,P=0.001)mRNA水平升高。免疫共沉淀实验结果显示,FLAG-ZDHHC5能够结合HA-EZH2蛋白。CCK 8结果显示,与NC-gfp组相比,KD-ZDHHC5#1-gfp组细胞增殖能力降低(48 h,t=29.89,P<0.001;72 h,t=32.94,P<0.001);与NC组相比,KD-ZDHHC5#2组细胞增殖能力降低(48 h,t=20.95,P<0.001;72 h,t=28.67,P<0.001)。克隆形成实验结果显示,与NC-gfp组和NC组相比,KD-ZDHHC5#1-gfp组(t=11.44,P<0.001)和KD-ZDHHC5#2组(t=6.02,P=0.004)细胞增殖能力降低。划痕实验结果显示,与NC-gfp组和NC组相比,KD-ZDHHC5#1-gfp组(t=5.78,P=0.029)和KD-ZDHHC5#2组(t=15.22,P=0.004)细胞迁移能力降低。结论ZDHHC5通过与EZH2相互作用,抑制IFN-α和IFN-β表达,增强结肠癌细胞的增殖和迁移能力。

关键词： ZDHHC5 Zeste同源物增强子2 Ⅰ型干扰素结肠癌

cGAS是识别HIV及其他逆转录病毒的固有免疫识别受体

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第5期20卷 521-521页

作者：温明岳安华章

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）等逆转录病毒可以激活固有免疫反应，但对机体如何识别逆转录病毒却知之甚少。cGAS（cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate synthase）是近期被发现的一个新的胞内DNA识别受体，cGAS能够结合胞内的DNA，催化产生第二信使cGAMP（cyclic guanosine monophosphate—adenosine monophosphate）。cGAMP继而结合并活化STING（stimulator of interferongenes），启动机体固有免疫反应。

关键词：逆转录病毒免疫识别 immunodeficiency 受体 HIV 人类免疫缺陷病毒免疫反应第二信使