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作者：宁洪叶南方医科大学

学位级别：硕士

背景乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是最严重和最普遍的健康问题之一,全世界约有20亿人受累。尽管从1982年开始使用HBV疫苗后,HBV感染率大为下降,全世界至今仍有超过3.5亿的慢性HBV携带者,其中约75%分布于亚太平洋地区。随... 详细信息

背景乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是最严重和最普遍的健康问题之一,全世界约有20亿人受累。尽管从1982年开始使用HBV疫苗后,HBV感染率大为下降,全世界至今仍有超过3.5亿的慢性HBV携带者,其中约75%分布于亚太平洋地区。随着感染时间延长,HBV感染者发生肝脏功能失代偿、肝硬化、肝细胞癌的风险亦逐渐增加,全世界每年约有50-120万人死于HBV感染相关的终末期肝病。我国约有1.2亿HBV感染者,其中2000-3000万为慢性活动性肝病患者。因此,慢性HBV感染依然是一个具挑战性的全球健康问题。 HBV感染的结局与宿主的免疫状态密切相关,其中机体对HBV的免疫耐受而导致特异性细胞毒性T细胞(CTL)应答不足是导致HBV感染慢性化的重要原因。慢性HBV感染的免疫学特点主要有:①存在不同程度的免疫耐受。HBV感染病例外周血中有大量病毒抗原,血液高浓度的病毒抗原长期刺激,可能诱导产生更多的Treg细胞,PD-1及CTLA-4等免疫抑制分子表达上调,从而使病毒特异性细胞免疫反应低下或缺失。②抗原提呈细胞特别是树突状细胞(DC)数量较少或功能缺陷,影响DC-T细胞间的相互作用,致使HBV抗原特异性T细胞HLA-Ⅱ表达下降,导致T细胞应答减弱、增殖不足,不能激活Th细胞产生细胞因子、或不能激活CTL的细胞毒活性;③HBV特异性TCR CDR3谱型较窄或峰形偏倚,T细胞呈单克隆性或寡克隆性增生,从而使机体对HBV抗原的识别及应答谱较窄;④Ⅰ型及Ⅱ型辅助性T淋巴细胞(Helper T lymphocyte,Th)失平衡。在病毒复制部位T细胞分泌的细胞因子型可能影响感染的最后结局,特异性Th1细胞占优势时,可促进细胞免疫反应,有利于清除病毒;而Th2细胞占优势时,虽然有利于产生针对HBV的抗体,但容易使感染慢性化。慢性HBV感染者Th1型细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-2等)相对不足,而Th2型细胞因子(IL-4、IL-10等)水平相对较高,因而维持慢性感染状态。⑤抗病毒相关的细胞因子(TNF-α及IFN-γ等)可能存在基因突变、基因多态性或信号转导过程的异常。随着对乙型肝炎病毒学、免疫学及慢性感染自然史认识的提高,目前公认HBV复制是免疫介导肝损伤和疾病进展的关键驱动者。自1998年以来,一些有效的口服抗病毒药物的批准使用使乙型肝炎的治疗发生了革命性的变化。目前批准用于抗HBV治疗的药物分两大类,注射用的干扰素(普通干扰素和长效干扰素)及口服的核苷(酸)类似物(拉米夫定、阿德福韦、替比夫定和恩替卡韦等)。这些药物可有效的抑制病毒复制和阻止疾病进展,但却不能完全清除病毒;核苷(酸)类似物长期治疗的耐药问题也是一个很大的缺陷。因此,我们需要寻找新的药物或治疗策略来提高慢性乙型肝炎治疗的效果。近年,医用臭氧用于治疗乙型病毒性肝炎成为一种新的探索。医用臭氧是臭氧与医用纯氧的混合气体,可用于治疗风湿、溃疡性结肠炎、椎间盘突出症等多种疾病。臭氧作用全血后产生活性氧(ROS,主要是HO)和脂质过氧化产物(LOPs),这两种产物分别作用于血液中的各种成分(单核细胞、血小板、红细胞、白细胞)及内皮细胞和其他器官,产生各种效应,近年来过氧化氢(HO)被认为是动、植物细胞中一个重要的细胞内信使,因此臭氧是通过其反应产物间接发挥作用。中国大陆在2004年底开始臭氧治疗乙型病毒性肝炎的尝试并且初见疗效,医用臭氧有望成为治疗慢性乙型肝炎的一种新的策略。但其作用机制不清楚。既往研究推断医用臭氧具有免疫调节作用,但尚需进一步证实,因此,研究医用臭氧的免疫作用机制具有重要的临床意义。目的通过研究医用臭氧体外对慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌细胞因子功能的影响, 1.探索臭氧治疗CHB的细胞免疫学机理;2.为医用臭氧治疗CHB提供基础研究的证据,促进并推广其在临床上的应用;3.为CHB的治疗寻找新策略,提高治疗效果。方法 1.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测臭氧作用后CHB患者PBMC培养上清中IFN-γ和IL-4水平:分别采集11例CHB患者和8例健康献血员外周血10ml,密度梯度离心法分离PBMC,用RPMI 1640完全培养基重悬后,以不同浓度(4、10、20、40、80μg/mL)的医用臭氧冒泡法作用后,于37℃含5%CO的细胞培养箱中培养72小时;设置医用纯氧(O,冒泡法作用)、阳性(PHA 10μg/ml刺激)、阴性(RPMI 1640基础培养基)及双复孔自身对照组。培养结束后,ELISA检测各处理组PBMC培养上清液中IFN-γ和IL-4的浓度,操作步骤按照试剂盒说明书进行。 2.流式细胞术(FCM)检测臭氧作用后CHB患者CD4+和CD8+T细胞中IFN-γ和IL-4阳性细

关键词：肝炎病毒乙型慢性臭氧细胞免疫酶联免疫吸附试验流式细胞术

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甲型H1N1流行性感冒患者早期血常规及C反应蛋白特点分析

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中华传染病杂志 2010年第5期28卷 301-303页

作者：施伎蝉蒋贤高朱海燕宁洪叶温州市第二人民医院感染科 325000

2009年3月，墨西哥暴发人感染流行性感冒（流感）疫情，并迅速在全球范围内蔓延。此次流感为一种新型呼吸道传染病，其病原为新甲型H1N1流感病毒，病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段。世界卫生组织（WHO）... 详细信息

2009年3月，墨西哥暴发人感染流行性感冒（流感）疫情，并迅速在全球范围内蔓延。此次流感为一种新型呼吸道传染病，其病原为新甲型H1N1流感病毒，病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段。世界卫生组织（WHO）初始将此型流感称为人感染猪流感，

关键词：流行性感冒 C反应蛋白甲型血常规流感病毒早期患者呼吸道传染病

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拉米夫定预防结核性胸膜炎合并乙型肝炎患者激素治疗后的乙型肝炎病毒再激活

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中华传染病杂志 2012年第10期30卷 618-619页

作者：苏菲菲杨守峰赵晓云宁洪叶蒋贤高朱海燕崔小亚浙江省温州市第二人民医院感染科 325000

HBV感染者应用糖皮质激素容易导致HBV再激活，其临床后果轻重不一。临床上结核性胸膜炎合并HBV感染者较为常见，在抗结核治疗时加用糖皮质激素，可引起HBV再激活，易发生急性肝炎甚至暴发性肝功能衰竭。本研究旨在对拉米夫定预防结核性... 详细信息

HBV感染者应用糖皮质激素容易导致HBV再激活，其临床后果轻重不一。临床上结核性胸膜炎合并HBV感染者较为常见，在抗结核治疗时加用糖皮质激素，可引起HBV再激活，易发生急性肝炎甚至暴发性肝功能衰竭。本研究旨在对拉米夫定预防结核性胸膜炎合并HBV感染患者糖皮质激素治疗引起HBV再激活进行探讨。

关键词：结核性胸膜炎乙型肝炎病毒再激活激素治疗拉米夫定乙型肝炎患者预防 HBV再激活暴发性肝功能衰竭

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肺结核诊治进展综述

肺结核诊治进展综述

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2018年浙江省医学会结核病学分会学术年会

作者：宁洪叶蒋贤高施伎蝉

肺结核是长期严重危害人类健康的慢性传染病,是单因素所致感染性疾病中病死率最高的疾病。自20世纪80年代后期,受耐药性结核病例增多、HIV/AIDS,合并感染和流动人口增加等因素的影响,结核病死灰复燃,已成为全球再次关注的公共卫生问题...

肺结核是长期严重危害人类健康的慢性传染病,是单因素所致感染性疾病中病死率最高的疾病。自20世纪80年代后期,受耐药性结核病例增多、HIV/AIDS,合并感染和流动人口增加等因素的影响,结核病死灰复燃,已成为全球再次关注的公共卫生问题和社会问题。结核病病例的发现与治疗是当前控制结核病传播、降低发病率的主要手段。

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医用臭氧治疗慢性乙型病毒性肝炎

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南方医科大学学报 2009年第6期29卷 1277-1278页

作者：宁洪叶彭福江周福元杨玲彭劼冯筱榕孙剑郭亚兵南方医科大学南方医院感染内科广东广州510515

目的探讨医用臭氧对慢性乙型病毒性肝炎的治疗疗效。方法45例慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者,采用医用臭氧自血回输疗法联合医用臭氧直肠灌注疗法,每周3次,疗程3～4月,治疗结束后随访24周。观察肝功能、乙肝病毒血清标志物、血清乙肝病毒... 详细信息

目的探讨医用臭氧对慢性乙型病毒性肝炎的治疗疗效。方法45例慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者,采用医用臭氧自血回输疗法联合医用臭氧直肠灌注疗法,每周3次,疗程3～4月,治疗结束后随访24周。观察肝功能、乙肝病毒血清标志物、血清乙肝病毒定量及不良反应。结果45例CHB患者,联合应答6例(6/45,13.3%),部分应答21例(21/45,46.7%),病毒学应答14例(14/45,31.1%)(治疗后血清HBVDNA下降≥2log10),HBeAg血清学转换10例(10/35,28.6%),ALT复常13例(13/45,28.9%),无严重不良事件发生。治疗结束后对45例患者进行了24周的随访,随访结束时,联合应答7例(7/45,15.6%),部分应答25例(25/45,55.6%),病毒学应答15例(15/45,33.3%),ALT复常17例(17/45,37.8%),HBeAg血清学转换11例(11/35,31.4%)。复发1例。结论医用臭氧治疗慢性乙型肝炎有一定的疗效,而且不良反应少,是一个不错的治疗选择。

关键词：病毒性肝炎乙型肝炎医用臭氧

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TRIM28磷酸化对人肺上皮细胞高致病性禽流感病毒感染过程中IFN-β和促炎细胞因子的表达

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中国预防医学杂志 2019年第7期20卷 613-617页

作者：宁洪叶蒋贤高施伎蝉何贵清吴正兴温州市中心医院感染科浙江温州325000

目的探究TRIM28磷酸化对人肺上皮细胞高致病性禽流感病毒感染过程中IFN-β和促炎细胞因子表达的影响。方法以人肺癌上皮细胞(human lung carcinoma cells A549,ATCC)及人肺腺癌细胞系PAa为研究对象。将细胞进行高致病性禽流感病毒ⅣAnhu... 详细信息

目的探究TRIM28磷酸化对人肺上皮细胞高致病性禽流感病毒感染过程中IFN-β和促炎细胞因子表达的影响。方法以人肺癌上皮细胞(human lung carcinoma cells A549,ATCC)及人肺腺癌细胞系PAa为研究对象。将细胞进行高致病性禽流感病毒ⅣAnhui/112005(H5N1)转染。将病毒转染后的细胞进行siRNA转染,对转染后的细胞的总RNA进行提取,检测各组细胞中mRNA的表达量,细胞内的蛋白表达量,细胞活性及细胞凋亡率。结果转染均siRNA2与siRNA3后能有效抑制TRIM28蛋白的磷酸化;TRIM28的磷酸化可促进IFN-β、IL-1β在细胞内的表达;与转染TRIM28 siRNA2、TRIM28 siRNA3后的对照组GAPDH和对照组scrambled siRNA中PAa细胞的G0/G1期比例(即50.02%和53.46%)相比,转染后的PAa细胞在G0/G1期的比例(60.13%和59.38%)增加(P<0.05)。但转染TRIM28 siRNA2、TRIM28 siRNA3的PAa细胞的G2/M期与S期的比例均下降。结论 TRIM28磷酸化增强了人肺上皮细胞高致病性禽流感病毒感染过程中IFN-β和促炎细胞因子的表达。

关键词： TRIM28磷酸化人肺上皮细胞高致病性禽流感病毒促炎细胞因子定量PCR 蛋白印迹流式细胞术

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温州市老年复治肺结核患者耐药情况分析

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预防医学 2018年第12期30卷 1241-1244页

作者：宁洪叶蒋贤高施伎蝉何贵清吴正兴温州市中心医院感染科浙江温州325000

目的了解温州市老年复治肺结核患者耐药情况,为老年结核病防治提供依据。方法选取2012年1月—2017年10月温州市≥60岁的初治和复治涂阳肺结核患者,通过问卷调查和药敏试验比较初、复治肺结核患者的耐药类型和耐药谱分布,分析老年复治肺... 详细信息

目的了解温州市老年复治肺结核患者耐药情况,为老年结核病防治提供依据。方法选取2012年1月—2017年10月温州市≥60岁的初治和复治涂阳肺结核患者,通过问卷调查和药敏试验比较初、复治肺结核患者的耐药类型和耐药谱分布,分析老年复治肺结核患者的耐药特征。结果最终纳入老年初治和复治肺结核患者各1 280例,初治患者总耐药率为31.72%,耐多药率为4.84%,广泛耐药率为0.63%;复治患者总耐药率为52.27%,耐多药率为25.23%,广泛耐药率为5.63%。老年复治患者链霉素(44.38%)、异烟肼(35.63%)、利福平(33.05%)、乙胺丁醇(22.50%)、氧氟沙星(15.70%)、对氨基水杨酸钠(6.72%)和卷曲霉素(4.69%)耐药率均高于初治患者(P<0.05)。女性老年复治患者耐多药率和广泛耐药率分别为28.73%和7.69%,均高于男性的23.39%和4.53%(P<0.05)。结论温州市老年复治肺结核患者耐多药率和广泛耐药率较高,女性耐多药率和广泛耐药率高于男性,且对一线抗结核药物的耐药率较高。

关键词：肺结核老年复治耐药

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甲型H1N1流感患者早期血常规及CRP特点分析

甲型H1N1流感患者早期血常规及CRP特点分析

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第二届传染病诊治高峰论坛暨2009年浙江省感染病、肝病学术年会

作者：施伎蝉蒋贤高朱海燕崔小亚宁洪叶温州市第二人民医院感染科

2009年3月,墨西哥暴发"人感染猪流感"疫情,并迅速在全球范围蔓延。此次流感为一种新型呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段。世界卫生组织(WHO)初始将此型流感称为... 详细信息

2009年3月,墨西哥暴发"人感染猪流感"疫情,并迅速在全球范围蔓延。此次流感为一种新型呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段。世界卫生组织(WHO)初始将此型流感称为"人感染猪流感",后将其重新命名为"甲型H1N1流感"。6月11日,WHO宣布将流感大流行警告级别提升为6级。据WHO网站的数据,截至2009年

关键词：流感病毒 CRP 特点分析

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左氧氟沙星及利福喷丁胶囊治疗老年初治肺结核患者的疗效及安全性分析

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中国生化药物杂志 2017年第4期37卷 238-240页

作者：宁洪叶蒋贤高施伎蝉何贵清吴正兴温州市中心医院感染科

目的探讨左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年初治肺结核的疗效及安全性。方法选取2015年1月~2016年1月温州市中心医院收治的120例老年初治肺结核患者随机分为A、B、C 3组,每组40例。A组治疗方案：2HRZE/4HR,B组治疗方案：2Rft HZE/4HRft,C... 详细信息

目的探讨左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年初治肺结核的疗效及安全性。方法选取2015年1月~2016年1月温州市中心医院收治的120例老年初治肺结核患者随机分为A、B、C 3组,每组40例。A组治疗方案：2HRZE/4HR,B组治疗方案：2Rft HZE/4HRft,C组治疗方案：2Rft HELfx/4HRft。比较3组患者临床症状、体征及药物不良反应,观察血常规、尿常规、肝肾功能变化,行影像学检查和细菌学检查,判断治疗效果。结果 A组患者中有5例、B组有1例因肝损害及严重胃肠道反应而放弃治疗,C组40例患者均无退出治疗。3组痰菌阴转率及病灶吸收情况比较差异无统计学意义,C组胃肠道反应及肝损害例数较A、B组明显减少（P〈0.05）,A组2例出现利福喷丁胶囊过敏而更换为左氧氟沙星治疗,其他2组无药物过敏出现。结论左氧氟沙星及利福喷丁胶囊治疗老年初治肺结核疗效好,不良作用较少,老年肺结核患者初治方案宜个体化,可考虑使用不良反应较小的药物,以保证治疗的顺利进行。

关键词：肺结核利福喷丁左氧氟沙星老年

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左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年肺结核疗效及安全性分析

左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年肺结核疗效及安全性分析

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2018年浙江省医学会结核病学分会学术年会

作者：宁洪叶蒋贤高施伎蝉何贵清吴正兴温州市中心医院感染科

目的探讨左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年初治肺结核的疗效及安全性,为老年肺结核患者制定个体化治疗方案。方法将我院120例老年初治肺结核患者随机分为A、B、C 3组,每组40例。A组治疗方案:2HRZE/4HR,B组治疗方案:2RFT(利福喷丁胶囊)HZE/4... 详细信息

目的探讨左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年初治肺结核的疗效及安全性,为老年肺结核患者制定个体化治疗方案。方法将我院120例老年初治肺结核患者随机分为A、B、C 3组,每组40例。A组治疗方案:2HRZE/4HR,B组治疗方案:2RFT(利福喷丁胶囊)HZE/4HRFT,C组治疗方案:2RFT(利福喷丁胶囊)HELfx/4HRFT。结果 A组患者中有5例、B组有1例因肝损害及严重胃肠道反应而放弃治疗,C组40例患者均无退出治疗。三组痰菌阴转率及病灶吸收情况无明显统计学差异(P均>0.05),C组胃肠道反应及肝损害例数较A、B组明显减少(P<0.05),A组2例出现利福平过敏而更换为左氧氟沙星治疗,其他2组无药物过敏出现。结论左氧氟沙星及利福喷丁治疗老年初治肺结核疗效好,副作用较少,老年肺结核患者初治方案宜个体化,可考虑使用副作用较小的药物,以保证治疗的顺利进行。

关键词：肺结核利福喷丁左氧氟沙星老年

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