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知母多糖理化性质及生物活性研究

知母多糖理化性质及生物活性研究

作者：季瑞雪黑龙江八一农垦大学

学位级别：硕士

知母是一种组成成分丰富、药理功效优良、开发潜力巨大的百合科植物,随着愈加强烈的保健预防需求,越来越多的消费者将知母作为辅料添加到食品中。知母多糖作为知母中重要的生物活性成分之一,现有文献中关于其抗炎、抗氧化和降血糖等方... 详细信息

知母是一种组成成分丰富、药理功效优良、开发潜力巨大的百合科植物,随着愈加强烈的保健预防需求,越来越多的消费者将知母作为辅料添加到食品中。知母多糖作为知母中重要的生物活性成分之一,现有文献中关于其抗炎、抗氧化和降血糖等方面的功效已被证明,但是未见关于其免疫调节能力和抗癌活性方面的明确报道。同时,知母多糖结构与生物活性之间的构效关系、免疫作用与抗癌作用之间的关系鲜有报道。因此,本研究对知母多糖理化性质和生物活性开展较为深入探究,主要结果如下:1.知母多糖热水浸提工艺优化:将热水浸提法得到的知母多糖命名为RAP1,通过单因素实验和正交试验确定此方法提取知母多糖的最佳提取工艺参数为:料液比1:20g/mL、提取温度90°C、提取时间2.0 h,此时RAP1平均得率达12.81%。***1纯化与结构分析:RAP1经DEAE Sepharose Fast Flow柱分离纯化后,得到F1和F2组分,得率分别为50.01%和19.62%。检测确定RAP1、F1和F2三种样品的中性糖含量分别为60.54%、89.72%和51.43%,蛋白质含量分别为14.50%、1.94%和7.60%,硫酸根含量分别为8.13%、3.42%和5.92%,糖醛酸含量分别为15.61%、1.03%和30.20%。三种样品的重均分子质量分布范围为130.00×10～576.51×10g/mol,旋转半径分布范围为87.59～382.62 nm,旋转比体积分布范围为0.32～54.31 cm/g。三种样品的单糖组成比例分别为鼠李糖(0～6.12%)、阿拉伯糖(7.10%～21.20%)、木糖(0.20%～4.83%)、甘露糖(39.90%～79.01%)、葡萄糖(6.01%～11.12%)和半乳糖(2.64%～22.01%)。F2多糖样品主链由(1→4)甘露糖残基和(1→3)半乳糖残基构成。3.知母多糖免疫活性评价:采用Griess法和RT-PCR法分析免疫活性,各处理组中NO、iNOS、COX-2、IL-1β和TNF-α的含量均得到提高,且具有显著性差异(P<0.05)。确定三种知母多糖都能通过调控RAW 264.7细胞中i NOS基因表达从而促进NO分泌,并调控细胞免疫因子的基因表达共同发挥免疫活性作用。4.知母多糖抑制胃癌细胞活性及机制:采用MTT法、Hoechst/PI双染法、流式细胞术和Western blotting法分析抗癌活性,确定RAP1、F1和F2组分多糖对三种胃癌细胞均具有杀伤能力,F2能够通过介导MAPK/STAT3信号通路,增强促凋亡蛋白表达强度,显著上调p-p38和p-JNK蛋白表达水平(P<0.05),同时显著降低ERK和STAT3磷酸化水平(P<0.05),进而诱导人胃癌AGS细胞凋亡。以上结果确定了热水浸提法提取知母多糖的最佳工艺参数,鉴定了知母多糖的理化性质和分子结构,明确了知母多糖RAP1、F1和F2(F2组分活性最强)具有良好的免疫活性和抗胃癌细胞活性,阐明了F2抗胃癌AGS细胞作用机制,为知母多糖相关功能性食品和免疫/抗胃癌保健品的开发和应用提供理论支持。

关键词：知母多糖理化性质生物活性结构鉴定

玛湖凹陷风城组页岩油产量影响因素及甜点评价

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新疆石油地质 2022年第6期43卷 733-742页

作者：刘财广季瑞雪王伟张融中国石油新疆油田分公司勘探开发研究院新疆克拉玛依834000 中国石油新疆油田分公司采气一厂新疆克拉玛依834000

准噶尔盆地玛湖凹陷风城组页岩油资源潜力巨大,但该组岩性复杂、矿物种类多样、单层厚度小、甜点分散、裂缝发育程度不一,甜点优选难度大,严重影响了勘探进程。通过对烃源岩品质、储集层品质、工程品质及压裂规模的研究,系统分析了总有... 详细信息

准噶尔盆地玛湖凹陷风城组页岩油资源潜力巨大,但该组岩性复杂、矿物种类多样、单层厚度小、甜点分散、裂缝发育程度不一,甜点优选难度大,严重影响了勘探进程。通过对烃源岩品质、储集层品质、工程品质及压裂规模的研究,系统分析了总有机碳含量、氯仿沥青“A”含量、孔隙度、含油饱和度、游离油含量、脆性指数、孔隙压力、两向应力差、裂缝发育程度等对产量的影响。研究表明,该组页岩油产量的关键控制因素主要有4个:游离油含量、脆性指数、裂缝发育程度及大规模体积压裂。利用研究区12口井的测井资料,分析产量与游离油、脆性、裂缝发育程度等控制因素的关系,建立适用于该组页岩油的甜点分类标准。将该分类标准应用于水平井玛页1H井分段分簇,取得了很好的应用效果,对后续勘探部署具有借鉴意义。

关键词：准噶尔盆地玛湖凹陷风城组页岩油储集层分类核磁共振测井产量影响因素甜点评价

白芍多糖提取工艺优化、分子特性分析及其对巨噬细胞的增殖作用

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食品工业科技 2021年第15期42卷 157-162页

作者：曹荣安张承泰季瑞雪张佳苗贾建牛广财王长远李兴革黑龙江八一农垦大学食品学院黑龙江大庆163319 黑龙江省农产品加工工程技术研究中心黑龙江大庆163319

本文采用水提醇沉法提取白芍多糖,通过正交试验确定白芍多糖提取工艺参数并分析其化学组成,使用高效尺寸排阻色谱-紫外检测器-多角度激光光散射仪-示差折光检测器联机系统检测多糖分子量,利用气相色谱-质谱联用仪分析多糖的单糖组成和... 详细信息

本文采用水提醇沉法提取白芍多糖,通过正交试验确定白芍多糖提取工艺参数并分析其化学组成,使用高效尺寸排阻色谱-紫外检测器-多角度激光光散射仪-示差折光检测器联机系统检测多糖分子量,利用气相色谱-质谱联用仪分析多糖的单糖组成和链接方式,采用WST法检测白芍多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖率的影响。结果表明:白芍多糖的最佳提取工艺参数为液料比25:1 mL/g、提取温度85℃、提取时间3.0 h,得率12.40%。白芍多糖含有96.2%±1.2%总糖和5.5%±0.6%蛋白质,未检出硫酸根和糖醛酸,其分子质量和回转半径分别为2.3×10^(6) u和234.9 nm。白芍多糖主要含葡萄糖,大部分是通过(1→4)糖苷键链接的。同时,白芍多糖可以在2、5、10μg/mL浓度范围促进RAW264.7细胞增殖。其中,10μg/mL处理组的细胞增殖率得到大幅提升,且与其他组别的细胞增殖率存在显著性差异(P<0.05)。

关键词：白芍多糖提取工艺分子特性细胞增殖

固相萃取-气相色谱法测定橄榄油中4种脂肪酸乙酯

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色谱 2023年第4期41卷 359-365页

作者：陆慧媛王利娟张炯恺张驰中李天娟季瑞雪沈伟健南京海关动植物与食品检测中心江苏南京210001 上海安谱实验科技股份有限公司上海201609

橄榄油中脂肪酸乙酯(FAEEs)的含量是衡量其产品品质的重要指标之一,GB/T 23347-2021《橄榄油、油橄榄果渣油》中要求特级初榨橄榄油中FAEEs应≤35 mg/kg。目前橄榄油中FAEEs的国际标准检测方法是硅胶柱层析-气相色谱法(GC),该方法存在... 详细信息

橄榄油中脂肪酸乙酯(FAEEs)的含量是衡量其产品品质的重要指标之一,GB/T 23347-2021《橄榄油、油橄榄果渣油》中要求特级初榨橄榄油中FAEEs应≤35 mg/kg。目前橄榄油中FAEEs的国际标准检测方法是硅胶柱层析-气相色谱法(GC),该方法存在操作复杂、耗时长、试剂消耗量大等缺点。本研究建立了硅胶固相萃取(Si SPE)-气相色谱分析橄榄油中棕榈酸乙酯、亚油酸乙酯、油酸乙酯和硬脂酸乙酯4种FAEEs的检测方法。考察了载气类型,选定He气作为载气;筛选了内标化合物,确定使用十七碳烯酸乙酯(顺-10)作为内标物质;优化了SPE条件,对比了不同品牌Si SPE柱对回收率的影响,确定了称取0.05 g橄榄油,使用正己烷提取,1 g/6 mL Si SPE柱净化的前处理方法。该方法处理一个样品大约仅需2 h前处理时间和23 mL试剂。对优化后的方法进行方法学验证,结果表明,4种FAEEs在0.1~5.0 mg/L的范围内线性关系良好(决定系数(R 2)>0.999),方法检出限为0.78~1.11 mg/kg,定量限为2.35~3.33 mg/kg,在低、中、高3个加标水平(4、8、20 mg/kg)下的回收率为93.8%~104.0%,相对标准偏差为2.2%~7.6%。用建立的方法对15个橄榄油样品进行测试,发现3个特级初榨橄榄油样品的FAEEs总量超过了35 mg/kg,表明市场上可能存在以次充好的现象。与国际标准检测方法相比,该方法前处理过程简便,操作时间短,试剂用量少,检测成本低,精密度高,准确性好,可以为橄榄油检测标准的完善提供有效的理论和数据参考。

关键词：固相萃取气相色谱脂肪酸乙酯棕榈酸乙酯亚油酸乙酯油酸乙酯硬脂酸乙酯橄榄油

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野生亚侧耳多糖的提取和对巨噬细胞Raw264.7的免疫调节作用研究

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食品工业科技 2020年第4期41卷 271-276页

作者：季瑞雪鹿保鑫王新茹向婷婷刘文江陶晨苏敏汤尚文包鸿慧湖北文理学院食品科学技术学院·化学工程学院湖北襄阳441000 黑龙江八一农垦大学食品学院黑龙江大庆163000

本研究从亚侧耳子实体中分离出水溶性亚侧耳多糖(HSP),通过体外实验评估其对Raw264.7巨噬细胞的免疫调节作用。采用WST-1法检测HSP对巨噬细胞增殖作用的影响,Griess试剂检测一氧化氮(NO)浓度,ELISA法检测HSP对淋巴细胞中一肿瘤坏死因子-... 详细信息

本研究从亚侧耳子实体中分离出水溶性亚侧耳多糖(HSP),通过体外实验评估其对Raw264.7巨噬细胞的免疫调节作用。采用WST-1法检测HSP对巨噬细胞增殖作用的影响,Griess试剂检测一氧化氮(NO)浓度,ELISA法检测HSP对淋巴细胞中一肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和前列腺素E2(prostaglandins E2,PGE2)等细胞因子分泌量的影响,反转录聚合酶链式反应分析诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-6(IL-6)、TNF-α和IL-1β的转录水平表达量。结果表明,HSP可显著提高Raw264.7细胞内NO的浓度,在HSP浓度为100.00μg/m L时,NO的分泌量达到最大值(29.94 mmol/L)。与空白组相比,HSP可以显著提高TNF-α、IL-1β、PGE2等免疫因子(P<0.05)的分泌量,其中IL-1β、PGE2的25μg/m L剂量组中各因子分泌量(31.9524 pg/m L,1.8174 ng/m L)均与LPS(脂多糖)阳性对照组相接近。反转录聚合酶链式反应分析结果表明,HSP能够提高iNOS和COX-2的蛋白表达量。HSP具有免疫调节的功能,可以作为免疫调节剂添加到功能性食品和药品中。

关键词：亚侧耳多糖巨噬细胞Raw264.7 免疫调节

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豆腐渣的营养功效及综合利用

粮食加工 2020年第2期45卷 46-47页

作者：任洁萍谷鑫张佳苗季瑞雪曹荣安黑龙江八一农垦大学食品学院黑龙江大庆163319

豆腐渣是生产豆腐的副产品,含有丰富营养成分,但由于其口感较差以往大多被废弃掉。随着科技进步,对豆腐渣的研究利用逐渐增多。综述了豆腐渣的营养成分、保健功效和综合利用情况,可以为豆腐渣的研究利用提供一定的参考。

关键词：豆腐渣营养功效综合利用

双碳目标下数字孪生推动天然气行业实现数字化转型

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双碳目标下数字孪生推动天然气行业实现数字化转型

第33届全国天然气学术年会

作者：王传平王佳佳李玉东公雨季瑞雪王俊丽新疆油田公司采气一厂

能源是国民经济发展的重要基础,当今世界正面临着能源紧张、环境污染、气候变化等难题。因此"碳达峰、碳中和"战略目标的提出,推动了能源改革及产业技术升级,也给天然气行业的发展带来新的机遇。天然气行业将如何以全新的姿态助力碳中和... 详细信息

能源是国民经济发展的重要基础,当今世界正面临着能源紧张、环境污染、气候变化等难题。因此"碳达峰、碳中和"战略目标的提出,推动了能源改革及产业技术升级,也给天然气行业的发展带来新的机遇。天然气行业将如何以全新的姿态助力碳中和?关键是要推动与数字化技术的深度融合,调整、优化传统产业结构,打造新产业、新业态、新模式,实现数字化转型。随着物联网、大数据、云计算、人工智能等新一代信息技术与实体经济深度融合,企业数字化转型需要向更高阶段发展,催生而出的数字孪生正在被广泛应用在航空航天、生产制造、石油天然气等领域。本文通过对项目构建数字孪生体、搭建数字孪生系统等,对数字孪生在天然气行业的应用进行了探索与研究,研究发现以实体为对象的数字孪生能大幅提升企业整体的数字化、智能化经营水平,实现降本增效,推动数字化转型,将为天然气行业发展、人类未来生活带来无限的可能。

关键词：双碳目标数字孪生数字化转型降本增效

来源： cnki会议评论

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麸皮多糖提取及生物活性研究综述

粮食加工 2020年第4期45卷 33-36页

作者：王欣卉季瑞雪宋雪健牛广财曹荣安齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江八一农垦大学食品学院黑龙江大庆163319 黑龙江八一农垦大学国家杂粮工程技术研究中心黑龙江大庆163319 黑龙江省农产品加工工程技术研究中心黑龙江大庆163319

谷物加工的副产物——麸皮含有丰富的营养成分,其中多糖是麸皮中重要的活性物质。对来源于小麦麸皮、玉米麸皮、青稞麸皮、燕麦麸皮及荞麦麸皮的多糖的提取方式及生物活性进行综述,为其深入研究提供参考,拓宽麸皮多糖的研究深度,提升麸... 详细信息

谷物加工的副产物——麸皮含有丰富的营养成分,其中多糖是麸皮中重要的活性物质。对来源于小麦麸皮、玉米麸皮、青稞麸皮、燕麦麸皮及荞麦麸皮的多糖的提取方式及生物活性进行综述,为其深入研究提供参考,拓宽麸皮多糖的研究深度,提升麸皮的综合利用率。

关键词：麸皮多糖提取活性

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榛蘑多糖颗粒冲剂的研制

黑龙江八一农垦大学学报 2020年第3期32卷 44-49,68页

作者：季瑞雪包鸿慧何泽良王加初石闯张敬徐娜鹿保鑫黑龙江八一农垦大学食品学院大庆163000 湖北文理学院食品科学技术学院化学工程学院

为研发一种榛蘑多糖保健颗粒冲剂,运用传统的热水浸提法提取榛蘑中的多糖。以减压浓缩,得到榛蘑多糖浸膏。应用挤压造粒法对混合的软材进行造粒,设定60℃为颗粒软材的干燥温度。在单因素试验的基础上进行正交试验,考察各种辅料的加入对... 详细信息

为研发一种榛蘑多糖保健颗粒冲剂,运用传统的热水浸提法提取榛蘑中的多糖。以减压浓缩,得到榛蘑多糖浸膏。应用挤压造粒法对混合的软材进行造粒,设定60℃为颗粒软材的干燥温度。在单因素试验的基础上进行正交试验,考察各种辅料的加入对榛蘑多糖颗粒冲剂的风味和复溶性效果的影响,从而确定颗粒制剂的最佳配方。结果,可溶性淀粉20%、β-环状糊精30%、柠檬酸0.1%、甜蜜素3%,即主辅料比约接近1∶1为最佳配方。榛蘑多糖颗粒冲剂在该工艺下,成型条件简单、重复性好、有效成分稳定。在此配比下研制出的榛蘑多糖冲剂口感好、溶解快。

关键词：正交试验榛蘑多糖冲剂复溶性