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天山雪莲细胞肽的制备与活性研究

天山雪莲细胞肽的制备与活性研究

作者：马海朝大连海洋大学

学位级别：硕士

天山雪莲是一种珍稀濒危的药用植物,作为药材使用具有悠久的历史。通过植物细胞培养技术成功培养天山雪莲细胞,解决了野生雪莲资源短缺的问题。雪莲细胞培养物在2010年获批植物类“新资源食品”,2021年通过化妆品新原料备案,可在各类保... 详细信息

天山雪莲是一种珍稀濒危的药用植物,作为药材使用具有悠久的历史。通过植物细胞培养技术成功培养天山雪莲细胞,解决了野生雪莲资源短缺的问题。雪莲细胞培养物在2010年获批植物类“新资源食品”,2021年通过化妆品新原料备案,可在各类保健食品、医药品及化妆品等领域中添加。雪莲细胞培养物中蛋白质较为丰富,但目前对其细胞培养物中活性蛋白/肽的研究与应用较少。论文以天山雪莲细胞培养物为研究对象,采用蛋白酶酶解法制备天山雪莲细胞肽。通过筛选适宜的蛋白酶进行酶解,结合单因素实验和正交实验,得到天山雪莲细胞肽适宜的酶解条件为采用胰蛋白酶酶解,料液比1:25,酶解温度为42℃,酶添加量为10000 U·g,酶解液的蛋白/肽含量为129.52 mg·g雪莲细胞。通过响应面法对蛋白酶的酶解条件进一步优化,优化后的酶解条件为料液比1:26.8、酶解温度43.8℃、酶添加量10717.1 U·g,在此条件下蛋白/肽含量的理论值为130.8 mg·g雪莲细胞。经过验证检验提取的雪莲蛋白/肽含量为128.3 mg·g雪莲细胞粉,与预测值接近,证明模型可行,可用于分析和预测天山雪莲酶解蛋白的条件优化。该结论与正交实验结果基本相吻合,说明采用该响应面模型优化天山雪莲细胞的酶解条件合理。采用上述优化的适宜酶解条件进行制备天山雪莲细胞酶解液。经离心、过滤得到上清液,结合透析富集和葡聚糖凝胶Sephadex G柱层析的分离纯化,获得不同分子量范围的蛋白/肽组分,分别为:500 Da以下（A组分）、500～1000 Da（B组分）、1000～2000 Da（C组分）、2000～3500 Da（D组分）、3500～5000 Da（E组分）。其中A、B组分经过葡聚糖凝胶Sephadex G-10纯化分别得到F、G活性肽组分,C、D、E组分经过葡聚糖凝胶Sephadex G-25纯化分别得到H、I、J活性肽组分。采用透析和葡聚糖凝胶柱层析对不同分子量范围的天山雪莲细胞蛋白/肽具有较好的富集和分离纯化作用。对上述天山雪莲细胞肽组分进行清除自由基活性实验。其中未经Sephadex G柱层析纯化前的天山雪莲细胞肽组分对DPPH自由基清除活性较好的是A组,经过葡聚糖凝胶纯化后的天山雪莲多肽各组分对DPPH自由基清除活性有一定的提升,纯化后的F和G组分清除DPPH自由基活性较强,IC值分别为0.052、0.066 mg·mL。未经纯化前的天山雪莲细胞肽组分中,A组分对羟基自由基的清除效果最好,IC值约为1.037 mg·mL,经过纯化后,G组分对羟基自由基的清除效果最好,IC值约为0.375 mg·mL,经纯化后的各多肽组分对羟基自由基清除能力明显增强。对其清除超氧阴离子活性进行测定,未经纯化前的天山雪莲细胞肽组分和经纯化后的组分均具有一定的超氧阴离子清除活性,其中A组和F组在各个浓度条件下具有较高的超氧阴离子清除活性。H组分浓度从0.078 mg·mL增加到0.625mg·mL,呈现了一定的浓度-活性的正相关性,清除率最高可达75.3%。对天山雪莲细胞肽进行抑制酪氨酸酶活性实验。其中未经Sephadex G柱层析纯化前的E组分对酪氨酸酶的清除效果较好,IC约为0.573 mg·mL,经过纯化后的G组分和I组分多肽对酪氨酸酶的抑制效果较好,IC分别为0.620和0.661 mg·mL。提示天山雪莲细胞肽具有一定的抑制酪氨酸酶活性,即具有一定的美白作用。结合HPLC-MS-MS液相-质谱联用技术,分析G、H多肽组分的氨基酸组成与序列。将得到的片段氨基酸序列通过PEAKS Studio数据库检索,分析总离子流色谱图,得到G组分含量相对较高的3条肽段氨基酸序列分别为:VPTVDVS（Val-Pro-Thr-Val-Asp-Val-Ser）.SMKKLTIL（Ser-Met-Lys-Lys-Leu-Thr-Ile-Leu）.GSNARDL（Gly-Ser-Asn-Ala-Arg-Asp-Leu）。H组分含量相对较高的4条肽段氨基酸序列分别为:PVVKLGGETLTVS（Pro-Val-Val-Lys-Leu-Gly-Gly-Glu-Thr-Leu-Thr-Val-Ser）.LVALC（+57.02）QSVDLRH[Leu-Val-Ala-Leu-Cys（+57.02）-Gln-Ser-Val-Asp-Leu-Arg-His]IVVAETADSPA（Ile-Val-Val-Ala-Glu-Thr-Ala-Asp-Ser-Pro-Ala）.VLADLSIGVFLWIA（Val-Leu-Ala-Asp-Leu-Ser-Ile-Gly-Val-Phe-Leu-Trp-Ile-Ala）。部分肽段的存在可能与其清除自由基活性、抑制酪氨酸酶活性有关。上述实验研究表明,采用胰蛋白酶酶解法制备的天山雪莲细胞肽具有

关键词：天山雪莲细胞蛋白酶酶解活性肽清除自由基活性抑制酪氨酸酶活性

CO2/N2混合物在新型Cr3O@SO3-MIL-101（Cr）复合材料中的吸附分离性能研究

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CO2/N2混合物在新型Cr3O@SO3-MIL-101（Cr）复合材料中的吸附分离...

作者：郎朝中北大学

学位级别：硕士

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基于知识图谱的智库人才政策研究

基于知识图谱的智库人才政策研究

作者：程镇朝河北大学

学位级别：硕士

基于KGWO-BP神经网络的水射流壁面剪切力预测方法研究

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水动力学研究与进展A辑 2024年

作者：季瑞陈正寿浙江海洋大学船舶与海运学院

超高压水射流作用于船体壁面的剪切力是反映除锈作业效率的一项关键指标，也是评估喷嘴内部结构参数合理性的重要依据。优化喷嘴的水动力性能涉及多个参数，若仅依赖CFD方法会带来高昂的计算成本。该文以常见的直锥型喷嘴为研究对象，... 详细信息

超高压水射流作用于船体壁面的剪切力是反映除锈作业效率的一项关键指标，也是评估喷嘴内部结构参数合理性的重要依据。优化喷嘴的水动力性能涉及多个参数，若仅依赖CFD方法会带来高昂的计算成本。该文以常见的直锥型喷嘴为研究对象，综合利用CFD数值仿真和神经网络方法构建水射流性能预测模型，基于正交试验法则设定仿真算例，以靶面剪切力作为核心指标，获得喷嘴结构各参数对水射流性能影响的主次顺序，旨在为喷嘴的设计及结构参数的优化等提供参考依据。研究结果表明：通过正交试验分析得出的喷嘴四个内部参数中，出口段长度对水射流的性能影响最大；总结归纳可得出壁面剪切力较大时对应的内部最佳参数组合。该文提出的KGWO-BP模型预测精度高、泛化性能强，可以为直锥型喷嘴优化提供可靠的技术支持。

关键词：超高压水射流直锥型喷嘴结构参数灰狼算法 BP神经网络

MLR、FIB、GRACE评分与NSTE-ACS患者冠脉病变程度及预后的相关研究

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MLR、FIB、GRACE评分与NSTE-ACS患者冠脉病变程度及预后的相关研究

作者：罗朝赣南医科大学

学位级别：硕士

基于ROS2平台的室内移动机器人导航系统设计与研究

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基于ROS2平台的室内移动机器人导航系统设计与研究

作者：季怀明齐鲁工业大学

学位级别：硕士

自主导航是室内移动机器人的核心技术。在复杂的室内环境中,实现机器人的精确定位、地图构建和路径规划是实现自主导航的关键。然而,机器人在面临斜坡、狭窄通道和行人等复杂环境时,无法顺利导航通过。因此,本文以复杂室内环境下的移动... 详细信息

自主导航是室内移动机器人的核心技术。在复杂的室内环境中,实现机器人的精确定位、地图构建和路径规划是实现自主导航的关键。然而,机器人在面临斜坡、狭窄通道和行人等复杂环境时,无法顺利导航通过。因此,本文以复杂室内环境下的移动机器人自主导航为背景,提出了一种基于ROS2平台的导航框架来解决这些问题。首先,本文对移动机器人领域的SLAM算法和路径规划研究现状进行了分析。为提高机器人通信的实时性和安全性,本文引入ROS2机器人操作平台作为导航系统平台,使用Gazebo仿真软件和Rviz可视化软件进行导航算法性能仿真比较和验证。其次,针对在复杂室内环境中移动机器人面临的特征点混乱和定位困难问题,本文采用Fast＿LIO2算法构建点云地图,通过地面提取分割算法分离障碍物与地面,同时剔除特征少的点云以减少算力消耗,使用ICP算法进行点云帧间匹配,从而准确确定机器人在室内环境中的位姿。为解决Cartographer算法在机器人运动过程中建图漂移和畸变的问题,本文提出了基于多传感器融合的Cartographer算法。在路径规划方面,本文选择A*算法和TEB算法的组合作为路径规划算法。最后,使用基于ROS2平台的移动机器人对算法进行实际验证分析,在复杂室内环境下进行了自主导航实验,验证了自主导航系统框架的可行性。综上,本文系统介绍了在复杂室内环境中移动机器人的自主导航技术,提出了一种基于激光雷达和ROS2平台的导航框架来解决精确定位、地图构建和路径规划的问题。通过实验验证,证明了该框架的有效性和可行性,对于提高移动机器人在室内环境中的导航能力具有重要的研究和应用价值。

关键词：移动机器人自主导航机器人操作系统激光雷达路径规划