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作者：季天海南方医科大学

学位级别：硕士

一、研究背景和目的间变性大细胞淋巴瘤(Anaplastic large cell lymphoma,ALCL)是非霍奇金淋巴瘤中的一个特殊类型,是由一组形态、表型、细胞遗传学和临床病程各异的疾病组成,其细胞形态变化多样,特征为淋巴结副皮质区和窦状隙内有表达C... 详细信息

一、研究背景和目的间变性大细胞淋巴瘤(Anaplastic large cell lymphoma,ALCL)是非霍奇金淋巴瘤中的一个特殊类型,是由一组形态、表型、细胞遗传学和临床病程各异的疾病组成,其细胞形态变化多样,特征为淋巴结副皮质区和窦状隙内有表达CD30的间变性大淋巴细胞浸润。但由于该标志特异性不强,以往有许多病例被误诊为恶性组织细胞增生症、窦状隙大细胞淋巴瘤、退行性非典型组织细胞增生、转移癌、黑色素瘤或淋巴细胞消减型霍奇金病等,因此病理亟待寻找更特异的诊断标记物。间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)是ALCL病例中比较特异的标志。遗传学研究发现约60%-85%ALCL患者存在ALK融合蛋白,这是由于2号染色体的ALK基因与5号染色体的核磷酸蛋白(nucleophosmin,NPM)基因融合导致。值得注意的是,ALK基因在绝大多数非造血系统肿瘤和正常组织中缺乏表达,且有ALK融合基因的ALCL病例预后要明显好于阴性病例,二者的临床特征有很大差异,可将ALCL分为ALK阳性ALCL及ALK阴性的ALCL,由此可见检测ALK对于病理诊断意义重大。组织微阵列(tissue microassays)是由大量组织标本高密度排列而成的,具有高信息量,实验误差小,标本利用率高和成本低等优点;如同普通组织切片一样可以做苏木素和伊红(hematoxylin and eosin,HE)、特殊组织化学、免疫组化染色和原位杂交,应用于寻找肿瘤基因、检测生物试剂等方面。染色体荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)技术近年己广泛应用于医学生物领域,但在国内病理诊断中的应用非常少见,除了商品化探针价格昂贵、实验结果观察需要特殊设备外,对材料的要求比较高也是一个重要因素。日常病理工作中的材料多为福尔马林固定石蜡包埋组织,而国内目前成功地对福尔马林固定石蜡包埋组织微阵列(tissue microarray,TMA)进行FISH实验研究报道极少。本实验运用组织芯片技术和核芯片技术,观测30例ALCL病理学特征、免疫表型特征、T细胞β、γ受体基因重排情况;同时运用FISH及免疫组化方法对福尔马林固定石蜡包埋ALCL的组织芯片中ALK融合基因其产物进行对比检测,比较它们在临床诊断中的作用,并探讨ALK融合基因其产物与患者预后的关系。二、方法收集1997-2005年间30例ALCL的临床资料较齐全病例并进行随访。采用2001年WHO关于淋巴造血组织肿瘤分类进行组织学分型。使用组织微阵列技术,构建了包含30例ALCL及2例对照组织(每例3个点)共96点阵的石蜡组织芯片。免疫组化染色采用链霉素抗生素蛋白——过氧化物酶(SP)法,分别对室温保存的组织芯片做CD3、CD20、CD45RO、CD79a、CD30和ALK标记,以进一步明确免疫表型和ALK的表达等。应用PCR检测TCR-β、TCR-γ受体基因重排。采用双色FISH检测ALCL病例中的ALK融合基因。统计学方法上,使用SPSS软件(SPSS13.0 for Windows)进行One-wayANOVA检验,以P＜0.05作为差异显著性标准来检验之间的差异性。三、结果1、组织学:原发皮肤型ALCL2例,系统性ALCL28例。系统性ALCL分为普通型22例(22/28,78.6%),淋巴组织细胞型4例(4/28,14.3%),小细胞型2例(2/28,7.1%)。2、免疫组织化学:30例ALCL中,29例CD30阳性(29/30,96.7%),23例T细胞标记阳性(CD3和/或CD45R0阳性),另7例无T细胞标记为阴性(CD3和CD45R0均阴性)。2例原发皮肤型ALK表达为阴性;28例系统性ALCL中有20例(71.4%,20/28)ALK阳性,其中普通型16例(72.7%,16/22),淋巴组织细胞型3例(75%,3/4),小细胞型1例(50%,1/2);经统计学分析,ALK表达在各组织学亚型中无显著性差异(P＞0.05)。20例ALK阳性的病例中17例为T细胞标记阳性,余3例为T、B细胞标记均阴性。ALK表达定位在细胞浆与细胞核。3、基因重排检测:2例原发皮肤型ALCL中1例(1/2,50%)同时检测到T细胞β和γ受体基因重排;28例系统性ALCL中20例(20/28,71.4%)检测到T细胞γ受体基因重排,13例(13/28,46.4%)检测到T细胞β受体基因重排,11例(11/28,39.3%)同时检测到T细胞β和γ受体基因重排。4、FISH检测:在17例(17/28,60.7%)系统性ALCL

关键词：间变性大细胞淋巴瘤 ALK 免疫组化基因重排荧光原位杂交组织微阵列

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烧伤诱发IgA肾病14例

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中华烧伤杂志 2009年第2期25卷 148-149页

作者：李小毅王浩季天海冯智程君涛解放军第一八○医院烧伤整形科福建泉州362000 南京军区福州总医院病理科

IgA肾病（IgAN）为常见的原发性肾小球疾病之一，是具有同一免疫特征而病理及临床表现多样的症候群。机体烧伤后，休克、创面渗出感染、坏死组织感染等因素导致血液循环中高浓度免疫复合物沉积，诱发IgAN。近30年来虽有不少研究报道阐释... 详细信息

IgA肾病（IgAN）为常见的原发性肾小球疾病之一，是具有同一免疫特征而病理及临床表现多样的症候群。机体烧伤后，休克、创面渗出感染、坏死组织感染等因素导致血液循环中高浓度免疫复合物沉积，诱发IgAN。近30年来虽有不少研究报道阐释IgAN发病机制，但尚未明了。

关键词： IgA肾病烧伤后诱发原发性肾小球疾病免疫复合物沉积组织感染 IgAN 临床表现

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TBX3基因mRNA在乳腺癌中表达的检测及其意义

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南方医科大学学报 2009年第1期29卷 87-89页

作者：陈忠华吕光明季天海南京军区福州总医院福建福州350025

目的探讨TBX3基因表达在乳腺癌发病过程的作用。方法常规提取51例液氮保存的新鲜乳腺癌和对应的癌旁组织总RNA。将这些总RNA逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR的方法检测TBX3基因在这些组织中的表达情况,分析其与乳腺癌转移相关的临... 详细信息

目的探讨TBX3基因表达在乳腺癌发病过程的作用。方法常规提取51例液氮保存的新鲜乳腺癌和对应的癌旁组织总RNA。将这些总RNA逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR的方法检测TBX3基因在这些组织中的表达情况,分析其与乳腺癌转移相关的临床病理参数之间的关系。结果与癌旁乳腺组织相比,TBX3基因在乳腺癌组织中呈明显高表达。此外,在有转移的癌组织中,TBX3基因表达比非转移的癌组织明显增强。结论TBX3基因高表达提示其促进了乳腺癌的发病过程,并可能与乳腺癌转移发生相关。

关键词：乳腺癌 TBX3基因乳腺癌转移

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淋巴结外间变性大细胞淋巴瘤临床病理诊断要点的初步探讨

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中华肿瘤杂志 2000年第5期22卷 403-405页

作者：季天海姚丽青邓波荣黎洪展余英豪南京军区福州总医院病理科 350025 解放军第一六一医院广州医学高等专科学校

目的　探讨淋巴结外Ki 1阳性间变性大细胞淋巴瘤 (Ki 1positiveanaplasticlargecelllymphoma ,Ki 1ALCL)的临床病理诊断要点。方法　应用病理组织学和免疫组织化学等方法对 12例Ki 1ALCL的临床病理学特性进行观察 ,并设置阴性对照组。... 详细信息

目的　探讨淋巴结外Ki 1阳性间变性大细胞淋巴瘤 (Ki 1positiveanaplasticlargecelllymphoma ,Ki 1ALCL)的临床病理诊断要点。方法　应用病理组织学和免疫组织化学等方法对 12例Ki 1ALCL的临床病理学特性进行观察 ,并设置阴性对照组。结果　淋巴结外Ki 1ALCL病理组织学形态特异。免疫组织化学染色显示 ,12例淋巴结外ALCL均为Ki 1阳性 (CD30或BerH2 ) ,其中 5例为白细胞共同抗原单克隆抗体 (LCA)、上皮膜抗原单克隆抗体 (EMA)阳性 ,2例LCA阴性、EMA阳性 ,1例LCA阳性、EMA阴性 ,其余 4例LCA、EMA均为阴性。T、B细胞标记表明 ,7例为B细胞性 ,2例为T细胞性 ,另 3例为非T非B细胞性。结论　淋巴结外Ki 1阳性ALCL在病理组织学和免疫组织化学上有一定特异性 ,与其他肿瘤能够进行鉴别诊断。

关键词：淋巴瘤病理学诊断免疫组织化学 Ki-1 ALCL

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食管癌肉瘤一例

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中华消化杂志 2002年第11期22卷 659-659,I001页

作者：姚丽青季天海卢起炎彭洪浩南京军区福州总医院病理科福州350025

患者男，48岁。进行性吞咽困难20 d，加重1周入院，患者20 d前无诱因进食干饭时出现胸骨后梗阻感，并逐渐加重，近1周仅能进半流汁进食时胸痛，当地医院行食管钡餐示食管中段癌，入院后在我院行食管癌根治术，术中见食管中段后壁息肉状... 详细信息

患者男，48岁。进行性吞咽困难20 d，加重1周入院，患者20 d前无诱因进食干饭时出现胸骨后梗阻感，并逐渐加重，近1周仅能进半流汁进食时胸痛，当地医院行食管钡餐示食管中段癌，入院后在我院行食管癌根治术，术中见食管中段后壁息肉状肿的突起，表面糜烂，周转未见肿大淋巴结。病理检查：食管中段见一个肿物，带蒂，息内状，向食管腔内突起，肿物大小5.0cm×3.0cm×2.7cm，切面灰白灰红色，质地中等，蒂与黏膜面黏连，境界清楚，外周及表面糜烂出血。显微镜观察：镜下肿瘤由分化型鳞癌和编织状排列的梭形细胞（平滑肋肉瘤）组成，两种细胞交织分布（图1），鳞癌在瘤体基底及蒂部较丰富，梭形细胞主要集中于瘤体内，可见较多核分裂，食管黏膜层近蒂部可见癌浸润灶。

关键词：食管癌肉瘤诊断治疗病例报告

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上调表达的Tbx3可能是乳腺癌的恶性标志物之一

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南方医科大学学报 2009年第4期29卷 765-767页

作者：陈忠华吕光明季天海南京军区福州总医院福建福州350025

目的探讨Tbx3基因表达变异在乳腺癌发病过程的作用。方法常规提取乳腺癌细胞系及正常乳腺组织中总RNA。在总RNA被逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR比较Tbx3基因mRNA在乳腺癌细胞系与正常乳腺组织中表达差异;随后利用免疫组化的方法验... 详细信息

目的探讨Tbx3基因表达变异在乳腺癌发病过程的作用。方法常规提取乳腺癌细胞系及正常乳腺组织中总RNA。在总RNA被逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR比较Tbx3基因mRNA在乳腺癌细胞系与正常乳腺组织中表达差异;随后利用免疫组化的方法验证Tbx3蛋白在乳腺癌与正常乳腺组织之间的表达差异。结果实时荧光定量PCR检测发现,与正常乳腺组织相比,Tbx3基因明显在乳腺癌细胞中高表达。免疫组化检测了60例乳腺癌及34例正常乳腺组织后发现,Tbx3蛋白在乳腺癌组织细胞核内呈高表达,这与mRNA表达特征相一致。结论Tbx3基因mRNA和蛋白在乳腺癌组织和细胞中明显高表达,其可能是乳腺癌发病过程中的恶性标志物之一。

关键词：乳腺癌 Tbx3 实时荧光定量PCR 免疫组化

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半侧骨盆原发性慢性骨髓炎一例

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中华放射学杂志 2001年第10期35卷 793-794页

作者：姚丽青季天海卢起炎周忠聂玫南京军区福州总医院病理科 350025 南京军区福州总医院骨科 350025 南京军区福州总医院放射科 350025

原发性慢性骨髓炎发生于骨盆者罕见,我院遇1例,现报道如下.

关键词：原发性慢性骨髓炎诊断 X线诊断骨盆治疗病例报告

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肠系膜淋巴管肌瘤病/淋巴管肌瘤1例及文献复习

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临床与实验病理学杂志 2011年第10期27卷 1136-1138页

作者：杨文圣胡君程林蓁戚沛霖季天海中国人民解放军第174医院病理科厦门361003

目的探讨淋巴管肌瘤病/淋巴管肌瘤(lymphangiomy-omatosis/lymphangiomyoma,LAM)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法对1例罕见的肺外结肠系膜LAM进行临床病理分析及免疫组化研究,并复习相关文献。结果镜下肿瘤组织由... 详细信息

目的探讨淋巴管肌瘤病/淋巴管肌瘤(lymphangiomy-omatosis/lymphangiomyoma,LAM)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法对1例罕见的肺外结肠系膜LAM进行临床病理分析及免疫组化研究,并复习相关文献。结果镜下肿瘤组织由许多大小不等的网状或窦样腔隙组成,并向周围脂肪组织穿插,腔隙壁由圆形、梭形或上皮样细胞围绕排列,细胞无异形性及核分裂,并可见淋巴细胞灶性聚集,可见淋巴滤泡。免疫组化染色示肿瘤细胞HHF35、α-SMA、desmin明显阳性,腔隙壁衬里及衬附的内皮细胞CD34与D2-40标记阳性或呈线形表达,而HMB-45、Melan-A阳性主要定位于上皮样细胞。结论 LAM属于血管周上皮样细胞肿瘤(perivascular epithelioid cell tumors,PE-Comas)家族,是一种主要发生于育龄期或绝经前期女性的可累及多个系统的罕见病患,而发生于成年男性的肺外LAM尤其罕见。对LAM分子发病机制不断的深入研究将会对其治疗及预后起到至关重要的作用。

关键词：肠系膜肿瘤淋巴管肌瘤病淋巴管肌瘤

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咽喉部恶性黑色素瘤多药耐药基因及其基因编码产物与预后关系的研究

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临床耳鼻咽喉科杂志 2002年第9期16卷 459-461,I001页

作者：陈曦季天海姚丽青杨劲松邓军张哉根福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科福州350025 南京军区福州总医院病理科第三军医大学附属西南医院病理研究所第三军医大学附属新桥医院病理科

　目的 :研究咽喉部恶性黑色素瘤多药耐药 (MDR)基因胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)、DNA拓朴酶Ⅱ (TopoⅡ )和MDR基因编码产物P 糖蛋白 (Pgp)的表达及其与预后的关系。方法 :应用链霉素亲生物素过氧化物酶标S P法检测 2 8例咽... 详细信息

　目的 :研究咽喉部恶性黑色素瘤多药耐药 (MDR)基因胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)、DNA拓朴酶Ⅱ (TopoⅡ )和MDR基因编码产物P 糖蛋白 (Pgp)的表达及其与预后的关系。方法 :应用链霉素亲生物素过氧化物酶标S P法检测 2 8例咽喉部恶性黑色素瘤患者Pgp、GST π和TopoⅡ的表达 ,分析MDR基因及MDR基因编码产物阳性表达率与肿瘤主要临床病理特征及预后的关系。结果 :2 8例标本中Pgp、GST π和TopoⅡ的表达率分别为 35 .7%、5 7.1%和 4 6 .4 % ,相互间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。Pgp、GST π和TopoⅡ的表达与性别、年龄、肿瘤大小及Clark’s分级、Breslow’s分级无明显相关 (P >0 .0 5 ) ,与AJC分级及预后显著相关 (P <0 .0 5 )。结论 :Pgp、GST π和TopoⅡ等多因素联合作用是咽喉部恶性黑色素瘤多药耐药的主要作用机制 ,与预后相关。

关键词：咽喉部恶性黑色素瘤咽喉肿瘤恶性黑色素瘤多药耐药基因基因表达预后

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咽喉部恶性黑色素瘤微血管密度与预后关系的探讨

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中华耳鼻咽喉科杂志 2001年第1期36卷 44-46,T007页

作者：陈曦季天海杨劲松张哉根姚丽青邓军福州福建医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科福州 350005 南京军区福州总医院病理科第三军医大学附属新桥医院病理科第三军医大学附属西南医院病理科

目的　探讨咽喉部恶性黑色素瘤中微血管密度与临床病理及患者预后的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测 2 8例咽喉部恶性黑色素瘤中血管内皮细胞特异性标记物Ⅷ因子相关抗原 (factorFⅧ relatedantigen ,FⅧ RAg)和CD31的表达 ,并... 详细信息

目的　探讨咽喉部恶性黑色素瘤中微血管密度与临床病理及患者预后的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测 2 8例咽喉部恶性黑色素瘤中血管内皮细胞特异性标记物Ⅷ因子相关抗原 (factorFⅧ relatedantigen ,FⅧ RAg)和CD31的表达 ,并通过形态学计量法计数肿瘤内微血管密度。结果　肿瘤微血管密度与恶性黑色素瘤的体积、Clark分级和Breslow分级无关 ,而与美国癌症联合会分级标准及增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)标记指数有关。Kaplan Meier分析显示微血管计数 36 .5个 (× 2 0 0 )预后较差。结论　咽喉部恶性黑色素瘤微血管密度与生存率相关。

关键词：咽部喉部黑色素瘤免疫组织化学预后微血管密度

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