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猴源细小病毒的分离鉴定

猴源细小病毒的分离鉴定

中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会、中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会

作者：杨松涛王淑君冯浩张仁舟曾林夏志平邹啸环王承宇连海孙兆增孟轲音王泽夏咸柱军事医学科学院军事兽医研究所军事医学科学院实验动物中心

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动... 详细信息

2008年我国某实验动物养殖基地发生猴传染性腹泻并引起死亡,临床症状类似犬猫细小病毒性肠炎。采集发病猴肠内容物,通过细胞培养进行病毒分离。采用血凝试验、PCR检测、免疫组织化学检测、电镜观察、直接免疫荧光检测、理化学鉴定、动物感染实验等方法对分离病毒进行了系统鉴定。结果F81细胞盲传三代后发生细小病毒样细胞病变,此分离病毒对猪红细胞的血凝效价为1:512;用845bp细小病毒通用引物进行PCR检测结果阳性;免疫组化检测肠绒毛上皮细胞呈细小病毒阳性反应;电镜负染和超薄切片观察见典型的细小病毒样粒子;直接免疫荧光检测结果阳性。用该病毒实验感染5只家猫,7日后相继发病死亡。序列分析结果表明,10个关键氨基酸位点中有8个与FPV相同,有2个与CPV相同。认为该病毒分离株为FPV变异株。该病毒是如何跨种传播给猴并发生致病性突变的尚需进一步研究。

关键词：细小病毒FPV猴分离

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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正压防护头罩消毒效果评价方法研究

医疗卫生装备 2023年第9期44卷 33-37页

作者：孟轲音张珊珊骆万博卜昭阳姚腾万忠海杜鹏刘军军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所长春130118

目的:通过1%卫可消毒剂对正压防护头罩上犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)的消毒效果试验,确立正压防护头罩的消毒效果评价方法。方法:依照《消毒技术规范》(2002版),结合1%卫可消毒剂特性选定中和剂,通过测定不同样品接种犬肾... 详细信息

目的:通过1%卫可消毒剂对正压防护头罩上犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)的消毒效果试验,确立正压防护头罩的消毒效果评价方法。方法:依照《消毒技术规范》(2002版),结合1%卫可消毒剂特性选定中和剂,通过测定不同样品接种犬肾细胞后的半数组织培养感染剂量(TCID50)验证中和剂的有效性;在同一环境下,通过测定CIV在正压防护头罩上作用不同时间的TCID50验证病毒载体及环境对病毒活性的影响;通过建立病毒载体模型及病毒浸染与采样方法,结合病毒回收率测定结果(实时定量聚合酶链式反应法和酶联免疫吸附测定法)及病毒滴度测定结果[TCID50及鸡胚半数感染量(EID50)]确定最佳消毒时间。结果:0.1%卵磷脂+2%吐温80+0.5%硫代硫酸钠磷酸缓冲盐溶液可作为1%卫可消毒剂的中和剂;在不同时间节点,实验载体及环境均对CIV活性无影响;接种犬肾细胞样本及鸡胚样本平均回收率分别为96.12%和95.98%,1%卫可消毒剂灭活正压防护头罩上CIV的最佳作用时间为4 min。结论:该研究提出的正压防护头罩消毒效果评价方法有效,可为正压防护头罩确立最佳消毒条件。

关键词：正压防护头罩消毒效果评价犬流感病毒卫可消毒剂

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新型冠状病毒猕猴感染实验生物安全管理

生物技术通讯 2020年第3期31卷 375-378页

作者：孟轲音万忠海李吉平卜昭阳缪发明姚腾高玉伟刘军军事医学研究院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室吉林长春130122

目前,全球爆发新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染人类事件,疫苗研制、防治药物筛选及感染机制研究迫在眉睫,而相关研究又离不开实验动物。本文以在动物生物安全三级实验室(animal bio-safety level 3 laboratory,ABSL-3)开展的SARS-CoV-2感... 详细信息

目前,全球爆发新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染人类事件,疫苗研制、防治药物筛选及感染机制研究迫在眉睫,而相关研究又离不开实验动物。本文以在动物生物安全三级实验室(animal bio-safety level 3 laboratory,ABSL-3)开展的SARS-CoV-2感染猕猴实验为例,结合工作实际,对生物安全管理工作中几个重要环节进行探讨,为正在或即将开展此项工作的同仁们提供参考。

关键词： SARS-CoV-2 猕猴实验动物生物安全三级实验室生物安全管理

犬细小病毒四川流行株分离鉴定及其遗传进化分析

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现代生物医学进展 2009年第10期9卷 1888-1890,1894页

作者：王淑君杨松涛陈创夫乔军马良邹啸环耿长国孟轲音冯昊夏咸柱石河子大学动科院新疆石河子832003 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062 中牧实业股份有限公司北京116001 四川农业大学四川雅安625014 吉林大学吉林长春130062

从犬粪便中分离到1株细小病毒,在F81细胞出现明显的CPV病变,电镜观察可见细小病毒样粒子,进一步理化性质鉴定该病毒具有细小病毒的特征,表明所分离病毒为CPV,命名为CPV-04-08-CN-6。根据特异性引物,采用PCR技术扩增出VP2全长基因,将PCR... 详细信息

从犬粪便中分离到1株细小病毒,在F81细胞出现明显的CPV病变,电镜观察可见细小病毒样粒子,进一步理化性质鉴定该病毒具有细小病毒的特征,表明所分离病毒为CPV,命名为CPV-04-08-CN-6。根据特异性引物,采用PCR技术扩增出VP2全长基因,将PCR产物克隆入pMDl8-T载体,进行测序分析。结果,CPV04-08-CN-6VP2基因全长1755bp,编码584个氨基酸,与CPV参照株的VP2基因核苷酸同源性为99.69%,12个核苷酸发生错义突变,导致4个氨基酸发生变异。VP2基因的系统发生分析表明CPV-04/08/CN-6在细小病毒分类上属于CPV-2a型。

关键词： CPV VP2基因序列分析

非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗株的构建和免疫保护特性

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中国兽医学报 2019年第8期39卷 1421-1427页

作者：张艳艳陈腾张静远齐宇缪发明薄宗义王立冬郭晓宇周鑫韬杨金梅王晓虎高玉龙汪春雨鲍晨沂米立娟孙雪霏冯娜杨金金王承宇万忠海李记平孟轲音田多李楠王述超王颖张菲张锦霞蒋依倩刘晔张守峰张中洋钱莺娟朱鸿飞高玉伟陈鸿军李金祥扈荣良军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所吉林长春130122 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 吉林和元生物工程股份有限公司吉林松原138000 广东省农业科学院动物卫生研究所广东广州510640 南京农业大学动物医学学院江苏南京210095 中国农业科学院北京100081

以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18... 详细信息

以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18ΔMGF/ΔCD2v)对猪安全,接种猪能够100%抵抗亲本强毒株SY18株的攻击,对照猪全部死亡;说明该毒株可作为非洲猪瘟疫苗候选株。

关键词：非洲猪瘟病毒基因缺失 MGF基因 CD2v基因疫苗候选株安全性免疫保护