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作者：孟红委上海交通大学

学位级别：硕士

背景与目的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是临床常见的重要致病菌,可以引起各种化脓性感染和毒素性疾病。随着抗生素的广泛使用,耐药菌株大量出现,如青霉素耐药金黄色葡萄球菌和甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-r... 详细信息

背景与目的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是临床常见的重要致病菌,可以引起各种化脓性感染和毒素性疾病。随着抗生素的广泛使用,耐药菌株大量出现,如青霉素耐药金黄色葡萄球菌和甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA),甚至出现了万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus,VRSA)。SA耐药速度快于新抗生素研发速度,临床上可用于治疗SA尤其是耐药菌株的药物越来越少,亟待挖掘新型有效的抗菌分子。人体共生菌群在帮助宿主抵御外敌和维持正常生理功能方面发挥重要作用。已有研究表明人在健康状态时的共生菌群明显比疾病状态时存在更丰富的多样性,同时人体共生菌可以通过合成抗菌物质来抵抗病原体。人体皮肤和上呼吸道是抵御外来病原微生物入侵的第一道防线,已有研究报道其共生菌群的多样性及产生的抵抗SA的分子。在已有的研究中,皮肤和上呼吸道的共生菌群的多样性及产生的抗菌分子是具有地区特异性的,而且SA作为筛选抗菌分子的测试菌株大多局限于实验标准菌株及个别临床菌株的研究。本研究旨在探究中国上海地区健康人群皮肤和上呼吸道(鼻腔)的共生菌群多样性,同时进一步筛选出对不同国家、不同感染类型以及不同物种来源的致病性MRSA均有明显抗菌作用的人体共生菌,并明确其抗菌基因和初步分离纯化抗菌分子,为进一步的抗菌作用机制研究和以抗菌分子为基础的抗菌药物研发奠定基础。第一部分健康人皮肤和鼻腔可培养共生菌多样性分析目的:探究中国上海地区健康人群皮肤和鼻腔的可培养共生菌群的种属多样性。方法:2017年6月于上海健康医学院采集210名182岁健康人群的皮肤和鼻腔拭子,用血平板培养;用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行种属鉴定;采用SPSS统计软件用卡方检验做统计学分析。结果:210名健康人的皮肤和鼻腔拭子共分离出2438株可培养共生菌,在皮肤和鼻腔分别有941株和1497株。所有可培养共生菌共鉴定出25个属,其中葡萄球菌属的菌株占81.34%,在皮肤和鼻腔的比例分别为80.23%和82.03%。所有的葡萄球菌鉴定出了11个菌种,以凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)为主,占93.95%,同时在皮肤和鼻腔葡萄球菌中分别占99.21%和90.72%。另外,皮肤和鼻腔可培养共生菌的种属多样性不同并且存在男女差异。结论:中国上海地区健康人皮肤和鼻腔的可培养共生菌存在丰富的种属多样性,且以CoNS为主。第二部分CoNS对病原性MRSA的抑菌作用目的:用不同国家、不同感染类型以及不同物种来源的致病性MRSA筛选具有抗菌作用的健康人的CoNS菌株,并研究主要菌株的抗菌作用。方法:用抑菌作用筛选实验对选取的CoNS筛选出具有抑制MRSA作用的菌株。选取一株具有明显抗菌作用的CoNS菌株,用浓缩上清抗菌实验明确抗菌分子是否为可分泌型;用两菌混合竞争生长实验确定其分泌抗菌分子的时相性;用其培养上清培养代表性的MRSA进一步明确抗菌分子的作用;进行细菌基因组完成图测序及生物信息学分析,并预测合成抗菌分子的基因(簇)和进行基因失活验证;用转座子随机插入突变文库进一步筛选与抗菌分子相关的基因;用化学方法初步分离纯化培养上清中的抗菌分子。结果:在选取的588株CoNS中共筛选出19株对MRSA有抗菌作用的CoNS,有6株能抑制所有来源的MRSA,其中作用最好的是表皮葡萄球菌N173-2。表皮葡萄球菌N173-2的浓缩培养上清具有很好的抗菌作用,表明抗菌分子是可分泌型分子,该分子在细菌指数生长中期即开始分泌;表皮葡萄球菌N173-2的培养上清可以很好的抑制中国的医院获得性MRSA(HA-MRSA)和社区获得性MRSA(CA-MRSA)以及北美的CA-MRSA生长;通过完成图测序得到染色体和2个质粒的完整序列,进化分析发现表皮葡萄球菌N173-2与NCBI中收录的9株完成图测序的表皮葡萄球菌距离较远,进一步预测分析和实验验证发现合成抗菌分子的基因簇为聚酮合成酶/非核糖体多肽合成酶(PKSs/NRPSs)杂合的基因簇,位于质粒2上;通过转座子随机插入突变文库筛选出表皮葡萄球菌N173-2染色体上有3个基因与抗菌分子有关,通过进一步比对分析,其中有2个基因是与磷酸转移酶系统(PTS)有关,还有1个基因是与铜离子转运有关;对表皮葡萄球菌N173-2的培养上清进行萃取得到了初提物以及用30%甲醇分离初提物得到了最有效的活性成分。结论:表皮葡萄球菌N173-2对不同国家、不同感染类型以及不同物种来源的MRSA均有非常明显的抗菌作用,其抗菌分子属于可分泌型,合成抗菌分子PKSs/NRPSs基因簇位于质粒2上,染色体上

关键词：可培养共生菌种属多样性凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS) 表皮葡萄球菌 MRSA 抑菌作用抗菌分子 PKSs NRPSs

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肺癌患者下呼吸道病原菌分布特征与耐药性分析

肺癌患者下呼吸道病原菌分布特征与耐药性分析

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2021年中国肿瘤标志物学术大会暨第十五届肿瘤标志物青年科学家论坛

作者：孟红委娄加陶上海市胸科医院

目的:了解肺癌患者下呼吸道病原菌分布及耐药性,以指导临床经验治疗及合理使用抗菌药物。方法收集2015年至2019年上海交通大学附属胸科医院肺癌患者的痰培养资料,对病原菌进行鉴定和体外药物敏感性实验,并分析其分布特点和耐药情况。结... 详细信息

目的:了解肺癌患者下呼吸道病原菌分布及耐药性,以指导临床经验治疗及合理使用抗菌药物。方法收集2015年至2019年上海交通大学附属胸科医院肺癌患者的痰培养资料,对病原菌进行鉴定和体外药物敏感性实验,并分析其分布特点和耐药情况。结果:2015-2019年共收集4753份痰培养,有672份痰培养检出病原菌720株,检出率为14.1%,其中革兰阴性菌,革兰阳性菌,真菌分别占71.5%,6.9%,21.5%。在所有病原菌中排名前5的分别是肺炎克雷伯菌(21.0%),铜绿假单胞菌(16.8%),白色念珠菌(16.5%),鲍曼不动杆菌(11.0%)和金黄色葡萄球菌(5.0%)。肺炎克雷伯菌,铜绿假单胞菌,鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦,左旋氧氟沙星,环丙沙星,头孢他啶,妥布霉素,庆大霉素均较为敏感。白色念珠菌对常用的抗真菌药物两性霉素B,氟康唑,伊曲康唑,伏立康唑,5-氟胞嘧啶均敏感。未发现对替加环素,万古霉素,利奈唑胺,奎奴普丁/达福普汀耐药的金黄色葡萄球菌。结论:肺癌患者下呼吸道病原菌种类复杂,以革兰阴性菌为主。临床对于下呼吸道感染的肺癌患者可以根据耐药监测结果进行经验治疗,并根据具体药物敏感性试验结果进行针对性治疗。

关键词：肺癌下呼吸道病原菌

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肺癌患者下呼吸道病原菌分布特征与耐药性分析

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国际检验医学杂志 2021年第17期42卷 2123-2127,2131页

作者：孟红委娄加陶上海市胸科医院/上海交通大学附属胸科医院检验科上海200030

目的了解肺癌患者下呼吸道病原菌分布及耐药性,以指导临床经验治疗及合理使用抗菌药物。方法将2015-2019年于该院治疗且行痰培养检查的共4753例肺癌患者纳入研究,对从患者痰标本分离的病原菌进行鉴定和体外药敏试验,分析病原菌的分布特... 详细信息

目的了解肺癌患者下呼吸道病原菌分布及耐药性,以指导临床经验治疗及合理使用抗菌药物。方法将2015-2019年于该院治疗且行痰培养检查的共4753例肺癌患者纳入研究,对从患者痰标本分离的病原菌进行鉴定和体外药敏试验,分析病原菌的分布特点和耐药情况。结果共672例患者的痰培养标本检出病原菌(共720株),检出率为14.1%(672/4753)。其中革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌分别占71.5%、6.9%、21.5%。在所有病原菌中所占比例排名前5的依次为肺炎克雷伯菌(21.0%)、铜绿假单胞菌(16.8%)、白色念珠菌(16.5%)、鲍曼不动杆菌(11.0%)、金黄色葡萄球菌(5.0%)。肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、左旋氧氟沙星、环丙沙星、头孢他啶、妥布霉素、庆大霉素均较为敏感。白色念珠菌对常用的抗真菌药物均敏感,如两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶。未发现对替加环素、万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀耐药的金黄色葡萄球菌。结论肺癌患者下呼吸道病原菌种类复杂,以革兰阴性菌为主。临床对于下呼吸道感染的肺癌患者可以根据耐药监测结果进行经验治疗,并根据具体的药物敏感性试验结果进行针对性治疗。

关键词：肺癌下呼吸道病原菌耐药性

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血清外泌体lncRNA用于早期肺癌诊断的临床性能评价

血清外泌体lncRNA用于早期肺癌诊断的临床性能评价

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2022CCTB中国肿瘤标志物学术大会暨中国整合肿瘤学大会暨第十六届肿瘤标志物青年科学家论坛暨中国肿瘤标志物产业创新大会

作者：于文俊郑沁杨孟红委上海市胸科医院

研究目的:探索用于早期肺腺癌诊断的血清外泌体lncRNA,评价血清外泌体lncRNA的临床诊断性能。材料与方法:我们前期利用基因芯片技术筛选5例正常人、5例早期肺腺癌患者血清外泌体中差异表达的lncRNAs。进一步利用RT-qPCR技术在40例肺部... 详细信息

研究目的:探索用于早期肺腺癌诊断的血清外泌体lncRNA,评价血清外泌体lncRNA的临床诊断性能。材料与方法:我们前期利用基因芯片技术筛选5例正常人、5例早期肺腺癌患者血清外泌体中差异表达的lncRNAs。进一步利用RT-qPCR技术在40例肺部良性疾病、40例早期肺腺癌患者中验证差异表达的前20条血清外泌体lncRNAs,绘制ROC曲线评价血清外泌体lncRNAs、传统肿瘤标志物(CEA、CYFRA21-1)的临床诊断性能,包括灵敏度和特异性。结果:利用基因芯片技术筛选出差异表达的血清外泌体lncRNAs共994条,其中815条表达上调,179条表达下调。利用RT-qPCR技术验证差异表达的前20条血清外泌体lncRNAs,其中lncRNA SLC6A12-9在早期肺腺癌患者血清中表达量升高,与肺部良性疾病患者的血清表达量有显著差异。利用ROC曲线评价lncRNA SLC6A12-9、CEA、CYFRA21-1在早期肺腺癌的诊断灵敏度和特异性,发现三个标志物联合检测的灵敏度、特异性最高,分别是95%、77.5%。结论:血清外泌体lncRNA SLC6A12-9可用于肺癌的早期诊断,与CEA和CYFRA21-1联合检测可提高临床诊断性能。

关键词：外泌体 lncRNA 早期诊断肺腺癌

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18至22岁健康人皮肤和鼻腔可培养共生菌多样性及耐药性分析

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中华检验医学杂志 2018年第3期41卷 196-202页

作者：孟红委刘瑶刘俊兰吕慧颖谢乙慧刘倩李敏上海交通大学医学院附属仁济医院检验科 200127

目的研究18至22岁健康人群鼻腔和皮肤可培养共生菌多样性及主要种属耐药性，为深入了解人体共生菌种属多样性的变化与疾病发生发展关系提供证据。方法2017年6至8月于上海交通大学医学院附属仁济医院体检中心采集上海地区18至22岁210名... 详细信息

目的研究18至22岁健康人群鼻腔和皮肤可培养共生菌多样性及主要种属耐药性，为深入了解人体共生菌种属多样性的变化与疾病发生发展关系提供证据。方法2017年6至8月于上海交通大学医学院附属仁济医院体检中心采集上海地区18至22岁210名体检健康人群的鼻腔和皮肤拭子，接种血平板；基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI－TOF－MS）进行细菌鉴定；纸片扩散法测定抗菌药物敏感性；脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析主要耐药菌遗传多样性；聚合酶链反应（PCR）方法确定耐药基因分型。使用卡方检验进行统计学分析。结果健康人鼻腔和皮肤拭子分别鉴定出1497株和941株细菌，共鉴定出25个属，以葡萄球菌属为主，分别占鼻腔和皮肤可培养共生菌的82.03%和80.23%，而这些葡萄球菌共鉴定出11个菌种，又以凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）为主，分别占鼻腔和皮肤葡萄球菌的90.72%和99.21%。鼻腔和皮肤的可培养共生菌种属多样性不同且存在男女差异。鼻腔和皮肤的631株葡萄球菌（同一样本去除重复菌种）对多数抗生素敏感，仅对青霉素（76.55%）、红霉素（41.20%）、克林霉素（10.77%）、甲氧苄啶/磺胺异唑（10.14%）有一定耐药率。耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）共分离出45株，以耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）（33株）为主，与甲氧西林敏感性葡萄球菌（MSS）相比，MRS的红霉素（χ2＝10.80，P＝0.001）、青霉素（χ2＝12.17，P〈0.001）、左氧氟沙星（χ2＝20.24，P〈0.001）和甲氧苄啶/磺胺唑（χ2＝58.57，P〈0.001）的耐药率显著增加。631株葡萄球菌中共有多重耐药菌（MDR）266株（42.16%），而MDR在MRS的比例为100.00%（45/45），显著高于MSS的37.71%（221/586）（χ2＝66.49，P〈0.001）。对33株皮肤和鼻腔MRSE进行PFGE聚类和进化分析，共分成23个簇群，存在遗传多样性。MRSE存在SCCmecⅣ、Ⅱ和Ⅴ三个型别，其中以Ⅳ为主（66.67%）。结论18至22岁健康人鼻腔和皮肤可培养共生菌存在较丰富的种属多样性和遗传多样性，且以葡萄球菌属（尤其是CoNS）为主，这些葡萄球菌虽然对多数抗生素敏感，但对红霉素、青霉素、克林霉素、甲氧苄啶/磺胺异唑有一定耐药率，另外还存在较高比例的MDR，可能成为抗生素耐药的储存库。（中华检验医学杂志，2018, 41：196－202）

关键词：共生菌种属多样性葡萄球菌耐药脉冲场凝胶电泳

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虚开增值税专用发票罪与逃税罪的界限

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政法论丛 2025年第1期 156-170页

作者：孟红艳天津大学法学院

厘清虚开增值税专用发票罪和逃税罪的不同构造，有助于实现对涉税犯罪的准确定性。虚开增值税专用发票罪是特殊诈骗罪，其构成要件包含了骗取国家税款行为和造成国家税款损失的要素；逃税罪不符合诈骗罪客观构成要件的定型性，不是特殊... 详细信息

厘清虚开增值税专用发票罪和逃税罪的不同构造，有助于实现对涉税犯罪的准确定性。虚开增值税专用发票罪是特殊诈骗罪，其构成要件包含了骗取国家税款行为和造成国家税款损失的要素；逃税罪不符合诈骗罪客观构成要件的定型性，不是特殊诈骗罪，这是其与虚开增值税专用发票罪法定刑悬殊的关键。对于实践中争议极大的“富余票”虚开、“有货代开”“变票虚开”、少开发票等情形，都应当认为行为人不是通过虚开骗抵的欺骗方式造成税款损失，而是为了在应纳税义务范围内逃避缴纳税款，不构成虚开增值税专用发票罪，但可能成立逃税罪。如此界定犯罪界限，能够在个案处理中严格贯彻执行罪刑法定原则，保持刑法谦抑性。对于不构成虚开增值税专用发票罪的逃税行为，不能转而认定其构成虚开发票罪。

关键词：虚开增值税专用发票罪逃税罪特殊诈骗刑法谦抑性

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高渗应激环境下伤寒沙门菌t4606基因功能研究

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检验医学与临床 2014年第18期11卷 2505-2507页

作者：缪敏慧孟红委倪红元戴如顺王敏杜鸿苏州大学附属第二医院检验科江苏苏州215004

目的研究t4606基因在伤寒沙门菌适应高渗应激环境时的生物学作用,为临床治疗和预防伤寒沙门菌感染提供可能的靶向基因。方法采用原核生物基因同源重组技术制备伤寒沙门菌t4606基因缺陷株及t4606基因缺陷回补株;以生长时间为横坐标,培养... 详细信息

目的研究t4606基因在伤寒沙门菌适应高渗应激环境时的生物学作用,为临床治疗和预防伤寒沙门菌感染提供可能的靶向基因。方法采用原核生物基因同源重组技术制备伤寒沙门菌t4606基因缺陷株及t4606基因缺陷回补株;以生长时间为横坐标,培养液600nm处得吸光度值为纵坐标,绘制生长曲线,比较t4606基因缺陷株、回补株及野生株在高渗应激(300mmol/L NaCl)环境下的生长能力;统计学分析不同菌株间的吸光度值差异。结果成功制备伤寒沙门菌t4606基因缺陷株和相应的回补株;生长曲线分析显示在高渗应激环境下,t4606基因缺陷株的生存能力明显弱于野生株。结论 t4606基因在伤寒沙门菌适应高渗应激环境方面发挥着重要的作用,t4606基因有可能作为临床治疗和预防伤寒沙门菌感染的靶向基因。

关键词：伤寒沙门菌 t4606基因生长曲线靶基因

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中国蓝藻新记录种--纤细双色藻(Cyanobium gracile)

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湖泊科学 2025年第1期37卷 229-237页

作者：刘洋委雅菲李效宇张榜军河南省水生态毒理与健康防护国际联合实验室新乡453007 河南师范大学生命科学学院新乡453007 河南省丹江口水库水域生态系统野外科学观测研究站南阳474450

随着基因测序技术的发展,环境中一些微藻不断被发现,超微蓝藻便是其中之一,但关于超微蓝藻的多相分类学研究在我国报道较少。本研究首次在某自来水厂分离纯化获得了一株超微蓝藻藻株Cyanobium gracile HNU001,并对其形态学、超微结构和... 详细信息

随着基因测序技术的发展,环境中一些微藻不断被发现,超微蓝藻便是其中之一,但关于超微蓝藻的多相分类学研究在我国报道较少。本研究首次在某自来水厂分离纯化获得了一株超微蓝藻藻株Cyanobium gracile HNU001,并对其形态学、超微结构和分子特征进行了研究。形态学研究发现,其藻细胞呈椭圆形或椭球形,在分裂过程中平行于短的细胞轴对称存在;超微结构显示了细胞二分裂繁殖以及类囊体膜平行于细胞膜排列;16S rRNA基因序列显示,该藻株与双色藻属Cyanobium的序列相似性大于99.9%,分子系统树聚为一束;该藻株与Cyanobium gracile PCC 6307的D1-D1′、Box-B螺旋结构一致。综合以上结果,将其命名为纤细双色藻(Cyanobium gracile),是在我国的首次报道。

关键词：蓝藻超微蓝藻双色藻分类分子系统

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不同蛋白酶水解对茶树菇挥发性风味成分的影响

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食品工业科技 2025年

作者：孟红艳杨帆甄少波苏开刘野毕爽北京工商大学食品与健康学院中国劳动关系学院酒店管理学院

研究旨在探究不同蛋白酶处理茶树菇对其香气活性化合物的影响，采用风味蛋白酶、protamex复合蛋白酶、中性蛋白酶以及胰蛋白酶对茶树菇进行了单酶水解处理，通过感官评价对不同酶解液的风味轮廓做了描述，并使用电子鼻和固相微萃取-全... 详细信息

研究旨在探究不同蛋白酶处理茶树菇对其香气活性化合物的影响，采用风味蛋白酶、protamex复合蛋白酶、中性蛋白酶以及胰蛋白酶对茶树菇进行了单酶水解处理，通过感官评价对不同酶解液的风味轮廓做了描述，并使用电子鼻和固相微萃取-全二维气相色谱-嗅闻-飞行时间质谱（SPME-GC×GC-O-TOF/MS）技术对不同蛋白酶酶解液中的香气活性化合物进行研究。结果表明，不同蛋白酶的酶解处理显著影响了茶树菇的风味轮廓以及香气活性化合物的组成。感官评价显示，所有经酶解处理后的样品中，蘑菇味、刺激味、麦芽味和黄油味的感知程度均呈下降趋势，而水果味、清香和坚果味则呈上升趋势。对照组和四种酶解液中分别检出50、57、52、52和48种香气活性化合物，主要有醇类、酯类、醛类、酮类和吡嗪类等，这些香气活性化合物的协同作用共同构成了茶树菇及其酶解液的特征气味，感官评价结果进一步验证了香气活性化合物的变化趋势，即酶解后酮类、吡嗪类和含氮、含氧、含硫化合物的增加，刺激性气味的醛类物质含量的减少是酶解液风味优于对照组的主要原因，其中风味蛋白酶酶解液的风味最佳。酶解处理能够保持并改善茶树菇风味，为优化茶树菇的风味特性提供了科学依据，也为食品工业中茶树菇的应用提供了新的理论支持。

关键词：茶树菇酶解固相微萃取电子鼻香气活性化合物

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山西碑刻语言文化传承与影响

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汉字文化 2025年第3期 4-6页

作者：孟红淼山西大同大学外国语学院

文章探讨了山西碑刻语言文化传承与影响，重点分析了云冈石窟在这一背景下的重要性。本文通过分析山西碑刻艺术特征，揭示其在书法和雕刻技艺上的独特之处。接着，深入探讨了云冈石窟与碑刻之间的互动关系，强调了石窟碑刻在内容与形式... 详细信息

文章探讨了山西碑刻语言文化传承与影响，重点分析了云冈石窟在这一背景下的重要性。本文通过分析山西碑刻艺术特征，揭示其在书法和雕刻技艺上的独特之处。接着，深入探讨了云冈石窟与碑刻之间的互动关系，强调了石窟碑刻在内容与形式上的创新。文章还讨论了当代对山西碑刻的保护与传承措施，以及其在地方文化认同和国际交流中的作用，总结了山西碑刻作为文化遗产的深远意义，并展望未来的研究前景。

关键词：山西碑刻文化传承云冈石窟文化遗产

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