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利用微卫星标记分析鸡、鹌鹑及其属间杂种的遗传多样性

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利用微卫星标记分析鸡、鹌鹑及其属间杂种的遗传多样性

作者：孟庆美石河子大学

学位级别：硕士

本实验利用12个微卫星标记从分子水平对鸡、鹌鹑及其属间杂交种的遗传多样性进行研究,计算了杂合度、有效等位基因数、多态信息含量、群体间的遗传距离,并根据遗传距离对鸡、鹌鹑及其属间杂种进行了聚类分析。研究结果如下: (1)本研究1... 详细信息

本实验利用12个微卫星标记从分子水平对鸡、鹌鹑及其属间杂交种的遗传多样性进行研究,计算了杂合度、有效等位基因数、多态信息含量、群体间的遗传距离,并根据遗传距离对鸡、鹌鹑及其属间杂种进行了聚类分析。研究结果如下: (1)本研究12个微卫星座位上共检测到了66个等位基因,每个座位上的等位基因数为4～8个,有效等位基因数目为3～7个,有效等位基因数小于实际观察等位基因数,这是等位基因分布不均匀的结果。 (2)属间杂交种共检测到54个等位基因,每个座位平均等位基因数为4.5个,该群体平均多态信息含量和平均杂合度分别为0.6659和0.6800。 (3)朝鲜鹌鹑共检测到55个等位基因,每个座位平均等位基因数为4.583个;该群体平均多态信息含量和平均杂合度分别为0.6945和0.7111。 (4)新罗曼蛋鸡共检测到40个等位基因,每个座位平均等位基因数为3.33个,该群体平均多态信息含量和平均杂合度分别为0.5681和0.5977。 (5)12个微卫星标记在三个群体中的多态信息含量除GUJ0063为中度多态外,其余11个微卫星均为高度多态,三个群体平均多态信息含量在0.5681～0.6945,平均杂合度在0.5977～0.7111。12个微卫星标记可作为有效的遗传标记用于鸡﹑鹌鹑及其属间杂交种遗传多样性研究。 (6)计算了标准遗传距离,属间杂交种与朝鲜鹌鹑的距离最近,与新罗曼蛋鸡相对较远。

关键词：属间杂交种微卫星标记遗传多样性遗传距离

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上市电商企业研发投入对经营绩效影响的研究

上市电商企业研发投入对经营绩效影响的研究

作者：孟庆美对外经济贸易大学

学位级别：硕士

电商是近年来我国消费市场中的一个重要经济实体,其广泛开展的各项业务已成为我国互联网用户日常网上交易的重要组成部分。研发投入是电商日常运营过程中的重要财务安排,与电商经营绩效有重要联系。本文围绕电商研发投入对其经营绩效的... 详细信息

电商是近年来我国消费市场中的一个重要经济实体,其广泛开展的各项业务已成为我国互联网用户日常网上交易的重要组成部分。研发投入是电商日常运营过程中的重要财务安排,与电商经营绩效有重要联系。本文围绕电商研发投入对其经营绩效的影响,详细介绍了相关业务背景、理论知识和业务现状,提出了测度电商研发投入和企业经营绩效关系的研究假设和计量分析模型,主要变量为企业净利润、研发投入额度、研发投入占比、现金流、企业规模、企业价值和企业年龄等。分析中选用的样本数据为2010年—2019年间全国上市电商企业财务数据,累计577条。实证分析过程中,根据电商不同类型进行了比对研究。本文采用的主要研究方法是实证分析,通过线性回归模型研究电商研发投入对企业经营绩效的影响,并对模型可能产生的内生性问题进行了探讨。主要结论是:电商研发投入与其经营绩效呈现正向相关关系;对于不同类型的电商,研发投入影响其经营绩效的程度不同。零售电商和生活服务电商经营绩效受研发投入的影响明显,均在30%左右的幅度上;上市电商企业年龄越长、规模越大,研发投入对其经营绩效提升作用越大,电商应在条件允许的情况下积极增加研发投入。

关键词：电商研发投入经营绩效线性回归内生性

禽致病性大肠杆菌Ⅵ型分泌系统2 DotU的功能研究及毒力基因多重PCR方法的建立

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禽致病性大肠杆菌Ⅵ型分泌系统2 DotU的功能研究及毒力基因多重PC...

作者：孟庆美南京农业大学

学位级别：硕士

禽致病性大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia coli, APEC）可导致鸡、鸭等多种禽类的肠道外疾病,临床症状复杂多样,包括心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、败血症和脑炎等,该病波及范围广,严重制约着各地养禽业的健康发展。除了禽类... 详细信息

禽致病性大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia coli, APEC）可导致鸡、鸭等多种禽类的肠道外疾病,临床症状复杂多样,包括心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、败血症和脑炎等,该病波及范围广,严重制约着各地养禽业的健康发展。除了禽类,它还可以导致小鼠的脑膜炎症状,无疑对人类健康构成了潜在的威胁。毒力因子是APEC致病过程中的重要因素。已发现的APEC毒力因子主要包括黏附素、侵袭素、抗血清存活因子、铁摄取系统、空泡形成毒素以及其他毒力因子。有研究证明,APEC与人类肠道外致病性大肠杆菌（Extraintestinal Pathogenic E. coli, ExPEC）利用共同的毒力基因贮存库,因此,加强对APEC毒力因子的监测和研究,对于养禽业和公共卫生均具有重要意义。APEC的致病力是由多种毒力因子共同作用的结果,新的毒力因子的发现将有助于APEC致病机理的阐述。Ⅵ型分泌系统（Type VI secretion system, T6SS）是新近发现的革兰氏阴性菌的蛋白分泌系统。研究证明,T6SS在不同菌中扮演多样的角色,包括促进毒力、抑制细菌的复制和毒力以及调节菌间关系等。目前,T6SS在APEC中的作用尚不清楚。本研究建立了4组多重PCR方法,用以检测APEC的18个毒力基因,另外还研究了T6SS2核心蛋白DotU在APEC致病以及蛋白分泌过程中的作用。1.禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立为实现对APEC毒力基因的简易、快速检测,本研究建立了4组多重PCR方法,分别检测黏附相关基因、侵袭及毒素相关基因、抗血清存活相关基因及铁转运相关基因共18个毒力基因。根据GenBank公布的基因序列,设计合成18对特异性引物,通过退火温度、引物浓度等条件优化,建立了4组多重PCR体系,通过模板倍比稀释法检测了各组多重PCR的灵敏性。利用建立的多重PCR方法对100株APEC进行了毒力基因检测,验证多重PCR方法的可行性。试验结果显示,本研究建立的多重PCR方法能够特异性扩增出目的基因,其灵敏度分别为：103 CFU、103 CFU、105 CFU、 105 CFU细菌和1 ng、1 ng、10 ng、10 ng DNA。对100株APEC的毒力基因进行多重PCR检测,结果与先前的单基因PCR检测结果一致。试验结果表明,所建立的多重PCR方法快速、有效,可用于APEC毒力基因的鉴定及流行病学调查。2.禽致病性大肠杆菌DE719 T6SS基因的序列分析、流行病学调查及克隆表达T6SS是新发现的细菌蛋白分泌系统,其在APEC中的作用尚待研究。本研究根据NMEC RS218的T6SS序列对APEC DE719的T6SS进行了测序,并检测了核心基因dotU在75株APEc分离株中的分布。另外,对核心蛋白DotU、Hcp1和Hcp2进行克隆表达,并制备相应抗血清,为进一步研究DotU在APEC致病力以及蛋白分泌过程中的作用奠定基础。分析发现DE719 T6SS大小为23033 bp,结构与新报道的APEC T6SS2相似,故命名为DE719 T6SS2,其核心基因dotU的分布率为6.67%。另外,设计合成dotU、hcp1、hcp2的特异性表达引物,并进行扩增,通过双酶切定向克隆于原核表达质粒中,转化入表达宿主菌BL21（DE3）,构建相应表达菌BL21-pET28a-dotU. BL21-pET28a-hcp1、BL21-pET30a-hcp2。经IPTG诱导,表达了大小依次为32 kD、23 kD和26 kD的融合蛋白。免疫新西兰大白兔获得相应多克隆抗体,经间接ELISA和Western blot鉴定,均具有较高的效价和良好的特异性。同时,通过间接ELISA试验发现DE719鸭康复血清中含有抗DotU抗体,说明DotU在感染过程中表达,并可刺激机体产生免疫反应,提示DotU可能在DE719的致病过程中发挥一定作用。3.禽致病性大肠杆菌DE719 T6SS2基因缺失株、互补株的构建及特性分析为研究T6SS2核心蛋白DotU在APEC DE719致病过程中的作用,本研究利用Red同源重组系统构建了DE719的dotU、hcp1、hcp2缺失株及T6SS2缺失株,并用pSTV28构建了dotU缺失互补株。通过一系列试验比较分析野生株、基因缺失株和互补株的生物学特性、致病力差异,同时还探究了dotU缺失对T6SS2蛋白分泌（Hcp1和Hcp2）的影响。生物学特性试验结果显示,与野生株相比,dotU缺失株的生长特性、运动性无显著变化;但其凝集沉降能力、对环境及SPF鸡血清耐受力显著下降。细胞试验结果显示,dotU缺失导致其对DF-1的黏附能力、对HD-11的抗吞噬能力和胞内存活能力显著下降。动物试验结果表明DE7

关键词：禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR T6SS2 dotU 缺失致病力

rmlA基因缺失影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成

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微生物学报 2013年第10期53卷 1056-1062页

作者：韩月韩先干白灏王少辉孟庆美丁铲于圣青中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

【目的】构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)rmlA基因缺失株,研究该缺失株的生物学特性。【方法】利用Red重组系统构建rmlA缺失株;比较野生株与缺失株在生长特性、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异;运... 详细信息

【目的】构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)rmlA基因缺失株,研究该缺失株的生物学特性。【方法】利用Red重组系统构建rmlA缺失株;比较野生株与缺失株在生长特性、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异;运用Real-time PCR技术,比较野生株与rmlA缺失株对APEC部分毒力基因转录的影响。【结果】rmlA缺失株,不影响APEC的生长和运动特性,但生物被膜形成能力显著增强,且使luxS、irp2基因转录水平分别上调2倍、1.8倍,iucD、fyuA则下调25倍。【结论】APEC的rmlA基因可以影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成能力及部分毒力基因的转录水平;而对APEC的生长、运动特性没有影响。

关键词：禽治病性大肠杆菌 rmlA基因基因缺失生物被膜 Real—time PCR

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鸡与鹌鹑属间杂交种染色体核型分析

安徽农业科学 2007年第14期35卷 4152-4153页

作者：孙永强赵宗胜孟庆美李大全石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

采用胚胎法和外周血淋巴细胞培养法制备染色体标本,对鸡与鹌鹑属间杂交种染色体核型进行了研究。结果显示:杂交禽染色体数目为2n=78,但染色体形态存在差异,主要表现在No.1、No.4、No.6、No.8染色体上。No.1染色体,源于鸡的为m型,源于鹌... 详细信息

采用胚胎法和外周血淋巴细胞培养法制备染色体标本,对鸡与鹌鹑属间杂交种染色体核型进行了研究。结果显示:杂交禽染色体数目为2n=78,但染色体形态存在差异,主要表现在No.1、No.4、No.6、No.8染色体上。No.1染色体,源于鸡的为m型,源于鹌鹑的为sm型;No.4染色体,源于鸡的为sm型,源于鹌鹑为的st型;No.6、No.8染色体,源于鸡的分别为sm、m型,源于鹌鹑的全为t型。来源于鸡与鹌鹑的染色体的核型差异可能导致了属间杂交种的杂种不育现象。

关键词：鸡鹌鹑属间杂交种染色体核型

疼痛护理应用于蛛网膜下腔出血患者的效果观察

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吉林医学 2012年第31期33卷 6923-6924页

作者：孟庆美江苏省沛县人民医院江苏沛县221600

目的:探讨疼痛护理对蛛网膜下腔出血(SAH)患者的头痛影响。方法:将14例实施常规护理的对照组与17例实施疼痛护理的观察组进行临床效果对比。结果:观察组抑郁、焦虑评分明显低于对照组,观察组的疼痛分级明显优于对照组,观察组患者对护理... 详细信息

目的:探讨疼痛护理对蛛网膜下腔出血(SAH)患者的头痛影响。方法:将14例实施常规护理的对照组与17例实施疼痛护理的观察组进行临床效果对比。结果:观察组抑郁、焦虑评分明显低于对照组,观察组的疼痛分级明显优于对照组,观察组患者对护理工作的满意度明显高于对照组。结论:疼痛护理对缓解SAH患者的负性情绪,增强对疼痛的耐受性,以及减轻痛苦,增进舒适,提高护理满意度有一定的作用。

关键词：疼痛护理 SAH 效果

快速成型技术在老年人群口腔修复中的疗效观察

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大医生 2018年第4期3卷 12-13页

作者：孟庆美山东省平邑县人民医院山东临沂273300

目的分析快速成型技术在老年人群口腔修复中的疗效。方法选取2017年1月至2017年12月本院收治的100例老年口腔修复患者。根据入院先后顺序分成对照组和研究组,各50例。对照组采用常规的口腔修复法,研究组采用快速成型技术。比较两组患者... 详细信息

目的分析快速成型技术在老年人群口腔修复中的疗效。方法选取2017年1月至2017年12月本院收治的100例老年口腔修复患者。根据入院先后顺序分成对照组和研究组,各50例。对照组采用常规的口腔修复法,研究组采用快速成型技术。比较两组患者修复后的疗效情况、患者满意度、不良反应情况等。结果研究组显效40例、有效8例、有效率96%,对照组显效31例、有效9例、有效率80%,研究组显著高于对照组(P<0.05)。研究组满意度为100%显著高于对照组的76%(P<0.05)。结论快速成型技术比传统口腔修复术效果更好、患者满意度更高。

关键词：快速成型老年患者不良反应口腔修复

对脑梗死后偏瘫患者进行康复护理期间对其家属实施康复护理培训对其康复效果的影响

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当代医药论丛 2019年第22期17卷 231-233页

作者：孟庆美徐州市沛县人民医院

目的:探究对脑梗死后偏瘫患者进行康复护理期间对其家属实施康复护理培训对其康复效果的影响.方法:将2018年8月至2019年4月期间徐州市沛县人民医院收治的60例脑梗死后偏瘫患者按照护理方法的不同分为观察组(n=30)与对照组(n=30).对两组... 详细信息

目的:探究对脑梗死后偏瘫患者进行康复护理期间对其家属实施康复护理培训对其康复效果的影响.方法:将2018年8月至2019年4月期间徐州市沛县人民医院收治的60例脑梗死后偏瘫患者按照护理方法的不同分为观察组(n=30)与对照组(n=30).对两组患者均进行对症治疗与康复护理,在此基础上对观察组患者家属实施康复护理培训,然后比较两组患者的ADL评分、FMA评分及其患肢的肌力.结果:接受护理后,观察组患者的ADL评分、FMA评分和患肢肌力的评分均高于对照组患者,P<0.05.结论:对脑梗死后偏瘫患者进行康复护理的同时,对其家属实施康复护理培训可显著改善其肢体的运动功能,提高其日常生活活动能力.

关键词：脑梗死偏瘫康复护理康复护理培训

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系统性红斑狼疮患者的健康教育

实用临床医药杂志 2005年第10期9卷 60-61页

作者：孟庆美江苏省南京市鼓楼医院江苏南京210008

系统性红斑狼疮是好发于育龄女性的终生性疾病，需要终生服药，不但给患者带来躯体痛苦，还危及生命。治疗药物多为激素和免疫抑制剂，这些药物都有严重的副作用，如出现柯兴症、卵巢功能损害等。患者多数因恐惧疾病、恐惧治疗、心理压... 详细信息

系统性红斑狼疮是好发于育龄女性的终生性疾病，需要终生服药，不但给患者带来躯体痛苦，还危及生命。治疗药物多为激素和免疫抑制剂，这些药物都有严重的副作用，如出现柯兴症、卵巢功能损害等。患者多数因恐惧疾病、恐惧治疗、心理压力增加等使疾病活动加剧，对患者康复及自我护理产生不利影响。因此，系统性红斑狼疮患者的健康教育尤为重要。

关键词：系统性红斑狼疮健康教育自我保健