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代谢工程改造产酸克雷伯氏菌生产D/L-乳酸与丙氨酸

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代谢工程改造产酸克雷伯氏菌生产D/L-乳酸与丙氨酸

作者：孙金凯山东大学

学位级别：硕士

乳酸(lactic acid)作为生物界三大有机酸之一,被美国能源部评为最有前景的平台化合物。尤其是乳酸的光学纯单体聚合物聚乳酸(poly-lactic acid,PLA),由于其具有生物可降解性和环境友好型等特点,可以替代石化来源的塑料应用在多种行业,... 详细信息

乳酸(lactic acid)作为生物界三大有机酸之一,被美国能源部评为最有前景的平台化合物。尤其是乳酸的光学纯单体聚合物聚乳酸(poly-lactic acid,PLA),由于其具有生物可降解性和环境友好型等特点,可以替代石化来源的塑料应用在多种行业,并受到广泛的关注。另外乳酸在食品行业、医药行业、化妆品、农业等领域也具有广泛的应用。随着乳酸生产需求的日益增加,如何能够高产量、低成本的生产光学纯乳酸成为人们研究的热点。乳酸的生产方法有化学合成法、酶转化法以及微生物发酵法,前两种方法所需条件较为复杂,而微生物发酵法由于其来源简单、重复性高、环境污染小、产物纯度高等优点,因此受到更多的关注。丙氨酸(alanine)是一种非必需氨基酸,在医药、食品和工业方面用途也尤为广泛。目前丙氨酸的生产方法有酶催化法和微生物发酵法,微生物发酵法生产丙氨酸凭借成本低、化学污染少等优点而被广泛应用。本文以产酸克雷伯氏菌为出发菌株,通过基因工程改造等手段,期望构建出高效的乳酸和丙氨酸生产菌株,以葡萄糖为底物实现光学纯乳酸和丙氨酸的高效生产。为了降低葡萄糖作为底物产生的抑制效应以及提高D-乳酸的生产效率及产量,本论文第二章在课题组前期筛选构建的工程菌株产酸克雷伯氏菌PDL-6的基础上,通过基因工程手段敲除了甲基乙二醛合成酶基因mgs,构建出新的D-乳酸生产菌株*** PDL-6 △mgs。恒化器发酵情况分析结果显示,与***-6相比,*** PDL-6 △mgs在30 h内利用葡萄糖内生产D-乳酸59.8g/L,产量提高了 14.5%,生产效率为1.99g/(L-h),生产效率提高了 14.4%,D-乳酸的转化率达到96.7%。第三章在第二章的基础上,从微生物发酵的相关因素着手,旨在提高***-6△mgs发酵生产D-乳酸的能力。分别从发酵培养基类型、转速、通气量、pH调节剂四个方面着手,对*** PDL-6△mgs发酵条件进行优化。通过对发酵情况以及成本条件分析,确定了最佳的发酵条件。最佳发酵培养基为8号培养基、转速为100rpm、通气量为0vvm、pH调节剂为6MNaOH。通过发酵条件优化,D-乳酸的产量可达59.7 g/L,生产效率为0.99 g/(L·h),转化率达99.5%。为了提高L-乳酸和丙氨酸的生产效率,第四章在本课题组原有L-乳酸生产菌株PDL-7的基础上构建了工程菌PDL-7 △pB和PDL-7 △pfl△mgs,用于L-乳酸的生产,并在PDL-6 △mgs基础上将来源于Geobacillusstearothermophilus XL-65-6的丙氨酸脱氢酶基因alaaD替换掉乳酸脱氢酶编码基因ldhD,构建了工程菌PDL-6△mgsAldhD::alaD,用于丙氨酸的生产。通过恒化器装置对比分析了这两株生产L-乳酸工程菌与出发菌株PDL-7的发酵情况,其中菌株PDL-7 △ppflB的生产情况最好,L-乳酸产量为30.6 g/L,生产效率为1.02 g/(L·h),底物转化率为90%。之后我们尝试在发酵罐中进行发酵条件优化,然而获得的L-乳酸产量较低,底物葡萄糖大部分生成了中间产物丙酮酸。通过测定L-乳酸脱氢酶酶活,发现酶活水平较低。这说明较低的乳酸脱氢酶酶活严重影响了菌株PDL-7△pflB的产酸能力,继而限制了它在工业发酵上的应用。之后探究了生产丙氨酸工程菌PDL-6 △mgs△ldD::alaD以葡萄糖为底物发酵生产丙氨酸的能力,最终通过59h发酵,共消耗葡萄糖64 g/L,丙氨酸产量43.92 g/L,葡萄糖向丙氨酸的转化率为68.625%,实现了葡萄糖向丙氨酸的高效转化。

关键词：产酸克雷伯氏菌 D-乳酸 L-乳酸丙氨酸微生物发酵法

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考虑收益共享契约的绿色供应链协调策略研究

武汉理工大学学报（信息与管理工程版） 2023年第6期45卷 920-927页

作者：胡永仕孙金凯林晶福建理工大学交通运输学院福建福州350118 福建江夏学院数理部福建福州350108

绿色制造水平已成为衡量国家制造业竞争力的重要因素。在制造商、零售商和消费者组成的两条绿色供应链中,为研究收益共享契约对链内纵向合作与链间横向竞争的影响,构建了Stackelberg主从动态博弈模型,分别确定两条供应链是否达成收益共... 详细信息

绿色制造水平已成为衡量国家制造业竞争力的重要因素。在制造商、零售商和消费者组成的两条绿色供应链中,为研究收益共享契约对链内纵向合作与链间横向竞争的影响,构建了Stackelberg主从动态博弈模型,分别确定两条供应链是否达成收益共享契约3种情形下的产品最优绿色水平及定价决策,分析产品竞争强度和消费者绿色敏感度对供应链均衡结果及收益共享契约优势效应的影响。研究表明:在价格和绿色度的双重竞争下,产品绿色水平随竞争强度的增强而提高。当消费者绿色敏感度较低时,提高产品绿色度可使制造商从中获益;随着产品竞争强度或消费者绿色敏感度的增强,若竞争供应链未达成收益共享契约,则实行收益共享的供应链中的制造商可获得帕累托改善,并且较小的共享系数使得零售商也获得帕累托改善。

关键词：竞争供应链收益共享绿色度竞争强度 Stackelberg博弈

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高仟伏X线与高分辨率CT（HRCT）对0、0～+、I矽肺小阴影影像学的比较研究

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高仟伏X线与高分辨率CT（HRCT）对0、0～+、I矽肺小阴影影像学的...

作者：孙金凯中国医科大学

学位级别：硕士

目的在我国，矽肺病是危害工人健康最严重的职业病。长期以来我国一直以高仟伏X线胸片进行矽肺诊断，但随着HRCT广泛深入临床，高仟伏摄影技术的缺点逐渐暴露出来。矽肺诊断单纯依靠高仟伏X线胸片存在很多误差，HRCT可显著提高肺... 详细信息

目的在我国，矽肺病是危害工人健康最严重的职业病。长期以来我国一直以高仟伏X线胸片进行矽肺诊断，但随着HRCT广泛深入临床，高仟伏摄影技术的缺点逐渐暴露出来。矽肺诊断单纯依靠高仟伏X线胸片存在很多误差，HRCT可显著提高肺部解剖结构的显示率，在尘肺诊断中的作用日益受到国内外的重视。本研究通过对90例0、0、Ⅰ矽肺患者分别拍摄高仟伏X线胸片和HRCT，并观察矽肺影象，对高仟伏X线胸片和HRCT在矽肺小阴影影像学中差异进行研究。研究对象和方法选取90例沈阳矿山机械厂矽肺患者，其中0矽肺30人，0矽肺30人，Ⅰ矽肺30人，分别摄取高仟伏X线胸片和HRCT进行对比，观察在高仟伏X线胸片及HRCT上小阴影的差异。胸片采用岛津800mA ED150型X光机，采取站位，拍摄后前位X线胸片。胸部CT采用GE Somatom plus型CT机，HRCT扫描采取仰卧位，吸气末屏气扫描，从肺尖扫描至肺底，采用高分辨骨重建算法。由5名沈阳市尘肺诊断组成员同时进行阅片。采用GBZ70-2002尘肺诊断标准及尘肺诊断标准片。采用统计软件SPSS11.5进行统计。对高仟伏X线胸片与HRCT显示肺区小阴影数量、小阴影密集度的肺区数及矽肺合并症数量进行χ检验，P＜0.05具有显著性意义。结果 1．高仟伏X线胸片与HRCT对矽肺患者小阴影显示的比较在30例高仟伏X线胸片诊断为0矽肺的患者中，通过拍摄HRCT发现

关键词：矽肺富仟伏X线胸片高分辨率CT

Windows EVTX日志恢复与取证技术研究

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Windows EVTX日志恢复与取证技术研究

作者：孙金凯杭州电子科技大学

学位级别：硕士

Microsoft Windows操作系统的EVTX日志文件记录了系统和应用程序的操作过程和痕迹。EVTX日志文件内的信息对取证调查人员有着非常重要的意义,因此Windows日志取证自然也成为计算机取证领域的研究热点之一。恢复已删除的日志文件更是日... 详细信息

Microsoft Windows操作系统的EVTX日志文件记录了系统和应用程序的操作过程和痕迹。EVTX日志文件内的信息对取证调查人员有着非常重要的意义,因此Windows日志取证自然也成为计算机取证领域的研究热点之一。恢复已删除的日志文件更是日志取证的重要组成部分,然而已有的研究很少关注已删除的EVTX日志文件。本文借用文件雕复的思想,在文件系统元信息缺失与文件分片的情况下,对如何有效恢复EVTX日志文件与日志记录展开研究。首先,在微软公司并未公开其日志服务源码与相关详细说明文档的情况下,对EVTX日志文件进行了分析和研究。本文详细地解析了日志文件的逻辑结构与各字段含义,利用字段之间的关系找出文件分片之间的关系,为日志文件在磁盘上的恢复工作做好了技术上的铺垫。其次,为了解决对文件系统元信息依赖的问题,本文先提出了两种基于文件头的EVTX日志文件恢复算法,但两种算法无法恢复出分片的日志文件。为了进一步解决文件分片的问题,随后提出了一种基于EVTX文件结构特征的恢复算法。该算法利用日志文件中数据的特征来定位磁盘镜像中所有日志文件分片,随后根据判别器和重组算法将文件分片重组为完整块,再将完整块重组为一个完整的日志文件。实验结果表明,基于EVTX文件结构特征的恢复算法同时在文件系统元信息缺失与文件分片的情况下,可以成功恢复出已删除的日志文件,并且在准确率100%的情况下,能保持85%以上的召回率。最后,提出了一种针对破损EVTX日志文件记录的恢复方法。本文分析了Windows操作系统专用的二进制XML编码技术,利用XML模板与替换数组的特征来提取日志记录中的信息;再结合标签与XML对象之间的关系,提出一种二进制XML可视化算法,将信息展示给取证调查人员。实验结果表明,恢复出破损日志文件中的日志记录可以达到更好的恢复效果,在准确率在98%以上的情况下,能将召回率提升到95%以上。并且当日志文件部分被覆写时,未被覆写的部分也能被该方法尽可能地恢复,其中召回率与覆写率的和始终接近100%。综上所述,本文利用EVTX日志文件的结构特征可以很好地解决恢复过程中依赖文件系统元信息与文件分片的问题。除此之外,还考虑到日志文件会出现部分覆写的情况,因此通过对二进制XML编码技术的解析来对日志记录进行尽可能的恢复。

关键词： Windows取证 EVTX日志文件数据恢复文件雕复二进制XML

基于自适应STBC的多天线HDA视频传输方案研究

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基于自适应STBC的多天线HDA视频传输方案研究

作者：孙金凯太原科技大学

学位级别：硕士

作为新型的跨层传输技术,混合数字模拟（HDA）视频传输可以很好地克服传统数字传输所引起的“悬崖效应”,同时具有比类模拟传输方案更高的效率。多输入多输出（MIMO）技术可以通过分集增益以及空间复用技术进一步提高视频的传输速率与效... 详细信息

作为新型的跨层传输技术,混合数字模拟（HDA）视频传输可以很好地克服传统数字传输所引起的“悬崖效应”,同时具有比类模拟传输方案更高的效率。多输入多输出（MIMO）技术可以通过分集增益以及空间复用技术进一步提高视频的传输速率与效率,因此,本论文选题研究MIMO系统的HDA方案以提高无线视频传输性能。论文主要完成的工作和创新点包括:首先,提出了一种基于自适应STBC（空时分组编码）的多天线HDA视频传输方案。先将每帧视频组织为64个包,根据数据包的能量大小进行重要性排列,再根据数据包的重要性选择OSTBC（正交空时分组编码）和QSTBC（准正交空时分组编码）:OSTBC用于传输最重要数据包,QSTBC用于传输次重要数据包,其他最不重要数据包被丢弃。在给定符号速率及不同的信道信噪比条件下,根据视频恢复质量最优,推导出传输数据包重排的闭式表达。实验结果表明,在4×1系统中,由于根据数据包的重要性自适应选择STBC,提出方案比纯OSTBC或纯QSTBC获得了质量的提升,体现了本方案在分配带宽时的优势。其次,提出了基于自适应STBC的多天线HDA视频传输功率优化方案。在保证数字信号无失真的前提下,推导了模拟信号失真与模拟信号功率的表达式,通过优化分配数字信号与模拟信号的功率,降低模拟信号的失真。实验结果表明,使用功率分配优化可以进一步提升视频的重构质量。

关键词：混合数字模拟视频传输 OSTBC QSTBC ASTBC 多天线功率优化

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壹期尘肺患者生命质量状况调查与分析

中国工业医学杂志 2011年第5期24卷 373-375页

作者：阎波韩冰孙金凯沈阳市第九人民医院辽宁沈阳110024 中国医科大学辽宁沈阳110001

为了解尘肺患者的生命质量现状及其影响因素,尝试以SF-36健康调查量表作为尘肺患者生命质量的测量工具,对沈阳地区171名壹期尘肺患者进行生命质量调查。结果显示,男性患者的生命质量优于女性患者,年龄低的患者优于年龄大的患者,文化程... 详细信息

为了解尘肺患者的生命质量现状及其影响因素,尝试以SF-36健康调查量表作为尘肺患者生命质量的测量工具,对沈阳地区171名壹期尘肺患者进行生命质量调查。结果显示,男性患者的生命质量优于女性患者,年龄低的患者优于年龄大的患者,文化程度越高的生命质量状况越好,月收入越高的生命质量状况越好,婚姻状况正常者优于离异或丧偶者。壹期尘肺患者生命质量总体较差,应有针对性地制定干预措施,促进壹期尘肺患者生命质量的提高。

关键词：壹期尘肺生命质量 SF-36健康调查量表

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合并肺结核尘肺患者社会支持状况的调查分析

中国工业医学杂志 2012年第1期25卷 50-52页

作者：阎波韩冰孙金凯沈阳市第九人民医院辽宁沈阳110024 中国医科大学辽宁沈阳110001

为全面评估尘肺患者的生存状况,以SSRS社会支持评定量表作为尘肺患者社会支持程度的测量工具,从沈阳地区入手,尝试了解尘肺患者社会支持的现状及其影响因素。结果显示,合并肺结核的尘肺患者的社会支持得分相对较低,提示他们的社会支持... 详细信息

为全面评估尘肺患者的生存状况,以SSRS社会支持评定量表作为尘肺患者社会支持程度的测量工具,从沈阳地区入手,尝试了解尘肺患者社会支持的现状及其影响因素。结果显示,合并肺结核的尘肺患者的社会支持得分相对较低,提示他们的社会支持状况还是不甚理想,需要在加强各方面支持的同时,要把各方支持联合衔接起来,提高对支持的利用度,改善和提高合并肺结核尘肺患者的生活质量。

关键词：尘肺合并肺结核社会支持 SSRS社会支持量表

基于自适应STBC的多天线HDA视频传输方案

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太原科技大学学报 2023年第3期44卷 193-199页

作者：孙金凯王安红李素月太原科技大学电子信息工程学院太原030024

混合数字模拟(HDA)视频传输是一种新型的跨层传输技术,可以很好克服传统数字传输所引起的视频质量悬崖效应。该研究基于HDA的多天线软视频传输以取得高频谱效率和高传输速率,提出了一种基于自适应STBC的多天线HDA视频传输方案。方案根... 详细信息

混合数字模拟(HDA)视频传输是一种新型的跨层传输技术,可以很好克服传统数字传输所引起的视频质量悬崖效应。该研究基于HDA的多天线软视频传输以取得高频谱效率和高传输速率,提出了一种基于自适应STBC的多天线HDA视频传输方案。方案根据数据包的重要性选择正交STBC(OSTBC)和准正交STBC(QSTBC):OSTBC用于传输最重要数据包,QSTBC用于传输次重要数据包,其他最不重要数据包被丢弃。在给定符号速率及不同的信道信噪比条件下,根据视频恢复质量最优,推导出传输数据包重排的闭式表达,并对传输的数据进行优化功率分配。实验结果表明,在4×1系统中,由于根据数据包的重要性自适应选择STBC,提出方案比纯OSTBC或纯QSTBC获得了0.2 dB~2 dB的质量提升。

关键词： HDA OSTBC QSTBC 多天线

尘肺患者呼吸相关生命质量评价及影响因素调查分析

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中国工业医学杂志 2012年第3期25卷 220-222页

作者：孙金凯韩冰阎波刘红波沈阳市第九人民医院辽宁沈阳110024 中国医科大学辽宁沈阳110001

采用圣乔治呼吸问卷(SGRQ)对208名尘肺患者生命质量进行调查。结果显示,随着年龄增长,SGRQ得分增大,尘肺患者的呼吸相关生命质量下降。接尘工龄越长的尘肺患者SGRQ呼吸症状得分越高;合并症越多的患者,活动受限得分越高。提示不同性别尘... 详细信息

采用圣乔治呼吸问卷(SGRQ)对208名尘肺患者生命质量进行调查。结果显示,随着年龄增长,SGRQ得分增大,尘肺患者的呼吸相关生命质量下降。接尘工龄越长的尘肺患者SGRQ呼吸症状得分越高;合并症越多的患者,活动受限得分越高。提示不同性别尘肺患者活动受限程度不同,可能与男女生理结构上的差异有关;除年龄外,接尘工龄也与尘肺患者呼吸症状有关;控制尘肺患者的合并症,可有效提高尘肺患者的生存质量。

关键词：尘肺生命质量 SGRQ