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miRNA-26a敲基因小鼠肺形态发育及肺表面活性物质合成的研究

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miRNA-26a敲基因小鼠肺形态发育及肺表面活性物质合成的研究

作者：孙祎璠南京医科大学

学位级别：硕士

[目的]正常的肺形态结构及功能是胎儿生后进行呼吸运动的重要条件。本文的主要通过对miRNA-26a（miR-26a）敲基因小鼠胎肺不同发育阶段的肺组织进行形态学观察及肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）合成情况的研究,探讨miR-26a... 详细信息

[目的]正常的肺形态结构及功能是胎儿生后进行呼吸运动的重要条件。本文的主要通过对miRNA-26a（miR-26a）敲基因小鼠胎肺不同发育阶段的肺组织进行形态学观察及肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）合成情况的研究,探讨miR-26a对肺发育的影响,为临床肺发育相关疾病的诊疗提供理论依据。[方法]根据鼠肺发育的分期,选择孕16.5天（embryonic day 16.5,E16.5）、E18.5天及生后2天（postnatal day 2,P2）作为观察研究的关键时间点。利用苏木精-伊红染色（hematoxylin-euphorbia,HE）及透射电镜方法行miR-26a纯合敲基因小鼠与野生型小鼠肺组织切片的形态学观察;利用免疫组织化学（immunochemistry,IHC）、蛋白质免疫印迹（western blot,WB）及实时定量 PCR技术检测miR-26a敲基因小鼠肺发育不同时期肺组织中PS相关蛋白的表达量。[结果]①HE结果:与野生型小鼠相比,在E16.5天时,miR-26a敲基因小鼠肺组织含有更多扩张的含气管腔;在E18.5天时,两组小鼠胎肺组织中均有大量Ⅱ 型肺泡上皮细胞（type Ⅱ alveolar epithelial cell,AECII）产生,但 miR-26a 敲基因小鼠肺组织中肺泡结构较野生型小鼠更加成熟;在P2天时,miR-26a敲基因小鼠肺组织较野生型小鼠肺组织中含有更多的AECIIs、更少的Ⅰ型肺泡上皮细胞（type Ⅰ alveolar epithelial cell,AECI）。②透射电镜结果:与野生型小鼠相比,E16.5天时miR-26a敲基因小鼠肺组织细胞中含有更多的糖原颗粒;在E18.5天和P2天时,miR-26a敲基因小鼠的AECIIs较野生型小鼠AECIIs中含有更多的成熟板层小体。③IHC、WB及实时定量PCR结果:与野生型小鼠相比,在E18.5天和P2天时,miR-26a敲除小鼠肺组织中PS相关蛋白A（surfactant protein-A,SP-A）、SP-B及SP-C在蛋白水平及mRNA水平上的表达量均明显增高。[结论]敲除miR-26a基因能够促进胎肺组织形态发育,与野生型小鼠相比更为成熟,且在促进肺发育过程中PS相关蛋白表达量也增加,提示miR-26a对肺形态发育和PS合成具有抑制作用。

关键词： miRNA-26a 敲基因小鼠组织形态学肺表面活性物质

基于三生融合的特色旅游小镇的规划研究——以濉溪县百善镇麦田小镇为例

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基于三生融合的特色旅游小镇的规划研究——以濉溪县百善镇麦田小...

作者：孙祎璠南京农业大学

学位级别：硕士

近年来,国内特色小镇的规划建设如火如荼,其中也出现了各种问题。面对“特色小镇”没有“特色”的发展难题,如何找寻出符合每个小城镇自身特色的空间布局和产业发展是亟待研究的重要课题。从生产上实现集约高效,从生活上实现适度宜居,... 详细信息

近年来,国内特色小镇的规划建设如火如荼,其中也出现了各种问题。面对“特色小镇”没有“特色”的发展难题,如何找寻出符合每个小城镇自身特色的空间布局和产业发展是亟待研究的重要课题。从生产上实现集约高效,从生活上实现适度宜居,从生态空间上实现山清水秀,让“三生融合”的理念贯彻到整个特色小镇的产业发展及空间布局的系统研究和发展中。基于“三生融合”理念,本论文通过文献研究法、案例分析法、实证研究法,对“三生融合”、“特色小镇”及“旅游小镇”进行全面的解析,深挖其相关要素,并且研究三者之间的关联性,进而提出“特色旅游小镇”这一规划策略,并且选取国内外成功的经典特色小镇案例进行分析,总结其规划理念及思想。以淮北市濉溪县百善镇麦田小镇为实证案例,调查濉溪县及周边城镇的特色小镇规划建设情况,分析濉溪县“生产”、“生活”及“生态”三大要素的现状,结合濉溪县百善镇实际发展特点,选取其主要粮食作物小麦作为突破口,打造具有当地特色的乡村文化旅游IP的休闲农业旅游目的地,以及具有良性农业产业链的特色麦田小镇。调查研究得出:(1)在特色小镇的规划中,研究因地制宜地构建特色旅游小镇文化旅游产业链,采用就地生根,而非无中生有的手段,通过打造强IP来解决同质化问题。(2)通过当地特色产业带动当地经济发展,三大产业相互配合,最终实现新的产业模式及城镇体系新格局,永久的构建多元融合的产业及环境生态结构。(3)通过对实证案例的研究,总结发现对于产业结构单一、居民生活不便、基地生态环境相对保持较好的农业城镇,在规划时保证优化当地生态环境条件的前提下,以其第一产业为基础,进行第二产业的扩展升级,并整体带动第三产业的区域发展,促使当地居民生活更加便利,最终实现规划区的三生融合是保证规划区长久保持活力的有效方式。

关键词：三生融合特色小镇旅游小镇生态农业

基于生物信息学分析microRNA-495-5p在早产儿支气管肺发育不良中的表达及其临床意义

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中国当代儿科杂志 2020年第1期22卷 24-30页

作者：孙祎璠马俐龚小慧洪文超蔡成上海市儿童医院/上海交通大学附属儿童医院新生儿科

目的探讨支气管肺发育不良(BPD)早产儿血清中microRNA-495-5p(miRNA-495-5p)的表达变化并对其进行生物信息学分析,为深入研究miRNA-495-5p与BPD的关系提供理论依据。方法收集2015年1月至2016年12月NICU住院治疗早产儿的一般临床资料,选... 详细信息

目的探讨支气管肺发育不良(BPD)早产儿血清中microRNA-495-5p(miRNA-495-5p)的表达变化并对其进行生物信息学分析,为深入研究miRNA-495-5p与BPD的关系提供理论依据。方法收集2015年1月至2016年12月NICU住院治疗早产儿的一般临床资料,选取具有早期BPD临床表现的20例患儿为BPD组,无早期BPD临床表现的20例患儿为对照组。采集两组患儿末梢外周血,每组各随机选取5例患儿,应用miRNA芯片技术筛选两组患儿血清中差异性表达的miRNAs;每组各随机选取6例患儿,采用RT-PCR技术再次验证其差异性表达。应用TargetScan、miRDB、miRWalk数据库对miRNA-495-5p进行靶基因预测;采用DAVID数据库对靶基因进行基因功能富集分析和信号转导通路富集分析。结果与对照组患儿相比,BPD组患儿血清miRNA-495-5p表达显著上调(P<0.05)。通过3种数据库预测miRNA-495-5p的靶基因共有117个,其靶基因功能分别富集于转录调节活性、转录激活活性、转录辅助激活活性等分子功能,代谢过程的调控、依赖DNA的转录调控、血管模式等生物学过程,以及核质、膜组分、不溶性组分等细胞组分上(P<0.05);信号转导通路则显著富集于mTOR信号通路中(P<0.05)。结论miRNA-495-5p可能通过调控新生血管生成、干细胞分化、细胞凋亡及自噬等参与BPD的发生发展,为后续深入研究其在BPD中的作用及功能机制提供了重要线索。

关键词：支气管肺发育不良 microRNA-495-5p 生物信息学早产儿

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市政工程公路施工工艺和施工质量控制的研究

居舍 2021年第1期 73-74页

作者：孙祎璠金埔园林股份有限公司

公路是市政工程的重要组成部分,为构建城市交通运输体系,提升交通运输水平,政府需要重视市政公路建设工作。对于施工单位来讲,其有必要选择合适的公路施工工艺开展施工活动,在施工的过程中科学地控制施工质量,保证公路建设质量。本文主... 详细信息

公路是市政工程的重要组成部分,为构建城市交通运输体系,提升交通运输水平,政府需要重视市政公路建设工作。对于施工单位来讲,其有必要选择合适的公路施工工艺开展施工活动,在施工的过程中科学地控制施工质量,保证公路建设质量。本文主要分析了市政工程公路施工工艺,研究了市政工程公路施工质量控制存在的问题,探究了市政工程公路施工质量控制措施。

关键词：公路市政工程施工质量施工工艺控制

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塑料行业上市公司盈利能力的多元回归分析

商场现代化 2019年第16期 140-141页

作者：孙祎璠三峡大学经济与管理学院

文章以2018年沪深二市发行的29家塑料行业上市公司财务数据为样本,从塑料行业发展现状入手,运用杜邦体系得出影响上市公司盈利能力的代表性因素,以权益净利率为被解释变量,以各影响因素为解释变量,建立多元回归分析模型。系统分析塑料... 详细信息

文章以2018年沪深二市发行的29家塑料行业上市公司财务数据为样本,从塑料行业发展现状入手,运用杜邦体系得出影响上市公司盈利能力的代表性因素,以权益净利率为被解释变量,以各影响因素为解释变量,建立多元回归分析模型。系统分析塑料行业上市公司盈利能力。

关键词：塑料行业盈利能力多元回归

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新生儿尿素循环障碍5例临床分析

临床儿科杂志 2023年第4期41卷 266-271页

作者：楚晓云孙祎璠颜崇兵洪文超龚小慧蔡成上海市儿童医院、上海交通大学医学院附属儿童医院新生儿科上海200062

目的总结新生儿尿素循环障碍(UCDs)的临床特征、诊治过程、转归及预后,以提高对该病的认识。方法回顾性分析2017年7月至2022年7月收治的经基因测序证实为阳性变异的5例新生儿UCDs的临床特点、治疗及预后等资料。结果5例新生儿中男4例、... 详细信息

目的总结新生儿尿素循环障碍(UCDs)的临床特征、诊治过程、转归及预后,以提高对该病的认识。方法回顾性分析2017年7月至2022年7月收治的经基因测序证实为阳性变异的5例新生儿UCDs的临床特点、治疗及预后等资料。结果5例新生儿中男4例、女1例,胎龄(39.0±1.2)周,出生体重(3642.0±511.6)g,中位发病日龄2(1~5)d,初始血氨水平(1386.8±398.4)μmol/L。起病特征分别为纳差3例、低体温2例、气促2例、呕吐1例,均有肌张力减退、意识障碍及惊厥。原发病为鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症(OTCD)3例,氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症(CPS1D)2例。OTCD患儿瓜氨酸降低,尿乳清酸增高,存在3种基因致病变异,其中c.177delA和c.387-1G>T为新发变异。CPS1D患儿瓜氨酸降低,尿乳清酸浓度正常或降低,基因测序存在4个变异位点,其中c.548T>C和c.3G>C为新发变异。5例UCDs新生儿均在饮食控制及药物治疗的基础上叠加透析疗法以快速清除血氨,其中3例患儿血氨水平降至(164.0±47.1)μmol/L,但因神经系统不良预后,最终4例放弃治疗后死亡,1例存活。存活患儿在1岁时接受了肝移植手术,随访至2022年12月存在语言及运动发育落后。结论新生儿UCDs病死率高且预后差,临床起病特征常缺乏特异性,尽早的血氨检测是发现该病的关键,基因分析可明确诊断。尽早给予有效干预可挽救患儿生命及改善其神经系统预后。

关键词：高氨血症尿素循环障碍临床分析新生儿

microRNA-296-5p靶基因的预测及在肺发育中的应用

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中国当代儿科杂志 2016年第12期18卷 1302-1307页

作者：张颖慧杨洋张存孙祎璠朱雯马程玲周晓玉南京医科大学附属儿童医院新生儿科江苏南京210008

目的对rno-micro RNA-296-5p(mi R-296)靶基因预测并进行相关生物信息学分析,为深入研究mi R-296与胎肺发育相关的生物学功能提供理论依据。方法应用Pub Med、Google等信息搜索工具检索mi R-296的现有研究,并通过mi RBase获取其序列特... 详细信息

目的对rno-micro RNA-296-5p(mi R-296)靶基因预测并进行相关生物信息学分析,为深入研究mi R-296与胎肺发育相关的生物学功能提供理论依据。方法应用Pub Med、Google等信息搜索工具检索mi R-296的现有研究,并通过mi RBase获取其序列特征以及进化的保守性;利用Target Scan数据库进行mi R-296的靶基因预测;并利用DAVID Bioinformatics Resources 6.8数据库对靶基因进行功能富集分析;利用KEGG数据库对靶基因进行信号转导通路分析。结果已有的文献表明mi R-296在许多生物学过程中发挥重要作用,序列在多物种间高度保守。mi R-296调控的靶基因参与分子功能、细胞组分和生物学过程等方面,靶基因集合的信号转导通路显著富集于MAPK信号通路、Wnt信号通路、TGF-β信号通路等(均P<0.05)。结论通过对mi R-296靶基因的生物信息学分析,为研究mi R-296在肺发育中的作用提供了功能与机制的线索。

关键词： microRNA-296 靶基因生物信息学肺发育

新生儿呼吸窘迫综合征无创通气治疗的研究进展

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国际儿科学杂志 2016年第10期43卷 803-806页

作者：孙祎璠阚清周晓玉南京医科大学附属南京儿童医院新生儿医疗中心 210008

新生儿呼吸窘迫综合征（neonatal respiratory distress syndrome, NRDS）是造成新生儿死亡的重要原因。目前治疗方案以肺表面活性物质替代治疗和机械通气为主。为了避免有创通气所带来的严重并发症，目前临床医生越来越倾向于采用无创... 详细信息

新生儿呼吸窘迫综合征（neonatal respiratory distress syndrome, NRDS）是造成新生儿死亡的重要原因。目前治疗方案以肺表面活性物质替代治疗和机械通气为主。为了避免有创通气所带来的严重并发症，目前临床医生越来越倾向于采用无创通气的模式。无创通气模式包括经鼻间歇正压通气、经鼻持续正压通气、加热加湿高流量鼻导管通气等。该文就无创通气在临床应用的研究进展作一综述。

关键词：无创通气呼吸窘迫综合征经鼻间歇正压通气经鼻持续正压通气新生儿

连续性肾脏替代治疗在新生儿急性肾损伤中的临床应用分析

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中国血液净化 2022年第8期21卷 569-572页

作者：孙祎璠楚晓云翁博雯洪文超龚小慧蔡成上海市儿童医院上海交通大学医学院附属儿童医院新生儿科上海200062

目的探讨连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)在新生儿急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中应用的有效性和安全性。方法回顾分析2015年1月~2021年10月上海市儿童医院新生儿科CRRT治疗的AKI患儿的临床资... 详细信息

目的探讨连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)在新生儿急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中应用的有效性和安全性。方法回顾分析2015年1月~2021年10月上海市儿童医院新生儿科CRRT治疗的AKI患儿的临床资料。比较治疗前、治疗12~24h和治疗结束时尿素氮、肌酐、尿量和血管活性药使用情况,观察并发症和临床预后。结果共纳入12例患儿,男性9例,女性3例,胎龄(36.6±3.0)周,出生体质量(2765.4±697.6)g。原发病包括出生窒息7例,肺炎、先天性脐膨出、先天性空肠闭锁、败血症及胎粪吸入综合征(meconium aspiration syndrome,MAS)各1例。治疗日龄3(1.0,4.8)天,持续运转时间(73.5±59.5)h。其中4例治愈出院,1例放弃治疗出院,7例死亡,治愈出院与放弃或死亡患儿的治疗日龄无显著性差异(Z=-0.352,P=0.725)。出现并发症电解质紊乱8例,血小板减少5例,导管堵塞3例。与治疗前相比,治疗12~24h尿素氮显著下降(Z=-2.118,P=0.034),治疗结束尿素氮下降,但差异无统计学意义(Z=-1.257,P=0.232)。与治疗前相比,治疗12~24h、治疗结束时肌酐水平均显著下降(t=4.528,P=0.001;t=3.372,P=0.006),尿量均显著升高(Z=-2.670,P=0.008;Z=-2.937,P=0.003)。治疗前使用血管活性药的患儿共11例,治疗12~24h 1例停用血管活性药,6例药物较前减量;治疗结束5例停用血管活性药,3例药物较前减量。结论CRRT治疗新生儿AKI是有效的、安全的,且并发症是可控的。

关键词：连续性肾脏替代治疗急性肾损伤新生儿有效性安全性