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多聚胺阳离子脂质体转染效率及细胞毒性的评价

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解放军医学杂志 2006年第4期31卷 327-329页

作者：孙瑞琳金发光吴道澄吴红刘斌南鹏娟张颖温德升西安第四军医大学唐都医院呼吸科 710038 西安交通大学生命科学与技术学院第四军医大学药学系化学教研室第四军医大学药学系口腔生物学教研室

目的评估四种多聚胺阳离子脂质体的转染效率及细胞毒性，筛选高效低毒的阳离子脂质体。方法多聚胺阳离子脂质TC-Chol、DC-Chol与中性磷脂DOPE分别以1：1、3：1摩尔比制备多聚胺阳离子脂质体，转染以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的质粒P... 详细信息

目的评估四种多聚胺阳离子脂质体的转染效率及细胞毒性，筛选高效低毒的阳离子脂质体。方法多聚胺阳离子脂质TC-Chol、DC-Chol与中性磷脂DOPE分别以1：1、3：1摩尔比制备多聚胺阳离子脂质体，转染以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的质粒PIRES2-EGFP入Hela细胞、Hep2细胞，倒置荧光显微镜下检测转染细胞的报告基因表达，筛选出高效的阳离子脂质体，通过MTT法检测转染细胞毒性，从而筛选相对高效低毒的阳离子脂质体。结果所制备的多聚胺阳离子脂质体在透射电镜下呈圆形、椭圆形囊泡样结构，少数呈管状、不规则状，粒径50-200nm，可将质粒PIRES2-EGFP有效转染入Hela细胞、Hep2细胞，其中多聚胺阳离子脂质TC-Chol与DOPE以3：1摩尔比制备的多聚胺阳离子脂质体是一种相对高效低毒的阳离子脂质体，转染效率39．5％～42．1％。结论多聚胺阳离子脂质TC-Chol、DC-Chol与中性磷脂DOPE以一定的摩尔比可制备高效低毒的多聚胺阳离子脂质体，其转染效率和细胞毒性与阳离子脂质的结构和中性磷脂DOPE的比例有关，在基因转染和基因治疗方面具有较广阔的应用前景。

关键词：多聚胺阳离子脂质体制备转染

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淡水近淹溺36例临床综合救治分析

中国急救医学 2010年第4期30卷 342-345页

作者：金发光傅恩清谢永宏李王平南岩东孙瑞琳刘伟解放军第四军医大学唐都医院呼吸内科西安710038

目的研究淡水近淹溺患者的临床表现、综合救治方法及患者的预后。方法回顾性分析1999-12～2009-12收住的36例淡水近淹溺患者的临床资料。结果淡水近淹溺的临床表现根据溺水时间、溺水后救治方法和送院时间的不同而表现各异，主要表现为... 详细信息

目的研究淡水近淹溺患者的临床表现、综合救治方法及患者的预后。方法回顾性分析1999-12～2009-12收住的36例淡水近淹溺患者的临床资料。结果淡水近淹溺的临床表现根据溺水时间、溺水后救治方法和送院时间的不同而表现各异，主要表现为不同程度的呼吸困难，严重时可伴有发绀、心动过速、四肢湿冷、血压下降、意识障碍、呼吸窘迫和咳粉红色泡沫样痰等。经综合救治后31例痊愈出院（86．1％）；死亡5例（其中1例因肺部严重感染死亡，2例因呼吸衰竭死亡，2例因多器官功能衰竭死亡），死亡率为13．9％。结论淡水近淹溺病情危重，死亡率高。如能早期及时得到合理有效的综合治疗，生存率较高。溺水后现场的正确急救和迅速护送，尽早机械通气，改善呼吸，早期、短程、足量的激素应用，早期有效的脑复苏，强有力的抗感染，保持水、酸碱、电解质平衡是抢救成功不可缺少的有效措施。

关键词：淹溺机械通气糖皮质激素救治

肺保护性通气对犬海水淹溺型肺水肿的治疗作用

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中国急救医学 2010年第8期30卷 716-719页

作者：金发光李王平南岩东傅恩清谢永宏孙瑞琳刘伟解放军第四军医大学唐都医院呼吸内科西安710038

目的观察肺保护性通气对海水淹溺型肺水肿（PE—SWD）犬肺内气体交换、气道力学、血流动力学及外周血炎性介质的影响，并与常规机械通气进行比较。方法健康成年杂种犬15只，经气管插管灌人海水形成PE—SWD模型后，随机分为3组（n=5）：... 详细信息

目的观察肺保护性通气对海水淹溺型肺水肿（PE—SWD）犬肺内气体交换、气道力学、血流动力学及外周血炎性介质的影响，并与常规机械通气进行比较。方法健康成年杂种犬15只，经气管插管灌人海水形成PE—SWD模型后，随机分为3组（n=5）：阳性对照组（Ⅰ组），常规机械通气治疗组（Ⅱ组），肺保护性通气治疗组（Ⅲ组）（VT8mL／kg＋PEEP8cmH2O）。治疗180min，分别观察各组治疗前后不同时间点动脉血气、呼吸力学、血流动力学以及外周血炎性介质的变化。结果肺保护性通气治疗后海水淹溺型肺水肿犬动脉血气、呼吸力学、血流动力学以及炎性介质指标均较Ⅰ、Ⅱ组明显改善（P〈0．05）。结论肺保护性通气可明显改善PE—SWD犬动脉血气，并能提高肺顺应性、降低气道峰压、降低肺动脉压、减少肺组织损伤。肺保护性通气模式可能是治疗PE—SWD的有效方法，值得临床实践应用。

关键词：犬海水淹溺肺水肿肺保护性通气常规机械通气

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响应曲面法优化紫山药抗氧化酸奶的发酵工艺

中国乳品工业 2017年第8期45卷 57-60页

作者：王彦平刘晓丽孙瑞琳焦镭河南农业职业学院郑州451450

以紫山药和牛乳为原料,研究了紫山药抗氧化酸奶的发酵工艺。以感官评价为指标,在单因素实验的基础上,利用响应曲面对实验方法进行分析,优化紫山药浆添加量、白砂糖添加量、菌种添加量影响了紫山药酸奶发酵效果的工艺参数。建立了响应面... 详细信息

以紫山药和牛乳为原料,研究了紫山药抗氧化酸奶的发酵工艺。以感官评价为指标,在单因素实验的基础上,利用响应曲面对实验方法进行分析,优化紫山药浆添加量、白砂糖添加量、菌种添加量影响了紫山药酸奶发酵效果的工艺参数。建立了响应面回归模型,最终得出紫山药酸奶最佳工艺参数为:紫山药浆添加量28.82%,糖添加量9.23%,发酵剂接种量0.18%。在此条件下制得的紫山药酸奶总抗氧化值为21.03 U/g,具有一定的抗氧化功能,颜色微紫、组织细腻、酸甜可口、风味独特,适合饮用。

关键词：紫山药酸奶响应曲面感官

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难治性中心气道狭窄的综合介入治疗

中华结核和呼吸杂志 2010年第1期33卷 21-24页

作者：金发光傅恩清谢永宏李王平南岩东刘伟孙瑞琳第四军医大学唐都医院西安710038

目的评价5种介入技术联合应用在难治性中心气道狭窄治疗中的价值。方法2001年1月至2008年6月第四军医大学唐都医院呼吸科收住的138例难治性中心气道狭窄患者，经临床、肺功能评价后，根据狭窄的病因、类型、部位、程度、长度以及狭窄远... 详细信息

目的评价5种介入技术联合应用在难治性中心气道狭窄治疗中的价值。方法2001年1月至2008年6月第四军医大学唐都医院呼吸科收住的138例难治性中心气道狭窄患者，经临床、肺功能评价后，根据狭窄的病因、类型、部位、程度、长度以及狭窄远端肺组织和气道功能的不同，选择高频电刀、氩等离子体凝固（APC）、冷冻、支架置入和高压球囊扩张等5种技术中的2种（包括2种）以上方法。138例中高频电刀＋APC治疗42例，高频电刀＋冷冻＋APC治疗54例，高频电刀＋冷冻＋APC＋支架置入治疗29例，冷冻＋APC＋高压球囊扩张治疗13例。达到理想效果1个月后评价气道开放、近期疗效和肺功能改善情况。结果138例患者近期总有效率为100％，气道直径术前为（2．6±1．5）mm，术后为（6．2±1．7）mm；气促评分由术前的（2．4±0．8）减少到术后的（0．7±0．6）。FEV，由术前的（1．8±0．6）％上升到术后的（3．1±0．7）％。23例良性病变（包括4例良性肿瘤，15例结核性狭窄和4例其他肉芽肿狭窄）的患者，3个月随访有5例发生再狭窄需要介入治疗，有效率为78．3％（18／23），6个月随访有3例再狭窄需要介入治疗，有效率为86．9％（20／23），12个月随访23例患者均未见明显狭窄。恶性肿瘤狭窄患者未进行远期随访。结论高频电刀、APC、冷冻、支架置入和高压球囊扩张等5种介入技术联合应用，对难治性中心气道狭窄有较好的效果，该方法并发症少，安全可行，值得临床推广应用。

关键词：高频电刀氩等离子体凝固(APC) 冷冻支架置入高压球囊扩张

缺氧条件下肠毒性大肠杆菌hns和stpA基因敲除以及对LT毒素表达调控的研究

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基因组学与应用生物学 2017年第12期36卷 5128-5134页

作者：鲁曦谢永宏孙瑞琳南岩东金发光第四军医大学唐都医院呼吸内科西安710032

本研究首先利用Red同源重组系统对肠毒性大肠杆菌H10407/Δhns进行stp A基因敲除并进行验证。随后在模拟肠内缺氧环境条件下,研究H10407/Δhns单基因敲除和H10407/Δhns/Δstp A双基因敲除对肠毒性大肠杆菌LT毒素表达的调控影响,并利用... 详细信息

本研究首先利用Red同源重组系统对肠毒性大肠杆菌H10407/Δhns进行stp A基因敲除并进行验证。随后在模拟肠内缺氧环境条件下,研究H10407/Δhns单基因敲除和H10407/Δhns/Δstp A双基因敲除对肠毒性大肠杆菌LT毒素表达的调控影响,并利用hns基因表达载体进行功能回补实验。结果发现,Red重组系统能够高效的完成肠毒性大肠杆菌hns和stp A基因敲除;在体外有氧条件下hns基因敲除有效促进了LT毒素的表达;而在缺氧条件下,hns和stp A双敲除有效促进了LT毒素的表达,但H-NS功能回补的hns单敲除株不能有效抑制LT毒素的表达。结果表明H-NS与Stp A对LT毒素表达调控具有重要作用,而且有氧与缺氧环境中发挥作用存在差异。

关键词：肠毒性大肠杆菌基因敲除 hns基因 stpA基因

miR-496靶向调控CDK1促进肺癌A549细胞凋亡

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基因组学与应用生物学 2020年第7期39卷 3344-3349页

作者：林国辉孙瑞琳王燕杨家盛颜文森广东省第二人民医院广州510317

为探讨miR-496对肺癌A549细胞的增殖和凋亡调控作用及分子机制,本研究通过荧光定量PCR检测miR-496在肺癌和癌旁组织中的表达,记A549细胞转染miR-496 mimics及对照miR-NC;通过CCK8检测miR-496对肺癌A549细胞增殖的影响,采用流式细胞术检... 详细信息

为探讨miR-496对肺癌A549细胞的增殖和凋亡调控作用及分子机制,本研究通过荧光定量PCR检测miR-496在肺癌和癌旁组织中的表达,记A549细胞转染miR-496 mimics及对照miR-NC;通过CCK8检测miR-496对肺癌A549细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测miR-496对A549细胞凋亡的影响,并通过双荧光素酶报告基因检测miR-496的靶基因;采用Western blotting检测miR-496对靶基因CDK1蛋白表达的影响。荧光定量PCR结果显示,肺癌组中的miR-496的相对表达量较癌旁组比较表达显著下调(p<0.01)。CCK8结果显示,miR-496 mimics组细胞在培养24 h和48 h后细胞增值率(A450值)较miR-NC对照组显著降低。流式细胞术检测结果显示,miR-496 mimics组细胞凋亡率较miR-NC对照组显著增加。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-496 mimics与CDK13’UTR WT载体共转染组荧光强度明显低于对照miR-NC与WT载体共转染组。Western blotting检测结果显示,miR-496 mimics组细胞的CDK1蛋白表达量与miR-NC对照组比较显著降低(p<0.01),miR-496 mimics+CDK1组细胞CDK1蛋白表达量与miR-496mimics组比较显著升高(p<0.01)。miR-496能够通过抑制靶基因CDK1的表达,抑制肺癌细胞A549的增殖,促进肺癌A549细胞凋亡。本研究结果有助于了解miR-496和CDK1在肺癌中的作用,为肺癌的治疗提供理论依据和实验基础。

关键词：肺癌 miR-496 细胞凋亡细胞周期蛋白激酶1

葡萄皮渣原花青素酶法提取工艺优化及抗氧化性研究

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北方园艺 2016年第16期 129-132页

作者：陈月英王彦平孙瑞琳杨会会谢克英古洋河南农业职业学院河南郑州451450

以葡萄皮渣为试材,在单因素试验的基础上,采用L9(43)正交实验对葡萄皮渣原花青素的提取工艺进行了优化,并对纯化后的葡萄皮渣原花青素的抗氧化性进行了研究。结果表明:葡萄皮渣原花青素提取的最佳工艺参数为纤维素酶添加量0.4%,果胶酶... 详细信息

以葡萄皮渣为试材,在单因素试验的基础上,采用L9(43)正交实验对葡萄皮渣原花青素的提取工艺进行了优化,并对纯化后的葡萄皮渣原花青素的抗氧化性进行了研究。结果表明:葡萄皮渣原花青素提取的最佳工艺参数为纤维素酶添加量0.4%,果胶酶添加量0.8%,酶解时间90min,酶解温度70℃。在此条件下,葡萄皮渣原花青素的得率为11.08mg·g-1。体外抗氧化试验结果表明,紫甘蓝原花青素表现出明显的抗氧化能力,对DPPH自由基和羟基自由基具有较好的清除能力,抗氧化能力优于维生素C。

关键词：葡萄皮渣原花青素酶法辅助提取抗氧化

葡萄皮渣原花青素微波辅助提取工艺的优化及其抗氧化活性研究

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北方园艺 2016年第11期 123-126页

作者：陈月英王彦平孙瑞琳谢克英杨会会古洋河南农业职业学院食品工程学院河南郑州451450

以葡萄皮渣为试材,采用微波辅助提取方法和体外抗氧化试验,研究了葡萄皮渣中原花青素提取工艺和体外抗氧化活性。结果表明:最佳工艺为乙醇体积分数60%(v/v)、料液比1∶20g·mL^(-1)、微波时间90s、微波功率800W。在此条件下,原花青素提... 详细信息

以葡萄皮渣为试材,采用微波辅助提取方法和体外抗氧化试验,研究了葡萄皮渣中原花青素提取工艺和体外抗氧化活性。结果表明:最佳工艺为乙醇体积分数60%(v/v)、料液比1∶20g·mL^(-1)、微波时间90s、微波功率800W。在此条件下,原花青素提取率为9.12mg·g^(-1)。体外抗氧化试验中,葡萄皮渣原花青素提取物表现明显的抗氧化能力,对DPPH自由基(DPPH·)和羟基自由基(·OH)具有较好的清除能力,但抗氧化能力比维生素C弱。

关键词：葡萄皮渣原花青素微波辅助提取抗氧化性