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Ⅱ型胶原蛋白对兔去分化软骨细胞再分化的作用

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中国修复重建外科杂志 2010年第10期24卷 1244-1248页

作者：孙明林朱雷吕丹武警医学院附属医院骨科天津300162

目的Ⅱ型胶原蛋白是软骨细胞表达的特征性蛋白,随着软骨细胞的不断传代培养,Ⅱ型胶原蛋白表达逐渐减少。通过观察Ⅱ型胶原蛋白对去分化兔关节软骨细胞再分化的作用,为软骨细胞更好地应用于软骨组织工程奠定实验基础。方法无菌条件下取7... 详细信息

目的Ⅱ型胶原蛋白是软骨细胞表达的特征性蛋白,随着软骨细胞的不断传代培养,Ⅱ型胶原蛋白表达逐渐减少。通过观察Ⅱ型胶原蛋白对去分化兔关节软骨细胞再分化的作用,为软骨细胞更好地应用于软骨组织工程奠定实验基础。方法无菌条件下取7月龄新西兰大耳白兔双侧膝关节分离培养软骨细胞,体外单层传代培养至第7代,分别为P1、P2、P3、P4、P5、P6、P7。采用RT-PCR、实时定量PCR、1,9二甲基亚甲蓝(1,9-dimethylmethyleneblue,DMMB)法检测其表型维持情况。根据观察结果,选择去分化的软骨细胞(P7),并给予不同浓度(0、0.5%、1.0%、1.5%)Ⅱ型胶原蛋白刺激。采用RT-PCR及实时定量PCR检测各浓度组去分化软骨细胞再分化的程度,DMMB法检测糖胺聚糖分泌情况。结果 P1～P7细胞糖胺聚糖含量分别为(12.20±0.17)、(11.20±0.24)、(11.18±0.16)、(10.89±0.50)、(8.73±0.19)、(9.39±0.32)、(8.18±0.20)μg,P2、P3、P4间细胞糖胺聚糖含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);其余各代次细胞糖胺聚糖含量比较,差异均有统计学意义(P0.05);Ⅱ型胶原及蛋白聚糖比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。0、0.5%、1.0%、1.5%浓度组的P7软骨细胞糖胺聚糖含量分别为(8.20±0.16)、(14.61±0.33)、(13.93±0.25)、(19.59±0.46)μg,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随着Ⅱ型胶原蛋白浓度的升高,各浓度组细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA表达逐渐增强,Ⅰ型胶原表达减弱;不同浓度组中Ⅰ、Ⅱ型胶原及蛋白聚糖mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Ⅱ型胶原蛋白可促进兔去分化软骨细胞再分化与活化。

关键词：软骨细胞 Ⅱ型胶原去分化再分化兔

个性定制人工半膝关节的快速设计制造与临床试用(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第52期12卷 10393-10396页

作者：孙明林武装警察部队医学院附属医院骨科天津市300162

背景:半膝关节置换中假体的设计与制造只有针对患者损伤的具体情况进行个体定制,才能实现假体关节面的良好匹配,这是传统的设计制造手段难以完成的。目的:建立以计算机辅助设计和快速成型技术为核心的人工半膝关节个体定制化设计方案和... 详细信息

背景:半膝关节置换中假体的设计与制造只有针对患者损伤的具体情况进行个体定制,才能实现假体关节面的良好匹配,这是传统的设计制造手段难以完成的。目的:建立以计算机辅助设计和快速成型技术为核心的人工半膝关节个体定制化设计方案和快速制造方法,通过临床试用评估假体设计制造技术和半膝关节置换的应用价值。设计、时间及地点:假体个体定制化设计及临床试用,于2002-01/2005-12在解放军第四军医大学附属西京医院,西安交通大学先进制造技术研究所,西安交通大学机械学院材料与力学国家重点实验室完成。对象:患者为男性,14岁,因右股骨下段骨肉瘤术后1年复发入院。经讨论及家属同意,拟行肿瘤切除、大段异体骨移植及定制化半膝关节面置换。方法:以患者CT扫描和三维重建等临床影像学资料为数据源,利用图像处理技术获取关节形状的数据,采用NURBS算法在Surface软件下重构出关节曲面,在计算机上完成半膝关节假体及其辅助装置的三维设计。采用快速成型技术制作出原型并通过精密铸造等手段完成实体制造。利用瞄准器将假体装入异体骨,锁定远端后置入患肢。主要观察指标:包括在Surfacer软件下对所构关节面的误差分析,关节假体及辅助装置加工后的组装情况,假体置换后患者膝关节X射线片检查结果、关节间隙情况及关节屈伸活动度。结果:全部设计和制造过程可在1周内完成。所设计的关节面计算机辅助设计模型与原始数据的最大误差﹤1mm,在屈、伸、旋转等状态下与胫骨关节面匹配良好,应力分布均匀。通过快速成型和精密铸造技术制作的假体及其辅助装置符合设计要求,可与大段异体骨装配。置入患膝后假体位置准确,能够实现与对侧胫骨关节面的良好匹配,关节间隙正常。置换后患者无不良反应,可早期功能锻炼。随访1年,患者膝关节功能恢复满意,未见关节脱位、慢性疼痛等。结论:通过计算机辅助设计和快速成型技术制造的个体定制化半膝关节在特定病例中具有一定的临床实用价值。

关键词：计算机辅助设计快速成型关节成形术,膝假体

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生物活性骨的新型制备方法研究

机械工程学报 2003年第11期39卷 144-148页

作者：陈中中李涤尘卢秉恒孙明林西安交通大学机械工程学院西安710049

提出了一种制备人工生物活性骨的新方法并建立了相应的工程化制造系统。利用该系统所制作出的人工骨外形与被替代骨一致,内部具有模拟真实骨组织微管系统结构,并通过复合骨生长因子使其具有生物活性,弥补了传统生物填充材料由于缺乏活... 详细信息

提出了一种制备人工生物活性骨的新方法并建立了相应的工程化制造系统。利用该系统所制作出的人工骨外形与被替代骨一致,内部具有模拟真实骨组织微管系统结构,并通过复合骨生长因子使其具有生物活性,弥补了传统生物填充材料由于缺乏活性而无法实现骨诱导的缺陷。动物试验的结果表明,所制作出的人工骨内部哈佛管与浮克曼管的仿真结构为新生骨细胞的三维并行生长提供了理想的空间条件,有效地促进了人工骨的快速活化。

关键词：快速成形人工骨生物活性工程化制造系统

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促进静电纺丝支架中细胞渗透生长的研究进展

中国修复重建外科杂志 2013年第2期27卷 219-222页

作者：安博孙铭泽孙明林武警后勤学院附属医院骨二科天津300162

目的综述改进静电纺丝(简称电纺)技术促进支架内细胞渗透生长的研究进展。方法查阅近年有关改进电纺技术促进支架内细胞渗透生长的相关文献,对相关技术方法和促进支架内细胞渗透生长的效果进行回顾及综合分析。结果改进方法包括电纺参... 详细信息

目的综述改进静电纺丝(简称电纺)技术促进支架内细胞渗透生长的研究进展。方法查阅近年有关改进电纺技术促进支架内细胞渗透生长的相关文献,对相关技术方法和促进支架内细胞渗透生长的效果进行回顾及综合分析。结果改进方法包括电纺参数调节、电纺支架加工修饰、细胞-支架复合物动态培养和其他方法等,但效果有限,仍需进一步优化。结论细胞在支架中的渗透生长在组织工程研究中意义重大,电纺技术应用瓶颈在于其致密排列的纤维和过小的腔隙孔径,限制了支架内细胞的渗透生长,多种改进技术的联合应用将是解决这一难题的方法。

关键词：组织工程静电纺丝技术支架材料渗透生长

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美国肠道寄生虫感染问题的现状

国际医学寄生虫病杂志 1995年第3期22卷 142-143页

作者：孙明林

受移民、艾滋病患者及入托儿童增多的影响,美国肠道寄生虫感染的流行状况发生了改变。为了解美国肠道寄生虫的流行现状,作者分析了1987年和1991年全美49个州公共卫生实验室的粪便检查结果。 1987年粪便标本216275份,查到一种以上寄生虫... 详细信息

受移民、艾滋病患者及入托儿童增多的影响,美国肠道寄生虫感染的流行状况发生了改变。为了解美国肠道寄生虫的流行现状,作者分析了1987年和1991年全美49个州公共卫生实验室的粪便检查结果。 1987年粪便标本216275份,查到一种以上寄生虫者有43150份(20.0％),1991年178786份标本中寄生虫阳性者35157份(19.7％)。1987年和1991年粪检阳性率小于10％的州分别有8个和6个,10％—25％者有28个和27个州,超过25％的有13个

关键词：检出率寄生虫感染寄生虫病肠道鞭毛虫原虫美国美利坚合众国北美洲

不同参数滚压模式对兔BMSCs向软骨细胞分化促进作用的研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第1期27卷 89-94页

作者：孙明林朱雷吕丹张春秋武警后勤学院附属医院骨科天津300162 天津理工大学机械工程学院

目的观察在不同滚压参数下,滚压载荷生物反应器对BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化的作用。方法分离2.5月龄新西兰兔BMSCs,培养至第3代后与低熔点琼脂糖复合成凝胶块,并在自制模具中形成直径4 mm、高4 mm的圆柱形BMSCs-... 详细信息

目的观察在不同滚压参数下,滚压载荷生物反应器对BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化的作用。方法分离2.5月龄新西兰兔BMSCs,培养至第3代后与低熔点琼脂糖复合成凝胶块,并在自制模具中形成直径4 mm、高4 mm的圆柱形BMSCs-琼脂糖复合体。将样本分别在0.4 Hz、3 h/d基本参数下比较压缩量10%、20%、30%(分别为A1、A2、A3组),以及0.4 Hz、20%压缩量基本参数下比较20 min、3 h、12 h滚压时间(分别为B1、B2、B3组)对BMSCs向软骨细胞分化的作用,以静态培养作为对照组。在培养24 h及7、14、21 d时取各组标本进行死活细胞检测、实时定量PCR检测、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量检测及组织学染色观察。结果死活细胞检测:14、21 d时,A1、A2组活细胞比率均显著高于A3组,B1、B2组活细胞比率均显著高于B3组,差异均有统计学意义(P0.05)。GAG含量检测:14、21 d时,A1、A2组GAG含量均显著高于对照组和A3组,B1、B2组GAG含量也显著高于对照组和B3组,差异均有统计学意义(P<0.05);21 d时A1、A2组间差异均有统计学意义(t=2.830,P=0.027)。组织学观察:21 d时,A2组和B2组出现明显蓝染,可见软骨陷窝样结构;而A1、A3组和B1、B3组蓝染效果较差,分布稀少。结论滚压载荷生物反应器在0.4 Hz、20%压缩量、3 h滚压时间参数下,能更有效地促进BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化。

关键词： BMSCs 软骨细胞生物反应器滚压载荷兔

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疟疾对马拉维家庭的经济影响

国际医学寄生虫病杂志 1995年第1期22卷 37-38页

作者：孙明林

疟疾是非洲马拉维最重要的公共卫生问题之一,占门诊病人数的1/3以上,住院病人的40％以上。它给社会带来沉重的经济负担,消耗健康中心21％—44％的财力,并使1％—3％劳动日丧失。但疟疾对家庭显著的经济影响尚无人注意。本文调查不同收... 详细信息

疟疾是非洲马拉维最重要的公共卫生问题之一,占门诊病人数的1/3以上,住院病人的40％以上。它给社会带来沉重的经济负担,消耗健康中心21％—44％的财力,并使1％—3％劳动日丧失。但疟疾对家庭显著的经济影响尚无人注意。本文调查不同收入来源和水平的家庭用于疟疾预防和治疗的直接费用及因患疟疾损失的劳动时间所造成的间

关键词：马拉维疟疾内科杂病收入水平经济

磷酸钙骨水泥作为骨形成蛋白载体修复节段性骨缺损及相关研究

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中华骨科杂志 2003年第2期23卷 114-120页

作者：孙明林胡蕴玉西安交通大学先进制造技术研究所 710049 第四军医大学西京医院骨科

目的制备CPC/BMP复合人工骨,通过动物实验研究其对骨缺损的修复作用及相关问题,探讨临床应用的可能性。方法参考有关文献方法合成CPC,并将其作为BMP的载体制成CPC/BMP复合物,植入兔桡骨15mm骨缺损处,术后不同时间处死动物。通过生物力... 详细信息

目的制备CPC/BMP复合人工骨,通过动物实验研究其对骨缺损的修复作用及相关问题,探讨临床应用的可能性。方法参考有关文献方法合成CPC,并将其作为BMP的载体制成CPC/BMP复合物,植入兔桡骨15mm骨缺损处,术后不同时间处死动物。通过生物力学测定、组织学染色分析、电镜扫描及X射线电子能谱分析、X线摄片、无机质含量测定以及骨密度测量等手段观察新骨形成和材料降解情况。同时以单纯的CPC及空白组作为对照研究,综合评价CPC/BMP对骨缺损的修复能力及对机体的影响。结果术后CPC/BMP和CPC两组动物均无毒性反应。随着时间的延长,血清中碱性磷酸酶浓度逐渐升高,尤以CPC/BMP组显著,提示CPC/BMP复合物和单纯的CPC均可以促进新骨形成,前者新骨形成量大,骨修复能力明显好于后者。CPC/BMP植入2周时可见大量间充质细胞分化,在材料与骨端之间出现一层软骨细胞,4周时软骨细胞向编织骨分化,16周时板层骨长入材料并与之相互分割包裹,24周时骨缺损初步修复,新骨密度明显高于CPC组,说明BMP的加入不仅有效地促进了新骨的形成,同时也加速了新骨的钙化。24周组标本生物力学测定结果表明,CPC/BMP组力学指标接近正常,与CPC组相比差异有显著性意义。无机质含量测定结果表明,新骨形成的同时伴随材料的降解,CPC组材料降解速度缓慢。

关键词：磷酸钙骨水泥骨形成蛋白载体节段性骨缺损骨形态发生蛋白质类羟基磷灰石类骨移植

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具有钛框架增强结构人工骨的降解规律

西安交通大学学报 2005年第1期39卷 9-12页

作者：刘亚雄李涤尘卢秉恒孙明林王臻王珏西安交通大学生物医学信息工程教育部重点实验室西安710049 西安交通大学机械制造系统工程国家重点实验室西安710049 第四军医大学西京医院西安710023

为了解决磷酸钙骨水泥(CPC)复合骨形态发生蛋白(BMP)植入体强度低的缺陷,提出了一种钛框架-CPC-BMP复合结构的人工骨,并通过长达半年的动物实验及后续分析研究其降解规律,得出了这种植入体降解的动力学模型.研究表明,CPC在植入动物体内... 详细信息

为了解决磷酸钙骨水泥(CPC)复合骨形态发生蛋白(BMP)植入体强度低的缺陷,提出了一种钛框架-CPC-BMP复合结构的人工骨,并通过长达半年的动物实验及后续分析研究其降解规律,得出了这种植入体降解的动力学模型.研究表明,CPC在植入动物体内后,其孔隙率按对数规律递增,靠近植入体表面的孔隙率明显低于其内部的孔隙率,植入体与骨接壤的端部界面因大块降解而呈现出中凸状的推进曲线,钛框架上小孔处的孔隙率明显高于无孔处的孔隙率.钛框架能有效提高植入体的整体强度,同时对CPC的整体降解速度没有明显影响,因此该复合植入体在大段骨修复中具有很高的临床应用价值.这些结论也为设计钛框架的形状提供了实验依据.

关键词：磷酸钙骨水泥骨形态发生蛋白孔隙率降解钛框架