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作者：孙帅军南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过观察GM诱导大鼠肾损伤及修复过程中自噬水平的变化及其与肾损伤程度的相关性,探讨自噬在肾损伤期及修复期内可能发挥的作用。方法:1.健康SD大鼠随机分为:空白对照组(control,Con),庆大霉素组(gentamicin,GM)和雷帕霉素组(rapam... 详细信息

目的:通过观察GM诱导大鼠肾损伤及修复过程中自噬水平的变化及其与肾损伤程度的相关性,探讨自噬在肾损伤期及修复期内可能发挥的作用。方法:1.健康SD大鼠随机分为:空白对照组(control,Con),庆大霉素组(gentamicin,GM)和雷帕霉素组(rapamycin,RAP)。对照组大鼠腹腔注射生理盐水,其他各组大鼠每天腹腔注射GM 100 mg·kg-1,连续7d。同时RAP组大鼠每天灌胃RAP 1.5 mg·kg-1,连续17d。分别在给药2d,5 d,7d,10d,12d,15 d,17d后采集动物肾、血、尿液等样本。观察各组大鼠肾指数变化水平;检测血清中肌酐(serum creatinine,Cre)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);收集24h尿液,检测尿液中肾损伤分子1(Kidney injury molecule1,KIM-1)、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(N-acetyl-beta-D-glucosamidase,NAG)表达水平,Western blot检测肾组织中各时间点微管相关蛋白轻链 3(Microtubule-associated protein light chain 3,LC3 Ⅱ)、自噬相关蛋白Beclin1及P62蛋白的表达情况;免疫组织化学检测肾组织中LC3 Ⅱ蛋白的表达及分布情况;采用Pearson相关性分析方法评判LC3 Ⅱ、P62与大鼠肾损伤指标KIM-1、NAG的相关性;苏木精-伊红(HE)染色观察分析各时间点肾组织病理变化;透射电镜观察分析肾组织的超微结构。***(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00 mg ml-1)、RAP(1.56、3.13、6.25、12.50、25.00、50.00μM)、3-MA(0.08、0.16、0.31、0.62、1.25、2.5mM),分别作用于 HK-2 细胞6h、12h、24h,MTT法检测GM、RAP、3-MA对HK-2细胞增殖抑制情况以确定合适的药物浓度;动态细胞成像及分析系统考察GM(0.50 mg·m l-1)、RAP(625μM)、3-MA(0.16mM)作用24h过程中HK2细胞增殖情况及形态的变化;Western blot、免疫荧光检测GM(0.50mg·ml-1)、RAP(6.25μM)、3-MA(0.16mM)作用 HK-2 细胞 6h、12h 及 24h 后,HK-2细胞中LC3Ⅱ、Beclin1蛋白的表达情况。结果:***连续腹腔注射7d后停止给药,GM组和RAP组中肾指数、血清Cre、BUN和尿液中KIM-1、NAG等水平在2-10d持续升高,而在10-17d时间段,均出现不同程度降低,且在部分时间点与表达水平最高时比较有显著差异,此外RAP组中部分时间点血清Cre、BUN和尿液中KIM-1、NAG水平显著低于GM组;病理结果显示,对照组大鼠肾脏未见明显异常,GM组和RAP组在2-10d时间段细胞脱落、坏死数目及炎细胞浸润逐渐增多,而在10-17d时间段,损伤程度均出现不同程度降低;Pearson相关分析表明,GM组KIM-1、NAG与LC3Ⅱ表达水平呈正相关,而与P62表达水平呈负相关;Western结果显示,GM组中LC3Ⅱ与Beclin1在2-10d显著性升高,P62显著降低,而在10-17d过程中,P62维持在高表达水平,LC3 Ⅱ与之相反。RAP组中,在2-10d LC3 Ⅱ表现出一定水平的提高,P62与之相反,在10-17d LC3 Ⅱ表达水平持续增强;免疫组化结果显示,GM组和RAP组在2-10d过程中LC3均显著表达,而在10-17d过程中,GM组出现一定程度降低,而RAP组中LC3维持高表达水平。此外,电镜结果显示,在7d时GM组自噬体数目较多,而在RAP组中,7d和17d自噬体数目较多,同时损伤程度明显减轻。***结果显示,GM、RAP及3-MA分别作用HK-2细胞6、12、24h后,选择GM、RAP及3-MA的合适浓度分别为0.5mg·ml-1、6.25μM和0.16mM。GM作用于HK2细胞后,分别应用自噬诱导剂RAP和自噬抑制剂3-MA干预,观察6、12、24h自噬水平变化。Western结果显示GM与RAP联用后,在6、12、24h,细胞内LC3Ⅱ及Beclin1表达均显著增多,GM与3-MA联用12h后,细胞内LC3 Ⅱ及Beclin1表达被抑制;免疫荧光显示RAP作用细胞24h后,细胞内LC3和Beclin1水平显著增多,而3-MA作用细胞24h后,细胞内LC3和Beclin1表达水平较低;动态细胞成像及分析系统观察发现GM作用下大部分细胞显著皱缩,体积缩小变圆,而加入RAP后细胞皱缩比例及漂浮细胞数目均较GM组略小,而加入3-

关键词：庆大霉素自噬肾损伤修复雷帕霉素

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丹酚酸B保护大鼠缺血心肌与炎症小体NLRP3表达的相关性研究

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中国药理学通报 2016年第10期32卷 1383-1388页

作者：王新宇王曼孙帅军陈叶香蒋宝平许立南京中医药大学药学院江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023

目的探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌缺血损伤的保护作用及炎症小体NLRP3(NLR family,pyrin domain containing 3)相关蛋白的表达对心肌缺血的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组、模... 详细信息

目的探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌缺血损伤的保护作用及炎症小体NLRP3(NLR family,pyrin domain containing 3)相关蛋白的表达对心肌缺血的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组、模型组和Sal B低、中、高剂量组。Sal B各剂量组腹腔注射给予Sal B 5、10、15 mg·kg^(-1),模型组和对照组腹腔注射等体积生理盐水,各组连续给药7 d;从d 5开始,皮下多点注射ISO(30 mg·kg^(-1)),连续2 d造模。末次造模24 h后观察Sal B对大鼠心电图、血清中心肌酶、氧化指标和炎症因子含量、心肌组织中炎症小体NLRP3相关蛋白表达及形态学的影响。结果 Sal B可以明显减轻心肌组织坏死和炎细胞浸润,明显降低心电图中T波值(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,Sal B各剂量组的肌酸激酶(creatine kinase,CK)值、谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT)值和白细胞介素1-β(interleukin 1-β,IL-1β)值,Sal B中、高剂量组的丙二醛(malonaldehyde,MDA)值及中剂量组的乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)值均明显降低(P<0.05,P<0.01);血清Sal B中、高剂量组的总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)值明显升高(P<0.05,P<0.01);Sal B给药组的心脏组织中NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)和IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 Sal B具有抗ISO所致大鼠心肌缺血作用,该作用机制可能与调控炎症小体NLRP3相关蛋白表达,抑制炎症因子的生成有关。

关键词：丹酚酸B NLRP3 异丙肾上腺素心肌缺血白细胞介素1-β 心肌酶

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基于响应面法的超低温球阀PCTFE阀座结构优化设计分析

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机械强度 2023年第5期45卷 1166-1173页

作者：张希恒鱼荣芳张弛周义孙帅军兰州理工大学石油化工学院兰州730050 博雷(中国)控制系统有限公司杭州311231

为优化超低温下软密封球阀阀座的结构强度,提出以最大等效应力为优化目标,将响应面法与遗传算法相结合的设计方法。研究低温球阀阀座的材料——聚三氟氯乙烯(Polytrifluorochloroe-thylene,PCTFE)在不同工况下的应力-应变关系,得出抗拉... 详细信息

为优化超低温下软密封球阀阀座的结构强度,提出以最大等效应力为优化目标,将响应面法与遗传算法相结合的设计方法。研究低温球阀阀座的材料——聚三氟氯乙烯(Polytrifluorochloroe-thylene,PCTFE)在不同工况下的应力-应变关系,得出抗拉强度是判断PCTFE强度的唯一重要依据。采用中心组合设计方法,建立应力关于结构参数的响应面模型,分析参数间的交互效应。基于响应面结合遗传算法得出阀座的最佳结构参数组合。研究结果表明,阀座最大等效应力随着阀座厚度、阀座密封面内外径的增大均有减小趋势,阀座密封面的内径对最大等效应力的影响最显著。

关键词：聚三氟氯乙烯(PCTFE) 参数优化响应面法遗传算法

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火电机组烟水复合回热系统节能解析

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热能动力工程 2018年第1期33卷 6-11页

作者：蒋晓锋曹雷鸣闫百涛孙帅军上海发电设备成套设计研究院上海200240 辽宁清河发电有限责任公司辽宁铁岭112003 国家电投东北电力有限公司辽宁沈阳110180

针对采用新型烟气余热深度利用技术的烟水复合回热系统，以600MW超临界汽轮机组为例，运用热量平衡、火用平衡两种手段进行了节能分析。优化系统设置了空预器烟气旁路，布置高、低压换热器加热给水,设置回收低品位余热的前置空预器。通... 详细信息

针对采用新型烟气余热深度利用技术的烟水复合回热系统，以600MW超临界汽轮机组为例，运用热量平衡、火用平衡两种手段进行了节能分析。优化系统设置了空预器烟气旁路，布置高、低压换热器加热给水,设置回收低品位余热的前置空预器。通过定功率全系统热力计算表明，优化系统深度利用锅炉排烟余热，主蒸汽流量减少，供电标准煤耗率减小5．13g／（kW·h）。优化系统锅炉传热炯损失、回热加热器炯损失减少。机组总火用损失减少．效率提高。工程应用表明，改造后机组实际供电标准煤耗降低了6．78g／（kW·h）。

关键词：烟水复合回热烟气旁路前置空预器系统热力计算炯分析

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狼疮清颗粒对系统性红斑狼疮的动物实验研究

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中国临床药理学杂志 2016年第12期32卷 1125-1128页

作者：孙帅军梁涛陆叶黄小玲耿珊马丽杰许立南京中医药大学药学院南京210023

目的研究狼疮清颗粒对豚鼠皮肤血管炎症和自发性狼疮MRL/lpr小鼠抗体、补体、免疫球蛋白和脾淋巴细胞上清液抗体水平的影响。方法豚鼠皮肤血管炎症实验:用免疫血清刺激豚鼠背部皮肤,随后尾静脉注射0.5%伊文思蓝,背部出现蓝染皮肤即为模... 详细信息

目的研究狼疮清颗粒对豚鼠皮肤血管炎症和自发性狼疮MRL/lpr小鼠抗体、补体、免疫球蛋白和脾淋巴细胞上清液抗体水平的影响。方法豚鼠皮肤血管炎症实验:用免疫血清刺激豚鼠背部皮肤,随后尾静脉注射0.5%伊文思蓝,背部出现蓝染皮肤即为模型成功。豚鼠随机分别为模型组、对照组、3个剂量(狼疮清颗粒,18.27,9.13,4.56 g·kg^(-1))实验组,连续灌胃8 d后,取蓝染皮肤浸泡液测定其光密度(OD)值。狼疮小鼠实验:MRL/lpr小鼠可自发形成红斑狼疮模型,将小鼠随机分为空白组、模型组、对照组、3个剂量(狼疮清颗粒,45.67,22.83,11.42 g·kg^(-1))实验组,连续灌胃6周后,对各组小鼠取血。用酶联免疫吸附法检测抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗核抗体(ANA)、补体3(C3)、补体4(C4)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)水平。在小鼠脾淋巴细胞实验中,将制备的狼疮清颗粒含药血清作用小鼠淋巴细胞24 h,检测细胞上清液抗dsDNA和ANA水平。结果豚鼠:与模型组比较,大剂量实验组能够降低皮肤浸泡液OD值(P<0.05)。自发狼疮MRL/lpr小鼠:与模型组比较,大剂量实验组显著降低小鼠血清dsDNA抗体水平[(47.25±6.05)vs(37.51±3.26)ng·L^(-1)]和Ig M水平,而明显升高C3水平(P<0.05,P<0.01);中剂量实验组能显著降低IgM水平、而明显升高C3水平(P<0.05,P<0.01)。小鼠淋巴细胞:给予20%含药血清的淋巴细胞上清液中,dsDNA水平明显降低(P<0.05)。结论狼疮清颗粒治疗系统性红斑狼疮疾病,可能与调节机体的自身抗体、补体、免疫球蛋白等免疫功能有关。

关键词：狼疮清颗粒系统性红斑狼疮抗体补体免疫球蛋白

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补心软脉颗粒对麻醉犬急性心肌缺血的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2015年第10期21卷 99-103页

作者：黄磊张雯孙帅军陈叶香蒋宝平严冬许立南京中医药大学中药药效与安全性评价重点实验室南京210023

目的:研究补心软脉颗粒对实验性犬急性心肌缺血的保护作用。方法:将36只实验犬随机分成补心软脉颗粒低、中、高剂量(7.33,14.67,29.33 g·kg-1)组、心元胶囊组、假手术组和模型组,除假手术组外各组均通过手术结扎犬冠状动脉左前降支(LAD... 详细信息

目的:研究补心软脉颗粒对实验性犬急性心肌缺血的保护作用。方法:将36只实验犬随机分成补心软脉颗粒低、中、高剂量(7.33,14.67,29.33 g·kg-1)组、心元胶囊组、假手术组和模型组,除假手术组外各组均通过手术结扎犬冠状动脉左前降支(LAD)造成急性心肌梗死模型,各组动物于手术结扎后经十二指肠给药。观察各组犬心电图、心脏冠脉流量、心膜电位和血清酶的变化;硝基蓝四唑(NBT)组织化学染色观察心肌梗死面积;血气分析仪测量动静脉含氧量。结果:模型组心肌耗氧量、心肌梗死面积、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性均高于假手术组(P<0.05,P<0.01);补心软脉颗粒中、高剂量组成剂量依赖性可显著地降低心肌缺血犬的心肌耗氧量,缩小心肌梗死范围及梗死程度,降低血清CK和LDH的活性,增加冠脉流量(P<0.05,P<0.01),且补心软脉颗粒高剂量组上述指标的变化较其他各组更为明显(P<0.01)。结论:补心软脉颗粒通过减少心肌耗氧量,降低梗死面积,对缺血心肌具有保护作用。

关键词：补心软脉颗粒心肌耗氧量心肌梗死血清酶冠脉流量

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右归丸干预肾间质纤维化的作用机制研究

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中药新药与临床药理 2016年第1期27卷 23-27页

作者：陈叶香许立孙帅军王曼王新宇蒋宝平余黎喻斌南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的探讨右归丸对腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的干预作用。方法取SD大鼠50只,随机分为空白对照组,模型组,右归丸低、中、高(2.25,4.50,9.00 g·kg^(-1))剂量组,每组10只。每天上午8点各组给予腺嘌呤... 详细信息

目的探讨右归丸对腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的干预作用。方法取SD大鼠50只,随机分为空白对照组,模型组,右归丸低、中、高(2.25,4.50,9.00 g·kg^(-1))剂量组,每组10只。每天上午8点各组给予腺嘌呤(0.15 g·kg^(-1))灌胃制备RIF模型,空白对照组给予等量生理盐水,下午17点右归丸各组灌胃给予相应剂量的右归丸,给药体积均为10 m L·kg^(-1),空白对照组和模型组给予等量生理盐水,连续15 d。给药期间定期测定大鼠体质量,实验结束称取各组大鼠肾质量并计算肾指数,肾组织进行病理HE染色,测定血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),炎性因子白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低(P0.05);但可减轻大鼠肾质量、肾指数(P<0.01),显著降低SCr、BUN水平(P<0.05),对肾小管重度坏死萎缩、炎细胞浸润及纤维结缔组织增生均有不同程度的改善作用,有显著增加SOD、降低MDA的作用(P<0.05),能够显著降低炎性因子IL-1β和IL-6的水平(P<0.05,P<0.01)。结论右归丸对腺嘌呤诱导的RIF有明显的改善作用。

关键词：右归丸肾间质纤维化腺嘌呤抗氧化抗炎

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“四大检察”协同发力保障农民工合法权益

“四大检察”协同发力保障农民工合法权益

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山西法治报

作者：孙帅军魏巍

背景提示检察机关作为根治欠薪专项行动的成员单位,积极落实中央和上级决策部署,以宽严相济、认罪认罚从宽等政策制度为抓手,着力推动解决“辛苦一整年,岁末讨薪难”问题。多元化拓展追缴欠薪渠道,督促欠薪企业和个人多方筹措资金、支... 详细信息

背景提示检察机关作为根治欠薪专项行动的成员单位,积极落实中央和上级决策部署,以宽严相济、认罪认罚从宽等政策制度为抓手,着力推动解决“辛苦一整年,岁末讨薪难”问题。多元化拓展追缴欠薪渠道,督促欠薪企业和个人多方筹措资金、支付报酬,切实维护广大普通劳动者的合法权......

关键词：农民工合法权益

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白藜芦醇改善阿霉素性心衰的机制研究

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中药药理与临床 2015年第3期31卷 24-28页

作者：黄磊许立张雯孙帅军陈叶香蒋宝平南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对阿霉素(doxorubicine,Dox)诱导大鼠慢性心衰的影响及其作用机制。方法:取SD雄性大鼠60只,通过使用剂量递增的方法(1,2,3 mg/kg)腹腔注射阿霉素,成功建立慢性心衰模型。将心衰大鼠随机分为地高辛(... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对阿霉素(doxorubicine,Dox)诱导大鼠慢性心衰的影响及其作用机制。方法:取SD雄性大鼠60只,通过使用剂量递增的方法(1,2,3 mg/kg)腹腔注射阿霉素,成功建立慢性心衰模型。将心衰大鼠随机分为地高辛(阳性药)和白藜芦醇组(浓度分别为25.0,12.5,6.25mg/kg),另设空白对照组及模型组。各组均经过灌胃给药(20 ml/kg),给药3周后测定各组大鼠血流动力学参数左室收缩压(LVSP)、左室内压上升及下降最大速率(+dp/dtmax),WST微板法和TBA法检测心脏组织超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及总巯基的含量。Masson染色明确心肌间质胶原纤维增生情况,免疫组织化学方法观察心肌8-羟基脱氧鸟苷的表达。Western免疫印迹检测SIRT1蛋白表达情况。结果:与模型组比较,白藜芦醇25mg/kg浓度时明显改善大鼠心肌间质胶原纤维增生,降低8-羟基脱氧鸟苷大量表达,并且增加大鼠血流动力学LVSP、(+)dp/dtmax参数,增加心肌超氧化物岐化酶、总巯基的含量。蛋白免疫印迹显示白藜芦醇组剂量依赖性明显上调SIRT1蛋白表达。结论:白藜芦醇可减轻阿霉素诱导心衰大鼠的氧化损伤,这种保护可能是通过上调SIRT1来实现的。

关键词：白藜芦醇阿霉素心衰氧化 SIRT1

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复方龙垂草水煎剂对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用

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中药新药与临床药理 2015年第3期26卷 280-284页

作者：张雯黄磊陈叶香孙帅军蒋宝平许立南京中医药大学江苏南京210023 江苏省中药药效与安全评价实验室江苏南京210023

目的研究复方龙垂草水煎剂对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制初探。方法预给药7 d后,于末次给药后1 h采用腹腔注射的方法注射0.2%CCl4复制小鼠急性肝损伤模型,16 h后取血清检测血清中丙氨酸转移酶(ALT)、谷草转氨酶(A... 详细信息

目的研究复方龙垂草水煎剂对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制初探。方法预给药7 d后,于末次给药后1 h采用腹腔注射的方法注射0.2%CCl4复制小鼠急性肝损伤模型,16 h后取血清检测血清中丙氨酸转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;取肝脏计算肝指数,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)指标变化,用Western Blot法检测肝脏组织中Caspase-3蛋白表达情况。结果复方龙垂草水煎剂可降低血清中ALT、AST(均P<0.01)活性,抑制肝组织中MDA(P<0.05)上升,上调SOD(P<0.01),抑制凋亡蛋白Caspase-3表达。结论复方龙垂草水煎剂对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的保护作用,其作用机制与抑制转氨酶及脂质过氧化有关,对CCl4诱导的凋亡信号通路也有抑制作用。

关键词：复方龙垂草水煎剂四氯化碳肝损伤 caspase-3

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