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蓝莓中花青素的提取和稳定性的研究及其脂质体的制备

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蓝莓中花青素的提取和稳定性的研究及其脂质体的制备

作者：孙倩怡吉林农业大学

学位级别：硕士

蓝莓别名越橘(Vaccinium uliginosum L),为杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium spp)多年生落叶植物或常绿灌木,果实类型为浆果,原产于加拿大东部和美国东北部。果实中含有大量的花青素,具有较高的生物活性。本文选用蓝莓冻干粉为原料... 详细信息

蓝莓别名越橘(Vaccinium uliginosum L),为杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium spp)多年生落叶植物或常绿灌木,果实类型为浆果,原产于加拿大东部和美国东北部。果实中含有大量的花青素,具有较高的生物活性。本文选用蓝莓冻干粉为原料,对花青素提取工艺、稳定性分析及其脂质体制备进行了探究,为更好的开发和利用蓝莓资源提供理论依据和方法。本文通过单因素实验和星点设计-效应面法优化超声酶法提取蓝莓中花青素的工艺,考察了3种不同的酶(β-葡聚糖酶;木瓜蛋白酶;木聚糖酶),醇浓度,提取时间,料液比对提取结果的影响,酶-辅助超声法提取蓝莓中花青素的最佳工艺为:β-葡聚糖酶,提取时间为20 min,料液比为1:20,提取过程中保持醇浓度为55%,再继续超声提取10min。花青素提取率可达到19.156%。此提取工艺条件温和,酶用量小,提取率高,可为蓝莓花青素的大量提取提供新方法。本文建立并优化了D3520大孔吸附树脂法纯化蓝莓花青素的工艺条件。选取HPD-600、HPD-100A、DM130、D4020、D3520 5种大孔吸附树脂,以静态吸附率及解吸率为指标,比较其对蓝莓花青素粗提物的纯化效果,采用效果最佳的大孔树脂,通过单因素实验和正交试验分析最佳的洗脱条件。结果发现,D3520大孔树脂是纯化蓝莓花青素的最佳树脂,当大孔树脂上样量(g)与蓝莓花青素的上样量(mL)为1∶5时,最佳工艺为蓝莓花青素样液pH 3,质量浓度为1.0mg/mL,吸附体积流量为2.0 mL/min时,吸附率为92.82%;洗脱液乙醇体积分数为70%;洗脱体积流量为2.0 mL/min;洗脱液用量为60 mL(3倍柱体积),解吸率为91.58%。纯化后的蓝莓花青素色价提高了11倍,纯化后花青素的质量分数为96.17%,纯度提高了5倍,花青素的得率为14.271%,说明工艺有效的提高了蓝莓花青素的纯化效率,适用于蓝莓花青素日后的工业化生产。本文明确了影响蓝莓花青素稳定性的因素。以蓝莓花青素保存率为指标,研究了光、pH、温度、糖类成分、蛋白质、有机酸及氧化还原剂对蓝莓冻干粉中花青素稳定性的影响。结果表明,避光、酸性(pH≤3)、低温条件有利于蓝莓花青素的储存;与高浓度葡萄糖、果糖、蔗糖,60℃预热的酪蛋白、50℃预热的乳清蛋白和乳球蛋白,柠檬酸、草酸共存则可维持花青素的稳定性,但与低浓度糖、抗坏血酸、氧化剂和还原剂共存则会加快蓝莓花青素的降解,酒石酸和苹果酸则无明显影响。为了延长蓝莓花青素的贮存时间,应将其储存在低温、避光、酸性的环境中,且可适当的添加一些辅助剂来维持其稳定性。制备了蓝莓花青素的脂质体以提高其稳定性。采用薄膜分散法制备蓝莓花青素脂质体(BAL),以包封率为指标,建立并优化了BAL制备工艺。采用响应面法,优化了大豆磷脂(SP)与胆固醇比例,旋转蒸发温度,SP与蓝莓花青素(BA)的比例等反应条件,BAL最佳制备工艺为:SP与胆固醇的比例为4:1,旋转蒸发温度为40℃,SP与BA的比例为20:1。所得BAL的粒径,ζ电位和包封率分别为310.7±1.8nm,-30.3±1.0mV,包封率为82.13%。BAL的物理稳定性试验表明,当其在4℃的贮存温度下具有较高的包封率。采用该优化配方得到的BAL具有重复性好,粒度均匀,粒度良好的特点。这项工作为BAL的工业化生产提供了一个高效的过程,提高了它的稳定性,避免花青素在日常生活中的降解,具有很高的科学基础和更广泛的应用前景。本文比较了蓝莓花青素及其脂质体的抗氧化活性。结果显示:蓝莓花青素及其脂质体对DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基的清除率都随着浓度的增加而升高,在4℃储存一周后后花青素脂质体抗氧化活性明显高于游离的花青素溶液。实验发现,将蓝莓花青素制备成脂质体后,可以有效的提高其自身的稳定性,为日后蓝莓花青素在天然抗氧化剂开发应用方面提供了较强的科学依据。

关键词：蓝莓花青素提取工艺纯化工艺稳定性脂质体抗氧化活性

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中国传统艺术符号回纹研究

中国传统艺术符号回纹研究

作者：孙倩怡湖南工业大学

学位级别：硕士

回纹这一传统艺术符号是中国传统纹样中形式简洁具有代表性的几何装饰纹样之一，它方正回旋的纹样构成形式承载了华夏人民对现实生活的美好寄托和精神追求。回纹产生的根本原因是远古先民们内心对自然万物运动规律产生的理解和感悟，对... 详细信息

回纹这一传统艺术符号是中国传统纹样中形式简洁具有代表性的几何装饰纹样之一，它方正回旋的纹样构成形式承载了华夏人民对现实生活的美好寄托和精神追求。回纹产生的根本原因是远古先民们内心对自然万物运动规律产生的理解和感悟，对自然哲学和韵律美感的深刻审视与情感表达。对回纹纹样的起源与发展的历史脉络进行了深入研究及全面详细的梳理;探讨了回纹与云雷纹、窃曲纹之间的关系;并从社会文化发展的时代背景来分析了回纹在汉代之后渐渐消逝、并在宋代开始重新回归并沿用至今的历史原因;通过对中华文明发展过程中回纹出现的各种艺术载体的归纳将回纹纹样在传承发展中变幻出来的几种不同的构成形式进行了详细归类，指出回纹在其变化发展过程中分化出了四种主要的纹样构成形式：方回单体型、减笔组合型、正反∽型、一笔连环型，并对以上几种回纹构成形式的特征进行了探讨;对回纹艺术符号的能指进行了深入的研究，揭示出人们在回纹纹样的装饰运用实际上是一种对现实生活的美好愿望;将回纹在现代艺术设计领域中的应用进行了搜集和整理，对当代设计中出现在各种载体上的回纹运用进行了详细的分析;对我国传统纹样怎样与现代设计理念更加完美的融合这一大命题进行了深入的思考与探讨。

关键词：回纹构成形式符号内涵美学意义现代设计

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一类容度的弱(次)二次交替性研究

山东大学学报（理学版） 2012年第10期47卷 59-63,69页

作者：绪玉珍江龙赵曼孙倩怡中国矿业大学理学院江苏徐州221008 南京地税局江苏南京210018

由非线性期望诱导出一类容度,对这类容度的性质进行了研究。为了更好地刻画容度的特点,提出了容度的弱二次交替性的概念。利用非线性期望的相关性质分别研究了容度的弱二次交替、次二次交替与二次交替的性质。对奇的非线性期望算子给出... 详细信息

由非线性期望诱导出一类容度,对这类容度的性质进行了研究。为了更好地刻画容度的特点,提出了容度的弱二次交替性的概念。利用非线性期望的相关性质分别研究了容度的弱二次交替、次二次交替与二次交替的性质。对奇的非线性期望算子给出了一个定理,使得3个性质是等价的。

关键词：非线性期望容度二次交替次二次交替弱二次交替

纳米孔技术对PD-1抗原抗体结合检测的实验研究

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化学学报 2019年第3期77卷 287-292页

作者：傅方舟张志诚孙倩怡徐冰沙菁■ 东南大学江苏省微纳生物医疗器械设计与制造重点实验室南京211189 东南大学机械工程学院南京211189

肿瘤的免疫疗法是利用人体自身的免疫系统去治疗肿瘤的一种方法,程序性死亡受体1(PD-1)是肿瘤免疫疗法中的一种免疫检查点,利用PD-1或PD-L1的单克隆抗体,可以阻断PD-1/PD-L1信号通路,恢复T细胞的免疫杀伤功能,实现肿瘤的免疫治疗.为了研... 详细信息

肿瘤的免疫疗法是利用人体自身的免疫系统去治疗肿瘤的一种方法,程序性死亡受体1(PD-1)是肿瘤免疫疗法中的一种免疫检查点,利用PD-1或PD-L1的单克隆抗体,可以阻断PD-1/PD-L1信号通路,恢复T细胞的免疫杀伤功能,实现肿瘤的免疫治疗.为了研究PD-1抗体药物与人体PD-1抗原的结合有效性,以PD-1蛋白质分子为实验对象,用纳米孔传感器件开展了PD-1、PD-1抗体及其结合物的辨识.分别对纯PD-1蛋白质分子和其抗体分子进行了纳米孔过孔实验研究,发现PD-1及其抗体的相对堵塞电流幅值比分别为0.00404和0.01297,实现了抗原抗体分子的区分.并对Si3N4纳米孔内壁进行了PD-1抗体修饰,再将PD-1蛋白质分子通过经抗体修饰后的纳米孔,以期实现结合物的检测,实验结果显示部分抗原抗体实现了特异性结合,剩下部分呈游离状,所以纳米孔技术可实现抗原抗体结合物的区分.未来,纳米孔有望成为无标志检测药物有效性的一种新手段.

关键词：纳米孔程序性死亡受体1(PD-1) 抗体抗原无标志

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模式识别及其在中药质量评价中的应用

中草药 2016年第23期47卷 4282-4288页

作者：王露露孙倩怡杨慧海张晶长春科技学院医药学院吉林长春130061 吉林农业大学中药材学院吉林长春130118

近年来我国中药产业发展迅速,但中药质量控制的方法仍不全面,是阻碍其发展的主要因素。模式识别法于20世纪80年代引入化学研究领域,同时也被应用于中药研究领域,目前,许多学者以模式识别理论为基础,建立了多种中药的有效且科学的质量评... 详细信息

近年来我国中药产业发展迅速,但中药质量控制的方法仍不全面,是阻碍其发展的主要因素。模式识别法于20世纪80年代引入化学研究领域,同时也被应用于中药研究领域,目前,许多学者以模式识别理论为基础,建立了多种中药的有效且科学的质量评价方法。通过对模式识别法的基本原理和方法及其几种分析技术,如主成分分析、聚类分析、判别分析、灰色关联分析、偏最小二乘法、直观推导式演进特征投影法和人工神经网络技术等在中药质量控制及评价方面的应用进行综述,以期为模式识别法在中药质量评价中的进一步应用提供参考。

关键词：中药模式识别主成分分析人工神经网络质量评价

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蓝莓花青素的研究进展

食品工业科技 2016年第20期37卷 381-384,390页

作者：孙倩怡鲁宝君张晶吉林农业大学中药材学院吉林长春130118 杭州睦山农实业投资有限公司浙江杭州311604

蓝莓是一种富含花色素,营养价值非常高的浆果,其中的花青素具有多种生物活性,其研究越来越受到重视。为了进一步开发利用蓝莓中的花青素,本文对蓝莓中的化学成分的相关研究进行了系统整理,并重点归纳了蓝莓中花青素的提取、纯化的方法... 详细信息

蓝莓是一种富含花色素,营养价值非常高的浆果,其中的花青素具有多种生物活性,其研究越来越受到重视。为了进一步开发利用蓝莓中的花青素,本文对蓝莓中的化学成分的相关研究进行了系统整理,并重点归纳了蓝莓中花青素的提取、纯化的方法和其生物活性的研究进展,希望对其以后的研究和应用提供参考。

关键词：蓝莓花青素提取纯化生物活性

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蓝莓花青素的稳定性研究

营养学报 2017年第4期39卷 400-404页

作者：孙倩怡任珅鲁宝君张晶吉林农业大学中药材学院长春130118 杭州睦山农实业投资有限公司杭州311604

目的探明蓝莓花青素的稳定性,为蓝莓花青素日后的应用加工提供理论依据。方法以蓝莓花青素保存率为指标,研究光、p H、温度、糖类成分、蛋白质、有机酸及氧化还原剂对蓝莓冻干粉中花青素稳定性的影响。结果避光、酸性(p H≤3)、低温条... 详细信息

目的探明蓝莓花青素的稳定性,为蓝莓花青素日后的应用加工提供理论依据。方法以蓝莓花青素保存率为指标,研究光、p H、温度、糖类成分、蛋白质、有机酸及氧化还原剂对蓝莓冻干粉中花青素稳定性的影响。结果避光、酸性(p H≤3)、低温条件有利于蓝莓花青素的储存;与高浓度葡萄糖、果糖、蔗糖,60℃预热的酪蛋白、50℃预热的乳清蛋白和乳球蛋白,柠檬酸、草酸共存则可维持花青素的稳定性,但与低浓度糖、抗坏血酸、氧化剂和还原剂共存则会加快蓝莓花青素的降解,酒石酸和苹果酸则无明显影响。结论蓝莓花青素宜储存于在低温、避光、酸性的环境中,适当的添加一些辅助剂可维持其稳定性。

关键词：蓝莓花青素稳定性贮藏条件

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3种规范中总黄酮定量分析法的比较

国际药学研究杂志 2017年第6期44卷 656-659页

作者：杨慧海张雪孙倩怡张晶吉林农业大学中药材学院长春130118

目的比较《中华人民共和国药典》2015版(A法)、《保健食品功效成分及卫生指标检验规范》(B法)和《保健食品功能成分检测与评价》(C法)3种规范中总黄酮定量分析结果的差异性,寻找其中的规律性。方法将21个以黄酮含量为质量检测指标的食... 详细信息

目的比较《中华人民共和国药典》2015版(A法)、《保健食品功效成分及卫生指标检验规范》(B法)和《保健食品功能成分检测与评价》(C法)3种规范中总黄酮定量分析结果的差异性,寻找其中的规律性。方法将21个以黄酮含量为质量检测指标的食药同源的药材、成药等样品分别按照3种规范进行总黄酮含量的测定,并对3组测定结果进行分析。结果A法所测定的值最高,C法测得值最低。A法记载测定值是B法的(1.4±0.12)倍和C法的(2.1±0.31)倍。结论 3种规范中的总黄酮定量方法对同一样品的测定结果存在显著差异,明确3种规范测定结果之间的数值关系,可避免影响到食药同源样品的质量评价。

关键词：《中华人民共和国药典》《保健食品功效成分及卫生指标检验规范》《保健食品功能成分检测与评价》总黄酮含量测定

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大孔树脂纯化蓝莓中花青素工艺的研究

中草药 2017年第22期48卷 4668-4674页

作者：孙倩怡蔡恩博夏玉婷鲁宝君张晶吉林农业大学中药材学院吉林长春130118 杭州睦山农实业投资有限公司浙江杭州311604

目的建立并优化大孔树脂法纯化蓝莓花青素的最佳工艺条件,为蓝莓花青素工业化生产提供参考。方法选用HPD-600、HPD-100A、DM130、D4020、D3520 5种大孔树脂,比较蓝莓花青素粗提物在其上的静态吸附及解吸效果,筛选适合蓝莓花青素纯化的... 详细信息

目的建立并优化大孔树脂法纯化蓝莓花青素的最佳工艺条件,为蓝莓花青素工业化生产提供参考。方法选用HPD-600、HPD-100A、DM130、D4020、D3520 5种大孔树脂,比较蓝莓花青素粗提物在其上的静态吸附及解吸效果,筛选适合蓝莓花青素纯化的大孔树脂,通过单因素实验和正交试验分析蓝莓花青素样液质量浓度、p H值、吸附体积流量、洗脱液乙醇体积分数、乙醇用量及洗脱体积流量对树脂吸附-解吸的影响。结果 D3520大孔树脂是纯化蓝莓花青素的最佳树脂,当大孔树脂上样量(g)与蓝莓花青素的上样量(m L)为1∶5时,最佳工艺为蓝莓花青素样液p H 3,质量浓度为1.0 mg/m L,吸附体积流量为2.0 m L/min时,吸附率为92.82%;洗脱液乙醇体积分数为70%;洗脱体积流量为2.0 m L/min,洗脱液用量为60 m L,解吸率为91.58%。结论纯化后的蓝莓花青素色价提高了11倍,纯化后花青素的质量分数为96.17%,纯度提高了5倍,花青素的得率为14.271%,此工艺有效地提高了蓝莓花青素的纯化效率,适用于蓝莓花青素日后的工业化生产。

关键词：蓝莓花青素纯化效果大孔树脂色价正交试验