检索结果-南通市图书馆

棉铃虫（Heliothisspp）核型多角体病毒四个分离株的比较研究

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中国病毒学 1994年第4期9卷 309-318页

作者：孙修炼张光裕中国科学院武汉病毒研究所

本文从形态结构、生物活性、结构多肽、核酸限制性内切酶图谱和核酸同源性等方面对棉铃虫核型多角体病毒四个分离株（两个ＳＮＰＶ分离株：ＨａＳ、ＨｚＳ，和两个ＭＮＰＶ分离株：ＨａＭ１、ＨａＭ２）进行了比较研究。它们对中国棉铃... 详细信息

本文从形态结构、生物活性、结构多肽、核酸限制性内切酶图谱和核酸同源性等方面对棉铃虫核型多角体病毒四个分离株（两个ＳＮＰＶ分离株：ＨａＳ、ＨｚＳ，和两个ＭＮＰＶ分离株：ＨａＭ１、ＨａＭ２）进行了比较研究。它们对中国棉铃虫二龄末三龄初幼虫的ＬＤ５０佰依次为３６１、３８７、２６３３、３５６０ＰＩＢｓ／克饲料，当感染剂过为５×ｌ０３ＰＩＢｓ／克饲料时，其ＬＴ５０值依次为４．６、４．９、６．４和６．６天。两个ＳＮＰＶ分离株的生物活性显著高于两个ＭＮＰＶ分离株。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，四个分离株多角体蛋白均为一条带，两个ＭＮＰＶ分离株结构多肽均具有相同的迁移率，两个ＳＮＰＶ分离株的结构多肽图谱也颇相似，但ＳＮＰＶ与ＭＮＰＶ分离株之间带型相差较大。各分离株基出组经ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ和ＸｂａＩ消化后，得到的内切酶图谱表现为两个ＮＭＰＶ分离株一致，两个ＳＮＰＶ分离株也很相似，而ＳＮＰＶ与ＭＮＰＶ分离株之间相差很大。严格条件杂交结果表明：两个ＳＮＰＶ分离株的基因组有较高的同源性，而ＳＮＰＶ与ＭＮＰＶ基因组之间的同源性极低。

关键词：棉铃虫核型多角体病毒生物活性

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控制棉铃虫的生态学途径——病毒生防

生态农业研究 1995年第3期3卷 26-29页

作者：张光裕孙修炼中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

张光裕,孙修炼:控制棉铃虫的生态学途径——病毒生防,《生态农业研究》,3(3)1995:26—29 棉铃虫是危害我国农业生产的主要害虫,危害棉花等多种作物。由于它对化学农药的抗性增强,单纯依靠化学农药难以控制该种害虫的发生和危害。因此,... 详细信息

张光裕,孙修炼:控制棉铃虫的生态学途径——病毒生防,《生态农业研究》,3(3)1995:26—29 棉铃虫是危害我国农业生产的主要害虫,危害棉花等多种作物。由于它对化学农药的抗性增强,单纯依靠化学农药难以控制该种害虫的发生和危害。因此,开展生态控制途径的研究具有重要意义。棉铃虫病毒杀虫剂是我国第一个成功开发的昆虫病毒杀虫剂。本文主要介绍棉铃虫核型多角体病毒(NPV)的基本特性、在环境中的稳定性、病毒生防技术及其效果。

关键词：棉铃虫核多角体病毒生物防治

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棉铃虫核型多角体病毒对宿主昆虫的弱化作用

植物保护学报 1998年第3期25卷 204-208页

作者：张忠信孙修炼张光裕中国科学院武汉病毒所武汉430071

棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nuclear polyhedrosis virus,HaNPV)感染2龄幼虫,感染3d,幼虫体长和体重明显小于对照幼虫。病毒感染4龄幼虫,残留活虫幼虫历期延长,但取食量减少37.52％。病毒感染5龄幼虫,感染幼虫蜕皮时间... 详细信息

棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nuclear polyhedrosis virus,HaNPV)感染2龄幼虫,感染3d,幼虫体长和体重明显小于对照幼虫。病毒感染4龄幼虫,残留活虫幼虫历期延长,但取食量减少37.52％。病毒感染5龄幼虫,感染幼虫蜕皮时间延迟18h,幼虫历期延长2d。幼虫血淋巴蛋白电泳结果表明,幼虫蜕皮时间延迟主要原因是蜕皮过程延长。病毒感染5龄初幼虫,残留活虫蛹重减轻14.19％,成虫产卵量减少20.58％。结果表明,HaN-PV感染棉铃虫幼虫不仅能直接杀死宿主昆虫,而且对残留活虫的生长发育、取食、产卵均有很强的弱化作用。

关键词：棉铃虫核型多角体病毒弱化宿虫昆虫

棉铃虫病毒HaSNPVfp25k基因的克隆表达及抗体制备

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中国病毒学 2004年第4期19卷 380-384页

作者：吴东邓菲胡志红袁丽孙修炼中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学实验室

根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpaarmigerasinglenucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)fp25k基因的序列,设计引物,引入适当的酶切位点,利用PCR扩增出基因片段。将该基因片段克隆至原核表达载体pProEXHTb,经IPTG诱导,在大肠杆菌DH5α中获得了高效表达,表达产物的大小为32kDa。纯化蛋白产物免疫家兔制备抗血清。该抗血清可与原核表达的GST-FP25K融合蛋白及在感染的昆虫细胞中表达的FP25K蛋白发生特异性免疫反应。该抗体的获得为深入研究FP25K蛋白的功能提供了基础。

关键词：棉铃虫单核衣壳核多角体病毒基因克隆表达抗体杆状病毒

杆状病毒介导RNAi抑制棉铃虫细胞色素P450 CYP9A14基因的转录

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华中农业大学学报 2012年第4期31卷 450-456页

作者：陈爱华孙修炼赵秀云华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院武汉病毒研究所/农业与环境微生物学重点实验室武汉430071

采用实时荧光定量PCR,测定棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)细胞色素P450 CYP9A14基因在氯氰菊酯抗性棉铃虫中肠里的表达量,结果表明抗性棉铃虫是敏感棉铃虫中肠表达量的17倍。将棉铃虫中肠P450 CYP9A14基因的一个490bp反向重复片... 详细信息

采用实时荧光定量PCR,测定棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)细胞色素P450 CYP9A14基因在氯氰菊酯抗性棉铃虫中肠里的表达量,结果表明抗性棉铃虫是敏感棉铃虫中肠表达量的17倍。将棉铃虫中肠P450 CYP9A14基因的一个490bp反向重复片段以双链RNA干扰(double-stranded RNA interference,dsRNAi)的方法重组到棉铃虫核型多角体病毒(helicoverpa nuclear polyhedrosis virus,HaNPV)中,结果表明以该重组病毒注射氯氰菊酯抗性棉铃虫体内后,幼虫中肠CYP9A14基因的转录水平显著下降。

关键词：棉铃虫杆状病毒基因转录抗药性

使用棉铃虫核型多角体病毒杀虫剂防治辣椒烟青虫

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中国蔬菜 1992年第6期 19-20页

作者：张光裕刘敦化王锋孙修炼钱长发中国科学院武汉病毒研究所 430071 中共湖北监利县委农工部中国科学院长沙农业现代化研究所

林使用棉铃虫核型多角体病毒杀虫剂防治辣椒烟青虫，经过３年试验，证明该病毒杀虫剂能有效地控制烟青虫的危害，防治效果与菊酯类化学杀虫剂速灭杀了、溴氰菊酯和来福灵相当，为生产无公害辣椒提供了一种有效的治虫手段。

关键词：辣椒烟青虫病毒杀虫剂防治

苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV)GP37蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位

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农业生物技术学报 2014年第5期22卷 552-560页

作者：刘向阳孙修炼张忠信周琳河南农业大学植物保护学院河南省新型农药创制与应用重点实验室中国科学院武汉病毒研究所

苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus,CpGV)是防治苹果蠹蛾最重要的生物药剂之一,为探寻苹果CpGV GP37蛋白的增效机制,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将苹果CpGV gp37基因和绿色荧光蛋白基因(egfp)以N端或C端融合... 详细信息

苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus,CpGV)是防治苹果蠹蛾最重要的生物药剂之一,为探寻苹果CpGV GP37蛋白的增效机制,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将苹果CpGV gp37基因和绿色荧光蛋白基因(egfp)以N端或C端融合的方式插入苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleocapsid NPV,AcMNPV)基因组中,获得重组的杆状病毒质粒(bacmid),转染昆虫细胞Sf9,然后进行Western blot检测。结果显示,检测到GP37和EGFP的融合蛋白(vAcEGFPGP37、vAcGP37EGFP)和非融合蛋白(vAcGP37、vAcEGFP)都得到了高效表达;用激光共聚焦显微镜观察蛋白的亚细胞定位情况,融合GP37的EGFP主要聚集在细胞质中,没有融合GP37的EGFP遍布整个细胞,说明CpGV GP37蛋白定位于细胞质中。本实验研究了CpGV GP37蛋白的真核表达,为该蛋白的后续研究提供了条件;而该蛋白的亚细胞定位研究,不仅为CpGV GP37蛋白增效机制的研究提供了基础资料,同时丰富了杆状病毒GP37蛋白的相关理论。

关键词：苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV) GP37蛋白 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统真核表达亚细胞定位

中国棉铃虫核型多角体病毒不同基因型的虫体克隆

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中国病毒学 1998年第1期13卷 83-88页

作者：孙修炼张光裕张忠信胡志红中国科学院武汉病毒研究所

首次利用虫体克隆技术，对野生型中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶＷ）的不同基因型进行了分离纯化。以较低浓度的ＨａＳＮＰＶＷ感染三龄初中国棉铃虫幼虫，病毒致死幼虫单虫收集，分别提取相应的病毒核酸，进行限制性内切... 详细信息

首次利用虫体克隆技术，对野生型中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶＷ）的不同基因型进行了分离纯化。以较低浓度的ＨａＳＮＰＶＷ感染三龄初中国棉铃虫幼虫，病毒致死幼虫单虫收集，分别提取相应的病毒核酸，进行限制性内切酶分析，得到了ＨａＳＮＰＶ的七个不同基因型（ＨａＳＮＰＶＧ１至Ｇ７），其ＥｃｏＲＩ酶切图谱均不相同。用ＢａｍＨＩ酶切分析，七个基因型的酶切图谱只在一个片段上有显著区别：Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３、Ｇ４ＤＮＡ的ＢａｍＨＩｈ片段大小是３．３０ｋｂ，Ｇ５、Ｇ６的这一片段的大小为３．５ｋｂ，而Ｇ７的这一片段为２．７ｋｂ。结果表明，野生型ＨａＳＮＰＶ至少包含七个不同的基因型。

关键词：中国棉铃虫核型多角体病毒基因型虫体克隆

棉铃虫核型多角体病毒与化学杀虫剂和卵磷脂混用的增效作用

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昆虫学报 2000年第4期43卷 346-355页

作者：万成松孙修炼张光裕中国人民解放军第一军医大学微生物教研室广州510515 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

棉铃虫核型多角体病毒 (HaNPV)分别与三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、灭净菊酯、灭多威、辛硫磷、甲基对硫磷和乙酰甲胺磷等化学杀虫剂混合饲喂棉铃虫幼虫 ,统计致死中浓度LC50 ,计算增效比 ,测定虫体内与抗性有关的三种重要酶 :多... 详细信息

棉铃虫核型多角体病毒 (HaNPV)分别与三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、灭净菊酯、灭多威、辛硫磷、甲基对硫磷和乙酰甲胺磷等化学杀虫剂混合饲喂棉铃虫幼虫 ,统计致死中浓度LC50 ,计算增效比 ,测定虫体内与抗性有关的三种重要酶 :多功能氧化酶 (MFO)、羧酸酯酶 (CarE)、乙酰胆碱酯酶 (AChE)的活性。研究大豆卵磷脂对HaNPV致病性的影响。结果表明 :HaNPV与化学杀虫剂混合饲喂抗性棉铃虫 ,生测统计增效比均大于 1 0 ,特别是病毒与甲基对硫磷混用 ,增效比更是达到 3 53,表现出良好的增效作用。混剂感染抗性棉铃虫 ,虫体内MFO的活性比化学杀虫剂单用时降低 3～ 12倍 ,CarE和AChE的活性也比化学杀虫剂单用时低 ,HaNPV明显抑制了化学杀虫剂对MFO和CarE的诱导作用。HaNPV与大豆卵磷脂混用 ,提高了HaNPV对棉铃虫的感染致死率 ,缩短了致死中时间 (LT50 )。

关键词：棉铃虫核型多角体病毒化学杀虫剂卵磷脂药效