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Irisin基于AMPK和PI3K/Akt信号通路对鲤糖代谢的调控研究

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Irisin基于AMPK和PI3K/Akt信号通路对鲤糖代谢的调控研究

作者：职韶阳河南师范大学

学位级别：硕士

骨骼肌不仅是机体的运动器官,而且可以表达、合成和分泌各种生物活性分子,例如FGF-21,IL-15和肌肉生长抑制素等,这些肌肉因子以旁分泌或内分泌方式参与机体代谢调节。Irisin是2012年发现的一种肌肉因子,具有提高胰岛素抵抗、抗炎以及改... 详细信息

骨骼肌不仅是机体的运动器官,而且可以表达、合成和分泌各种生物活性分子,例如FGF-21,IL-15和肌肉生长抑制素等,这些肌肉因子以旁分泌或内分泌方式参与机体代谢调节。Irisin是2012年发现的一种肌肉因子,具有提高胰岛素抵抗、抗炎以及改善心血管和内皮功能的作用。但在鱼类中,关于irisin对糖代谢的研究鲜见报道。本研究利用TSA（Transcriptome Shotgun Assembly）数据库进行拼接比对,通过特异性引物克隆得到鲤（Cyprinus carpio L.）irisin的前体基因FNDC5序列。通过序列比对、系统进化树分析以及基因共线性分析得到鲤FNDC5基因序列信息。随后对鲤FNDC5进行了表达特性分析。通过原核表达系统获得鲤重组irisin蛋白,并制备了多克隆抗体。通过腹腔注射和原代肝细胞孵育实验,检测irisin对鲤糖代谢的作用。此外,还通过RNA干扰实验敲降FNDC5表达后检测对鲤糖代谢的影响。最后,通过使用irisin及AMPK或PI3K/Akt抑制剂离体孵育原代肝细胞,阐明irisin对鲤糖代谢作用的信号通路。主要研究结果如下:1、本研究首次从鲤下丘脑中克隆获得鲤FNDC5的c DNA序列。FNDC5的c DNA长度为722 bp,包含666 bp开放阅读框,编码221个氨基酸,预测分子量为24.586 KDa。使用Signal P预测FNDC5的前25个氨基酸为信号肽,之后的112个氨基酸序列为irisin成熟肽。Net Phos预测鲤FNDC5含有24个磷酸化位点,包括13个丝氨酸残基,10个苏氨酸残基和1个酪氨酸残基。此外,预测结果显示鲤FNDC5蛋白含有两个N-糖基化位点（NVS和NTT）。进化树分析表明鲤FNDC5与鱼类FNDC5聚为一簇。结合基因共线性分析结果,我们成功获得鲤FNDC5。为分析FNDC5在鲤组织中的表达模式,本文对脑区和外周共19个组织进行定量q RT-PCR研究。结果发现FNDC5 mRNA在中脑、端脑、下丘脑和性腺中高表达,在心脏,肝胰脏和鳃中低表达。2、为了评估营养状态对FNDC5 mRNA表达的影响,进行了饥饿和再投喂、葡萄糖耐量（OGTT）、高糖或高脂饲喂实验（8周）。饥饿7天后,FNDC5在肝胰脏和中肠的表达水平显著上调,再次饲喂后,迅速恢复到正常水平。OGTT结果显示FNDC5的表达在脑、中肠和红肌中显著上调,而在肝胰脏中显著下调。高糖或高脂饲喂可上调FNDC5 mRNA的表达。而注射胰岛素（100 ng/g B.W.）后,抑制了鲤肝胰脏和肠FNDC5的表达;相反,胰高血糖素（100 ng/g B.W.）注射促进了肝胰脏中FNDC5的表达。3、利用大肠杆菌原核表达系统表达鲤重组irisin蛋白,为进一步研究其功能提供了蛋白基础。鲤重组irisin蛋白纯化后,对NIH阴性小鼠进行免疫,制备得到了鲤irisin多克隆抗血清。通过多克隆抗体效价检测irisin抗体效价为1:90000。利用该抗体对鲤血清样品进行ELISA分析,检测出血清irisin的含量为1.26 ng/m L,成功建立了在鱼类中检测irisin的实验方法。通过免疫荧光实验证实鲤组织内存在内源性irisin蛋白。4、对鲤重组irisin蛋白进行功能研究,主要通过离体原代肝细胞孵育和在体腹腔注射实验进行检测。结果发现,表明irisin能够显著降低葡萄糖含量,并且调节葡萄糖转运蛋白sglt1和glut2的mRNA表达,促进糖原合成基因gs的表达,抑制gsk3β的表达。酶活结果显示,irisin可以显著提升糖酵解相关酶,葡萄糖激酶（gk）、已糖激酶（hk）和磷酸果糖激酶（pfk）的活性;降低糖异生相关酶,果糖-1,6-二磷酸酶（fbpase）、葡萄糖-6-磷酸酶（g6pase）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（pepck）的活性,并促进肝糖原的合成。这说明irisin能够通过调节肝脏葡萄糖转运和糖原合成相关基因的表达,抑制糖异生酶活性,促进糖酵解酶活性,从而降低血清葡萄糖含量。5、通过脑室注射irisin-siRNA,进行RNA干扰实验。发现在注射siRNA后可抑制脑和肝胰脏中FNDC5的mRNA表达,抑制率分别达到91%和97%,证明RNAi可有效降低鲤FNDC5基因表达水平。注射siRNA后,血清irisin含量显著降低,血清中葡萄糖呈增加趋势。脑中glut2的表达降低,但在肝胰脏中,glut2和gs的mRNA水平显著下调,而pygl显著上调。糖酵解hk和pfk的基因表达显著下调,糖异生g6pase和pepck显著上调。进一步证明irisin对于鲤糖代谢的重要作用。6、为阐明irisin作用机制,本研究使用irisin及AMPK或PI3K/Akt抑制剂孵育鲤原代肝细胞。结果发现irisin激活AMPK

关键词：鲤 FNDC5 irisin 糖代谢 AMPK PI3K/Akt

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指导性案例的司法适用研究

指导性案例的司法适用研究

作者：段韶阳河北经贸大学

学位级别：硕士

我国社会各方面正处在高速发展的阶段,各种新类型、疑难复杂的司法案件也层出不穷,在司法实务中各级法院及法官业务水平各有差异的情况下,为了保证法律适用的一致性,促进严格司法,形成“同案同判”的司法公正结果,我国建立了案例指导制... 详细信息

我国社会各方面正处在高速发展的阶段,各种新类型、疑难复杂的司法案件也层出不穷,在司法实务中各级法院及法官业务水平各有差异的情况下,为了保证法律适用的一致性,促进严格司法,形成“同案同判”的司法公正结果,我国建立了案例指导制度。通过具体的指导性案例,指导法官在办案过程中正确适用法律法规和司法解释,以案释法,避免出现“同案不同判”的司法不公现象。由于法律条文本身具有抽象性和概括性的特点,在实际的审判过程中难以具体把握,指导性案例则以其真实具体的案例以及裁判规则,弥补法律条文在适用上的局限性。指导性案例作为我国司法改革的一项重要举措,自2011年最高人民法院发布第一批指导性案例以来,其发展一直受到理论学者与司法实践的关注。本文通过指导性案例与相关概念的关系对比,认为指导性案例实质相当于“案例化的司法解释”,只不过指导性案例针对的个别的法律法规条款,而司法解释涵盖的范围则更广。截至2020年1月最高人民法院已经发布了24批共139个指导性案例,本文对最高人民法院已发布的指导性案例进行了分类与现状分析。根据指导性案例对相关法条的解释作用不同,指导性案例可分为三大类,具体包括:释法型指导性案例、宣法型指导性案例与造法型指导性案例。此外,指导性案例在其发布现状上,则存在发布数量较少、案例涉及的范围不均衡等方面的欠缺。指导性案例作为参照案例最重要的就是要应用于司法实践之中,而现阶段的指导性案例在司法适用过程中还存在很多问题,主要包括指导性案例的适用率低、法官援引不主动、欠缺具体适用规则等。对指导性案例在适用过程中的问题,本文则针对性地提出了相关完善建议,具体措施主要包括类案及关联案件强制检索、建立法官培训与奖励机制、细化具体适用规则等。关于目前指导性案例在司法实践中的应用情况,本文以指导性案例为研究对象,根据“北大法宝司法案例库”的数据统计,对指导性案例在司法实践中的适用情况做出统计分析,并提出指导性案例在司法适用中的问题和相关的完善建议。

关键词：指导性案例司法适用大数据分析完善机制

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作者：秦韶阳贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨心脏特异性同源盒转录因子(Homobox transcription factor,NKX2.5)基因rs3729753、rs2277923和亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylene Tetrahydrofolate Reductase,MTHFR)基因rs1801131、rs1801133单核苷酸多态性(Single neucleotide polymorphism,SNP)与成人心血管疾病和小儿先天性心脏病的遗传易感性以及基因间的关联性;MTHFR相关血清学标志物同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对心血管疾病的临床诊断价值及与MTHFR基因的相关性。方法:运用循证医学中系统评价定性原理和Meta分析定量方法对MTHFR基因C677T(rs1801133)多态性与心血管疾病的相关性进行分析;采用病例-对照研究收集标本,正常对照组105例和成人心血管疾病108例,正常对照组53例和小儿先心病49例;收集研究对象的一般临床资料并检测血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平;运用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)对NKX2.5基因rs3729753、rs2277923和MTHFR基因rs1801131、rs1801133的多态性位点进行序列扩增,一代测序技术检测各位点的基因分型分布;采用卡方检验对四个多态性位点与心血管疾病的风险进行关联分析,和各位点的基因型组合分析,采用单因素方差分析rs1801131、rs1801133位点各基因型与血清Hcy水平的相关性;Logistic回归分析心血管疾病的危险因子;绘制ROC曲线评价Hcy与各种危险因子对诊断心脏病的临床价值。结果:循证医学Meta分析结果显示在以下5个遗传模型中合并分析时,均存在MTHFR C677T基因多态性与心血管疾病发病的显著相关性:等位基因模型(T vs C)[OR=1.39,95%CI(1.17,1.65),P=0.0002];纯合子模型(TT vs CC)[OR=1.57,95%CI(1.16,2.12),P=0.003];杂合子模型(TC vs CC)[OR=1.69,95%CI(1.26,2.27),P=0.0004];显性遗传模型(TT+TC vs CC)[OR=1.53,95%CI(1.21,1.94),P=0.0005];隐性遗传模型(TT vs TC+CC)[OR=1.37,95%CI(1.08,1.73),P=0.01]。亚组分析时,在以下亚组中显示出更高的发病风险:冠心病组,隐性遗传模型[OR=1.38,95%CI(1.17,1.62),P=0.0001];心肌梗死组,等位基因模型[OR=1.71,95%CI(1.37,2.13),P0.05);各位点在不同疾病间(冠心病、原发性高血压、先心病、冠心病合并原高)并未发现差异rs1801131(χ2=5.799,P=0.122)、rs1801133(χ2=4.221,P=0.239)、rs2277923(χ2=1.154,P=0.562);单因素方差分析显示在rs1801133位点基因型CC、CT、TT中Hcy血清水平为(F=17.231,P=0.000)差异有统计学意义,在rs1801131位点基因型AA、AC、CC中Hcy血清水平为(F=6.900,P=0.001)差异有统计学意义,并且从野生纯合子到突变杂合子、突变纯合子逐渐升高;对14个心血管疾病可能的危险因素进行Logistic回归分析,关联程度用OR值及95%CI表示,筛出9个相关因素:TG、TC、HDL-C、LDL-C、LP(a)、Hcy、rs1801131、rs1801133、rs2277923;经线性相关性分析,用Pearson相关系数(r)来描述相关性,

关键词： MTHFR NKX2.5 成人心血管疾病先心病单核苷酸多态性

山东省高校大学生投掷运动员营养认知及训练期饮食调查研究

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山东省高校大学生投掷运动员营养认知及训练期饮食调查研究

作者：徐韶阳山东体育学院

学位级别：硕士

合理平衡的膳食营养,关系着投掷运动员的身心健康,而且对运动成绩的提高也至关重要。本文以山东省高校大学生投掷运动员(二级水平)为研究对象,主要采用问卷调查法、文献资料法、综合分析法和数理统计法等,深入剖析我省高校投掷运动员日... 详细信息

合理平衡的膳食营养,关系着投掷运动员的身心健康,而且对运动成绩的提高也至关重要。本文以山东省高校大学生投掷运动员(二级水平)为研究对象,主要采用问卷调查法、文献资料法、综合分析法和数理统计法等,深入剖析我省高校投掷运动员日常训练期营养工作的问题与不足,同时提出具体的应对措施,为高校投掷类运动员合理膳食营养提供参考,为全省大学生运动会储备人才,也为教练员训练与饮食的有机结合提供一定的参考依据。通过调查发现:(1)投掷运动员营养素和能量摄入方面存在的问题:投掷运动员普遍能量摄入不足,碳水化合物和蛋白质的摄入比例过低,而脂肪摄入的比例偏高,维生素A、E、B、B缺乏,钙、铁、锌的摄入达不到推荐摄入量。粮谷类、薯类、豆类低于推荐摄入量,奶制品的摄入严重缺乏,蔬菜水果达不到推荐摄入量,肉、蛋、海产品的摄入量超出推荐摄入量;(2)大学生投掷运动员缺乏营养知识,营养的认识态度不够深入,普遍存在不良饮食行为习惯,运动员对营养知识感兴趣,但宣传教育力度不够,获得营养知识的途径少,同时也反映出投掷运动员对自身运动专项了解不透彻。运动员对营养知识的积极作用存在疑虑,需正确的营养教育来引导,科学的行为干预来证明,另外,部分运动员需改变饮食习惯;(3)学校饮食管理部门对运动员营养的重视程度不够,缺乏针对性;(4)缺乏专业运动营养师的指导和缺乏比较完善的膳食管理制度和监督体系。据此,本文提出合理化建议:(1)拓宽运动员营养知识方面的教育渠道;(2)安排运动员合理的膳食制度,建立良好的饮食习惯;(3)配备专业的运动营养师,监测运动员膳食现状,纠正不良饮食习惯,建立运动员膳食营养分析系统进行运动员个性化能量平衡和膳食指导,实行科学配餐;(4)加强高校及相关部门的大力支持。

关键词：训练期营养投掷运动员大学生营养认知

乙酸锌对肉仔鸡生长性能、骨骼性状及肉品质的影响

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乙酸锌对肉仔鸡生长性能、骨骼性状及肉品质的影响

作者：牟韶阳东北农业大学

学位级别：硕士

锌是动物营养必需的微量元素,不仅参与体内三大营养物质等的代谢,还与多种酶的活性和激素分泌有关联。因此锌对动物的生长代谢、骨骼发育、免疫等都有重要的作用。不同形式的锌生物学利用率不同。但是,关于乙酸锌在肉鸡方面的研究甚少... 详细信息

锌是动物营养必需的微量元素,不仅参与体内三大营养物质等的代谢,还与多种酶的活性和激素分泌有关联。因此锌对动物的生长代谢、骨骼发育、免疫等都有重要的作用。不同形式的锌生物学利用率不同。但是,关于乙酸锌在肉鸡方面的研究甚少。本试验旨在探讨饲粮中不同添加水平的乙酸锌对肉仔鸡生长性能、骨骼性状和肉品质等指标的影响,为生产中合理使用乙酸锌提供科学的试验依据。试验选取1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡220羽,按体重无差异原则随机分为一个对照组(A)和三个试验组(B、C、D),每组5个重复,每个重复11羽。基础日粮采用玉米-豆粕型日粮(不额外加锌),对照组(A)在基础日粮中添加锌40 mg/kg(Zn SO4·H2O形式),试验组(B、C、D)分别在基础日粮中添加80 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg三个水平的乙酸锌。试验期42d。试验结果表明:(1)与对照组相比,B组肉仔鸡21日龄体重、日增重显著高于其它三组(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05)。(2)与对照组相比,42日龄时,B组肉仔鸡对代谢能、粗蛋白及钙的利用率显著升高(P<0.05),21日龄时D组肉仔鸡对代谢能、P以及42日龄时D组肉仔鸡对Ca、P的利用率均显著降低(P<0.05),42日龄时C组肉仔鸡对Ca的利用率显著降低(P<0.05)。(3)21日龄肉仔鸡血清中总蛋白(TP)的含量B组显著高于其它三组(P<0.05),42日龄肉仔鸡血清中总蛋白(TP)和低密度脂蛋白(LDL)的含量C、D组显著降低(P<0.05)。(4)与对照组相比,B组肉仔鸡21日龄鲜胫骨重及总灰分重均显著升高(P<0.05),B、C组肉仔鸡21日龄胫骨烘干重及B组肉仔鸡42日龄胫骨烘干重显著升高(P<0.05),D组肉仔鸡21日龄胫骨Ca、P含量及42日龄胫骨Ca含量均显著降低(P<0.05),B组肉仔鸡42日龄胫骨Ca含量显著升高(P<0.05),21、42日龄时,肉仔鸡胰腺锌的含量B组均显著高于A组(P<0.05),C组显著高于A、B两组(P<0.05),D组显著高于A、B、C组(P<0.05)。(5)与对照组相比,各试验组42日龄肉仔鸡腿肌粗脂肪含量显著升高(P<0.05),胸肌粗蛋白和粗脂肪含量B、D组显著升高(P<0.05);各试验组肉仔鸡胸肌L*值、胸肌和腿肌p H均显著升高(P<0.05),腿肌L*值B、C两组显著升高(P<0.05),胸肌a*值和腿肌b*值D组显著升高(P<0.05);各试验组间胸肌和腿肌p H D组显著高于B、C两组(P<0.05)。由以上结果可以看出,饲粮中添加80 mg/kg乙酸锌促进了肉仔鸡的生长发育和养分利用率,对血清中蛋白、脂肪含量有显著影响,提高了肉仔鸡胫骨长和重量,促进胫骨的钙磷沉积,同时显著提高肉仔鸡肌肉粗脂肪含量和胸肌粗蛋白含量,提高肌肉亮度值以及肌肉p H,改善肉品质。

关键词：肉仔鸡乙酸锌生长性能骨骼性状肉品质

干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症:细胞来源、数量、修饰手段及给药途径

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4083-4090页

作者：赵文毕玉琳付旭阳段红梅杨朝阳李晓光首都医科大学基础医学院神经生物学系北京市100069 北京航空航天大学生物与医学工程学院生物材料与神经再生北京市重点实验室北京市100083

背景:随着医疗技术的不断进步,干细胞疗法已经被用于包括肌萎缩侧索硬化症在内的多种疾病的治疗。目的:综述干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症的研究进展,展望该领域的发展趋势。方法:以“肌萎缩侧索硬化症,间充质干细胞,神经干/祖细胞,多能... 详细信息

背景:随着医疗技术的不断进步,干细胞疗法已经被用于包括肌萎缩侧索硬化症在内的多种疾病的治疗。目的:综述干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症的研究进展,展望该领域的发展趋势。方法:以“肌萎缩侧索硬化症,间充质干细胞,神经干/祖细胞,多能诱导干细胞;amyotrophic lateral sclerosis,mesenchymal stem cells,neural stem/progenitor cells,pluripotent stem cells”为关键词,在PubMed、中国知网、万方数据库进行检索,检索时限为1995-2024年。共检索到1700余篇文献,最终纳入58篇文献用于综述。结果与结论:肌萎缩侧索硬化症是一种影响脑干和脊髓的下部运动神经元以及运动皮质的上部运动神经元的神经退行性疾病。干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症的相关研究已成为一大研究热点。在这篇综述中,总结了不同种类干细胞在肌萎缩侧索硬化症研究领域中的应用情况,包括间充质干细胞、神经干祖细胞、多能诱导干细胞,评估了干细胞来源、细胞量、干细胞修饰手段及给药途径等临床前研究关键,为未来干细胞治疗的应用奠定了基础。

关键词：肌萎缩侧索硬化症间充质干细胞神经干/祖细胞诱导多能干细胞神经退行性疾病

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电气产品的电气间隙和爬电距离试验分析

电器工业 2025年第1期 25-28页

作者：陆俊阳武博赵永刚陈大伟甘肃电器科学研究院三峡新能源清水发电有限公司

近年来,随着新能源、智能制造等技术的快速发展,电气产品的智能化、微型化成为主要发展方向,越来越多的智能化电气产品影响着我们的生活。同时,由于电气产品引发的触电、着火等危害也较为突出。因此,电气产品的安全性能设计尤为重要,电... 详细信息

近年来,随着新能源、智能制造等技术的快速发展,电气产品的智能化、微型化成为主要发展方向,越来越多的智能化电气产品影响着我们的生活。同时,由于电气产品引发的触电、着火等危害也较为突出。因此,电气产品的安全性能设计尤为重要,电气间隙和爬电距离是其中最重要的环节。为了研究影响电气间隙和爬电距离的因素,本文结合接线端子电气间隙和爬电距离测量实例进行分析。

关键词：爬电距离电气间隙污染等级安全

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新疆西昆仑切列克其大型菱铁矿床锆石U-Pb年龄及地质意义

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地质科学 2025年第1期 272-279页

作者：朱明田孔繁琦刘文成中国科学院地质与地球物理研究所岩石圈演化与环境演变全国重点实验室中国科学院大学地球与行星科学学院中国地质大学地球科学与资源学院

木吉—布伦口—黑黑孜站干—大红柳滩菱铁矿带是西昆仑最重要的铁成矿带之一，可分为南北两段，北段分布于木吉—布伦口—切列克其一带，以切列克其菱铁矿规模最大且典型，但目前尚没有确切的成矿年代学数据来限定菱铁矿的形成时代。本... 详细信息

木吉—布伦口—黑黑孜站干—大红柳滩菱铁矿带是西昆仑最重要的铁成矿带之一，可分为南北两段，北段分布于木吉—布伦口—切列克其一带，以切列克其菱铁矿规模最大且典型，但目前尚没有确切的成矿年代学数据来限定菱铁矿的形成时代。本文从块状菱铁矿石中挑选出了大量岩浆成因锆石，它们均具有典型的韵律环带，LA-ICP-MS U-Pb定年给出的206Pb/238U加权平均年龄为488±3 Ma，指示块状菱铁矿体形成于寒武纪末期。另有3颗锆石给出了～434 Ma的年代学记录，其轻稀土含量变化较大，可能遭受了后期流体扰动。这一变质事件可能与原特提斯洋的闭合有关，一定程度上影响了块状菱铁矿的形成。由此推测西昆仑北段菱铁矿带很可能形成于寒武纪末期，与原特提期洋演化过程中的海底喷流热液成矿系统有关。

关键词：切列克其菱铁矿成矿年代学西昆仑喷流沉积

基于系统工程方法统筹低碳城市规划、建设与管理

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科技管理研究 2016年第24期36卷 255-259页

作者：杜栋葛韶阳河海大学城市系统工程研究中心江苏常州213022

以低碳城市为研究对象,认为低碳城市工作也是一个复杂的系统工程。低碳城市系统包括目标系统、运行系统、保障系统、控制系统。低碳城市工作中的低碳城市规划对应于目标系统、低碳城市建设对应于运行系统、低碳城市管理对应于保障系统... 详细信息

以低碳城市为研究对象,认为低碳城市工作也是一个复杂的系统工程。低碳城市系统包括目标系统、运行系统、保障系统、控制系统。低碳城市工作中的低碳城市规划对应于目标系统、低碳城市建设对应于运行系统、低碳城市管理对应于保障系统。要统筹规划、建设和管理三大环节,需要强化低碳城市的控制系统。建议成立"总体设计部",并充分运用协调控制的方法和技术。

关键词：系统工程城市系统工程低碳城市

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