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中国卒中杂志 2024年第6期19卷 655-663页

作者：叶维贞赵顺英姜鸣钰黄秋茹温少红董雯陈青芳刘向荣首都医科大学附属北京天坛医院国家神经系统疾病临床医学研究中心北京100070

目的本研究通过探讨N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)修饰及其调控蛋白在脑缺血小鼠中的表达变化,为脑缺血治疗的分子靶点研究提供参考。方法取60只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为假手术组、脑缺血1 d组、脑缺血3 d组和脑缺血... 详细信息

目的本研究通过探讨N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)修饰及其调控蛋白在脑缺血小鼠中的表达变化,为脑缺血治疗的分子靶点研究提供参考。方法取60只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为假手术组、脑缺血1 d组、脑缺血3 d组和脑缺血7 d组,每组各15只,采用线栓法制作右侧大脑中动脉梗死模型,于缺血1 h进行拔栓再灌注。通过RNA提取及斑点印迹实验检测小鼠缺血侧脑组织RNA m^(6)A水平;使用荧光定量逆转录PCR检测小鼠缺血侧脑组织甲基转移酶3(methyltransferase 3,Mettl3)、甲基转移酶14(methyltransferase 14,Mettl14)、FTOα-酮戊二酸酯依赖性双加氧酶(FTO alpha-ketoglutarate dependent dioxygenase,Fto)、RNA去甲基化酶alkB同源基因5(alkB homolog 5,RNA demethylase;Alkbh5)、YTH N^(6)-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTH N^(6)-methyladenosine RNA binding protein 1,Ythdf1)、Ythdf2和Ythdf3的mRNA表达水平;利用免疫印迹实验检测缺血侧脑组织Mettl3、Mettl14、Fto、Alkbh5、Ythdf1、Ythdf2和Ythdf3蛋白的表达水平;借助免疫荧光染色观察缺血侧脑组织梗死周边区神经元中Mettl3、Fto、Ythdf1、Ythdf2和Ythdf3蛋白的表达变化情况。结果与假手术组相比,脑缺血3 d组脑组织RNA的m^(6)A水平升高(1.620±0.339 vs.1.000±0.192,P=0.0343)。(1)甲基转移酶表达情况:脑缺血7 d组Mettl3mRNA水平降低(0.675±0.059 vs.1.000±0.131,P=0.0331);脑缺血1 d组Mettl3(0.548±0.107 vs.1.000±0.056,P=0.0398)、Mettl14(0.534±0.218 vs.1.000±0.018,P=0.0108)蛋白表达水平降低;脑缺血3 d组Mettl3(0.410±0.341 vs.1.000±0.056,P=0.0084)、Mettl14(0.429±0.283 vs.1.000±0.018,P=0.0026)蛋白表达水平也均下降;免疫荧光染色显示脑缺血3 d组梗死周边区神经元中Mettl3蛋白表达减少。(2)去甲基化酶表达情况:脑缺血1 d组(0.405±0.209 vs.1.000±0.142,P=0.0108)、脑缺血3 d组(0.530±0.125 vs.1.000±0.142,P=0.0412)Fto蛋白表达水平降低;免疫荧光染色显示脑缺血3 d组梗死周边区神经元中Fto表达减少。(3)m^(6)A结合蛋白表达情况:脑缺血1 d组Ythdf1mRNA水平降低(0.708±0.046 vs.1.000±0.117,P=0.0331),Ythdf3mRNA水平升高(1.473±0.093 vs.1.000±0.142,P=0.0012);脑缺血3 d组Ythdf1(0.593±0.240 vs.1.000±0.117,P=0.0034)、Ythdf2(0.664±0.177 vs.1.000±0.200,P=0.0100)mRNA水平降低,Ythdf3 mRNA水平升高(1.451±0.281 vs.1.000±0.142,P=0.0018);脑缺血1 d组Ythdf1(0.486±0.177 vs.1.000±0.091,P=0.0197)、Ythdf3(0.536±0.107 vs.1.000±0.125,P=0.0400)蛋白表达水平降低;脑缺血3 d组Ythdf1(0.404±0.299 vs.1.000±0.091,P=0.0079)、Ythdf2(0.279±0.189 vs.1.000±0.261,P=0.0136)、Ythdf3(0.450±0.220 vs.1.000±0.125,P=0.0157)蛋白表达水平均降低;免疫荧光染色显示脑缺血3 d组梗死周边区神经元中m6A结合蛋白Ythdf1、Ythdf2、Ythdf3表达均减少。结论小鼠脑缺血后可能由Fto表达下调导致m^(6)A水平升高,Ythdf1、Ythdf2、Ythdf3蛋白表达水平趋势基本一致,可能存在功能冗余。

关键词：脑缺血 N^(6)-甲基腺苷修饰 N^(6)-甲基腺苷甲基转移酶 N^(6)-甲基腺苷去甲基化酶 N^(6)-甲基腺苷结合蛋白

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毛柳苷在脑缺血再灌注后抑制神经元自噬及神经保护作用研究

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中国卒中杂志 2022年第9期17卷 991-1001页

作者：温少红刘宽赵顺英董雯陈青芳陈文涛叶维贞姜鸣钰刘向荣首都医科大学附属北京天坛医院国家神经系统疾病临床医学研究中心北京100070 湖南省人民医院星沙院区神经外科

目的通过动物模型和体外细胞培养探索毛柳苷(salidroside,SAL)对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其可能机制。方法36只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(12只)、溶剂组(12只)和SAL组(12只)。线栓法制作小鼠右侧大脑中动脉闭塞模型,缺... 详细信息

目的通过动物模型和体外细胞培养探索毛柳苷(salidroside,SAL)对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其可能机制。方法36只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(12只)、溶剂组(12只)和SAL组(12只)。线栓法制作小鼠右侧大脑中动脉闭塞模型,缺血1 h后再灌注,而后即刻尾静脉注射150μL SAL(剂量10 mg/kg,每只实际用量0.22 mg),溶剂组注射同等体积磷酸盐缓冲液,假手术组不给药。缺血再灌注后24 h进行小鼠神经功能缺损评分,神经元特异核蛋白(neuronal nuclei,NeuN)染色统计脑梗死率。取溶剂组小鼠全脑冰冻切片,自噬标记物微管相关蛋白1轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3 beta,LC3B)分别与NeuN、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光共染,观察LC3B与梗死周边区神经元、星形胶质细胞共定位情况,以明确缺血再灌注后24 h产生自噬活动的主要部位。自噬标记物苄氯素1(Beclin-1)、自噬相关蛋白3(autophagy related protein 3,Atg3)分别与NeuN免疫荧光共染,进一步观察梗死周边区神经元自噬水平变化情况,并统计Beclin-1^(+)/NeuN^(+)、Atg3^(+)/NeuN^(+)细胞在单位面积(1 mm^(2))内的个数。原代大鼠神经元培养10 d后进行氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD),将细胞分为以下6组:对照(control,CON)组、OGD 1 h后复氧1 h(OGD 1 h)组、OGD 1 h后复氧4 h(OGD 4 h)组、SAL组、OGD 1 h后复氧1 h/全程SAL治疗(OGD^(+)SAL 1 h)组、OGD 1 h后复氧4 h/全程SAL治疗(OGD^(+)SAL 4 h)组,CON组和SAL组不进行OGD,SAL剂量50μmol/L。采用免疫印迹法检测各组细胞中自噬标记物LC3B、Beclin-1、Atg3、Atg5和Atg7的相对表达量;CON组、OGD 4 h组细胞进行LC3B、NeuN免疫荧光共染,观察OGD后神经元内LC3B表达变化情况,并统计LC3B^(+)/NeuN^(+)细胞在单位面积(1 mm^(2))内的个数。结果缺血再灌注后24 h,SAL组小鼠神经功能缺损评分(5.8±1.4分vs.7.1±1.4分,P=0.0332)和脑梗死率(28.7%±9.7%vs.39.9%±9.4%,P=0.0038)均低于溶剂组。溶剂组LC3B与梗死周边区神经元有共定位,与星形胶质细胞无共定位。SAL组Beclin-1^(+)/NeuN^(+)(312.4±45.6个/平方毫米vs.471.2±50.3个/平方毫米,P=0.0121)、Atg3^(+)/NeuN^(+)(322.5±26.5个/平方毫米vs.491.3±42.1个/平方毫米,P=0.0013)细胞数量少于溶剂组。大鼠原代神经元免疫印迹结果显示,OGD 1 h组(1.096±0.004 vs.1.000±0.000,P=0.0174)、OGD 4 h组(1.213±0.019 vs.1.000±0.000,P<0.0001)LC3B相对表达量高于CON组;OGD^(+)SAL 4 h组LC3B、Beclin-1、Atg3相对表达量低于OGD 4 h组(0.833±0.029 vs.1.213±0.019,P<0.0001,0.579±0.081 vs.1.152±0.144,P<0.0001,0.726±0.182 vs.1.091±0.177,P=0.0211);OGD^(+)SAL 4 h组LC3B、Beclin-1相对表达量低于OGD^(+)SAL 1 h组(0.833±0.029 vs.1.046±0.063,P<0.0001;0.579±0.081 vs.0.921±0.09,P=0.0030)。CON组LC3B^(+)/NeuN^(+)细胞数少于OGD 4 h组(51.9±18.7个/平方毫米vs.584.2±34.5个/平方毫米,P=0.0002)。结论SAL可能通过抑制神经元自噬在急性脑缺血再灌注损伤中发挥神经保护作用。

关键词：脑缺血再灌注神经元自噬毛柳苷神经保护

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毛柳苷在缺血性脑损伤中对白介素4诱导蛋白1表达和小胶质细胞激活及表型的影响

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中国卒中杂志 2022年第2期17卷 134-141页

作者：刘文倩赵顺英叶维贞姜鸣钰陈文涛陈青芳温少红董雯刘向荣首都医科大学附属北京天坛医院国家神经系统疾病临床医学研究中心北京100070

目的探讨毛柳苷在缺血性脑损伤后对白介素4诱导蛋白1(interleukin-4 induced protein 1,IL4I1)表达及小胶质细胞极化的影响。方法38只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(4只)、毛柳苷组(17只)和生理盐水组(17只)。通过线栓法制作大脑中... 详细信息

目的探讨毛柳苷在缺血性脑损伤后对白介素4诱导蛋白1(interleukin-4 induced protein 1,IL4I1)表达及小胶质细胞极化的影响。方法38只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(4只)、毛柳苷组(17只)和生理盐水组(17只)。通过线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型(缺血60 min拔栓实现再灌注),再灌注10 min后,毛柳苷组与生理盐水组小鼠分别经尾静脉按照10 mg/kg剂量注射毛柳苷(1 mg/mL)与生理盐水,每天1次,持续28 d。ELISA法检测假手术组及模型组缺血再灌注后48 h、7 d、28 d血清中的IL4I1浓度。采用神经元特异核蛋白(neuronalnuclei,NeuN)抗体免疫荧光染色标记神经元,观察缺血再灌注后7 d脑梗死体积。采用CD16/32、CD206和离子化钙结合适配分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)免疫荧光染色观察缺血再灌注后7 d小胶质细胞极化状态及突起的长度、数量变化。通过细胞实验探究IL4I1与小胶质细胞不同表型之间的联系。培养小鼠BV2小胶质细胞,设置M0型细胞为空白对照组,使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和INF-γ诱导BV2细胞极化为M1促炎型,使用IL-4和IL-13诱导BV2细胞极化为M2抗炎型细胞。BV2细胞诱导48 h后提取细胞蛋白,通过免疫印迹检测BV2细胞不同表型中IL4I1的表达情况。结果与假手术组相比,生理盐水组脑缺血再灌注后48 h血清中IL4I1浓度下降(P=0.0302);与生理盐水组相比,毛柳苷组脑缺血再灌注后7 d和28 d血清中IL4I1浓度增加(P=0.0229,P=0.0076)。毛柳苷组脑缺血再灌注后7 d脑梗死体积较生理盐水组降低(P=0.0389)。与生理盐水组相比,毛柳苷组脑缺血再灌注后7 d缺血区周围小胶质细胞突起长度、突起数量、突起的分叉点及终末端点数量均增加(P=0.0040,P<0.001,P<0.001,P<0.001),皮层与纹状体区域M1型小胶质细胞数量减少(P=0.0407,P=0.0032),皮层与纹状体区域M2型小胶质细胞数量增多(P=0.0206,P=0.0075)。体外细胞实验BV2小胶质细胞不同表型中,M1型与M2型较M0型IL4I1表达下降(P=0.0008,P=0.0155),与M2型相比,M1型IL4I1表达更低(P=0.0406)。结论毛柳苷可能通过增加脑缺血再灌注损伤后血清及缺血脑组织中IL4I1的表达,并使激活的小胶质细胞向M2抗炎表型转化,减少脑梗死体积,从而发挥神经保护作用。

关键词：缺血性脑损伤毛柳苷小胶质细胞极化白介素4诱导蛋白1

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阿司匹林和氯吡格雷联合应用对小鼠脑缺血损伤后骨髓及脑内炎症反应的影响

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中国卒中杂志 2022年第6期17卷 605-610页

作者：董雯姜鸣钰陈文涛刘文倩陈青芳赵顺英叶维贞温少红刘向荣首都医科大学附属北京天坛医院国家神经系统疾病临床医学研究中心北京100070

目的探讨小鼠脑缺血损伤后阿司匹林和氯吡格雷联合应用21 d对骨髓中性粒细胞炎症因子及脑内小胶质细胞极化的影响。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、阿司匹林联合氯吡格雷组(双抗组)2组,每组10只。通过结扎大脑中动脉远端制作脑缺... 详细信息

目的探讨小鼠脑缺血损伤后阿司匹林和氯吡格雷联合应用21 d对骨髓中性粒细胞炎症因子及脑内小胶质细胞极化的影响。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、阿司匹林联合氯吡格雷组(双抗组)2组,每组10只。通过结扎大脑中动脉远端制作脑缺血再灌注模型(缺血60 min,解开结扎实现再灌注),再灌注即刻通过灌胃给予饮用水100μL(对照组)和阿司匹林(剂量12 mg/kg,每只实际用量0.3 mg)与氯吡格雷(剂量12 mg/kg,每只实际用量0.3 mg)混悬液100μL(双抗组),每日1次,连续21 d。21 d后处死小鼠,分离骨髓中性粒细胞,通过实时荧光定量PCR检测骨髓中性粒细胞相关炎症因子,包括IL-1β、IL-6、IL-10、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric-oxide synthase,iNOS)、TNFα、精氨酸酶1(arginase1,Arg1)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGFβ)、CD206、CD32、几丁质酶样蛋白(chitinase-like 3,Chil3/YM1)的表达情况。脑组织行冰冻切片,免疫荧光染色标记离子化钙结合适配分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)、CD16和CD206,观察小胶质细胞数量、形态变化与极化状态。结果与对照组相比,治疗21 d后双抗组小鼠骨髓中性粒细胞IL-1β的相对表达下降(0.703±0.124 vs.1.000±0.203,P=0.019);YM1(2.173±0.968 vs.1.000±0.282,P=0.019)和CD206(1.361±0.203 vs.1.000±0.260,P=0.048)的相对表达上调。治疗21 d后双抗组与对照组梗死周边区的小胶质细胞数量差异无统计学意义,但双抗组CD16阳性(M1型)小胶质细胞数量降低(119.4±37.43个/平方毫米vs.220.2±63.07个/平方毫米,P<0.001),CD206阳性(M2型)小胶质细胞数量增加(198.2±40.16个/平方毫米vs.122.8±29.88个/平方毫米,P<0.001),且双抗组小胶质细胞形态上呈多分支网状结构。结论阿司匹林与氯吡格雷联合应用可能通过抑制骨髓中性粒细胞炎症反应,增加脑内小胶质细胞分支,并激活小胶质细胞向抗炎表型(M2型)转化,从而发挥神经保护作用。

关键词：缺血性脑损伤阿司匹林氯吡格雷中性粒细胞小胶质细胞

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重述与赓续:近十年国产动画电影的叙事范式探析

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当代文坛 2025年第1期 140-145页

作者：石竹青任子钰辽宁师范大学影视艺术学院

中国动画艺术诞生之始,便肩负着描绘时代风貌、传递民族情感的重要使命。其特有的想象力,使作品具有能穿越时空的鲜活艺术形态。中国动画的叙事策略决定着动画作品的质量与形态。置身于当下的创作语境,动画从业者们通过对文本与形象、... 详细信息

中国动画艺术诞生之始,便肩负着描绘时代风貌、传递民族情感的重要使命。其特有的想象力,使作品具有能穿越时空的鲜活艺术形态。中国动画的叙事策略决定着动画作品的质量与形态。置身于当下的创作语境,动画从业者们通过对文本与形象、空间及精神价值的创造性续写再述中国故事,其影像表达独具中国美学元素与意境生成,以及烛照历史与现实的伦理与哲思,实现了人生观、价值观乃至世界观的叙事呈现。如何坚守动画艺术的本真与纯粹,勇于探索形式与风格融合的新境界,成为动画创作者们面临的重要课题。

关键词：国产动画文本改编叙事空间时代精神

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基于有限状态机的六足机器人人机协同指令优选方法

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控制与决策 2025年第1期 327-335页

作者：尤波董正李佳钰陈潇磊陈晨丁亮哈尔滨理工大学黑龙江省复杂智能系统与集成重点实验室布里斯托大学布里斯托机器人实验室哈尔滨工业大学机器人技术与系统国家重点实验室

针对六足机器人在复杂环境下如何决策出最优人机指令组合问题,提出将操控指令权限分配的过程分为离线和在线两个阶段.在离线阶段,将六足机器人运动过程中机身的稳定裕度、能量消耗和与障碍物的碰撞接触时间作为指令优选的约束条件,并建... 详细信息

针对六足机器人在复杂环境下如何决策出最优人机指令组合问题,提出将操控指令权限分配的过程分为离线和在线两个阶段.在离线阶段,将六足机器人运动过程中机身的稳定裕度、能量消耗和与障碍物的碰撞接触时间作为指令优选的约束条件,并建立评价函数实现在进入地形前获得最优的操控指令组合;在线阶段,依据上述3个约束条件量化有限状态机网络中的状态转移概率,并人为设置约束条件阈值作为触发条件,向最优的人机决策指令状态进行转换.最后利用半物理仿真系统进行实验,结果表明所提出的决策方法在稳定裕度上相对于其他操控方法提高约15%～25%;能量消耗上降低了约10%～50%;碰撞接触时间降低了约10%～50%.

关键词：六足机器人有限状态机协同决策指令优选约束条件评价函数

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基于几何镶嵌的可持续皮革服装设计与研发

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皮革科学与工程 2025年第1期35卷 77-82页

作者：刘英同张辰钰王巍四川大学轻工科学与工程学院四川成都610065

服装行业绿色发展需要具有人文关怀的可持续设计理念。基于几何镶嵌提出一种可持续皮革服装的设计方法。将皮革服装解构为可拼装的镶嵌模块,通过拼装的方式创造出丰富多样的服装款式,为消费者提供参与制作的乐趣,具有高度的个性化特征... 详细信息

服装行业绿色发展需要具有人文关怀的可持续设计理念。基于几何镶嵌提出一种可持续皮革服装的设计方法。将皮革服装解构为可拼装的镶嵌模块,通过拼装的方式创造出丰富多样的服装款式,为消费者提供参与制作的乐趣,具有高度的个性化特征。同时,用户可以根据需求拼装不同的镶嵌模块以改变服装造型,镶嵌模块使用了可持续生物质材料和激光切割技术进行制作,在材料与生产技术上也满足了可持续设计理念。实验结果表明,基于几何镶嵌的可持续皮革服装丰富了服装产品的形式,为皮革制品、服装与服饰设计的发展提供了创新性参考。

关键词：皮革服装可持续设计几何镶嵌模块化拼装

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基于UG的拖拉机齿轮传动系统仿真研究

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农机化研究 2025年第1期47卷 258-261,268页

作者：杨玉霞李艳钰济源职业技术学院河南济源454650

设计了一款拖拉机复合行星齿轮的动力系统,并基于UG仿真软件,建立了齿轮参数化模型,得到了齿轮的渐开线和齿廓线,最后建立了齿轮传动系统仿真模型。齿轮传动系统可靠性实验表明:系统齿轮运动符合预期,满足设计要求,证实了系统的可靠性。

关键词：拖拉机复合行星齿轮 UG 齿轮传动

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一种适应于直流微电网的全桥LLC变换器

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现代电子技术 2025年第2期 29-34页

作者：国梦珠陈思郑贞钰郭永玉三峡大学电气与新能源学院

针对传统的光伏并网隔离型变换器的变压器体积大、损耗高和半导体器件电压应力高等问题，提出一种基于LLC谐振变换器的高增益DC-DC变换器。该变换器满足了输入输出之间电气隔离的要求，将全桥LLC谐振变换器与开关电容相结合，有效地提... 详细信息

针对传统的光伏并网隔离型变换器的变压器体积大、损耗高和半导体器件电压应力高等问题，提出一种基于LLC谐振变换器的高增益DC-DC变换器。该变换器满足了输入输出之间电气隔离的要求，将全桥LLC谐振变换器与开关电容相结合，有效地提高了变换器的增益，减少了变压器的体积和损耗，降低了半导体器件的电压应力，实现了开关管的零电压开通和二极管的零电流关断，有效地降低了开关损耗。首先对所提变换器的工作原理进行详细分析；其次用基波分析法分析其基本特性，并进行半导体器件电压、电流应力计算及电路的参数设计；最后搭建一台了800 W的实验样机，经过实验验证，该变换器实现了开关管的ZVS开通，二极管的ZCS关断；减小了变压器的体积和铜耗；转换效率最高可达94.9%。二次侧二极管的电压应力为输出电压的1 2，是全桥整流的0.5倍、半桥整流的0.25倍，且平均电流相同，有利于器件的选型，更适用于直流微电网的应用，证明了理论分析的准确性。

关键词：直流微电网 LLC谐振变换器 DC-DC变换器高增益电压应力开关电容基波分析法

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指向量感培养的小学数学教学策略--以“认识厘米”的教学为例

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小学教学研究 2025年第2期 60-62页

作者：王梓钰江苏省无锡市锡山区无锡市安镇实验小学

“量感”是数学学科核心素养的主要表现之一。在核心素养背景下,教师要着力培养学生的量感。在小学度量教学中,教师应当以量感培养为导向,从激发“量”的需求、丰富“量”的体验、深化“量”的认知、促进“量”的结构化四个方面着力教... 详细信息

“量感”是数学学科核心素养的主要表现之一。在核心素养背景下,教师要着力培养学生的量感。在小学度量教学中,教师应当以量感培养为导向,从激发“量”的需求、丰富“量”的体验、深化“量”的认知、促进“量”的结构化四个方面着力教学。基于此,文章结合苏教版数学二年级上册“认识厘米”这一课例,阐述指向量感培养的小学数学教学策略。

关键词：小学数学量感培养认识厘米教学策略

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