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RNA干扰技术抑制MTA1对乳腺癌细胞ERα表达和侵袭能力的影响

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RNA干扰技术抑制MTA1对乳腺癌细胞ERα表达和侵袭能力的影响

作者：姜青明重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨MTA1基因在乳腺癌浸润转移过程中可能涉及的分子机制,为应用RNA干扰技术治疗乳腺癌提供新的技术方案。方法:设计合成干扰MTA1基因的shRNA寡核苷酸片段,克隆到线性化的pGenesil-1真核表达载体上,测序鉴定。应用Lipofectamine 2... 详细信息

目的:探讨MTA1基因在乳腺癌浸润转移过程中可能涉及的分子机制,为应用RNA干扰技术治疗乳腺癌提供新的技术方案。方法:设计合成干扰MTA1基因的shRNA寡核苷酸片段,克隆到线性化的pGenesil-1真核表达载体上,测序鉴定。应用Lipofectamine 2000将该重组质粒分别转染MDA-MB-231和MCF-7细胞,荧光显微镜评估转染效率,RT-PCR检测MTA1和MMP-9mRNA表达情况,免疫组化检测ERα和MMP-9表达,Western blot检测ERα蛋白表达情况,用Boyden小室体外侵袭实验检测转染前后两株细胞侵袭力的变化。结果:成功构建了重组质粒pGenesil-1/ MTA1;MDA-MB-231细胞平均转染效率为82.5﹪,MCF-7细胞的平均转染效率为78.2﹪。RT-PCR显示,转染重组质粒及用G418筛选3周后,MDA-MB-231和MCF-7两株细胞MTA1mRNA表达均较空白对照组有不同程度的下降,抑制率分别达到80.2﹪,58.7﹪;Western blot显示筛选3周的MDA-MB-231细胞ERα表达呈阳性,RT-PCR显示MDA-MB-231细胞MMP-9表达较空白对照组下降;免疫组化检测ERα,MDA-MB-231细胞核呈阳性表达,而MCF-7细胞ERα表达变化不显著。Boyden小室体外侵袭实验显示MDA-MB-231细胞体外侵袭力强,其侵袭指数为(76.3±2.4)﹪,MCF-7细胞体外侵袭力弱,其侵袭指数为(25.6±1.9)﹪,两者差异有显著性(P0.05)。结论:1.重组质粒pGenesil-1/ MTA1的shRNA能有效抑制人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7细胞MTA1基因表达,且在表达较高的细胞中抑制效果更好。2.干扰MTA1基因后,MDA-MB-231细胞ERα表达得到逆转,表达呈阳性;MMP-9表达降低,其高侵袭转移能力亦减弱。3.利用RNA干扰技术对MTA1基因进行抑制不仅能应用于研究基因功能,而且为乳腺癌的治疗提供有意义的作用靶点奠定了基础。

关键词： RNA干扰 MTA1 ER 乳腺癌侵袭

RNA干扰抑制MTA 1的表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响

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肿瘤 2007年第12期27卷 957-961页

作者：张萍张徽姜青明重庆医科大学病理教研室重庆400016

目的:探讨通过RNA干扰技术抑制MTA1的表达及对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和细胞周期的影响。方法:建立3种稳定表达靶向MTA1的shRNA的MDA-MB-231细胞系。通过反转录-聚合酶链反应(reverse transeription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组化法验证基因表达的抑制效果;采用细胞计数法及噻唑蓝(thiazolylblue,MTT)法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪分析细胞周期。结果:MTA1基因被抑制后,其mRNA表达明显下降,RT-PCR结果显示,稳定转染3种重组质粒后,MTA1mRNA水平较对照组分别下调了70.07%、82.40%和63.44%;同时,MDA-MB-231细胞的生长明显受抑制,与对照组细胞相比,细胞计数示细胞数目明显减低;MTT分析示细胞增殖下降,流式细胞分析示细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:在MDA-MB-231细胞中,抑制MTA1的表达可有效抑制细胞生长并导致细胞周期的阻滞;利用RNA干扰技术抑制MTA1的表达可能会成为一种有效的乳腺癌基因治疗手段。

关键词：乳腺肿瘤 RNA,小分子干扰肿瘤转移相关基因 MDA-MB-231细胞

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子宫内膜小细胞癌病例报告及文献复习

重庆医科大学学报 2010年第3期35卷 471-473页

作者：王冬周琦姜青明重庆市肿瘤研究所妇瘤科重庆市肿瘤研究所病理科重庆400030

目的:探讨子宫内膜小细胞癌组织起源,临床病理特点及治疗方法。方法:报道2例子宫内膜小细胞癌,并进行文献复习。结果:2例患者均有不规则阴道流血,术前诊断性刮宫病理诊断为子宫内膜分化差恶性肿瘤,行广泛性子宫、双附件和盆腔淋巴结切除... 详细信息

目的:探讨子宫内膜小细胞癌组织起源,临床病理特点及治疗方法。方法:报道2例子宫内膜小细胞癌,并进行文献复习。结果:2例患者均有不规则阴道流血,术前诊断性刮宫病理诊断为子宫内膜分化差恶性肿瘤,行广泛性子宫、双附件和盆腔淋巴结切除,临床病理分期均为子宫内膜小细胞癌Ⅲc期,免疫组织化学诊断神经特异性烯醇酶(NSE)、突触素(Syn)呈阳性表达。病例1手术后未进行其他治疗,于手术后5月死亡;病例2手术后立即给予化疗和盆腔大野放疗,已无瘤生存2个月。结论:原发性子宫内膜小细胞癌极其罕见,具有较强侵袭性,预后差,手术、放疗及化疗等综合治疗可能改善预后。

关键词：子宫内膜小细胞癌病理学免疫组织化学

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阴道副神经节瘤1例报告并文献复习

肿瘤防治研究 2014年第5期41卷 513-514页

作者：黄裕邹冬玲姜青明王冬重庆市肿瘤研究所妇瘤科重庆400030 重庆市肿瘤研究所病理科重庆400030

引言副神经节瘤(paraganglioma)是一类起源于神经嵴细胞,与交感或副交感神经相关的嗜铬或非嗜铬的神经上皮样细胞团形成的肿瘤,主要分布在头颈、纵隔、肾上腺及腹膜后等有副神经节聚集的部位,临床上较为少见,需病理组织学明确诊断,目前... 详细信息

引言副神经节瘤(paraganglioma)是一类起源于神经嵴细胞,与交感或副交感神经相关的嗜铬或非嗜铬的神经上皮样细胞团形成的肿瘤,主要分布在头颈、纵隔、肾上腺及腹膜后等有副神经节聚集的部位,临床上较为少见,需病理组织学明确诊断,目前该病的分期和治疗尚无统一标准。通过对1例原发于阴道的副神经节瘤患者进行临床及病理特点分析,并对相关文献进行复习,提高对副神经节瘤的认识。

关键词：阴道肿瘤副神经节瘤病理学

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特殊病理类型宫颈癌24例临床病理分析

肿瘤防治研究 2012年第7期39卷 885-886页

作者：黄裕姜青明王冬周琦重庆市肿瘤研究所妇瘤科重庆400030 重庆市肿瘤研究所病理科重庆400030

0引言子宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,宫颈的小细胞癌、透明细胞癌、腺肉瘤、浆液性乳头状腺癌、黑色素瘤及淋巴瘤均是特殊罕见病理类型。对24例特殊病理类型宫颈癌进行临床及病理特征分析,提高对少见病理类型宫颈癌诊治的认识。

关键词：宫颈肿瘤诊断病理类型免疫组织化学临床病理

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阴道副神经节瘤1例

实用妇产科杂志 2014年第2期30卷 135-136页

作者：黄裕邹冬玲姜青明王冬重庆市肿瘤研究所重庆400030

1病例报告患者，17岁，未婚未孕。因不规则阴道流血5月于2012年12月26日入院。患者主要表现为月经中间期不规则阴道流血，色鲜红，量少，可自行停止，不伴腹痛、发热、肛门坠胀等其他不适。无血液系统遗传病史，无凝血功能异常、肝硬化... 详细信息

1病例报告患者，17岁，未婚未孕。因不规则阴道流血5月于2012年12月26日入院。患者主要表现为月经中间期不规则阴道流血，色鲜红，量少，可自行停止，不伴腹痛、发热、肛门坠胀等其他不适。无血液系统遗传病史，无凝血功能异常、肝硬化等病史，曾有“支气管哮喘”病史。入院查体：T36．8℃，P85／min，R20／rain，BP140／100mmHg，一股隋况良好，全身浅表淋巴结未扪及肿大，心、肺、腹部体检无异常。

关键词：不规则阴道流血副神经节瘤遗传病史凝血功能异常入院查体支气管哮喘浅表淋巴结病例报告

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原发性子宫恶性淋巴瘤病例报告

重庆医科大学学报 2011年第8期36卷 1018-1019页

作者：黄裕李敏姜青明周琦重庆市肿瘤研究所妇瘤科重庆400030

恶性淋巴瘤是起源于淋巴结或结外淋巴组织的免疫细胞肿瘤,女性生殖系统原发性恶性淋巴瘤属结外型淋巴瘤,几乎全部为非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin＇s lymphoma,NHL）,临床罕见,常需借助病理组织学明确诊断,且本病的分期和治疗现尚无统一... 详细信息

恶性淋巴瘤是起源于淋巴结或结外淋巴组织的免疫细胞肿瘤,女性生殖系统原发性恶性淋巴瘤属结外型淋巴瘤,几乎全部为非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin＇s lymphoma,NHL）,临床罕见,常需借助病理组织学明确诊断,且本病的分期和治疗现尚无统一标准。通过对1例患者临床及病理特点、诊疗经过进行分析,并对相关文献进行复习,提高对原发性子宫恶性淋巴瘤的认识。

关键词：原发性子宫恶性淋巴瘤病例报告原发性恶性淋巴瘤 lymphoma 结外淋巴组织结外型淋巴瘤女性生殖系统病理组织学

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原发性卵巢类癌病例报告及文献复习

重庆医科大学学报 2011年第2期36卷 235-237页

作者：李雨聪周琦王冬姜青明重庆市肿瘤研究所妇瘤科重庆400030 重庆市肿瘤研究所病理科重庆400030

目的:探讨原发性卵巢类癌组织起源,临床病理特点、治疗及预后。方法:报道2例原发性卵巢类癌,并进行临床病理分析。结果:病例1中患者为40岁女性,病例2中患者为33岁女性,2例患者临床症状均有下腹疼痛,2例患者均接受手术治疗。组织病理学... 详细信息

目的:探讨原发性卵巢类癌组织起源,临床病理特点、治疗及预后。方法:报道2例原发性卵巢类癌,并进行临床病理分析。结果:病例1中患者为40岁女性,病例2中患者为33岁女性,2例患者临床症状均有下腹疼痛,2例患者均接受手术治疗。组织病理学类型为:岛状型。临床病理分期病例1为Ⅰa期,手术后无其他治疗已无瘤生存9年;病例2为Ⅲc期,术后接受化疗,6个月后死于本病。结论:原发性卵巢类癌是一种罕见的低度恶性肿瘤,无典型临床症状,诊断需除外转移性类癌。早期患者行单纯手术治疗后愈后良好,晚期患者愈后差,化疗不敏感。

关键词：瘤类癌病理学免疫组织化学

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组织细胞肉瘤四例临床病理学分析

中华血液学杂志 2012年第9期33卷 751-755页

作者：姜青明周文文宋容叶学正李进重庆市肿瘤研究所病理科 400030

目的探讨组织细胞肉瘤（HS）的临床病理学特征、免疫学表型、鉴别诊断及预后。方法分析4例HS患者临床病理资料，活检或切除的肿瘤组织标本采用常规石蜡切片，HE染色，EnVi—sion法免疫组化染色，电镜观察，并对患者进行随访。结果4例HS... 详细信息

目的探讨组织细胞肉瘤（HS）的临床病理学特征、免疫学表型、鉴别诊断及预后。方法分析4例HS患者临床病理资料，活检或切除的肿瘤组织标本采用常规石蜡切片，HE染色，EnVi—sion法免疫组化染色，电镜观察，并对患者进行随访。结果4例HS患者中男女各2例，年龄范围22～65岁（平均43．25岁）；发生部位为淋巴结2例、皮肤1例、结肠1例。光学显微镜下观察，肿瘤组织的形态学特点为肿瘤细胞弥漫浸润、散在分布、互不黏附，瘤细胞体积中等到大，呈圆形、卵圆形、多角形、上皮样，胞质较丰富，略嗜酸性，部分细胞胞质呈泡沫状，核圆形、卯圆形，偏位，核染色质空泡状，核仁嗜碱性，核分裂象多见，可见病理性核分裂象。3例见双核瘤细胞，多形性明显，可见多核瘤巨细胞，2例可见灶状泡沫状胞质的瘤细胞，1例可见灶状肉瘤样梭形细胞区，2例可见噬血细胞现象。4例均见到多少不一的炎细胞背景。4例患者均弥漫表达α-1-ACT、CD68、CD163、溶菌酶，3例表达CD45、CD45RO。电镜检查4例患者均显示肿瘤细胞胞质丰富，内含溶酶体，不见Birbeck小体、细胞间连接及指状突起。4例均进行了随访，3例确诊后6～13个月死亡，1例局限于皮肤及皮下者现存活。结论HS为一种罕见的显示成熟组织细胞形态和免疫表型特征的恶性肿瘤，其诊断是在形态学的基础上依靠免疫组织化学染色及电镜观察进行排除胜诊断。

关键词：组织细胞肉瘤免疫表型分型显微镜检查,电子诊断,鉴别预后