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白头翁(Pulsatilla chinensis)实时荧光定量PCR内参基因的筛选与评价

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分子植物育种 2023年

作者：刘先菊姜金铸刘安中国中医科学院中药研究所中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室

为筛选可在白头翁(Pulsatilla chinensis)不同组织部位中稳定表达的基因作为内参基因，供实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法分析白头翁不同组织部位中基因相对表达水平时使用，为后续白头翁中活性成分生物合成途径及分子调控机制解析提供基...

为筛选可在白头翁(Pulsatilla chinensis)不同组织部位中稳定表达的基因作为内参基因，供实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法分析白头翁不同组织部位中基因相对表达水平时使用，为后续白头翁中活性成分生物合成途径及分子调控机制解析提供基础。本研究从已有转录组数据中选取Actin2、EF1γ、GAPDH、PGK和TUB 5个植物中常用的内参基因作为候选基因，使用RT-qPCR法检测候选基因在白头翁不同组织部位(根，根状茎，叶片及叶柄)中的表达水平，并使用geNorm、NormFinder、BestKeeper和Delta Ct 4种方法计算候选基因在样本中表达稳定性；最后使用RefFinder在线软件对候选基因表达稳定性进行综合评价。结果显示GAPDH和Actin2相对于其他内参基因在所试样本中表达较高，PGK次之，EF1γ与TUB基因的表达相对较低。geNorm分析结果表明PGK与GAPDH在四个不同的组织部位中表达最为稳定，且发现两个基因共同作为内参使用即可达到较好的效果；NormFinder、Delta Ct与BestKeeper分析结果均显示PGK的稳定性最好，且TUB基因稳定性最差；最后通过RefFinder对候选基因稳定性进行综合评价发现候选基因的稳定性PGK > EF1γ > GAPDH > Actin2 > TUB；因此PGK基因是最适合用于分析白头翁不同组织部位基因表达量的内参基因。

关键词：

葡萄辅助因子VvVQ10负调白藜芦醇生物合成分子机理研究

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中外葡萄与葡萄酒 2023年

作者：刘先菊刘安姜金铸中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制，通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明，葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达，紫外光处理呈上调表达... 详细信息

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制，通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明，葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达，紫外光处理呈上调表达，而伤害与霜霉菌侵染处理则显著下调；在山葡萄叶片中瞬时沉默VvVQ10，白藜芦醇及其糖苷（虎杖苷）含量显著升高；酵母双杂交分析表明，VvVQ10蛋白可与VvWRKY8蛋白互作，且结合位点在VvWRKY8的N段或包含DNA结合区的C段。以上结果表明，VvVQ10可通过与VvWRKY8蛋白互作的方式负调控葡萄白藜芦醇的生物合成。

关键词：葡萄辅助因子白藜芦醇 VQ蛋白负调控

枳实及其有效成分柚皮苷预防术后肠粘连的作用机制分析

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中国实验方剂学杂志 2022年第24期28卷 50-57页

作者：樊玉青张婷兰刘艳陈畅陈莎姜金铸程锦堂刘安郭丛闫智勇西南交通大学生命科学与工程学院成都610031 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:研究枳实及柚皮苷对大鼠术后肠粘连的预防作用并探究其作用机制。方法:采用大鼠盲肠刮擦模型研究枳实和柚皮苷对肠粘连的预防作用,雄性SD大鼠造模后随机分为模型组、地塞米松磷酸钠组及枳实低、中、高剂量组(1.58、3.15、6.30 g·k... 详细信息

目的:研究枳实及柚皮苷对大鼠术后肠粘连的预防作用并探究其作用机制。方法:采用大鼠盲肠刮擦模型研究枳实和柚皮苷对肠粘连的预防作用,雄性SD大鼠造模后随机分为模型组、地塞米松磷酸钠组及枳实低、中、高剂量组(1.58、3.15、6.30 g·kg^(-1)·d^(-1)),另设假手术组仅进行开腹处理,给药7 d后用Nair法评估肠粘连情况,采用苏木素-伊红(HE)染色观察盲肠组织病理形态,免疫组化检测盲肠粘连组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达;同时,雄性SD大鼠造模后随机分为模型组、地塞米松磷酸钠组及柚皮苷低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^(-1)·d^(-1)),另设假手术组仅进行开腹处理。给药7 d后评估肠粘连情况,采用HE染色观察盲肠组织病理形态,免疫组化检测盲肠粘连组织中MMP-9的表达,蛋白质免疫印迹法分析盲肠组织中转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:枳实能抑制大鼠术后肠粘连的形成,组织病理学结果显示,其能减少受损盲肠组织中的炎性细胞浸润,并呈剂量依赖性地上调黏附组织中MMP-9的表达;柚皮苷各剂量组均能明显抑制大鼠术后肠粘连,减少组织中炎性细胞浸润和纤维增生,呈剂量依赖性地上调黏附组织中MMP-9的表达,并能抑制盲肠组织中TGF-β_(1)和α-SMA的表达。结论:枳实及其有效成分柚皮苷均能有效预防术后肠粘连,其作用可能与减轻组织纤维化和加速细胞外基质降解有关。

关键词：枳实柚皮苷肠粘连纤维化基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 转化生长因子(TGF) α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)

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基于应激颗粒的中药神经保护研究设想

中草药 2022年第16期53卷 5185-5192页

作者：陈畅罗婉君段飞鹏王寓平胥雄飞杨萌楚姜金铸谢永艳黄锦伟黄丽萍江西中医药大学药学院江西南昌330004 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078 中国中医科学院中药研究所北京100700

应激颗粒是存在于胞质的一种无膜致密颗粒,通过包裹mRNA、转录起始因子、RNA结合蛋白等翻译起始阶段的重要元件,使细胞在遭受不利刺激时出现短暂的蛋白翻译阻滞,从而起到细胞保护作用。研究发现,应激颗粒广泛分布于海马和皮层的神经元... 详细信息

应激颗粒是存在于胞质的一种无膜致密颗粒,通过包裹mRNA、转录起始因子、RNA结合蛋白等翻译起始阶段的重要元件,使细胞在遭受不利刺激时出现短暂的蛋白翻译阻滞,从而起到细胞保护作用。研究发现,应激颗粒广泛分布于海马和皮层的神经元细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞和浦肯野细胞等神经细胞中,生物过程涉及蛋白异常聚集、突触的成熟和可塑性、免疫调节、抗氧化应激反应、抑制细胞凋亡等,在急性缺血性脑卒中和神经退行性疾病的发生发展中发挥着重要作用。尤其是其多样化的物质组成和广泛参与的生物过程,为中医证候生物学及“同病异治”“整体调节”等中医药传统理论和治法的研究提供了崭新的思路和视野。对应激颗粒的基本特征、神经保护及研究方法等进行系统的梳理,同时以急性缺血性脑卒中为范例,尝试将应激颗粒这一现代生物学现象纳入到中医药现代研究中,提出研究设想和思路,以期用科学的语言阐释传统中医药相关理论与治法,也为行业同仁的相关研究提供参考。

关键词：应激颗粒脑缺血 RNA结合蛋白 Ras-GTPase活化蛋白SH3结构域结合蛋白1 神经保护

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浅谈速滑教学的合理调控

冰雪运动 1997年第4期19卷 56-58页

作者：姜金铸阿城农垦师专体育教研室

随着教育体制的改革,体育教学方法也在不断更新;为了打破旧的传统,克服教学活动的盲目性和主观性,应在教师的主导作用下,充分体现以学生“学”为主体,由学生去“发现规律”,对学生着重创造力和个性的培养。本文中速滑教学的“收”和“放... 详细信息

随着教育体制的改革,体育教学方法也在不断更新;为了打破旧的传统,克服教学活动的盲目性和主观性,应在教师的主导作用下,充分体现以学生“学”为主体,由学生去“发现规律”,对学生着重创造力和个性的培养。本文中速滑教学的“收”和“放”,是指在教师直接或间接控制的情况下,在局部乃至全部的时间里,学生自己独立的控制自己的练习活动。

关键词：速滑教学 “收”“放” 调控度

葡萄辅助因子VvVQ10负调控白藜芦醇生物合成分子机理研究

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中外葡萄与葡萄酒 2023年第3期 18-23页

作者：刘先菊刘安姜金铸中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室北京100700

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制,通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明,葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达,紫外光处理呈上调表达,而... 详细信息

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制,通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明,葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达,紫外光处理呈上调表达,而伤害与霜霉菌侵染处理则显著下调;在山葡萄叶片中瞬时沉默VvVQ10,白藜芦醇及其糖苷(虎杖苷)含量显著升高;酵母双杂交分析表明,VvVQ10蛋白可与VvWRKY8蛋白互作,且结合位点在VvWRKY8的N段或包含DNA结合区的C段。以上结果表明,VvVQ10可通过与VvWRKY8蛋白互作的方式负调控葡萄白藜芦醇的生物合成。

关键词：葡萄辅助因子白藜芦醇 VQ蛋白负调控

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社会秩序建构视角下墨家天志与明鬼思想新探

中国哲学史 2024年第2期 60-66页

作者：姜金生中央民族大学天津科技大学

墨家天志、明鬼思想不是宗教、迷信。如果以文化人类学功能学派为理论工具分析,墨家天、鬼在认知体系中所隐喻的功能可以分别概括为集体意志的符号化、文化迫力的法制化。天赏、鬼伐之下的士君子集团则是社会形态转型的领衔阶层,其无我... 详细信息

墨家天志、明鬼思想不是宗教、迷信。如果以文化人类学功能学派为理论工具分析,墨家天、鬼在认知体系中所隐喻的功能可以分别概括为集体意志的符号化、文化迫力的法制化。天赏、鬼伐之下的士君子集团则是社会形态转型的领衔阶层,其无我、公平的人格具象指向当时的公共价值,决定着社会秩序建构理路的逻辑起点。

关键词：墨家士君子文化人类学社会形态

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太极拳意念教学法探析

黑龙江农垦师专学报 1999年第3期13卷 63-65页

作者：姜金铸黑龙江省农垦师专体系阿城150301

本文用“意念练习”教学法渗透到太极拳教学过程中，旨在使同学们在这一教学活动中完成从“学会”到“会学”

关键词：太极拳意念教学法效果

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分布动载荷时域识别的动标定试验方法

南京航空航天大学学报 2024年第3期56卷 561-570页

作者：陈奥辉姜金辉南京航空航天大学航空航天结构力学及控制全国重点实验室南京210016

在工程应用中,作用于工程结构上的载荷多为分布载荷,因此分布载荷识别技术一直备受关注。动标定技术通过建立载荷与响应之间的关系识别载荷,传统动标定方法根据有限元仿真获得标定矩阵,识别结果受到模型误差影响。基于Gauss-Legendre积... 详细信息

在工程应用中,作用于工程结构上的载荷多为分布载荷,因此分布载荷识别技术一直备受关注。动标定技术通过建立载荷与响应之间的关系识别载荷,传统动标定方法根据有限元仿真获得标定矩阵,识别结果受到模型误差影响。基于Gauss-Legendre积分将无限维的动标定转换为有限维的动标定,通过傅里叶逆变换和卷积积分得到时域标定矩阵,对施加于结构上的分布载荷进行时域识别,并用仿真验证了该方法的有效性和高精度。在响应中加入噪声,考察该方法的抗噪性,并与传统仿真标定方法进行对比,并讨论了不同高斯点总数对识别精度的影响。

关键词：分布载荷识别试验动标定 Gauss-Legendre积分正交多项式时域