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Hrd1在香烟烟雾诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞内质网应激中的作用

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Hrd1在香烟烟雾诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞内质网应激中的作用

作者：姜迪譞南华大学

学位级别：硕士

目的：观察原代培养的大鼠II型肺泡上皮细胞（AECII）暴露于香烟烟雾提取物（CSE）不同时间凋亡率的变化，以及AECII中Hrd1、内质网应激（ERS）相关因子、ERS诱导性凋亡相关因子的表达变化;观察Hrd1基因沉默/过表达对上述变化的影响;探... 详细信息

目的：观察原代培养的大鼠II型肺泡上皮细胞（AECII）暴露于香烟烟雾提取物（CSE）不同时间凋亡率的变化，以及AECII中Hrd1、内质网应激（ERS）相关因子、ERS诱导性凋亡相关因子的表达变化;观察Hrd1基因沉默/过表达对上述变化的影响;探索Hrd1在COPD关于肺结构细胞凋亡的发病机制中所起的作用。方法：原代及传代培养大鼠AECII;制备CSE;用携带Hrd1干扰序列/编码序列的慢病毒侵染AECII沉默/过表达Hrd1基因;在10%CSE刺激AECII的0h、3h、6h、12h、24h、48h时间点：Hoechst染色检测干预前后细胞凋亡率、Realtime-PCR、Western blot技术检测干预前后Hrd1、PERK、P-PERK、eIF2α、P-eIF2α、IRE1、P-IRE1、ATF6、caspase12、JNK、P-JNK、CHOP的表达;结果：1.传至第3代培养的细胞，其形态、生长特征及生理学特性与原代培养细胞无明显差异。2. Hoechst染色显示：暴露于10%CSE的大鼠AECII其凋亡率随着刺激时间的延长不断升高;敲除Hrd1基因组细胞各时间点凋亡率较野生型明显增加;过表达Hrd1基因组细胞凋亡率较野生型明显降低。*** blot结果显示：10%CSE作用不同时间PERK、eIF2α以及IRE1总蛋白的表达差异无统计学意义（P＞0.5），野生型细胞P-PERK的表达从3h组开始升高，12h达到高峰，后逐渐降低但仍高于对照组水平，P-eIF2α随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势;沉默Hrd1基因后，P-PERK的表达从3h组有所升高，6h开始即表达稍降并随着CSE作用时间的延长显著降低，而P-eIF2α蛋白的表达则随着作用时间的延长呈持续下降趋势;过表达Hrd1基因后，P-PERK蛋白的表达随着作用时间的延长不断减少，而P-eIF2α的表达从3h组稍有升高，12h组最高，随后根据CSE作用时间的延长显著降低。野生组P-IRE1的表达随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势;沉默组P-IRE1的表达从3h开始逐渐升高，12h达高峰，24h、48h表达均下降;过表达组P-IRE1的表达随着作用时间的延长不断增加。野生组ATF6α的表达随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势;沉默组ATF6α蛋白的表达则随着作用时间的延长呈持续下降趋势;过表达组ATF6α的表达从3h开始逐渐降低，6h最低，12h开始表达增加并在24h、48组持续增加。4. Westen blot结果显示：10%CSE作用不同时间总JNK蛋白的表达与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.5），P-JNK的表达随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势，caspase12的表达从3h组开始升高，12h达到高峰，随后逐渐降低但仍高于对照组水平。CHOP蛋白的表达在野生组随着CSE暴露时间的延长不断增加，在沉默组从3h组开始升高，12h达最高峰，之后随着CSE作用时间的延长逐渐下降但表达始终高于对照组，在过表达组随着CSE作用时间的延长持续升高。结论：1.在适宜的培养条件下，离体培养的第3代AECⅡ能够维持相对稳定的分化表型，可以用于探索在体AECII的凋亡机制。2. CSE能够诱导AECII发生ERS并通过ERS介导细胞凋亡，PEAK/IRE1/ATF6三条跨膜信号通路均参与了CSE诱导的ERS，Caspase12/JNK/CHOP三条ERS凋亡信号通路均参与介导CSE诱导的AECII凋亡。3. Hrd1对CSE诱导的AECII凋亡具有保护作用。

关键词： Ⅱ型肺泡上皮细胞香烟烟雾提取物内质网应激内质网应激诱导性凋亡 Hrd1 慢性阻塞性肺疾病

血必净注射液对重型新型冠状病毒肺炎患者炎症指标及病情转归的疗效观察

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中华危重病急救医学 2020年第4期32卷 426-429页

作者：文隆周志国姜迪譞黄康长沙市第一医院呼吸内科长沙410000

目的观察血必净注射液对新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)患者炎症指标及预后的影响。方法选择2020年1月至3月长沙市公共卫生救治中心(长沙市第一医院北院)收治的60例重型新冠肺炎患者作为研究对象,按随机数字表法分为常规治疗组、血必净... 详细信息

目的观察血必净注射液对新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)患者炎症指标及预后的影响。方法选择2020年1月至3月长沙市公共卫生救治中心(长沙市第一医院北院)收治的60例重型新冠肺炎患者作为研究对象,按随机数字表法分为常规治疗组、血必净50 mL组和血必净100 mL组,每组20例。常规治疗组依据国家卫生健康委员会(卫健委)发布的新冠肺炎诊疗方案进行治疗;血必净50 mL组在常规治疗基础上加用血必净注射液每次50 mL、每日2次、连用7 d;血必净100 mL组在常规治疗基础上加用血必净注射液每次100 mL、每日2次、连用7 d。观察3组患者治疗前及治疗8 d后血常规、C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、2019新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测结果及疾病分型的变化。结果①治疗后,3组白细胞计数(WBC)及淋巴细胞计数(LYM)均较治疗前升高,CRP及ESR均较治疗前降低。与常规治疗组比较,血必净100 mL组治疗后WBC明显升高(×10^9/L:7.12±0.55比5.67±0.51,P0.05)。3组患者治疗后病情均有所改善,其中常规治疗组8例转为普通型、1例转为危重型,血必净50 mL组9例转为普通型,血必净100 mL组12例转为普通型;血必净100 mL组较50 mL组和常规治疗组改善更明显(均P<0.05)。结论血必净注射液可有效改善重型新冠肺炎患者的炎症指标及病情转归。

关键词：新型冠状病毒肺炎血必净注射液炎症指标急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ 预后

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内质网相关性降解与呼吸系统疾病

国际呼吸杂志 2014年第7期34卷 555-560页

作者：王花枝姜迪譞胡瑞成戴爱国南华大学附属省马王堆医院长沙410016 长沙市第一医院呼吸内科 410005 湖南省老年医学研究所呼吸病研究室长沙410016

内质网相关性降解（ERAD）通过清除内质网腔内的错误折叠蛋白质，从而预防和缓解内质网应激，是真核生物蛋白质质量控制和维持细胞正常功能状态的重要机制。ERAD包含底物（即错误折叠蛋白）识别、底物泛素化与逆转运、底物降解三个基本... 详细信息

内质网相关性降解（ERAD）通过清除内质网腔内的错误折叠蛋白质，从而预防和缓解内质网应激，是真核生物蛋白质质量控制和维持细胞正常功能状态的重要机制。ERAD包含底物（即错误折叠蛋白）识别、底物泛素化与逆转运、底物降解三个基本环节，其中任何一个环节失调都会导致细胞功能障碍，并可能进一步导致疾病的发生与发展。近几年研究发现，ERAD参与了COPD、肺癌、肺囊性纤维化等疾病发生过程。本文就参与ERAD的相关因子的研究进展进行综述。

关键词：内质网应激内质网相关性降解泛素化蛋白凝集素样蛋白甘露糖苷酶蛋白酶体呼吸系统疾病

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大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞传代培养可行性研究

国际呼吸杂志 2012年第8期32卷 569-573页

作者：姜迪譞胡瑞成戴爱国谭双香南华大学研究生院衡阳 421001 湖南省老年医院湖南省老年医学研究所呼吸疾病研究室长沙410016

目的通过对离体培养的原代细胞和第3代Ⅱ型肺泡上皮细胞（alveolartypeⅡepithelialcells，AECⅡ）进行分化表型鉴定，探索AECⅡ离体传代培养的可行性。方法联合应用肺循环灌注、支气管肺泡灌洗、双酶联合螯合剂灌注消化、物理过滤、差... 详细信息

目的通过对离体培养的原代细胞和第3代Ⅱ型肺泡上皮细胞（alveolartypeⅡepithelialcells，AECⅡ）进行分化表型鉴定，探索AECⅡ离体传代培养的可行性。方法联合应用肺循环灌注、支气管肺泡灌洗、双酶联合螯合剂灌注消化、物理过滤、差速离心、贴壁纯化、免疫吸附等方法分离和纯化大鼠AECⅡ。纯化的AECⅡ接种于基质胶包被的培养皿，在含10μg／L角质细胞生长因子、5％胎牛血清的DMEM／F12培养基中进行离体培养。收集原代和第3培养细胞，透射电镜观察细胞超微结构，免疫细胞化学染色检测肺泡表面活性蛋白A（surfactantproteinA，SP-A）表达情况，并进行碱性磷酸酶染色鉴定细胞分化表型。结果AECⅡ产量为（21．3±5．8）×10^5／鼠，活细胞比例为（96．5±0．8）％。细胞培养至第3代，其形态、生长特征与原代培养细胞无明显差异。透射电镜观察证实原代细胞及第3代细胞均具备AECⅡ的特征性结构，SPA免疫细胞化学染色显示原代细胞及第3代细胞阳性比例均超过95％，碱性磷酸酶染色显示原代细胞及第3代细胞阳性比例分别为（85．2±3．7）％和（90．4±4．2）％。结论在适宜的培养条件下，离体培养的第3代AECⅡ能够维持相对稳定的分化表型，可以用于离体实验。

关键词： Ⅱ型肺泡上皮细胞原代培养传代培养表型分化

城乡居民养老保险与家庭消费——基于微观数据的实证分析

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会计与经济研究 2024年

作者：王树苏杰姜迪贵州财经大学经济学院中国社会科学院大学应用经济学院贵州财经大学图书馆贵州财经大学票据博物馆

研究采用2010-2020年中国家庭追踪调查（CFPS）数据，运用面板模型、Heckman两步法和倾向得分匹配法（PSM），实证分析城乡居民养老保险和家庭消费之间的关系。采用合成面板数据发现，城乡居民养老保险参保人数的增加促进家庭消费率的... 详细信息

研究采用2010-2020年中国家庭追踪调查（CFPS）数据，运用面板模型、Heckman两步法和倾向得分匹配法（PSM），实证分析城乡居民养老保险和家庭消费之间的关系。采用合成面板数据发现，城乡居民养老保险参保人数的增加促进家庭消费率的提高；从消费结构来看，城乡居民养老保险可以促进家庭消费结构的优化，提高总消费中发展享受型消费的比例。考虑城乡和收入差异后发现，在城镇居民和中高收入群体中，养老保险对消费的促进作用更为明显；新农保和城居保合并为城乡居民养老保险后，城乡居民养老保险对低收入群体和农村家庭消费的促进作用不断提升。对2020年截面数据进行信贷约束分析后发现，相比于存在信贷约束的家庭，城乡居民养老保险对不存在信贷约束的家庭消费的促进作用更强。因此，我国应积极实施扩大城乡居民养老保险覆盖率等政策，促进家庭消费。

关键词：城乡居民养老保险家庭消费消费结构城乡差异信贷约束

细菌感染/定植诱导慢性阻塞性肺疾病患者痰β-防御素2表达

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现代生物医学进展 2011年第12期11卷 2238-2241,2233页

作者：胡瑞成谭双香戴爱国王宁甘桂香姜迪譞湖南省老年医院-湖南省老年医学研究所湖南长沙410016

目的:初步探讨下呼吸道细菌感染/定植对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者痰β-防御素2(BD-2)表达水平的影响。方法:36例戒烟COPD患者和30名不吸烟/戒烟对照人员纳入研究。在COPD患者的急性加重期和稳定期分别采集自然痰进行普通细菌培养(简... 详细信息

目的:初步探讨下呼吸道细菌感染/定植对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者痰β-防御素2(BD-2)表达水平的影响。方法:36例戒烟COPD患者和30名不吸烟/戒烟对照人员纳入研究。在COPD患者的急性加重期和稳定期分别采集自然痰进行普通细菌培养(简称痰培养),并行细胞分类计数和BD-2浓度测定;采集对照人员诱导痰行细胞分类计数和BD-2浓度测定以资对照。结果:COPD患者急性加重期和稳定期痰培养阳性比例分别为30/36和14/36。COPD患者痰细胞总数和中性粒细胞比例、淋巴细胞比例高于对照组而巨噬细胞比例低于对照组;痰菌阳性和痰菌阴性的急性加重期COPD患者痰细胞总数、巨噬细胞比例、中性粒细胞比例分别为(6.0±0.9)×106/g、(23.6±3.9)%、(66.0±5.9)%和(3.1±0.5)×106/g、(34.3±4.3)%、(55.7±4.4)%,痰菌阳性和痰菌阴性的稳定期COPD患者痰细胞总数、巨噬细胞比例、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例分别为(4.4±0.8)×106/g、(28.6±6.4)%、(64.0±7.2)%和(3.0±0.5)×106/g、(41.4±5.7)%、(45.4±5.1)%。COPD患者稳定期痰BD-2浓度[(211±98)ng/L]低于急性加重期[(300±83)ng/L]而高于对照组[(127±41)ng/L];痰菌阳性稳定期COPD患者痰BD-2浓度高于对照组而与急性加重期无统计学差异;痰菌阴性稳定期COPD患者痰BD-2浓度低于急性加重期而与对照组无统计学差异。结论:下呼吸道细菌感染/定植是COPD患者痰BD-2表达升高的重要诱导因素,也是COPD患者急性加重发作的重要原因。

关键词：肺疾病慢性阻塞性细菌感染 β-防御素2 痰

基于LC-MS/MS技术的四种柳属植物叶片的差异代谢物分析

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内蒙古农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：杜少波姜迪鄂崇毅谢惠春青海师范大学地理科学学院青海祁连山南坡森林生态系统国家定位观测研究站青海师范大学生命科学学院

为探究腹毛柳(Salix delavayana Hand.-Mazz.)、坡柳(Salix myrtillacea Anderss.)、康定柳(Salix paraplesia ***.)和乌柳(Salix cheilophila ***.)叶片代谢物差异。方法：采用液相色谱串联质谱技术分析四种柳属植物叶片代谢物成分，并结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法(OPLS-DA)筛选差异代谢物，基于KEGG分析差异代谢物的富集通路。结果发现，在四种柳属植物叶片中共检测到19类2 796个化合物，主要为异戊二烯类、黄酮类、苯及其取代衍生物、羧酸及其衍生物、有机氧和脂质化合物；腹毛柳和坡柳、康定柳、乌柳间，差异代谢物分别有641个、625个、643个，坡柳和康定柳及乌柳、康定柳和乌柳间，差异代谢物分别有592个、593个、626个，差异代谢物主要以黄酮类为主；四种柳属植物叶片的差异代谢物主要富集于黄酮和黄酮醇生物合成、类黄酮生物合成、ABC转运蛋白等途径上。研究结果可为这四种柳属植物资源的综合利用提供参考，并为其他柳属植物间的差异代谢物分析提供了研究新思路。

关键词：液相色谱串联质谱技术柳属植物差异代谢物代谢途径

应力驱动下大鼠正畸牙移动过程中牙槽骨密度变化研究

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医用生物力学 2024年第S1期 317-318页

作者：栗明娜吴斌姜迪易扬严斌南京林业大学机械电子工程学院南京医科大学附属口腔医院正畸科

目的建立基于应力状态的骨改建力学模型,模拟大鼠正畸牙移动过程中的牙槽骨密度变化。方法基于正畸过程中牙槽骨在张力区与压力区所展现出的不同骨密度变化特征,选用相当应力作为力学激励,建立了新的骨改建模型。以健康大鼠为实验对象...

目的建立基于应力状态的骨改建力学模型,模拟大鼠正畸牙移动过程中的牙槽骨密度变化。方法基于正畸过程中牙槽骨在张力区与压力区所展现出的不同骨密度变化特征,选用相当应力作为力学激励,建立了新的骨改建模型。以健康大鼠为实验对象,对其磨牙施加20 g正畸力,并获取未进行正畸处理和正畸治疗后的磨牙牙槽骨样本。通过micro-CT扫描测量骨密度变化趋势,并进行纳米压痕试验得到材料参数。建立大鼠完整磨牙及牙周的三维模型,模拟力控制加载方式,结合本研究骨改建理论利用ABAQUS二次开发编写成算法,预测牙槽骨重建过程。结果仿真结果表明,磨牙左侧张力区的骨密度呈现上升的趋势,而右侧压力区及根分叉部位的骨密度则表现出明显的下降趋势。实验结果表明大鼠磨牙根分叉处存在骨密度降低现象。与实验数据对比,仿真结果具有显著一致性。结论本研究首次将基于应力状态的骨改建力学模型用于模拟大鼠正畸过程中牙槽骨密度的变化,并通过与实验数据的对比验证了模型的有效性。这一研究为深入理解正畸过程中骨组织响应机制提供了新的视角,对口腔正畸治疗和未来骨组织工程发展具有重要意义。

关键词：

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新型给排水管材的选用与施工技术探析

河南建材 2024年第7期 71-73页

作者：姜迪昆江西循翔建设工程有限公司 330000

给排水系统中的核心部分是排水管道,其施工质量直接决定了整个系统的稳定性。在实际应用中,给排水管道类型众多,如何高效且科学地选择管材成为施工中的关键问题。基于此,文章主要分析了当前几种新型的给排水管材类型,并提出了相应的科... 详细信息

给排水系统中的核心部分是排水管道,其施工质量直接决定了整个系统的稳定性。在实际应用中,给排水管道类型众多,如何高效且科学地选择管材成为施工中的关键问题。基于此,文章主要分析了当前几种新型的给排水管材类型,并提出了相应的科学施工措施,旨在为给排水系统的功能完善提供有益性的参考,从而全面提升给排水系统的服务质量。

关键词：施工技术给排水系统给排水管材