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FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响

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中华胃肠外科杂志 2010年第9期13卷 661-663页

作者：黄常新李朝阳姜贻乾段广亮王青青杭州师范大学附属医院肿瘤科 310015 浙江中医药大学肿瘤科浙江大学免疫学研究所

目的研究FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响.方法 43例晚期结直肠癌患者中22例接受了FOLFOX方案化疗（化疗组）,21例未接受化疗（对照组）.分别于化疗前、化疗结束时和化疗结束3个月后,取患者外周静脉血,采用抗体标记流... 详细信息

目的研究FOLFOX方案化疗对晚期结直肠癌患者免疫功能的影响.方法 43例晚期结直肠癌患者中22例接受了FOLFOX方案化疗（化疗组）,21例未接受化疗（对照组）.分别于化疗前、化疗结束时和化疗结束3个月后,取患者外周静脉血,采用抗体标记流式细胞仪检测外周血CD4＋T细胞中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞所占比例;并通过ELISA法检测外周血中Th1/Th2细胞因子（IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10）水平.结果化疗结束时,相对于化疗前和对照组,化疗组CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例显著降低 [（4.15±0.56）%比（5.60±0.88）%和（5.38±0.92）%,均P＜0.01];外周血IL-4和IL-10水平亦显著降低,IFN-γ和IL-2水平则明显升高（均P＜0.01）.化疗结束后3个月,CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例略微升高 [（4.53±0.58）%],但仍低于化疗前和对照组（P＜0.01）;而IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10则恢复到化疗前和对照组同期水平（均P＜0.01）.结论 FOLFOX化疗可降低晚期结直肠癌患者的调节性T细胞的比例,引起Th1/Th2细胞因子平衡向Th1漂移,从而有利于患者肿瘤免疫抑制的解除.

关键词：结直肠肿瘤化学疗法 T淋巴细胞调节性细胞因子

微小RNA-29b对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其分子生物学机制

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浙江大学学报（医学版） 2017年第4期46卷 349-356页

作者：姜贻乾郭庆敏谷建钟徐小平安素红苏芳鲍艳红黄常新管晓翔南京医科大学金陵临床医学院江苏南京210002 杭州师范大学医学院附属杭州市萧山区第一人民医院肿瘤中心浙江杭州311200 浙江中医药大学附属第一医院肿瘤科浙江杭州310006

目的:研究微小RNA(miRNA)-29b对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其分子生物学机制。方法:构建miRNA-29b重组慢病毒表达载体lenti-miRNA-29b转染293T细胞获得重组慢病毒,提纯慢病毒颗粒感染乳腺癌细胞MCF-7。通过绿色荧光蛋白肿瘤细胞比例... 详细信息

目的:研究微小RNA(miRNA)-29b对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其分子生物学机制。方法:构建miRNA-29b重组慢病毒表达载体lenti-miRNA-29b转染293T细胞获得重组慢病毒,提纯慢病毒颗粒感染乳腺癌细胞MCF-7。通过绿色荧光蛋白肿瘤细胞比例来验证转染情况;实时定量PCR检测miRNA-29b的表达水平;CCK-8实验和Transwell实验检测miRNA-29b过表达后乳腺癌细胞生物学行为的变化。采用生物信息学软件对miRNA-29b调控的下游靶基因进行预测和筛选,使用双荧光素酶检测、实时定量PCR和蛋白质印迹法进行验证。对筛选出的miRNA-29b调控的下游靶基因RTKN通过siRNA-RTKN验证其对MCF-7细胞的增殖和迁移的影响。结果:成功构建了miRNA-29b的重组慢病毒表达载体。感染乳腺癌细胞MCF-7后,lenti-miRNA-29b组和空载体转染组分别有90%和60%左右的细胞出现绿色荧光;lenti-miRNA-29 b组miRNA-29 b表达量较空载体转染组和空白对照组显著增加(均P<0.05),MCF-7细胞的增殖和迁移能力较空载体转染组显著减弱(均P<0.05)。RTKN的基因编码3'UTR区中具有miRNA-29b的结合位点;野生型RTKN-WT-3'UTR报告基因载体与lenti-miRNA-29b共转染MCF-7细胞后可使荧光素酶的活性显著下降(P<0.05)。转染siRNA-RTKN后,MCF-7细胞中RTKN蛋白的水平显著下降,细胞增殖和迁移能力显著减弱(均P<0.05)。结论:miRNA-29b能够通过抑制RTKN的表达来抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力。

关键词：微RNAs 乳腺肿瘤/病理生理慢病毒属转染聚合酶链反应细胞增殖肿瘤转移肿瘤细胞培养的

养阴清热与润肺止咳验方防治放射性肺损伤的作用机制

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中国临床药理学杂志 2017年第19期33卷 1922-1925,1941页

作者：黄常新鲍艳红王婷雷艳敏李朝阳朱影姜贻乾杭州师范大学附属医院肿瘤科杭州310015 杭州市萧山区第一人民医院放疗科杭州311200 杭州市余杭区良渚医院外科杭州311112

目的研究养阴清热、润肺止咳验方防治放射性肺损伤的作用机制。方法用射线方法建立放射性肺损伤大鼠模型。将60只模型大鼠随机分为阳性对照组、模型组、实验A组、实验B组、实验C组,每组12只;另取,24只健康大鼠随机分为空白组和阴性对照... 详细信息

目的研究养阴清热、润肺止咳验方防治放射性肺损伤的作用机制。方法用射线方法建立放射性肺损伤大鼠模型。将60只模型大鼠随机分为阳性对照组、模型组、实验A组、实验B组、实验C组,每组12只;另取,24只健康大鼠随机分为空白组和阴性对照组,每组12只。照射完成后次日,实验A、B、C组分别予以1,2,4 g·m L^(-1)养阴清热、润肺止咳验方;阳性对照组予以地塞米松;模型组和空白组均予以蒸馏水;阴性对照组予以2 g·mL^(-1)养阴清热、润肺止咳验方。7组大鼠均按0.01 m L·g^(-1)的剂量,每天灌服一次,总共14 d。14 d后处死大鼠,用Western blot法检测肺组织细胞中髓样分化蛋白88(My D88)、肿瘤坏死因子受体活化因子-6(TRAF-6)、诱导干扰素β的TIR基域接头分子(TRIF)、Toll样受体4(TLR4)的表达量,用酶联免疫吸附法检测肺组织匀浆上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)表达量。结果实验A、B、C组、模型组、阳性对照组、阴性对照组及空白组的My D88的灰度值(×10^(-2)))分别为(60.04±6.95),(51.75±6.50),(53.31±3.80),(63.27±0.06),(53.29±2.23),(21.43±5.42)和(21.16±4.81),TRAF-6的灰度值(×10^(-2)))分别为(77.44±4.16),(70.26±6.48),(66.05±4.17),(80.58±3.82),(65.23±2.60),(56.31±7.40)和(54.51±7.81),TRIF的灰度值(×10^(-2))分别为(48.01±6.51),(40.80±5.16),(41.20±5.18),(48.62±4.10,(39.44±4.25),(33.83±3.40和(32.49±4.71),TLR4的灰度值(×10^(-2)))分别为(65.13±4.53),(59.46±3.59),(57.13±4.83),(67.45±3.73),(56.65±3.82),(36.52±3.50)和(40.19±3.07),TNF-α分别为(255.71±4.87),(215.77±2.83),(211.27±3.81),(283.86±8.30),(208.21±1.31),(87.15±3.60)和(105.55±1.81)pg·m L^(-1),IL-17分别为(45.56±2.66),(32.84±3.64),(32.66±1.78,(48.56±1.26),(28.74±1.65),(17.26±3.00)和(20.44±2.69)pg·m L^(-1),TGF-β分别为(64.24±3.49),(53.19±4.30),(52.34±6.49),(67.09±6.04),(46.76±2.93),(38.22±6.16)和(38.37±1.74)ng·m L^(-1)。模型组、实验A、B、C及阳性对照组的上述指标与空白组及阴性对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论养阴清热、润肺止咳验方可能通过抑制TLR4信号通路及减少肺部炎症因子的表达,来阻止或延缓放射性肺损伤的发生发展,其短期效果几乎与激素相当。

关键词：养阴清热与润肺止咳验方放射性肺损伤信号分子蛋白细胞因子

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肿瘤干细胞调控机制的研究进展

浙江临床医学 2012年第3期14卷 362-364页

作者：段广亮姜贻乾黄常新浙江中医药大学 310053 杭州师范大学附属医院 310015

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞，干细胞的自我更新和分化受到严格的调控，如果这种调控机制发生障碍，细胞就会相对无止境地生长、繁殖，形成肿瘤。由此可知，正常干细胞可能通过累积基因突变获得不确定的分裂繁殖... 详细信息

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞，干细胞的自我更新和分化受到严格的调控，如果这种调控机制发生障碍，细胞就会相对无止境地生长、繁殖，形成肿瘤。由此可知，正常干细胞可能通过累积基因突变获得不确定的分裂繁殖能力，转化为肿瘤干细胞。目前，恶性肿瘤治疗的方法主要是针对肿瘤组织内的肿瘤细胞进行手术、放疗和化疗，治疗后常出现局部复发和远位转移，影响治疗效果。通过对肿瘤干细胞的各种调控机制进行综述，为选择性杀伤肿瘤干细胞，从而可能根治肿瘤和防止肿瘤复发与转移提出新的方向。

关键词：肿瘤干细胞细胞调控多向分化潜能治疗效果自我更新繁殖能力选择性杀伤基因突变

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膏药穴位外敷法治疗腰椎间盘突出术后腰腿痛

浙江临床医学 2013年第8期15卷 1195-1196页

作者：曹平华黄常新姜贻乾浙江嘉兴市凤桥镇新篁卫生院 314002 杭州师范大学附属医院 310016 萧山区第一人民医院 311220

腰椎间盘突出症术后腰腿痛是腰椎间盘突出症的常见手术并发症，治疗方法较多，但效果欠佳。本科采用膏药穴位外敷的方法治疗腰椎间盘突出症术后腰腿痛，效果比较满意。现对一组采用膏药穴位外敷治疗的病例，并与推拿按摩法、单纯自动牵... 详细信息

腰椎间盘突出症术后腰腿痛是腰椎间盘突出症的常见手术并发症，治疗方法较多，但效果欠佳。本科采用膏药穴位外敷的方法治疗腰椎间盘突出症术后腰腿痛，效果比较满意。现对一组采用膏药穴位外敷治疗的病例，并与推拿按摩法、单纯自动牵引治疗的病例进行比较分析，结果报告如下。

关键词：腰椎间盘突出症穴位外敷法治疗方法腰腿痛术后手术并发症推拿按摩法外敷治疗

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肿瘤细胞膜抗原在瘤苗中的研究进展

浙江临床医学 2010年第10期12卷 1123-1126页

作者：李朝阳姜贻乾黄常新浙江中医药大学 310053 杭州师范大学附属医院 310016

疫苗在抗感染免疫方面取得了成功，能够使机体产生体液反应以预防感染性疾病，从而引发了对肿瘤疫苗的研究。然而，抗感染免疫和抗肿瘤免疫之间却有着一定的差异，最主要的区别是，在肿瘤细胞上所发现的抗原是机体自身固有的天然抗原，... 详细信息

疫苗在抗感染免疫方面取得了成功，能够使机体产生体液反应以预防感染性疾病，从而引发了对肿瘤疫苗的研究。然而，抗感染免疫和抗肿瘤免疫之间却有着一定的差异，最主要的区别是，在肿瘤细胞上所发现的抗原是机体自身固有的天然抗原，而在微生物体上发现的并呈递给机体免疫系统的是外来的非自身抗原。肿瘤细胞膜上虽然集中了诱导抗体产生的肿瘤抗原，但由于异质性不强，

关键词：肿瘤细胞膜抗原机体免疫系统抗感染免疫瘤苗肿瘤疫苗感染性疾病抗肿瘤免疫体液反应

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孕妇B族链球菌感染对母婴结局的影响分析

浙江医学 2018年第7期40卷 709-711,716页

作者：杨振莉姜贻乾来汉江杭州市萧山区第一人民医院妇产科 311200

目的研究孕妇B族链球菌(GBS)感染的高危因素及预防性使用抗生素对母婴结局的影响。方法选取2016年1月至2017年10月孕35周后产检并分娩的孕妇2 449例,采用细菌培养法进行GBS筛查,将2017年1至10月孕35周后筛查GBS阳性,并在临产或破膜后预... 详细信息

目的研究孕妇B族链球菌(GBS)感染的高危因素及预防性使用抗生素对母婴结局的影响。方法选取2016年1月至2017年10月孕35周后产检并分娩的孕妇2 449例,采用细菌培养法进行GBS筛查,将2017年1至10月孕35周后筛查GBS阳性,并在临产或破膜后预防性使用抗生素的孕妇设为试验组(107例),同期有1 027例孕妇GBS筛查阴性,分析影响GBS感染的高危因素;另将2016年3至12月GBS筛查阳性,在临产或破膜后未预防性使用抗生素的孕妇设为对照组,观察预防性使用抗生素的临床意义。结果孕早期BMI≥24kg/m^2、经产妇、妊娠期糖耐量异常、合并阴道炎者的GBS阳性率均高于孕早期BMI0.05)。结论肥胖、经产妇、妊娠期糖耐量异常、阴道炎为妊娠晚期孕妇GBS感染的可能高危因素,经预防性使用抗生素后,产妇自身的不良妊娠结局有较多改变,但新生儿感染、早产、胎膜早破、低出生体重儿等严重不良预后的结局改善不明显。

关键词： B族链球菌母婴结局高危因素

南方红豆杉水提物逆转非小细胞肺癌干细胞耐药作用的实验

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肿瘤防治研究 2016年第11期43卷 933-936页

作者：姜贻乾郭庆敏莫永祥安素红徐佳灵苏芳刘剑余灿炳徐小平杭州市萧山区第一人民医院放疗科杭州311201

目的研究南方红豆杉水提物逆转非小细胞肺癌干细胞耐药作用的机制。方法选取人非小细胞肺癌H460细胞为实验细胞,以侧群细胞及细胞表面标志物鉴定法筛选出其中的干细胞;CCK8(cell counting kit-8)法检测红豆杉水提物对H460干细胞的毒性,... 详细信息

目的研究南方红豆杉水提物逆转非小细胞肺癌干细胞耐药作用的机制。方法选取人非小细胞肺癌H460细胞为实验细胞,以侧群细胞及细胞表面标志物鉴定法筛选出其中的干细胞;CCK8(cell counting kit-8)法检测红豆杉水提物对H460干细胞的毒性,并检测红豆杉水提物逆转H460干细胞对顺铂的耐药性;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测红豆杉水提物逆转H460干细胞耐药的作用机制。结果红豆杉水提物对H460干细胞有细胞毒性,测得H460干细胞的IC50为1 449.5μg/ml;用红豆杉水提物预处理后的H460干细胞进行实验发现,顺铂的抗肿瘤效应明显增强,其作用机制为抑制细胞膜上的P-gp蛋白来降低有效药物排出量。结论南方红豆杉水提物能够较强的逆转非小细胞肺癌干细胞的耐药性。

关键词：红豆杉水提物逆转耐药非小细胞肺癌干细胞

胃癌干细胞来源的伴侣分子-抗原肽瘤苗的制备及其免疫功能

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中华肿瘤杂志 2017年第2期39卷 109-114页

作者：姜贻乾郭庆敏徐小平梁军才悄一扬安素红苏芳李朝阳黄常新杭州市萧山区第一人民医院放疗科 311201 杭州师范大学附属医院肿瘤科 310015

目的：探讨从胃癌干细胞中提取伴侣分子？抗原肽的方法及其免疫功能。方法低温超声裂解筛选胃癌干细胞和胃癌细胞，经盐析粗提蛋白及透析后，采用十二烷基硫酸钠？聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS？PAGE）分析伴侣分子？抗原肽表达量，采用溴... 详细信息

目的：探讨从胃癌干细胞中提取伴侣分子？抗原肽的方法及其免疫功能。方法低温超声裂解筛选胃癌干细胞和胃癌细胞，经盐析粗提蛋白及透析后，采用十二烷基硫酸钠？聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS？PAGE）分析伴侣分子？抗原肽表达量，采用溴化氰活化琼脂糖凝胶4B亲和层析分离、纯化伴侣分子？抗原肽，采用反向高压液相色谱、SDS？PAGE和Western blot法进行蛋白纯度分析，采用淋巴细胞增殖实验和细胞毒活性实验检测伴侣分子？抗原肽的免疫活性。结果成功制备并鉴定胃癌干细胞的伴侣分子？抗原肽，主要组分为HSP60？抗原肽、HSP70？抗原肽、HSP90？抗原肽和HSP110？抗原肽。0．75μg HSP70？抗原肽、1．00μg HSP70？抗原肽和1．00μg HSP90？抗原肽对淋巴细胞有明显的增殖作用，其A490值分别为0．26±0．03、0．45±0．05和0．32±0．04，而相应剂量的 HSP60？抗原肽和HSP110？抗原肽不能激活淋巴细胞。1．00μg HSP70？抗原肽组和1．00μg HSP70组的细胞杀伤率分别为（45．0±2．0）％和（16．0±2．0）％，差异有统计学意义（P＝0．012）。1．00μg HSP90？抗原肽组和1．00μg HSP90组的细胞杀伤率分别为（36．0±5．0）％和（13．0±4．0）％，差异有统计学意义（P＝0．048）。结论胃癌细胞中伴侣分子？抗原肽含量极低，而胃癌干细胞中伴侣分子？抗原肽含量明显增多，经提纯后可制备纯度较高的伴侣分子？抗原肽。提取的伴侣分子？抗原肽具有较强的免疫原性，可在体外制作瘤苗，可能在胃癌靶向治疗上有较好的应用价值。

关键词：胃肿瘤肿瘤干细胞伴侣分子-抗原肽亲和层析瘤苗